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Study Sponsor: Issue Date: Document Reference No.: ELFATOCHEMS.A. 12-Mar-96 96/SAE6/0409/HT AR226-3040 Biodegradability (OECD301B) Author(s): H. Thiebaud A.M. Petit English Translation of Report Summary for DuPont Chemical Solutions Enterprise 27-Jan-03 Company Sanitized. Does not contain TSCA CBI ELF ATOCHEM Levallois Applications Center TECHNICAL SUMMARY The biodegradability study described in this report was effected using the operating procedure described in appendix C.4-C of the Directive 92/69/EEC. This protocol is in agreement with the Directing Outline N6 301 B of OCDE adopted on 17/7/92. ^JJJUrwas Under the test conditions, the percent biodegradation of (plateau). 48 % in 28 days During the time interval of 10 days following start of the biodegradation phase, the latter reached a level of 47 %. The substance can be considered to be easily biodegradable according to the Directing Outline 301 of OCDE. The substance did not show an inhibiting effect towards micro-organisms. A sterile abiotic control was effected : it showed that the substance does not disappear due to physical and chemical phenomena under the test conditions. The test validity criteria were respected. Company Sanitized. Does not contain TSCA CBI Elf Atochem S.A. DCRD Centre d'Application de Levallois Service Analyse Environnement Levallois, Ie 12/03/96 Reference Sequential Etude numero E6/0409/HT 6349/95/A <ofrcK SSSAIS Laboiatum accredite sous te nl-0210 Reconnaissance de connxmite aux BPL de rOCOe par Ie GIPC en date du 80J93. reeandute Ie aawss RAPPORT D'ETUDE TITRE : DETERMINATION DE LA BIODEGRADABILITE FACILE ESSAI DE DEGAGEMENT DE CO^ AUTEUR(S): H. THIEBAUD ; Coll. A. M. PETIT RESUME DOCUMENTAIRE : Determination de la biodegradabilite facile de la substance :_--_--_1_--__--_^_1_^_1, en suivant Ie mode operatoire jdecrit dans I'annexe C.4-C de la directive CEE 92/69, et la Ligne Directrice de I'OCDE 301 B (adoptee Ie 17/7/92). MOTS Cl OCDE/301 B biodegradabilite aerobie ultime facile, 92/69/CEE, C.4-C, DESTINATAIRES : M. DEVAUX (DCSF) DOC FICHIER TECH Copies : Chef de Service, Auditeur Qualite, Responsable des Archives, Laboratoire d'ecotoxicologie.Secretariat, o Service Ecotoxicite et Surete des Produits (DSEP) -'' -* < * "..,K,,. ycfi^fe L'accreditatfon par la Section Essais du COPRAC atteste uniquement de la competence technique des laboratoires pour les essais ou analyses couverts par I'accreditation. Ce rapport comprend 19 pages et 4 feuillets non pagines. Ce document est notre pfopriete.II ne peut 9re ni copB, ni communiquea des tassi La reproductionde ce rapportdelude nest autorisee que sous form&tBI RC4C6349.DOC page 1/19 etfElf Atochem. ^Migiaes not contain TSCA CBI ElfAtochemS.A. Centre d'Application de Levallois RAPPORT D'ETUDE BIODEGRADABILITE FACILE ESSAI DE DEGAGEMENT DE COz N0 D'ETUDE: 6349/95/A SOMMAIRE SOMMAIRE 1. ASSURANCE QUALITY 2. SIGNATURES 3. IDENTIFICATIONS 3.1. Substance d'essai 3.2. Installation d'essais 3.3. Demandeur de I'etude 3.4. Calendrier 3.5. Archivage 4. OBJECTIF DE L'ETUDE 5. METHODE D'ESSAI 7 5.1. Introduction 7 5.1.1. Principe 7 5.1.2. References 8 5.1.3. Deviations 8 5.2. Materiel et produits 9 5.2.1. Materiel 9 5.2.2. Produits et reactifs 9 5.2.3. Substance de reference 9 5.2.4. Inoculum 9 5.3. Mode operatoire 10 5.3.1. Preparation des solutions 10 6. RESULTATS 11 6.1. Calcul 11 6.2. Resultats de I'etude 12 6.3. Clauses de validite de I'etude 12 7. CONCLUSIONS 13 8. ANNEXES 14 8.1. ANNEXE 1 Schema de montage 14 8.2. ANNEXE 2 Tableau de resultats et calcul 15 8.3. ANNEXE 3. Graphique de la degradation en fonction du temps 17 8.4. ANNEXE 4. Milieu d'essai 18 8.5. ANNEXE 5. Bulletins d'analyses 19 C^ documsnt est note po^yi^JI re peut lre ni copii. ni conimmx^ a dss fera sans aLtoisat^ La repoAidnn de ce rapport tfetude nest autoosee que sous ftxmMie faG-s^photogiaphiqueritegral. RC4C6349.DOC page 3/is'ompany Sanitized. Does not contain TSCA CBI ElfAtochemS.A. Centre d'Application de Levallois RESUME TECHNIQUE L'etude de biodegradabilite decrite dans ce rapport a ete realisee selon Ie mode operatoire decrit dans 1'annexe C.4-C de la Directive 92/69/CEE. Ce protocole est en accord avec la Ligne Directrice de 1'OCDE ?301 B adoptee Ie 17/7/92. Dans les conditions de l.'essai. Ie pourcentage de biodegradation du| etc de 48% en 16 jours (plateau). Dans Fintervalle de temps de 10 jours suivant Ie debut de la phase de biodegradation, celle ci a atteint un niveau de 47 %. La substance ne peut etre consideree comme facilement biodegradable selon les criteres enonces dans la ligne directrice 301 de 1'OCDE. La substance n'a pas montre d'effet inhibiteur vis-a-vis des micro-organismes. Un temoin sterile abiotique a ete realise : il a montre que la substance ne subit pas de disparition due a des phenomenes physico-chimiques dans les conditions de 1'essai. Les criteres de validite de 1'essai ont ete respectes. ^t ^ ^ ^ ^ Ce document est notre pnopriaiS.ne [< are ni copie, ni commmiqu6 ^ des fias sans autorialionexpressecfElfAtochsm. ^rEFnxJudiondeceBpporttf^n^a^^quesousfCTm^^^ *M-*4C6349.DOC p30^ 2/19 ElfAtochemS.A. Centre d'Application de Levallois 1. ASSURANCE OUALITE La presente etude a ete realisee selon les principes de Bonnes Pratiques de Laboratoire de 1'OCDE. Le Service Analyse-Environnement du Centre d'Application de Levallois dispose d'une reconnaissance de conformite aux BPL emise par le Groupement Interministeriel des Produits Chimiques en date du 8 mars 1993 et reconduite a la suite d'une inspection realisee par le Comite Francais d'Accreditation, les 19 et 20 avril 1994, confonnement au decret n90-206 du 7 mars 1990, pour les domaines de competences suivants : " Etudes ecotoxicologiques sur les organismes aquatiques et terrestres. - Etudes portant sur le comportement dans 1'eau, dans le sol et dans 1'air ; bioaccumulation. Le laboratoire est accredite par le COFRAC pour certains essais du programme 26-2 Essais de determination de certaines proprietes intrinseques des substances chimiques : essais ecotoxicologiques, et est idenrifie sous le numero d'accreditation : 1-0210. L'Auditeur Qualite du Centre d'Application de Levallois precede a des inspections periodiques et a des verifications en vue : - d'etablir la concordance de 1'etude avec les Principes de Bonnes Pratiques de Laboratoire de 1'OCDE, - de s'assurer que les methodes, les modes operatoires et les observations sont correctement decrits dans le rapport d'etude et que les resultats indiques refletent avec exactitude les donnees ecrites de 1'etude. Les dates correspondant a 1'audit de cette etude sont donnees ci-dessous: 28/09/95,17/10/95,11/03/96. L'Auditeur Qualite : D. TAISNE Date ^1 ff^j ^ h Signature Ce dcxaiTiert e^ no^ propi^ 1 ne peu! are ni cop6, ri conimirequi ^ cte tiera sans aulo^ La reproEludionde ce rapportcfAxte n'est autoris^ que sous famiejde^fihiJip^ RC4C6349.DOC page ^iP'mpanySahiti^d.boes not contain TSCACBI ElfAtochemS.A. Centre d'Application de Levallois 2. SIGNATURES Nous, soussignes, cerrifions que les resultats decrits dans ce rapport ont bien ete obtenus sous notre responsabilite dans Ie Service Analyse Environnement du Centre d'Application de Levallois et refletent avec exactitude les resultats obtenus lors de cette etude. Le Chefdu Service Analyse Environnement: M; BOURALY Date Signature ,^/y^ a Le Directeur de 1'etude : H. TH1EBAUD Date {tl/^C Signafa Ce documented notre propriafi llnepeuie^niccpa.ncomnuriclueactelietssansautoreafoneipresse La reproduction dece rapportdelude nest atorBee que sous SameQisjfS^^y'QW^SSSy^es not contain TSCA CBI RC4C6349.DOC page 5/19 Elf Atochem S. A. Centre d'Application de Levallois 3. IDENTIFICATIONS 3.1. Substance d'essai Denomination: ^^^^^IH N du lot: N d'enregistrement: 6349/95 Caracteristiques principales : - apparence : liquide brim - solubilite : totalement soluble dans 1'eau Precaution d'emploi et de conservation : voir FDS. 3.2. installation d'essais ELF ATOCHEM CENTRE D'APPLICATION DE LEVALLOIS SERVICE ANALYSE ENVIRONNEMENT 95 rue Danton 92300 LEVALLOIS-PERRET Directeur de 1'etude: H. THIEBAUD Personnel impHque dans 1'etude : Ingenieur responsable de 1'etude : H. .THIEBAUD Technicien(s) charge(s) de la realisation de 1'etude : A.M. PETIT Ingenieur charge des analyses : F. MANTISI Technicien(s) charge(s) des analyses : A. COUTY. Ce document est notre propriete. II ne peut are ri oop6, ri conrouniqui & des fere sans autotisafianBipressedafAtochem. La reproductiondeceBpportrfetudenes(autori^(^sousfomi9a^l%?fs^^^ not contain TSCA CBI RC4C6349.DOC page 6/19 ElfAtochemS.A. Centre d'Application de Levallois 3.3. Demandeur de I'etude M. DEVAUX (DCSF) Moniteur de 1'etude : Mme BUREAU (DSEP). 3.4. Calendrier - Approbation du plan d'etude par Ie Moniteur de I'etude : 02/10/95 - Debut de I'etude : 09/10/95 - Fin de I'etude : 09/11/95 - Rapport d'etude : 12/03/96 3.5. Archivage Les substances etudiees sont conservees dans Ie Service Analyse Environnement pendant une duree de 5 ans au maximum. L'ensemble des documents de I'etude est conserve au moins 10 ans. 4. OBJECTIF DE L'ETUDE L'objectifde cette etude est de determiner la biodegradabilite aerobic ultime dite facile du ^BlUIBBB^par application du mode operatoire decrit dans 1'annexe C.4-C de la Directive 92/69/CEE. qui est compatible avec la methode decrite dans la Ligne Directrice de 1'OCDE 301 B adoptee Ie 17/7/92. 5. METHODE D'ESSAI 5.1. introduction 5.1.1. Principe Un volume connu de milieu mineral ensemence, contenant une concentration connue de substance a etudier (entre 10 et 20 mg/1 de COD ou de COT) comme unique source nominale de carbone organique, est aere dans 1'obscurite par passage d'air exempt de dioxyde de carbone sous debit controle. Les substances organiques dissoutes dans 1'eau sont biodegradees par des micro-organismes chimio-organotrophes, qui les utilisent comme seule source de carbone et d'energie. La degradation est suivie par 1'analyse du dioxyde de carbone produit pendant une periode de 28 jours et a des intervalles de temps Ce document est noire propria6.11re peut are ni 03p6, ni communique& des fers sans autorisEtenesyressedElfAlochem. LaiBxodudxxideixiapportd'elLxJRenC'e4sCta6ut3o4ris9e.eDqOueCsopuasfgame7^&/lC1fl^rneKll^'ly'S^lTC^^oesnot. cont, e . __ ElfAtochemS.A. Centre d'Application de Levallois mtermediaires sufSsamment courts pour determiner 1'intervalle de 10 jours et Ie debut et la fin de la biodegradation. L'activite de 1'inoculum est controlee au moyen d'une substance de reference. Simultanement, on etudie les effets inhibiteurs eventuels de la substance d'etude vis-a-vis de 1'inoculum avec un melange de la substance de reference et de la substance d'etude. Une serie sterile permet egalement de verifier si la substance peut subir une degradation abiotique. 5.1.2. References -Annexe de la Directive CEE/92/69 ; Partie C: Methodes de Determination de FEcotoxicite - C.4 Determination de la Biodegradabilite Facile, partie II : Essai de degagement de C02 (methode C.4-C). JOCE ?1383 A du 29/12/92. - Ligne Directrice de 1'OCDE pour les essais de produits chimiques n301 B : Essai de degagement de CCh, adoptee par Ie conseil Ie 17juillet 1992. - Plan d'etude du : 26/09/95 - Plan Qualite n5 : Bipdegradabilite Facile : Essai de degagement de C02, edition 1, fevrier 1994. 5.1.3. Deviations La methode prevoit 1'elimination du CO^ du milieu dans les flacons en debut d'essai apres addition de Pinoculum et avant introduction des substances d'essai et de reference. Dans Ie cas present, la substance d'essai, peu soluble, etant dispersee par mise en emulsion directement dans les flacons d'essai, 1'elimination du C02 du milieu est realisee par aeration des milieux apres addition de la substance et avant introduction de 1'inoculum. Parallelement, ce dernier est preconditionne pour abaisser Ie niveau de respiration endogene. Afin d'evaluer la conformite a la cause de validite decrite au IV.3.2. de la methode CEE C.4-C precisant que la teneur en carbone inorganique (CI) de la suspension de la substance a etudier en milieu mineral au debut de 1'essai doit etre inferieure a 5% du carbone total , Ie CI est mesure avec 1'analyseur MAlHAK TOCOR 100 et sa concentration est comparee a la somme du (COT) introduit dans Ie milieu mineral par ajout de la substance. Cette operation differe de'eelle preconisee dans Ie plan qualite n 5 edition 1 redige avant que la mesure directe du CI ne soit realisable. II etait alors procede a la double mesure directe du (CT) et du COT et la difference de ces concentrations donnait une estimation en CI. En raison de 1'incompatibilite entre les composes fluores, presents dans la preparation testee, et 1'analyseur de carbone, il n'est pas precede a la verification experimentale du niveau de carbone inorganique en debut d'essai dans les flacons Ft. cette analyse n'est realisee que dans les flacons Fb. La clause de validite decrite au IV.3.2 de la methode LaBpnAx^decerappcrttfetucfe^a^^^^ffi^^ Ce document est noire propriete.II ne peut are ni copie.ni communiquea des tas sans autorisationeipressetfBfAtochem. ^ ^^ ^^ pg, ElfAtochemS.A. Centre d'Application de Levallois precisant que "la teneur en carbone inorganique (CI) de la suspension de la substance a etudier en milieu mineral au debut de 1'essai doit etre inferieure a 5% du carbone total", n'est pas verifiee. 5.2. Materiel et produits 5.2.1. Materiel Appareillage courant de laboratoire d'ecotoxicologie et, notamment: - Centrifugeuse thermostatee : JOUAN CT 4-22 ; - Oxymetre, conductimetre, pH-metre : combine multifonctions Jenway 3410 ; - Le schema de montage est represente en annexe 1. Pour chaque unite d'essai, il est constitue, d'amont en aval de : - pompe peristaltique GILSON a 4 canaux , - 3 flacons pour le piegeage du CO') avec tube plongeur en verre fritte, successivement N'aOH 5 M. NaOH 5 M et Ba(OH)2 0,0125 M - recipients pour essais : flacons en verre de 3 litres, - agitateurs magneriques pour les flacons d'essais, - 3 flacons pour le piegeage du CCb. A partir des pieges amont jusqu'aux pieges aval, les gaz circulent dans des tubes en elastomere fluore faiblement permeable au C02 : Viton, Norprene. - Burette de precision de 50 ml pour titration du Ba(OH)2. L'analyse du carbone organique e.t inorganique en solution au debut de Pessai est realisee au moyen d'un appareil MAIHAK TOCOR 100. 5.2.2. Produits et reactifs Tous les reactifs utilises pour la preparation du milieu sont de qualite "pour analyse". L'eau provient d'un appareil de production d'eau ultra-pure (ultrafiltration, echange d'ions, charbon actif) muni d'un dispositifde mesure de la resistivite. 5.2.3. Substance de reference Benzoate de sodium de qualite "pour analyse". 5.2.4. Inoculum L'inoculum provient d'effluent secondaire de la station d'epuration biologique urbaine de Versailles. L'effluent est preleve le 9/10/95 puis acre jusqu'au jour de 1'ensemencement des flacons, ou il est centrifuge a environ 20C pendant 20 mn a 4000 g ; le culot est repris dans un volume de milieu d'essai tel que 1'on ait un facteur de concentration d'environ 125 par rapport a I'echantillon preleve. Une numeration sur echantillonneur Ce document est ncitrepropnae llrepeaarerccp6.niconimurqueadastiassareautc(Ba^a<piBsse(fBfAtochem. ^^ep(DTM*?^tf^^c^DOC^e<W^^^ not contain TSCA CBI ElfAtochemS.A. Centre d'Application de Levallois pour bacteries totales Totalcount Millipore montre que pom- la presente etude, 1'mocnlum concentre presentait une concentration de : 7,5 x 106 bact/ml, ce qui donne 7,5 x 104 bact/ml dans Ie milieu ensemence final (1% d'moculum dans Ie milieu d'incubation). 5.3. Mode operatoire 5.3.1. Preparation des solutions Le milieu d'essai est prepare selon les indications de 1'annexe 4. Solutions de piegeage el de dosage : Soude 5 M, hydroxyde de baryum 0,0125 M, acide chlorhydrique 0,05 M. Substances d'essai et de reference : Le pourcentage de carbone dans la substance d'essai! analyse elementaire (bulletin d'analyse en annexe 5), est de : 9,96%. ^determine par La concentration de la solution mere est calculee pour que le volume de transfer! apporte une concentration en carbone dans 1'erlen fixee, entre 10 et 20 mg COT/I. 4HHHBB9 La solution de dans le milieu d'essai a 150,7 mg/1 correspond a 15 mg COT/I, soit, pour un volume de 1500 ml par flacon, une masse theorique de C02 de : 82.5 mgCOsTh. Une solution mere de benzoate de sodium trihydrate (57,7%C) dans le milieu d'essai a 3,9 mg/ml. est utilisee a raison de 10 ml pQur 1500 ml de milieu, soit 39 mgCOD, soit une masse theorique de CO^ de : 2,5 mgCO^Th. Dans le flacon de controle d'inhibition. des quantites equivalentes de substance d'essai et de reference sont introduites. Pour ce flacon, la masse theorique de C02 est de : 165mgC02Th. 5.3.1.1. Conduite des essais Les essais sont realises dans des flacons de 3000 ml, a raison de : Sirie Fiacoos Essai Blanc Conlrole inoculum Blanc svsicinc Sterile Inhibition Ftl.Fl2 Fbl.Fb2 Fcl Fbs Fs Fi Inoculum 15 ml 15ml 15 ml 15 ml mg substance d'essai 226 Solutioiun&re snbstaTOe'tSN rflFereace^l 10ml 226 226 10ml 10ml 10ml q.s.p. 1500 ml q.s.p. 1500 ml q.s.p. 1500 ml q.s.p. 1500 ml Ce document es( noire propraSteH re peut are ra copa, ni communique AdestessansautarisaljoneqaEssetfBfAtochsm LareprixhjctxTictereraRxrtd'aLrienestautoris&quesousfom-eA.fa;^^ , RC4C6349.DOCpage lo/^1'^^^3"1^9- 'Joes not cont, ai. n TSCA CBI ElfAtochemS.A. Centre d'Application de Levallois La substance d'essai est pesee sur un support inerte (lamelle de microscope) et I'ensemble est depose dans les flacons Ft, Fs et Fi. 10ml de la solution mere de la substance de reference sont ajoutes dans les flacons Fc et Fi. L'aeration de ces melanges par de 1'air exempt de C02 est demarree afin de purger Ie CC>2, pendant une nuit. L'inoculum preconditionne est ajoute ; un prelevement est realise dans les flacons Fb pour mesure du CI et les pieges de CC>2en aval des flacons d'essais sont branches. Ces pieges contiennent 50 ml de solution d'hydroxyde de baryum0,0125 M. L'incubation a lieu dans une salle thermostatee a 22 2C. Le debit d'air a travers les flacons d'essai est mesure en debut d'essai et en cas de changement de tuyau ou de piege amont. Le dosage du COz degage et piege est realise a des intervalles determines par la vitesse d'avancement de la reaction. Le dioxyde de carbone reagit avec 1'hydroxyde de baryum pour donner du carbonate de baryum insoluble. Lorsque le precipite blanc de carbonate de baryum apparait dans le second piege (apres le flacon d'essai), les 3 pieges sont remplaces par des pieges de solution fraiche d'hydroxyde de baryum. Les pieges retires sont doses. Au dernier jour de 1'essai. apres renouvellement des pieges, les flacons d'essai sont acidifies au moyen de 1 ml d'acide chlorhydrique concentre pour degager le C02 dissous. Au bout de 24 heures celui-ci est mesure. La titration de 1'hydroxyde de baryum restant est faite par neutralisation au moyen d'une solution d'acide chlorhydrique. en presence de phenolphtaleine. 6,__RESULTATS 6.1. Calcul Les resultats obtenus sont rassembles dans les tableaux en annexe 2. Sur la premiere page sont portes les volumes V d'HCl de neutralisation du Ba(OH)2 restant dans les pieges. Le nombre m de mg de CCb capte est donne par 1'equation : m=l,lx(50-V) La masse de CCh produit par la degradation de la substance est calculee a partir du C02 issu des flacons Ft deduction faite du CCh produit par 1'inoculum. 11en est fait de meme pour les flacons Fc et Fi Les quantites de CCb a chaque dosage et cumulees sont indiquees sur la seconde page de 1'annexe 2. ainsi que les pourcentages de degradation. A partir du cumul du CO^, la degradation est calculee selon 1'equation generale suivante : Ce document est noire propriete. II ne peut are ni cap6, ri commiriqui a des tias sans autorisalionexpressecfElfAtochein. La^xk<^deceBpportcf^^^^^^ft(,%i^^^ ^ ^^ ^^ ^ ElfAtochemS.A. Centre d'Application de Levallois ,%, d,e, grad, ati. on = ing CO, produit --------------2J-------------.. mg COT ajoute dans 1'essai x -- x ,1-0,,0, Le denominateur de 1'equation exprime Ie CO^ theorique pouvant se former a partir de la quantite de carbone organique introduite. ...... ... CO, produit par leflacon sterile apres 28 jours (mg) x ,1,,00, % de degrad. ati. on abiotique = ------------------C--O--;T--h--(m--g--) ----------------- Le graphique en annexe 3 montre le pourcentage de degradation en fonction du temps pour les series Ft, Fc et Fi (fioles d'essai, de reference et d'inhibition). 6.2. Resultats de Fetude Le niveau maximal de degradation du 4BHHHH9 est de : 48 % en 16 jours. La phase de latence pour la degradation de la substance (temps ecoule entre le debut de 1'essai et 10% de degradation) est d'environ 1 jour et le pourcentage de degradation au bout de 1'intervalle de temps de 10 jours suivant cette phase de latence est de 47 %. 6.3. Clauses de validite de I'etude La difference entre les valeurs extremes obtenues pour Ftl et Ft2 est inferieure a 20 %. Le pourcentage de degradation de la substance de reference (Fc) est superieur a 60 % en 14 jours. Dans la fiole Fi. la degradation de la substance de reference est superieure a 25 % au cours des 14 premiers jours : la degradation de la substance de reference n'a done pas ete inhibee par la presence de la substance d'essai. La quantite cumulee de CCh degagee par les flacons Fb est inferieure a 40 mg/1 de milieu, soit 60 mg. La teneur en carbone inorganique dans la suspension de la substance a etudier en milieu mineral (flacons Ft) au debut de 1'essai n'a pu etre detenninee (cf. 5.1.3); le critere mentionnant que cette teneur doit etre inferieure a 5 % n'a pas ete verifie. La concentration en CI dans les flacons Fb est de : 0,22 mg/1 (annexe 5). L a ^ ^ x ^ d e ^ ^ i t f ^ n ^ ^ ^ ^ ^ S ^ l ^ ^ ^ Ce document est noire propriete 11nepeut are nic^.rt communiquea des tiers sareautorisatiooeipresserfHAtodTem. not contain TSCA CB1 ElfAtochemS.A. Centre d'Application de Levallois 7. CONCLUSIONS L'etude de la biodegradabilite aerobie ultime facile du ^^H^^HHIl^ selon la meftode de 1'annexe C.4-C de la Directive 92/69/CEE, montre que cette substance presente un niveau maximum de biodegradation de 48%. Le pourcentage de degradation au bout de 1'intervalle de temps de 10 jours suivant la phase de latence est de 47%. La substance d'essai n'a pas inhibe 1'activite de 1'inoculum bacterien. Selon les indications de la Ligne Directrice de 1'OCDE 301, une substance est consideree comine facilement biodegradable selon cette methode si un niveau de 60% de degradation est atteint dans les 10 jours suivant le debut de la phase de degradation (laquelle debute lorsque 10% du COT a ete biodegrade). Ces 60 % doivent etre atteints dans la periode d'essai de 28 jours. ^IBBBIBB Selon ces criteres, le nlest P33 considere comme facilement degradable. En raison du caractere rigoureux de cette methode, une valeur peu elevee ne signifie pas necessairement que la substance soumise a 1'essai'n'est pas biodegradable dans les conditions de 1'environnement, mais elle indique que des etudes complementaires seront necessaires pour evaluer sa biodegradabilite. Ce docitnert est noire pnapriete. 11ne peut are ni cope, ni conimunique & des lias sans autarisationexpressedElfAtochem. la^u=c.*cempport<f^n^^^^^ftq5@^^ ^ ^ &>! O R >W C u ys yii b.1 X Ed U X z Ed 2 z < 2 < od oo 0) CM e- ^l S I "r c i?' U) o ? ' -.: 'm OQ o_ o ro Q) 0) ^ .<u 'S g^CM2 ^ in CO 0 CD 0 f:.' I <D S g- a> v S^ ^| !'i- I 11? ||S SSS) =.1" 1-I | |T,.O: M t) a Company Sanitized. Does not contain TSCA CBI l_ll muuiiBii Centre d'Application de Levailois 8.2. ANNEXE 2 - Tableau de resultats et calcul BIODEGRADAB1L1TE FACILE Essai de degagement de C02 92/69/CEE: C.4-C ird'etude:|63495/A Substance etudiee: | Substance de reference: (Benzoate de sodium Substance etudiee: Substance de reference: Serie inhibition: mg %C mg carbone 226 10.0 22,5 39 57,7 22.5 45.0 mgC02th. 82,5 82,5 165,0 VOLUME HCL (ml) Vba Baryte nombre de pieges Jour 25,8 24,3 24,7 13 24,4 16 24,9 3 20 24,6 3 26 25.0 28 25,2 29 26,1 Vb Fbl Pb2 piege 1 24.5 piege2 piege 3 TOTAL' 25,8 25.5 ~SS "~"7S~S piege 1 24.7 piege2 25.3 piege 3 25.6 TOTAL""""""""" ......... '"'"75.6 35.9 33,1 24.3 93,3 34,5 35,0 24,2 93,? 23,5 24,4 24,6 72.5 22,9 24,2 24,5 """7T.6 23,9 24,3 24,4 72,6 22,8 24,0 24,4 ""'7T2 24,2 24,8 24,7 ''""73,7 23,7 24.2 24.5 --72-4 23,9 24,4 24,5 --72-8 22.8 23,5 24,1 ~-7o;4 23,7 24,8 24,9 """73;4 22.0 22,8 23.9 '""'687 24,7 25,0 25,0 """747 21,9 23,8 24,8 """70^ 25,8 26.0 26,0 """77;8 24,0 25,3 25,8 """75"1" Moyenne Fb #mt 75.7 93,5 72.1 71,9 73,1 71,6 71,1 72.6 76,5 VI Ft1 piege 1 14.0 22,1 18,1 23,3 23.6 23,0 23,7 24,8 25,8 piege2 21.8 34.0 23,9 24,0 24,1 24,2 24.7 25,1 26,0 piege 3 TOTAL"' 24.4 """605 23.6 24,5 24,2 24,8 "79.7 """66.5 """7TS """72,5 24,3 ^ 25,0 25.2 "73.4 """75"1 26,0 77.8 Ft2 piege 1 16.1 20.9 20,8 22,8 23,7 22,6 23,7 24,7 25,8 piege2 23.6 piege 3 24,5 TOTAL""'" """"" "iii """64.2 32.1 22,4 23,9 24,6 24,3 23,0 24,4 24.2 24,7 24.0 76.0 "'""67.6 """765 ""735' '""%9 24,8 25,0 25,9 24.9 25,0 26,0 73.4 '""747 """777' Moyenne Ft m 62.2 77.9 67,1 71,2 72,6 71,2 73,4 74,9 77.8 Vc Pc1 piege 1 2.1 22.1 20,2 22,3 23,8 23,5 23,4 24.8 25,7 piege2 17.0 28.0 23.1 23,9 24,4 23,6 24,5 24,8 25.8 PTOiisT?A-.L!..............., itSfa 22.2 41.3 21,9 72.0 24.0 67,3 24.4 70.6 24.5 24,5 72.7 . 71,6 24.9 72,8 25.1 74,7 25.8 77,3 Fc2 piege 1 piege2 piege 3 TOTAL'""""""""" 'iif? "SWA" "<fN/A" "#N/A" "?N/A" "SWA" "IN/A" "#N/A" "SN7A" "?N/A" Moyenne Fc Vi Fi piege 1 piege2 piege 3 TOTAL IHSt 41.3 0.9 1,3 16.5 --yff 72,0 67.3 5,7 16,1 27.1 22,5 23.2 24.2 5'6',0 "'"623 70.6 72,7 21.4 23,3 24.2 24.5 24,4 24,6 70"0 "'"72",4 71,6 72,8 22,4 23,2 23.9 24,7 24,3 25,0 7S,6 """72,9 74.7 24,6 25,0 25.1 """747 77.3 25,8 26,0 26,1 """77',9 Vbs Fbs Vs Fs piege 1 piege 2 piege 3 TOTAL""""""""" Wff piege 1 aiege 2 siege 3 TOTAL""""""""" 'ml 25,1 35.6 24.7 24.4 25.0 35.5 24.6 24,4 24,9 24,1 24,7 24.4 """75.0 """95.2 "74;o "-73^ 25.6 25,8 25.6 ""'77.0 35.7 35,6 24.2 ""95,5 24.6 24,7 24,7 """74"o 23,9 24.3 24.4 "-72;6 24.6 24,2 24,7 25,0 26,0 24.8 24,5 24,9 25,1 26.1 24,8 24,6 24,9 25.1 26.1 74,2 '"""73,3 """74;5 """75;2 --7g^ 24,5 24,1 24,4 25.0 25,9 24.6 24,2 24,9 25.1 26,0 24,9 24,1 24,9 25,2 26,1 74,0 '""72.4 """7'4,2 """75;3 '""78.0 Ce document est noire propri6telIneceutelreraa^.riixnmMiic^adesterssansautorisa^eiqxessedBfAtochen'i. La reproductionde ce rapport delude nest autnrisee que sous fonne de lac-sanilephotogiaphiquentEgral. RC4C6349.DOC page 15/lCompany Sanitized. Does not contain TSCA CBI Centre d'Application de Levallois BIODEGRADABILITE FACILE Essai de degagement de C02 92/69/CEE: C.4-C N d'etude: |6349/95/A Substance etudife: Substance de inference: |Benzoate de sodium |C02 (ms0 /jour .r(Vba-Vb) .r(Vba-Vb) ,1'(Vba-Vb) .r(Vb-Vl) ,r(Vb-Vt) i,r(Vb-vi) 1.1'(Vb-Vc) i,r(Vb-vc) i.r(Vb-vc) l.l'(Vb-Vi) l.l'(Vbs-Vs) Jour Fb1 Fb2 Moyenne Fb Ft1 Ft2 Moyenne Ft Fcl Fc2 Moyenne Fc Fi Fs 0 2 9 13 16 20 26 28 29 0 1.8 4,3 1,8 0,7 1.1 1.1 1,8 1,0 0,6 0 2,0 3.9 2.8 2,2 2,5 3.7 6,9 5,6 3,5 0 1,9 4,1 2,3 1,4 1,8 2,4 4,3 3,3 2,0 0 17.1 15.2 6.1 0,4 0,6 0,1 -2,6 -2,8 -1.5 0 12,7 19,3 4,9 1,1 0,1 0.8 -2,6 -2.3 -1.4 0 14,9 17,2 5,5 0,8 0,3 0,4 -2,6 -2,5 -1,4 0 37,8 23.7 5.2 1,4 0,4 0,0 -1.9 -2.3 -0,9 0 SN/A #N/A #N/A SN/A SWA #N/A #N/A SN/A SN/A 0 37.8 23,7 5.2 0 60.5 41.3 10,2 0 -2,2 -0,3 0,0 1,4 0,4 2,1 0,7 0,7 0,2 0,0 -1,9 -2.3 -0,9 1,1 -2,0 -2,3 -1,6 1,0 0,3 -0,1 0,2 |C02 cumul6 (mg) Jour 0 2 5 9 13 16 20 26 28 29 Fb1 Fb2 Moyenne Fb Ft1 Ft2 Moyenne Ft Fcl Fc2 0,0 1.8 6.1 7,8 8,5 9.6 10.7 12,4 13,4 14,0 0,0 2.0 5.8 8,6 10,8 13,3 17.1 24.0 29.6 33,1 0.0 1.9 5,9 8,2 9.6 11.4 13.9 18,2 21,5 23,5 0.0 17.1 32,2 38,3 38.8 39.4 39,5 36,9 34.2 32.7 0.0 12.7 31.9 36,8 37,9 38.0 38,7 36.1 33.8 32,4 0.0 14.9 32.1 37,6 38.3 38,7 39,1 36,5 34,0 32,6 0.0 37.8 61,5 66.7 68,1 68,5 68,5 66,6 64,3 63.4 0.0 SN/A SN/A ffN/A #N/A SN/A #N/A #N/A SN/A #N/A Moyenne Fc FI 0.0 37,8 61.5 66,7 68.1 68,5 68.5 66,6 64.3 63,4 0.0 60.5 101,8 111.9 114,0 114.7 115,8 113,8 111,5 109.9 ^s 0.0 -2.2 -2,5 -2,5 -1,9 -1.7 -0,7 -0,3 -0.4 -0.2 [DEGRADATION (%) Jour Ft1 Ft2 Moyenne Ft Fcl Fc2 Moyenne PC Fi Fs 0 2 5 9 13 16 20 26 28 29 0 21 39 46 47 48 48 45 41 40 0 15 39 45 46 46 47 44 41 39 0 18 39 46 46 47 47 44 41 39 0 46 75 81 83 83 63 81 78 77 0 SN/A #N/A N/A SN/A #M/A #N/A SN/A SN/A N/A 0 46 75 81 83 83 83 81 78 77 0 37 62 68 69 70 70 69 68 67 0 -3 -3 -3 -2 -2 -1 0 -1 0 Ce document esirotrepropnete llrpeutacricopte.rioomnrxnqu6adesl!ec5sarBaute(GafionexpressecfEffAtochem La reproduction de ce rapport tfaude n'est autoriste que sous fame de (ac-stnK photographiqueritegtal. RC4C6349.DOC page 16/teompany Sanitized. Does not contain TSCA CBI I u .8& Su ""o &) 8P o 0 3 ^132 8-o -ejjO; R ^ U X U z 2: < ',3 ^ 00 Company Sanitized. Does not contain TSCA CBI KIT Miocnem a. A. Centre d'Application de Levallois 8.4. ANNEXE 4 - Milieu d'essai Le milieu d'essai est realise a partir des solutions suivantes: Solution a Dihydrogenophosphate de potassium anhydre (KH2P04) Monohydrogenophosphate de potassium anhydre (K2HP04) Monohydrogenophosphate de sodium dihydrate (Na2HP04,2H20) Chlomre d'ammonium (NH4C1) . 8,5 g 21,75 g 33,4 g 0,5 g Eau ultra-pure, q.s.p. 1000 ml Le pH de ce melange est de 7,4 Solution h 22.5 g de sulfate de magnesium heptahydrate (MgS04,7H20) dans 1000 ml d'eau ultra- pure. Solution c 27,5 g de chlorure de calcium anhydre (CaCl2) dans 1000 ml d'eau ultra-pure . Solution cl 0.25 g de chlorure de fer(III) hexahydrate (FeCl3,6H20) dans 1000 ml d'eau ultra-pure. Cette solution est preparee lejour du debut de 1'essai Pour 1 I de milieu, ajouter a 800 ml d'eau ultra-pure : 10 ml de solution chacune des solutions h a c/et completer a 1000 ml avec de 1'eau ultra-pure. a, \ ml de. Ce document est notre propria&lt re peut are raicop4.ni communique &des fiassansaulDrisatnne^iressed'ElfAtochem. [^ repnxlucten de (X rapport cTetude n'est autixis& que sous fbin de bogi^ pholo^^ RC4C6349.DOC page 18/Gompany Sanitized. Does not contain TSCA CBI tir Atocnem s. A. Centre d'Application de Levallois 8.5. ANNEXE 5 - Bulletins d'analvses Cette annexe est constituee de 4 feuillets non pagines a la suite de la presente page. Ce document est noire propriae.ll ne pout are ni oap6. n communique& des 6as sns autnisaficnexpressed'BfAtochern. w lL^arreeopntDxoiuuccilxioxniadeeceiapporttfajcfReCn4'eCs6ta3u4t9a.rDisOeCeqpuaegseoulasf/oli^inme^pfaa&sni^/Sanitized. Does not . contain ,T_S_C,A C. BI elf atochem CENTRE D'APPLICATION DE LEVALLOIS Levallois Peiret Ie : 06/10/95 BULLETIN D*ANALYSE Reference AGILAN : Reference document: Reference demands : 95/SAEf/1020/AC I'orre demande : Du: 02/10/95 Sequentiel: Etude BPL: Destinataire TBaEBAUD HERVE SAE CA LEVALLOIS Determination du taux de Carbone d'un echantillon de j Analyse faite sur CHN/OS CARLO ERBA n42701 . Coll A Couty Copie AM Petit Responsable d'analyse : FREDERICK MANTISI ('isa: / Company Sanitized. Does not contain TSCA CBI Reference Analyse : Destinataire: BAUD HERVE fichantillon: CARBONE CARBONE Teneur 10.18 9.75 Unite % % Page: 2/2 Ramarque Compahv Sanitizftd- Does nnt p.nnfain TSr'/\ CB| elf atochem CENTRE D'APPUCATION DE LEVALLOIS Levaflois Perret Ie: 12/10/95 BULLETIN ^ANALYSE Reference AC/LAN : Reference document; Reference demande^ 95/SAEf/1054/AC Destinataire THIEBAUD HERVE SAE CA LEVALLOIS 1otre demande : BIODEGRADABILITE C4C DU CID Du: Sequentiel: 11/10/95 Etude BPL: Determination C I D sur essais biodegradabilite C4C du , Analyse faite sur TOCOR 100 MAIHAK n0 CA 000112 Coll A Couty Copie AM Petit Responsable d'analyse : FREDERICK MANTISI ('isa : /. Company Sanitized. Does not contain TSCA CB1 Reference Analyse: Destinataire: AUD HERVE Echantillon; TEMOIN Constltuant CID Teneur <0.1 EchantiUon: BLANC 1 Constituant CID Teneur <01 Echantmon; BLANC 2 ConEtltuant CID CID CID Teneur 021 023 024 Unite nig/I Unite mg/1 Unite mg/1 mg/1 mg/1 Page: 2/2 Remarque Remarque Remarque Company Sanitized. Does not contain TSHA URI