Document v1ayz7gmowjxp29Jaya5pg0dZ

Study Sponsor: Issue Date: Document Reference No.: ELF ATOCHEM 25-Jan-95 53957 AR226-3009 Acute Toxicity to Daphnia Author(s): H. Thiebaud Coll: P. Brochier English Translation of Report Summary for DuPont Chemical Solutions Enterprise 27-Jan-03 Company Sanitized. Does not contain TSCACBt ELF ATOCHEM Levallois Applications Center 1. TECHNICAL SUMMARY Determination of acute toxicity (inhibition of mobility) of Daphnia magna b y ^ M ovf and 48 hours was effected using the operating procedure described in standard ISO 6341 applicable to chemical substances, industrial and urban effluents, to surface and subterranean waters. The method consists in exposing the daphnias to a range of concentrations of the substance being studied The toxic effect observed is the immobilization at the end of 24 and 48 hours. From the dose/effect relation established with the initial concentrations, a median effective CE(I)S0 is calculated, expressed as CE(l)5o- 24 h and CE(l)5o- 48 h. Under the study conditions, i ^ m H P p r e s e n t s a CE(I)S0 - 24 h and CE(I)S0- 48 h above 100 mg/i and a CE(I)so - 48 h of 13 mg/l. 2. SIGNATURE Director of the study : H. THIEBAUD Date Signature 25/1/95 Company Sanitized. Does not contain TSCA t e t ELF ATOCHEM D.C.R.D. Centre d'Application de Levaiiois Service Analyse Environnement Levaiiois le : 25/01/95 Rf. document : 53957 N de Squentiel : 814020 TITRE : TO XICIT AIGU VIS--VIS DES DAPHNIES A U T E U R S : H. THIBAUD coll : P. BROCHIER RESUME DOCUMENTAIRE Dtermination de la toxicit aigu (inhibition de la mobilit) de Daphnia magna par sur 2 4 et 48 heures, en suivant le mode opratoire dcrit dans la norme ISO 6341 (seconde dition, 1989). MOTS CLS Toxicit aigue daphnies, ISO 6341. DESTINATAIRE : M. DEVAUX (DCFS) Copies : Chef de Service, Responsable des Archives, Laboratoire d'cotoxcologie Secrtariat, Fichier TECH Service cotoxicrt et Sret des Produits (DSE-P) Company Sanitized. Does not contain TSCA CBt Ce document est ls Droorit d'ELF ATOCKEfv'i !l ne oeut tre ni coole ni communiou des tiers sens atjinnssrinr. formelle. ELF ATOCHEM Centre d'Application de Levallois RAPPORT D 'E TU D E TOXICIT AIGU VIS--VIS DES DAPHNIES. SO M M AIRE 1. RSUM TECHNIQUE 2. SIGNATURE 3. IDENTIFICATIONS 3.1. Substance d'essai 3.2. Laboratoire d'essai 3.3. Demandeur de l'tude 3.4. Calendrier 3.5. Archivage 4. OBJECTIF DE L'ETUDE 5. MTHODE D'ESSAI 5.1. introduction 5.1.1. Principe 5.1.2. Rfrences 5.2. Matriel et produits 5.2.1. Matriel 5.2.2. Produits et ractifs 5.3. Mode opratoire 5.3.1. Prparation des solutions 5.3.2. Essai prliminaire 5.3.3. Essai dfinitif 5.3.4. Contrle de sensibilit du ractif biologique 6. RSULTATS 6.1. Essai dfinitif 6.2. Critres de Validit de l'tude 6.2.1. Teneur en oxygne 6.2.2. Immobilisation des tmoins 6.2.3. Sensibilit du ractif biologique 7. CONCLUSIONS 8. ANNEXES 8.1. Annexe 1 : Milieu d'essai. , ,- 8.2. Annexe 2 : Concentrations utilises et rsultats des calculs a 24 heures 8 3 Annexe 3 : Concentrations utilises et rsultats des calculs 48 heures 3 3 4 4 4 4 4 4 5 5 5 5 6 6 6 6 6 6 6 7 7 7 7 8 8 8 E 8 g g 10 11 Company Snitized. Does not contan TSCA C * f-. nnnimoni est i= DroDits d'ci! ATOCHEIV. il ne peut tre ni copi, ni communiqu s des tiers sans autorisation rormeiie. ELF ATOCHEM Centre d'Application de Levallois 1. RSUM TECHNIQ UE La dtermination de la toxicit aigu (inhibition de la mobilit) de Daphnia magna par |e sur 24 et 48 heures a t ralise en suivant le mode opratoire dcrit dans la norme ISO 6341 applicable aux substances chimiques, aux effluents industriels et urbains, aux eaux de surfaces et souterraines. La mthode consiste exposer les daphnies une gamme de concentrations de la substance tudie. L'effet toxique observ est l'immobilisation au bout de 2 4 heures et 4 8 heures. A partir de la relation dose/effet tablie avec les concentrations initiales, on dduit une concentration mdiane effective C E (I)50, exprime en en C E (I)50 - 24 h et en CE-(I)50 - 4 8 h. D ans les conditions de l'tude, le prsente une C E{!)50 - 24 h suprieure 100 m g/l e t une C E (i)5Q- 48 h de 13 m g/l. 2. SIGNATURE Le Directeur de l'tude : H. THIBAUD Company Sanitized. Does not contain TSCA CBi document est ie proprit d'ELr ATOCHEM. ii ne peut tre ni copi, ni communiqu des tiers sens autorisation ormeiie ELF ATOCHEN! Centre d'Application de Levallois 3. ID EN TIFIC A TIO N S 3.1. Substance d'essai Caractristiques principales : - apparence : liquide ambr - solubilit dans l'eau : soluble environ 10% en masse 3.2. Laboratoire d'essai ELF ATOCHEM CENTRE D'APPLICATION DE LEVALLOIS SERVICE ANALYSE ENVIRONNEMENT 95 rue Danton 92300 LEVALLOiS-PERRET Directeur d'tude M. THIBAUD Personnel impliqu dans l'tude " Ingnieur : Technicienne : M. THIBAUD Mlle BROCHIER 3.3. Demandeur de l'tude M. DEVAUX (DCFS) 3.4. Calendrier Dbut de l'tude Fin de l'tude Rapport d'tude . ... . 2/11/94 15/12/94 25/01/95 3.5. Archivage Les substances tudies sont conserves dans le Service Analyse Environnement pendant une dure de 5 ans au maximum. L'ensemble des documents d'tudes est conserv au moins ip ans. Company Sanitized. Does not contain TSCA CW r~. ri- i- n-Tir-.rit H'C! - TO! MFM II ne oeu* tre n1copi. Ri communiau des tiers sans autorisation formelle. ELF ATOCHEM Centre d'Application de Levaiiois 4. O B JEC TIF DE L'TU D E L'objectif de cette tude e st.de dterminer la toxicit aigu (inhibition de te mobilit) vis--vis des daphnies du 9 M H H R N V en suivant le mode opratoire dcrit dans la norme ISO 6341 (seconde dition, 1989). Cette norme s'applique aux substances chimiques, aux effluents industriels et urbains, aux eaux de surfaces et souterraines. 5. M THO DE D 'ESSA I 5.1. Introduction B 1.1. Principe Les daphnies sont exposes 1a substance d'essai ajoute l'eau, dans une srie de concentrations donne, pendant une priode de 2 4 heures et ventuellement 48 heures, sans renouvellement des concentrations d'essai. Dans des conditions identiques et pour une gamme de concentrations adquate (dfinie au moyen d'un essai prliminaire), des concentrations diffrentes en substance d'essai ont des effets diffrents sur te capacit de nage des daphnies. En consquence, en fin d'essai, chaque concentration correspond un pourcentage diffrent d'immobilisation des daphnies. Les concentrations initiales provoquant 0 et 100 % d'immobilisation sont dtermines directement par observation. La concentration initiale efficace inhibitrice immobilisant en 24 heures 50 % des daphnies mises en exprimentation, dsigne C E (I)50 - 24 h, est dtermine par calcul. La CE(l)5o - 4 8 h est ventuellement dtermine par 1a mme mthode. L'tude est conduite en deux tapes : - un essai prliminaire qui sert dterminer 1a gamme des concentrations pour l'essai dfinitif. - un essai dfinitif dont seul le rsultat est retenu : C E (I)50 - 24 h et ventuellement CE(l)50- 4 8 h. Si l'essai prliminaire montre une absence de toxicit sur la gamme de concentration teste, un essai limite 100 mg/i, ou a is limite de solubilit de te substance si celleci est infrieure 100 mg/i, est reaisse. I_e tant un mlange de plusieurs substances pouvant voluer d iff ^ m m e n tje s r s u lta ts sont exprims par rapport aux concentrations nominales (mg/l) de la prparation, considres quivalentes aux concentrations initiales. Les pourcentages d'immobilisation en fonction des concentrations initiales, 24 et ventuellement 48 heures, sont utiliss pour calculer, l'aide d'un programme -informatique appropri, la CE(I)50 ( 24 heures et ventuellement 48 heures). Les intervalles de confiance 95 % sont, si possible, dtermins par le calcul. Company Sanitized, Does not contain TSCA CBI ,, ,, r t s i -f'--t f i TOC HEM I' ne oeut sire ni coDie. n! communiaue a des tiers sans auiorisation farmeile. ELF ATOCHEM Centre 'Application de Levaliois 5.1.2. Rfrences - Norme internationale ISO 6341, Qualit des eaux - Dtermination de l'inhibition de la mobilit de Daphnia magna Straus (Cladocera, Crustacea), seconde dition du 01/10/89. 5.2. Matriel et produits 5.2.1. Matriel L'tude a t ralise dans une salle thermostate une temprature comprise entre 20 et 21 C. Les paramtres physico-chimiques ont t mesurs au moyen d'un combin multifonctions JEN W A Y 3410 (oxymtre, conductimtre, pHmtre). Les daphnies (Daphnia magna Straus) utilises proviennent d'un levage ralis dans le laboratoire. La slection d'organismes gs de moins de 2 4 heures s'effectue par tamisage (toile bluter mailies de 0,56 mm). La composition du milieu d'essai est dtaille en annexe 1. Les rcipients pour essai sont des flacons type pnicilline de capacit nominale 120 ml bouchs par des septa en Teflon sertis par des capsules en aluminium. 5.2.2. Produits et ractifs - Eau : pour la prparation des solutions mres du milieu d'essai, il est fait usage d'eau uitrapure (ultrafiltration, charbon actif, change d'ions, filtre 0,22 pm) ; de mme, pour la ralisation du milieu d'essai (eau de dilution) les solutions mres sont dilues dans de l'eau uitrapure. - Les ractifs utiliss pour la prparation de l'eau de dilution (voir annexe 1 ) sont de qualit "pour analyse". 5.3. Mode opratoire 5.3.1. Prparation des solutions Une solution de 4 H B | | B M S c i a n s ie milieu d'essai 0,1 g/l est prpare le jour de l'essai. 5.3.2. Essai prliminaire . Des volumes adquats de la solution mre de 0,1 g/l sont verss* dans des fioles jauges de 250 ml et complts par de l'eau de dilution pour obtenir la aamme de concentrations allant de : 0,1 100 mg/l ~ jgompany SanitizecL Does not contais TSCA CBI ^ _____ _ _ ^ r'cr! r TocMCh/ n ns non* pfrr ni nnni ni communiou des tiers sans autorisation formelle ELFATOCHEM Centre ('Application de Levailois 5 daphnies ges de moins de 24 heures sont ajoutes dans chaque rcipient d'essai puis ceux-ci sont placs l'obscurit dans la salle thermostate. Au bout de 24 heures, les daphnies encore mobiles sont dnombres, les flacons sont replacs l'obscurit puis un deuxime dnombrement est ralis 48 heures aprs le dbut de l'essai. Les rsultats obtenus servent dfinir la gamme de concentration de l'essai dfinitif. 5.3.3. Essai dfinitif On procde des dilutions de la solution mre dans de l'eau de dilution pour raliser la gamme de concentrations ncessaire la ralisation de l'essai dfinitif. Les diffrentes concentrations de cette gamme sont donnes dans les annexes 2 et 3. 4 flacons de 5 daphnies ges de moins de 24 heures sont prpars pour chaque concentration et pour le tmoin. Au bout de 24 heures, les daphnies encore mobiles sont dnombres, les rcipients sont replacs l'obscurit puis un deuxime dnombrement est ralis 48 heures aprs le dbui de l'essai. 5.3.4. Contrle de sensibilit du ractif biologique Priodiquement, et selon le mme mode opratoire, la C E (I)50 - 24h du dichromate de potassium est dtermine afin de contrler la sensibilit des organismes. 6. R SULTATS 6.1. E ssai d fin itif Les rsultats obtenus dans l'essai sont rassembls dans les tableaux en annexe 2 (rsultats 2 4 heures) et en annexe 3 (rsultats 48 heures). La partie suprieure montre les donnes brutes obtenues-; ies concentrations utilises pour les calculs sont indiques en dessous. Aprs linarisation au moyen de la mthode des Logits, on obtient les rsultats suivants : CE so-24h suprieure 100 m g/!, CE 5(j-48h = 13 m g/I, avec un intervalle de confiance 95 % gal : 7,3 - 25 mg/l (r2 =0,964) i Les rsultats obtenus sont rassembls dans les tableaux en annexe 2 (rsultats 24 heures) et en annexe 3 (rsultats 48 heures). Company Sanitized. Does not contain T$CA CBS Ce document est is proprit d'ELF ATOCHEM. I! ne peut tre ni copi, ni communiqu des tiers sans autorisation formelle. ELFATOCHEM Centre d'Application de Levallois Le pH initial la concentration la plus leve tait de 7,91. Le tableau ci-dessous donne les rsultats des mesures d '0 2 et de pH ralises aux diffrentes concentrations : Concentration nominale (mg/l) 0 0,1 1 5 10 50 100 C>2 48h (mg/l) pH 48 h 7,8 8,0 7,6 7,4 7,6 7,6 7,9 8,00 7,99 8,02 8,00 8,01 8,00 7,88 6.2. C ritres de V a lid it de l'tude 6.2.1. Teneur en oxygne chaque concentration, la teneur en oxygne dissous, mesure en fin d'essai, est suprieure ou gale 2 mg/l. 6.2.2. Immobilisation des tmoins L'immobilisation au bout de 48 heures dans la srie tmoin est de 5 %. La clause requrant une mortalit infrieure ou gale 10 % en fin d'essai a donc t respecte. 6.2.3. Sensibilit du ractif biologique Le dernier contrle de la sensibilit des daphnies au dichromate de potassium a t ralis le 8/11/94. La C E (I)50 - 2 4 h de cette substance de rfrence, value 1,1 mg/l, tait comprise entre 0,9 mg/l et 2,4 mg/l qui est la gamme acceptable ( 9.2 de la norme ISO 6341). 7. C O N C LU SIO N S L'tude de la toxicit aigu du 4 f H 0 H H H R ^ i s~-vis de la daphnie montre que cette substance prsente une CE(I)5 0 - 24 h suprieure 100 mg/l et une CE(!)5 0 48 h gaie 14 mg/i. Company Sanitized. Does not contain TSCA CM r.f> riacumeni est is proprit d'EL? `QCHEM II ne peut tre ni copi, ni communiau des tiers sans autonssiion formelle. ELF ATOCHEM Centre 'Application de Levallois 8. ANNEXES 8.1. Annexe 1 : Milieu d'essai. L'eau de dilution (ou milieu d'essai) est prpare de la faon dcrite dans la norme ISO 6341 : - les solutions mres suivantes sont prpares : 11,76 g de CaCI2, 2H 20 par litre d'eau ultrapure, 4,9 3 g_d M g S 04, 7 H20 _p a rlitre d ,eauultrapure, 2^59 g de N a H C 0 3 par litre d'eau ultrapure, 0,23 g de KCI par litre d'eau ultrapure. - l'eau de dilution est obtenue partir de 25 ml de chacune de ces solutions par litre d'eau, puis aration jusqu' saturation en oxygne. Sompany SanWzed. Ooesnot m ntsU n T t CB document est ts oronrit d'ELF ATOCHEM. li ns peut tre ni coDi. ni communtau s des tiers sens autorisation formelle. ELF ATOCHEM Centre d'Application de Levallois 8.2. A nnexe 2 : C oncen tratio n s u tilises et rsu ltats des calculs 2 4 heures TO XIC IT AIG U V IS - -V IS DES DAPHNIES Substance d'essai Numro d'tude E ssa i dfinitif, 24 heures Nombre de daphnies par concentration 20 I mg/l subst. 100 50 10 5 1 0,1 0 (tmoin) 0 (solvant) % IMMO 40 30 10 15 5 0 100 100 100 100 100 5 100 Rcipient 1 3 4 4 4 5 5 Nombre de daphnies mobiles Rcipient 2 Rcipient 3 Rcipient 4 324 334 4 55 3 5 5 5 54 555 5 545 total 12 14 18 17 19 20 0 0 0 0 0 19 0 geg^anjf Sanitized Does no! contain TCA c B1 Ce document est ia oroprit tfELF ATOCHEM. Hne oeut tre ni ooDi. ni communiau des tiers sans autorisation formelle. ELFATOCHEM Centre d'Applicati'on de Levallois 8.3, Annexe 3 : C oncen tratio n s utilises e t rsu ltats des calculs 48 heures TO X IC IT AIGU VIS- -V IS DES DAPHNIES Substance d'essai : Numro d'tude : E ssa i dfinitif, 48 heures Nombre de daphnies par concentration 20 mg/l subst. 100 50 10 5 1 0,1 0 (tmoin) 0 (solvant) % IMMO 90 65 45 30 10 0 100 100 100 100 100 5 100 Nombre de daphnies mobiles Rcipient 1 | Rcipient 2 | Rcipient 3 Rcipient 4 20 0 0 21 2 2 23 4 2 23 4 5 45 5 4 55 5 5 55 5 4 total 2 7 11 14 18 20 0 0 0 0 0 19 0 CESO = CE50 > CE50 < r2 = 13 7,3 25 0,972 m g/l mg/l mg/l Donnes utilises pour le calcul * concentration 100 50 10 5 1 0,1 % IMMO 90 65 45 30 10 0 nb valeurs 6 #N/A : valeur non disponible. #NOMBRE! : vaieur indtermine. Proportion immobilise 0.90 0,65 0,45 0,30 0,10 0,03 #N/A #N/A #N/A #N/A Somme ; Moyenne LOGIT y 2,197 0,619 4),201 -0,847 -2,197 -3,664 #N/A #N/A #N/A #N/A -4.092 -0.682 log conc. X 2,000 1,699 1,000 0,698 0,000 -1,000 #NOMBRE! #NOMBRE! #NOMBRE! #NOMBRE! 4.398 0.733 | iPompany Sanitized. Does not contain TSCA CB ,e document est is oroprit d'ELr ATOCHEM. Il ne peut tre ni copi, ni communiau des tiers sens autorisation formelle. ELF ATOCHEM Centre d'Application de Levallois C alcul de la C E50 48h selon la m thode du Logit empany Sanitized. Does not contain TSCA CB! 'E -3,000 / -1,000 -0,500 0,000 0,500 1,000 1,500 log dcim ai de la co n cen tratio n , m ail -- I- -4,000 2,000 Ce document est te proprit d'ELr ATOCHEM li ne peut tre ni copi, ni communtau des tiers sens autorisation formeiie.