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AR226-3008 Studv Sonsor: Ifi.qi ip Date: Document Reference No.: ELF ATOCHEM 9-Jan-95 95/SAE6/0304/HT . -------------------- . Acute Toxicity to Daphnia Author(s): H. Thiebaud English Translation of Report Summary for DuPont Chemical Solutions Enterprise 27-Jan-03 Company Sanitized. Does m i T R A N S L A T IO N LF ATOCHEM Levallois Applications Center 1 . TECHNICAL SUMMARY _ _________ Determination of acute toxicity (inhibition of mobility) of Daphma magna by 4.8 hours was effected using, the operating procedure described n stariaard ib u chemical substances, industrial and urban effluents, to surface and subterranean waters. pver 24 and pplicabie to The method consists in exposing the daphnias to a range of concentrationsof studied. The toxic effect observed is the immobilization at the end of 24 and 48 hours From dose/effect relation established with the initial concentrations, a median effective CE(I)50 is calculated, expressed as CE(l)so - 24 h and CE(l)so - 48 h. Under the study conditions, mg/l. resents a CE(I)50- 24 h and CE(l)50 - 48 h above 100 9. SIGNATURE Director of the study : THIEBAUD Date Signature 1/6/95 ric o n ta la TSCACBl Goes ELF TO CHEM D.C.R.D. Centre d'Application de Levallois Service Analyse Environnement Levallois le : 01/06/95 Rf. document : 95/SAE6/0304/HT N de Squentiel : 814020 TITRE : TOXICIT AIGU VIS--VIS DES DAPHNIES AUTEUR : H. THIBAUD RESUME DOCUMENTAIRE : Dtermination de la toxicit aigu (inhibition de la mobilit) de Daphnia magna par l e t e ^ f l ^ B P y u r 24 et 48 heures, en suivant le mode opratoire dcrit dans la n o r r n ^ S ^ ^ 4 1 (seconde dition, 1989). MOTS CLES : DESTINATAIRE : M. DEVAUX (DCFS) Copies : Chef de Service, Responsable des Archives, Laboratoire d'cotoxicologie Secrtariat, Fichier TECH Service cotoxicit et Sret des Produits (DSE-P) noi contala TSGACBl 0roparixSamfeed.DQOS Ce Document est te oroprlt d'ELF ATOCHEM. !i ne peut tre ni copi, ni communiqu des tiers sans autorisation formelle ta reproduction oe ce rapport d 'tude n'est autorise que sous forme de fac-simil photographique intgrai. ' P f 'P 'J R T P T r n r P a n t -I IC -.... ...... ELFATOCHEM Centre d'Application de Levallois SOMMAIRE 1. RSUM TECHNIQUE 2. SIGNATURE 3. IDENTIFICATIONS 3.1. Substance d'essai 3.2. Laboratoire d'essai 3.3. Demandeur de l'tude 3.4. Calendrier 3.5. Archivage 4. OBJECTIF DE L'ETUDE 5. MTHODE D'ESSAI 5.1. Introduction 5.1.1. Principe 5.1.2. Rfrences 5.1.3. Dviations 5.2. Matriel et produits 5.2.1. Matriel 5.2.2. Produits et ractifs 5.3. Mode opratoire 5.3.1. Prparation des solutions 5.3.2. Essai prliminaire 5.3.3. Essai limite 5.3.4. Contrle de sensibilit du ractif biologique 6. RSULTATS 6.1. Essai limite 6.2. Critres de Validit de l'tude 6.2.1. Teneur en oxygne 6.2.2. Immobilisation des tmoins 6.2.3. Sensibilit du ractif biologique 7. CONCLUSIONS 8. ANNEXE : Milieu d'essai 3 3 4 4 4 4 4 4 5 5 5 5 6 6 6 6 6 6 6 6 7 7 7 7 8 8 8 8 8 9 GAC81 ,,, o l= '!tainTSl Saw5lB e 4 .B e5 Ce decumani est ie proprit c fE lr ATOCHEM. Il ne peut tre ni copi, ni communiqu aes tiers sans autorisation formelie. Le reDroductior. de ce rapport d'tude n'est autorises due sous forme de fac-simil photograoniaue intgral. P r . 7 dP.7 R n n r . n a n e 7 /Q ELF ATOCHEN! Centre 'Application de Levallois 1. RSUM TE C H N IQ U E La d te rm in a tio r^ ^ ^ o x ic it aigu (inhibition de la mobilit) de Daphnia magna par le f l | H H H H | H f ) s u r 24 et 48 heures a t ralise en suivant le mode o p ra to i^ a e c n ra a n ^ a norme ISO 6341 applicable aux substances chimiques, aux effluents industriels et urbains, aux eaux de surfaces et souterraines. La mthode consiste exposer les daphnies une gamme de concentrations de la substance tudie. L'effet toxique observ est l'immobilisation au bout de 24 heures et 48 heures. A partir de la relation dose/effet tablie avec les concentrations initiales, on dduit une concentration mdiane effective CE(I)50, exprime en C E (I)50 - 24 h et C E(I)50 - 48 h. Dans les conditions de l'tude, ie | une CE(I)50 - 48 h suprieures 10i mgi ) rsente une C E (I)50 - 24 h et 2. SIGNATURE Le Directeur de l'tude : THIBAUD w- i Iy noiconiata TSCACBfc Company Sanitized. Does Ce document est la proprit cfELF ATQCHEM. I ne bs tre ni cooi, ni eommuniau des tiers sans autorisation formelle. La reproduction de ce rapport d'tude n'est autorise que sous forme de fac-simil pnotogrsphiaue intgrai. ' &r.?7F,7n n n r . narre 3/S ELFATOCHEM Centre d'Application de Levallois 3. IDENTIFICATIONS 3.1. Substance d 'essai Dnomination 11 N du lot N d'enregistrement : 2876/95 Caractristiques principales : - apparence n - puret : - solubilit dans l'eau : Prcaution d'emploi et de conservation : voir FDS 3.2. Laboratoire d'essai ELF ATOCHEM CENTRE D'APPLICATION DE LEVALLOIS SERVICE ANALYSE ENVIRONNEMENT 95 rue Danton 92300 LEVALLOIS-PERRET Directeur d'tude M. THIBAUD Personne! impliqu dans l'tude ingnieur : M. THIBAUD Techniciennes : Mlle BROCHIER 3.3. Dem andeur de l'tude M. DEVAUX (DCFS) 3.4. Calendrier Dbut de l'tude Fin de l'tude Rapport d'tude 10/05/95 19/05/95 01/06/95 3.5. Archivage Le; substances tudies sont conserves dans le Service A nalyse Environnem ent Company Sanitized. Doss not contain SCA C Ce document est te proprit ri'ELF A sOCHEtf. il ne oeui tre ni copie, ns communiau des tiers sens. auto.risation( formelle. La reproduction ae ce rapport d'tude n:est autoriss que sous forme oe icc-simile photographique intgrai. c^ n o c -" - n n r / (Ci ELFATOCHEM Centre d'Application de Levailois pendant une dure de 5 ans au maximum. L'ensemble des documents d'tudes est conserv au moins 10 ans. 4. OBJECTIF DE L'TUDE L'objectif de cette tude esU i^jignm nenJa toxicit aigu (inhibition de la mobilit) vis--vis des daphnies d J H H H H B p 11suivant le mode opratoire dcrit dans la norme ISO 6341 (seconde dition, iy y ). Cette norme s'applique aux substances chimiques, aux effluents industriels et urbains, aux eaux de surfaces et souterraines. S. MTHODE D'ESSAI 5.1. Introduction 5.1.1. Principe Les daphnies sont exposes ia substance d'essai ajoute l'eau, dans une srie de concentrations donne, pendant une priode de 24 heures et ventuellement 48 heures, sans renouvellement des concentrations d'essai. Dans des conditions identiques et pour une gamme de concentrations adquate (dfinie au moyen d'un essai prliminaire), des concentrations diffrentes en substance d'essai ont des effets diffrents sur la capacit de nage des daphnies. En consquence, en fin d'essai, chaque concentration correspond un pourcentage diffrent d'immobilisation des daphnies. Les concentrations initiales provoquant 0 et 100 % d'immobilisation sont dtermines directement par l'observation. La concentration initiale efficace inhibitrice immobilisant en 24 heures 50 % des daphnies mises en exprimentation, dsigne C E (I)50 - 24 h, est dtermine par calcul. La C E (I)50 - 48 h est ventuellement dtermine par la mme mthode. L'tude est conduite en deux tapes : - un essai prliminaire qui sert dterminer la gamme des concentrations pour l'essai dfinitif. - un essai dfinitif dont seul le rsultat est retenu ; CE(l)5o - 24 h et ventuellement CE(l)so - 48 h. - Si l'essai prlim inaire montre une absence de toxicit sur ia gamme de concentration teste, un essai limite is concentration de 100 mg/l, ou la limite de soiubiiit de la substance si celle-ci est infrieure 100 mg/l, est ralis. _e j B S ^ ^ H B E S B | t a n i un mlange de plusieurs substances pouvant voluer d iffrem m entJe^S fultats sont exprims par rapport aux concentrations nominales (mg/l) de la prparation, considres quivalentes aux concentrations initiales. Les pourcentages d 'im m ooiiisation en fonction des concentrations initiales, 24 et ventuellement 4 8 heures, sont utiliss pour calculer, l'aide d'un programme inform atique appropri, is C E (I)50 ( 24 heures et ventuellem ent 48 heures). Les intervalles de confiance 95 % sont, si possible, dsierrmnes par le calcul. - e d o c u rrw es" Is Droorit d'ELF ATOCHEM. ti ns oeu; trs ni coni. ni communiau des tiers sans autorisation formelle. . n * SCACBfc Le reorodustton a s ce raoport d'tude n'est autorise que sous forme as fac-simil pnotograpmque integral n o t COR n n r n a n o F./P m-j Sanfess. i ELF ATOCHEM Centre d'Application de Levallois 5.1.2. Rfrences - Norme Internationale ISO 6341, Qualit des eaux - Dtermination de l'inhibition de la mobilit de Daphnia magna Straus (Cladocera, Crustacea), seconde dition du 01/10/89. 5.1.3. Dviations 5.2. Matriel et produits 5.2.1. Matriel L'tude a t ralise dans une salie thermostate une temprature comprise entre 18 et 20 C. Les paramtres physico-chimiques ont t mesurs au moyen d'un combin multifonctions JEN W A Y 3410 (oxymtre, conductimtre, pHmtre). Les daphnies (Daphnia magna Straus) utilises proviennent d'un levage ralis dans le laboratoire. La slection d'organismes gs de moins de 24 heures s'effectue par tamisage (toile bluter mailles de 0,56' mm). La composition du milieu d'essai est dtaille en annexe. Les rcipients pour essai sont des flacons type pnicilline de capacit nominale 120 ml bouchs par des septa en Teflon sertis par des capsules en aluminium. 5.2.2. Produits et ractifs - Eau : pour la prparation des solutions mres du milieu d'essai, il est fait usage d'eau ultrapure (ultrafiltration, charbon actif, change d'ions, filtre 0,22 pm) ; de mme, pour la ralisation du milieu d'essai (eau de dilution) les solutions mres sont dilues dans de l'eau ultrapure. - Les ractifs utiliss pour la prparation de l'eau de dilution (voir annexe) sont de qualit "pour analyse". 5.3. Mode opratoire 5.3.1, Prparation des solutions Une solution de de l'essai. ^ jd an s le milieu d'essai 1 g/l est prpare le jour 5.3.2. Essai prliminaire A partir d'une solution mre de dans du milieu d'essai 1 g/!, une Ce document est ts proprit cfELF ATOCHEM. Il ne peu; tre ni copi, ni communinu des tiers sans auiorission formels. La reproduction de ce rapport d'tude n'est autorise pue sous forme oe fec-simii photoorapnipue intarsl. RC22S76.DOC pape 6/9 San' CoPar rrQ TS ELF ATOCHEM Centre d'Application de Levallois dilution au 1/100 me est ralise dans l'eau de dilution. Des volumes adquats de cette solution, ou de la solution 1 g:l, sont verss dans des fioles jauges et complts 2 5 0 ml par de l'eau de dilution pour obtenir la gamme de concentrations allant de 0,1 100 mg/l 5 daphnies ges de moins de 24 heures sont ajoutes dans chaque rcipient d'essai puis ceux-ci sont placs l'obscurit dans la salle thermostate. Au bout de 2 4 heures, les daphnies encore mobiles sont dnombres, les flacons sont replacs l'obscurit puis un deuxime dnombrement est ralis 48 heures aprs le dbut de l'essai. Les rsultats obtenus servent dfinir la gamme de concentration de Cessai dfinitif. 5 3.3. Essai limite On procde une dilution de la solution mre dans de 'eau de dilution pour raliser la concentration de 100 mg/l ncessaire la ralisation de Cessai limite. 4 flacons de 5 daphnies ges de moins de 24 heures sont prpars pour la concentration teste et pour le tmoin. Au bout de 2 4 heures, les daphnies encore mobiles sont dnombres, les rcipients sont replacs l'obscurit puis un deuxime dnombrement est ralis 48 heures aprs le dbut de Cessai. - 5.3.4. Contrle de sensibilit du ractif biologique Priodiquement, et selon le mme mode opratoire, la C E (I)50 - 24h du dichromate de potassium est dtermine afin de contrler la sensibilit des organismes. 6. RSULTATS 6.1. Essai imite En raison de l'absence de toxicit d u ^ H m ^ m n ^ b s e r v e 100 mg/l l'issus de Cessai prliminaire, nous avons procd a un essai limite pour vrifier que la C E (I)5D est bien suprieure 100 mg/l. Aprs 24 et 48 heures d'exposition la concentration de 100 mg/l, 19 daphnies sur 20 taient mobiles soit une immobilisation observe de 5 %. Par consquent, aucune immobilisation significative des daphnies n'est observe aprs 24 et 48 h d'exposition : les CE 50 - 24h et CE 50 - 48h sont toutes deux suprieures 120 mg/l. Company Sanifc d. Doss not contain TSCA CBJ Ce document es; te prodrii d'ELr A" OCHEM. li ne peut tre ni copi, ni communiqu des tiers sans autorisation formelle, La reproduction de ce rappor c'iuoe n'est autorise que sous forme oe r-.nr noie 7 /0 rac-simue photographique intgra;, ELF ATOCHEM Centre d'Application de Levaliois Le pH initial la concentration 100 mg/l tait de 8,04 et le pH final cette concentration et dans le tmoin taient de 8,07 et 8,01, respectivement. La concentration finale en oxygne dissous tait de 8,3 dans le tmoin et de 7,7 100 mg/l. 6.2. Critres de Validit de t'tude 6.2.1. Teneur en oxygne chaque concentration, la teneur en oxygne dissous, mesure en fin d'essai, est suprieure ou gale 2 mg/l. 6.2 . Z. immobilisation des tmoins L'immobilisation au bout de 48 heures dans la srie tmoin est de 5 %. La clause requrant une mortalit infrieure ou gale 10 % en fin d'essai a donc t respecte. 6.2.3. Sensibilit du ractif biologique Le dernier contrle de la sensibilit des daphnies au dichromate de potassium a t ralis le 10/05/95. La CE(I)50 - 2 4 h de cette substance de rfrence, value 1,2 mg/l, tait comprise entre 0,9 mg/l et 2,4 mg/l qui est ia gamme acceptable ( 9.2 de la norme ISO 6341 ). 7. CONCLUSIONS L'tude de la toxicit aigu cette substance prsente ut 120 mg/l. ivis--vis de la daphnie montre que k une CE(I)S0 - 48 h suprieures orapany SanlcscL Des not contain TSCA CEI Ce document est e proprit jfELr A i OCHclii. li ne peut tre ni copi, ni communiqu des tiers sens autorisation formeiie. La reproduction de ce rapport tftuoe n'est autorise que sous forme de fac-simii photographique intgrai. RC22B73.DOC oaqe 8/9 ELF ATOCHEM Centre d'Application de Levallois 8. ANNEXE : Milieu d'essai L'eau de dilution (ou milieu d'essai) est prpare de la faon dcrite dans la norme ISO 6341 : - les solutions mres suivantes sont prpares : 11,76 g de CaCI2, 2 H 20 par litre d'eau ultrapure, 4,93 g de M g S 04, 7H 20 par litre d'eau ultrapure, 2,59 g de N a H C 0 3 par litre d'eau ultrapure, 0,23 g de KCI par litre d'eau ultrapure. - l'eau de dilution est obtenue partir de 25 ml de chacune de ces solutions par litre d'eau, puis aration jusqu' saturation en oxygne. Company Sanitized. Doss not contain TSCA GB! Ce document est te proprit cfELF ATOCHEM. Rne peut tre ni copi, ni communiqu des tiers sans autorisation formeRe. La reoroduction de es rapport d'tude n'est autorise oue sous forme de rac-simile pnotographtoua integra!. R C 77B75 D O C n a n s S/B ....