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Study Sponsor: Issue Date: Document Reference No.: ELFATOCHEM 10-Jul-95 95/SAE6/0548/HT AR226-3022 Ready Biodegradability Author(s): H. Thiebaud English Translation of Report Sum m aiy for DuPont Chemical Solutions Enterprise 27-Jan-03 Company Sanitized. Does not contain TSCA CB1 ELF ATOCHEM Levallois Applications Center 1. TECHNICAL SUMMARY The biodegradability study described in this report was effected using the operating procedure described in appendix C.4-C of the Directive 92/69/EEC. This protocol is in agreement with the Directing Outline NB 301 B of OCDE adopted on 17/7/92. Under the test conditions, the percent biodegradation 84 % in 28 days. During the time interval of 10 days following start of the biodegradation phase, the latter reached a level of 68 %. . The substance can be considered to be easily biodegradable according to the Directing Outline 301 of OCDE. The substance did not show an inhibiting effect towards micro-organisms. A sterile abiotic control was effected : it showed that the substance does not disappear due to physical and chemical phenomena under the test conditions. .Company Sanitized. Does not contain TSCA ELF ATOCHEWi S.A. D .C .R .D . C e n tre d `A p p lic a tio n d e L evalio is S ervice A n alyse E nviro n n em en t Levaliois le : 10/07/95 Rf. document : 95/SA E6/0548/H T N de Squentiel : 814020 RAPPORT D' cofrcu ESSAIS Laboratoire accrdit sous le n*1-0210 Reconnaissance de conformit aux 8PL de l'OCDE par le G1PC en date du 8/3/93. reconduite le 30/06/94 N : 2876/95/A T IT R E : DTERMINATION DE LA BIODGRADABILIT FACILE ESSAI DE DGAGEMENT DE C 0 2 AUTEUR(S) : H. TH IB A U D _________________ RESUME DOCUMENTAIRE : j|Dtermination de la biodgradabilit facile de la substance en suivant le m ode opratoire dcrit dans l'annexe C .4 -C de la directive C E E 92/69, et la Ligne Directriqe de I'QCDE 301 B (adopte le 17/7/92). , p f & / 4 Ci O - L.( t.-i* 3 , V i f t c. j i . C - Q O-J c -i v. J - "`- 7 MOTS CLES : (!O CDE/301 B biodgradabilit arobie ultime facile, 92/69/C EE , C .4-C , 5 // DESTINATAIRE : M. DEVAUX (DCFS) ' Copies : Chef de Service, Auditeur Qualit, Responsable des Archives, Laboratoire d'cotoxicologie Secrtariat, Fichier TECH Service cotoxicit et Sret des Produits (D SEP) ' L'accrditation COFRAC atteste uniquement de la comptence technique des laboratoires pour les essais couverts par l'accrditation. Ce rapport comprend 19 pages et 4 reuiliets non pagins {bulletins d'analyses). Company Sanitized. Does noi contain TSCA C Ce document est la proprit d'ELF ATOCHEM. Il ne peut tre ni copi, ni communiqu des tiers sans autorisation formelle. La reproduction de ce rapport d'tude n'est autorise que sous forme de fac-sim onotograDhiaue mtorai. ' RC4C2876.DOC Paowe 1/19 ._____ ELFATOCHEM Centre d'Application de Levallois RAPPORT D'TUDE B lo fe ^ A C IL E ESSAI DE DGAGEMENT DE C 0 2 N D'TUDE : 2876/95/A SO M M A IR E 1. RSUM TECHNIQUE 2. ASSURANCE QUALIT 3. SIGNATURES 4. IDENTIFICATIONS 4.1. Substance d'essai 4.2. Installation d'essais 4.3. Demandeur de l'tude 4.4. Calendrier ' 4.5. Archivage 5. OBJECTIF DE L'TUDE 6. MTHODE D'ESSAI 6.1. Introduction 6.1.1. Principe 6.1.2. Rfrences 6.1.3. Dviations 6.2. Matriel et produits 6.2.1. Matriel 6.2.2. Produits et ractifs 6.2.3. Substance de rfrence 6.2.4. Inoculum 6.3. Mode opratoire 6.3.1. Prparation des solutions 6.3.2. Conduite des essais 7. RSULTATS 7.1. Calcul 7.2. Rsultats de l'tude 7.3. Clauses de validit de l'tude 8. CONCLUSIONS 9. ANNEXES . .' 9.1. ANNEXE 1 - Schma de montage 9.2. ANNEXE 2 - Tableau de rsultats et calculs 9.3. ANNEXE 3 - Graphique de la dgradation en fonction du temps 9.4. ANNEXE 4 - Milieu d'essai 9.5. ANNEXE 5 - Bulletins d'analyses 3 4 5 6 6 6 6 6 7 7 7 7 7 8 8 8 8 9 9 9 9 9 10 11 11 12 12 12 14 14 15 17 18 19 Ce accumeni est la proprit d'E L r ATOCHEIv. Il ne peut tre ni copi, ni communiqu des tiers sans autorisation formelle. _ n o i c o * La reproauction de ce raDoort d'tuae n'est autorise aue sous forme de fac-sim photooraphique in t a ra irf-g iJ . O ' RC4C2S76.DOC page 2/19 ELF ATOCHEM Centre d'Application de Levailois 1 R SU M T E C H N IQ U E L'tude de biodgradabilit dcrite dans ce rapport a t ralise selon le mode opratoire dcrit dans l'annexe C .4-C de la Directive 92/69/C E E . C e protocole est en accord avec la Ligne Directrice de l'OCDE N301 B adopte le 17/7/92. D a n a ,le s conditions de l'essai, le pourcentage de biodgradation du g j j m t de 84% en 28 jours. Dans l'intervalle de temps de 10 jours suivant le dbut de la phase de biodgradation, celle ci a atteint un niveau de 68 %. La substance peut tre considre comme facilement biodgradable selon les critres noncs dans la ligne directrice 301 de l'OCDE. La substance n'a pas montr d'effet inhibiteur vis--vis des micro-organismes. Un tmoin strile abiotique a t ralis : il a montr que la substance ne subit pas de disparition due des phnomnes physico-chimiques dans les conditions de l'essai. De document est is nroorit tfE L F ATOCHEM. Il ne peut tre ni copi, ni communiqu des tiers sans autorisation formelle L2 reoroduction de ce rapport d'tude n'est autorise oue sous forme de fac-simil pnotographrque intgral. rjo S ' RC4C2876.DOC page 3/19 n ta ltt tS ' w ELF ATOCHEM Centre d'Application de Levallois 2. A SSU R A N C E Q U A L IT La prsente tude a t ralise selon les principes de Bonnes Pratiques de Laboratoire de l'O C D E. Le Service Analyse-Environnem ent du Centre d'Application de Levallois dispose d'une reconnaissance de conformit aux BPL mise par le Groupement Interministriel des Produits Chimiques en date du 8 mars 1993 et reconduite la suite d'une inspection ralise par le Comit Franais d'Accrditation, les 19 et 20 avril 1994, conformment au dcret n90-206 du 7 mars 1990, pour les domaines de comptences suivants : - tudes cotoxicologiques sur les organismes aquatiques et terrestres. - tudes portant sur le comportement dans l'eau, dans le sol et dans l'air ; bioaccumulation. Le laboratoire est accrdit par le COFRAC pour certains essais du programme 2 6 2 Essais de dtermination de certaines proprits intrinsques des substances chimiques : essais cotoxicologiques, et est identifi sous le numro d'accrditation : 1-0210. L'Auditeur Qualit du Centre d'Application de Levallois procde des inspections priodiques et des vrifications en vue : - d'tablir la concordance de l'tude avec les Principes de Bonnes Pratiques de Laboratoire de l'OCDE, - de s'assurer que les mthodes, les modes opratoires et les observations sont correctement dcrits dans le rapport d'tude et que les rsultats indiqus refltent avec exactitude les donnes crites de l'tude. Les dates correspondant l'audit de cette tude sont donnes ci-dessous : 09/05/95 ; 09/06/95 ; 04/07/95. * L'Auditeur Qualit : D. TA IS N E Date Signature Cs document est ia proprit d'ELF ATOCHEM. li ne peut tre ni copi, ni cornmuniou des tiers s La reproduction de ce rapDort d'tude n'est autorise aue sous forme de fac-simil photogr ' ' RC4C2878.DOC page 4/1S ELF TOCHEM Centre d'Applicaton de Levaliois 3 . S IG N A TU R E S Nous, soussigns, certifions que les rsultats dcrits dans ce rapport ont bien t obtenus sous notre responsabilit dans le Service Analyse Environnement du Centre d'Application de Levaliois, et refltent avec exactitude les rsultats obtenus lors de cette tude. Le Chef du Service Analyse Environnement : M. BO URALY Date Signature Le Directeur de l'tude : H. THIBAUD Cs document est la proprit d'EL La reproduction ae ce raf ELF ATOCHEN! Centre d'Application de Levailois A. ID E N T IF IC A T IO N S 4.1. S u b stan ce d 'essai Dnomination! N d'enregistrement : 2876/95 Caractristiques principales : fl - apparence - solubilit 1 Prcaution d'emploi et de conservation : prohiber le contact avec les yeux, la peau et l'inhalation de vapeurs. 4.2. In s ta lla tio n d 'e s s a is ELF ATOCHEM - CENTRE D'APPLICATION DE LEVALLOIS SERVICE ANALYSE ENVIRONNEMENT 95 rue Danton 92300 LEVALLOIS-PERRET Directeur de l'tude : H. TH I B A U D Personnel impliqu dans l'tude : Ingnieur responsable de l'tude : H. TH IBAUD Technicien charg de la ralisation de l'tude : C. KAE Ingnieur charg des analyses : F. MANTISI Technicien charg des analyses : A. C O U TY - 4.3. Dem andeur de i'tude NI. D E V A U X (D C F S ) Moniteur de l'tude : Mme BUREAU (D SEP) 4.4. C alendrier - Approbation du plan d'tude par le-Moniteur de l'tude : 12/05/95 - Dbut de l'tude : 15/05/95 Ce documeni est la propriis d'SLF ATOCHEM. Il ne peut tre ni copi, ni communiau des tiers sans autorisation formelle. La reproduction oe :e rapport d'tuae n'est autorise aue sous forme de fac-simil pnioOiIoOourfaoDphniOouUec inticOgriadi. . ' RC4C2576 .DOC page 6/18 ,m,c n l" 'TSCRCW ELF ATOCHEM Centre d'Application de Levallois - Fin de l'tude : 15/06/95 - Rapport d'tude : 10/07/95 4.5. Archivage Les substances tudies sont conserves dans le Service Analyse Environnement pendant une dure d e 5 ans au maximum. L'ensemble des documents de l'tude est conserv au moins 10 ans. 5. O B JE C T IF DE L ' T U D E L'objectif d ^ e t t ^ t u d ^ e s t de dterminer la biodgradabilit arobie ultime dite facile d L f l H H H H M > a r application du mode opratoire dcrit dans l'annexe C .4-C de llro ire c tiv ^ 2 f y fl5 E E , qui est compatible avec la mthode dcrite dans la Ligne Directrice de l'O C D E 301 B adopte le 17/7/92. 6. M T H O D E D 'E S S A I 6.1. In tro d u ctio n 6.1.1. Principe Un volume connu de milieu minral ensemenc, contenant une concentration connue de substance tudier (entre 10 et 20 mg/l de CO D ou de C O T ) comme unique source nom inale de carbone organique, est ar dans l'obscurit par passage d'air exempt de dioxyde de carbone sous dbit contrl. Les substances organiques dissoutes dans l'eau sont biodgrades par des micro-organismes chimio-organotrophes, qui les utilisent comme seule source de carbone et d'nergie. La dgradation est suivie par ('analyse du dioxyde de carbone produit pendant une priode de 2 8 jours et des intervalles de temps intermdiaires suffisamment courts pour dterminer l'intervalle de 10 jours et le dbut et la fin de la biodgradation.. L'activit de l'inoculum est contrle du moyen d'une substance de rfrence. Simultanment, on tudie les effets inhibiteurs ventuels de la substance d'tude vis--vis de l'inoculum avec un mlange de la substance de rfrence et de la substance d'tude. U n e srie strile permet galement de vrifier si la substance peut subir une dgradation abiotique. 1 Company Sanitized. Does not contain TSCA CB Ge document est is proprit d'ELF ATOCHEM. li ne peut tre ni copie, ni communique aes tiers sans autorisation formelle, ua reproduction de ce rapport d'tude n'est autorise due sous forme de fac-simii pnotoarapnioue intarsl. ' " RC4C2B76.DOC page 7/19 '' ELF ATOCHEM Centre d'Application de Levallois 6.1.2. Rfrences -A n n e x e d e la Directive C E E /92/69 ; Partie C: Mthodes de Dtermination de l'cotoxicit - C .4 Dtermination de la Biodgradabilit Facile, partie II : Essai de dgagement de C O 2 (mthode C.4-C). JOCE NL 383 A du 29/12/92. - Ligne Directrice de l'O CDE pour les essais de produits chimiques n301 B : Essai de dgagem ent de C O 2, adopte par le conseil le 17 juillet 1992. - Plan d'tude du : 05/05/95 -P la n Q ualit n5 : Biodgradabilit Facile : Essai de dgagement de C O 2 , dition 1, fvrier 1994. 6.1.3, Dviations La mthode prvoit l'limination du CO2 du milieu dans les flacons en dbut d'essai aprs addition de l'inoculum et avant introduction des substances d'essai et de rfrence. Dans le cas prsent, la substance est dilue dans les flacons d'essai puis l'limination du C O 2 du milieu est ralise par aration des milieux aprs addition de la substance et avant introduction de l'inoculum. En raison de l'incompatibilit entre les composs fluors, prsents dans la prparation teste, et l'analyseur de carbone, Il n'est pas procd la vrification exprimentale du niveau de carbone inorganique en dbut d'essai dans les flacons Ft. Cette analyse n'est ralise que dans les flacons Fb. La clause de validit dcrite au IV .3.2 de la mthode CEE C.4-C, prcisant que la teneur en carbone inorganique (Cl) de la suspension de la substance tudier en milieu minral au dbut de l'essai doit tre infrieure 5 % du carbone total, n'est pas vrifie. 6.2. M atriel e t p ro d u its 6.2.1. Matriel Appareillage courant de laboratoire d'cotoxicologie et, notamment : m - Centrifugeuse thermostate : JOUAN CT 4-22 ; * ' - Oxymtre, conductimtre, pH-mtre : combin multifonctions Jenway 3 410 ; - Le schm a de m ontage est reprsent en annexe 1. Pour chaque unit d'essai, il est constitu, d'am ont en aval de : - pompe pristaltique GILSON 4 canaux, - 3 flacons pour le pigeage du CO2 avec tube plongeur en verre fritt, successivem ent NaOH 5 M, NaOH 5 M et B a(O H )2 0,0 1 2 5 M - rcipients pour essais : flacons en verre de 3 litres, - agitateurs m agntiques pour es flacons d'essais. - 3 flacons pour pigeage du CO 2. Company Sanitized. Doss not contain TSCA CB Ze document est is proprit d'ELF ATOCHEM. It ne peut tre ni copi, ni communique s des tiers sans autorisation formelle La reproduction de ce rapport d'tuoe n'est autorise oue sous forme de fac-sim photoaraoniaue intgrai. ' " RC4C2876.DOC page 8/19 "" ELF ATOCHEM Centre d'Application de Levallois partir des piges amont jusqu'aux piges aval, les gaz circulent dans des tubes en lastomre fluor faiblement permable au C O 2 : Viton, Norprne. - Burette de prcision de 50 ml pour titration du Ba(O H )2- Afin de dterminer le pourcentage de carbone de la substance (calcul du CO 2 thorique), il a t procd une analyse lm entaire (C H N O S) sur un appareil CARLO ERBA avec chantillonneur automatique et micro-balance SA R TO R IU S ipg- L'analyse du carbone organique et inorganique en solution au dbut de l'essai est ralise au moyen d'un appareil M A H A K T O C O R 100. 6.2.2. Produits et ractifs Tous les ractifs utiliss pour la prparation du milieu sont de qualit "pour analyse". L'eau provient d'un appareil de production d'eau ultra-pure (ultrafiltration, change d'ions, charbon actif) muni d'un dispositif de mesure de la rsistivit. 6.2.3. Substance de rfrence Benzoate de sodium de qualit "pour analyse". 6.2.4. Inoculum L'inoculum provient d'effluent secondaire de la station d'puration biologique urbaine de Versailles. L'effluent, prlev la veille de l'ensemencement des flacons, est centrifug environ 20C pendant 20 mn 40 0 0 g ; le culot est repris dans un volume de milieu d'essai tel que l'on ait un facteur de concentration d'environ 100 par rapport l'chantillon prlev. Cet inoculum est prconditionn (aration) jusqu' ensem encem ent des flacons. Une numration sur chantillonneur pour bactries totales Totalcount Millipore montre que pour fa prsente tude, l'inoculum concentr prsentait une concentration de 1,7 * 105 bact/ml, ce qui donne 1,7 * 103 bact/ml dans le milieu ensem enc final ( 1% d'inoculum dans le milieu d'incubation). 6.3. M ode o p ra to ire 6.3.1. Prparation des solutions * Le milieu d'essai est prpar selon les indications de l'annexe 4. Solutions de pigeage et de dosage : Soude 5 M, hydroxyde de baryum 0,0125 M, acide chlorhydrique 0,05 M. Substances d'essai et de rfrence : Le pourcentage de carbone dans la substance d'essai dtermin Ce document est ta proprit ci'ELF ATOCHEM. I! ne peut tre ni copi, ni communiqu aes tiers sens autorisation formelle. La reproduction de ce raoport d'tude n'est autorise due sous forme oe fac-simil pnotograDhiaue intgrai. ' ' rc4C2876.d o c page s/19 j& m p a y Sanitized. Does ffirt eeirtaln TSCA CB! ELF ATOCHEM Centre d!Application de Levallois par analyse lm entaire (bulletin d'analyse en annexe 5), est de 33,25 %. La concentration de la solution m re est calcule pour que te voUm de apporte une concentration en carbone dans I erlen fixee, entre 10 et 20 mg C O T / . Des essais prlim inaires ont montr que la substance pouvait etre diluee de fa on homoane dans l'eau. U ne solution mre 6 ,7 7 g/l est prpare puis 10 ml de c* .te solution sont ajouts 1,5 litre de milieu minral dans les flacons d essai, s> us agitation. La solution de__ ________ .dans le milieu d'essai 45,1 mg/l correspond 15 mg COT/I, doit, pour un volui ie de 1500 ml par flacon, une masse thoriqu ? de CC>2 de 82,7 mgCC>2Th. Une solution m re d e benzoate d e sodium (57,7 % dans le milieu d'essai i 3,9 mg/ml, est utilise raison de 10 ml pour 1500 ml de milieu, soit 39 m gCOD, oit une masse thorique de CO 2 de 82,5 mgCC^Th. Dans le flacon de contrle d'inhibition, des quantits quivalentes de substance d'essai et de rfrence sont introduites. Pour ce flacon, la m asse thorique de ^ 0 2 est de 165,2 m gCC^Th. fi 3.2. Conduite des essais Les essais sont raliss dans des flacons de 3 0 0 0 ml, raison de : Srie Blanc Contrle Flacons Ft1, Ft2 Fb1, Fb2 Fc Inoculum j Solution substance 9 d'essai \ 15 ml 15 ml 10 ml 15 ml j Solution mre | substance i de rference 10 ml Blanc Systme Strile Inhibition Fbs Fs Fi 15 ml I . 10 ml 10 ml 10 m! Solution ^torure : mercuriqje a M:lie. 1 d'essai q.s.p. 1500 ml q.s.p. 150C ml q.s.p. 150C ml 10 ml q.s.p. 1500 ml 10 ml q.s.p. 1500 ml q.s.p. 15QC ml La solution mre de substance est verse goutte goutte dans le milieu minral contenu dans les flacons d'essai Ft et Fi, sous agitation. La substance de rfrence est ajoute dans les flacons Fc e t Fi. L'aration de ces mlanges par de l'air exempt de CO? est dm arre afin de purger le CO 2, pendant une n u it L'inoculum prconditionn est ajout et les piges de C O 2 en aval des flacons d'essais sont branchs. Ces piges contiennent 5 0 ml de solution d hydroxyde de baryum 0,0125 M. . ^ docum-m es- te proprit d'ELF ATOCHEM. Il ne peut tre ni copi, ni communique a aes tiers sans autorisation form ete La reproduction os ce rapport d'tude n est autonsee due sous tonne oe ra c -s im i^ o to p ra p ta o u s ||e g ^ W v a ' RC4C2S7S.DOC page 10/15 ELF ATOCHEM Centre d'Application de Levaliois L'incubation a lieu dans une salle thermostate 2 2 2C . Le dbit d'air travers les flacons d'essai est mesur en dbut d'essai et en cas de changement de tuyau ou de pige amont. Le dosage du CO? dgag et pig est ralis des intervalles dtermines par la vitesse d'avancement de la raction. Le dioxyde de carbone ragit avec ! hydroxyde de baryum pour donner du carbonate de baryum insoluble. Lorsque le prcipit blanc de carbonate de baryum apparat dans le second piege (a Prej le flacon d'essai) les 3 piges sont remplacs par des piges de solution frache d hydroxyde de baryum. Les piges retirs sont doss. Au dernier jour de I essai, apres renouvellement des piges, les flacons d'essai sont acidifies au moyen 1 ml d'acide chlorhydrique concentr pour dgager le C O 2 dissous. Au bout de 24 heures celui-ci est mesur. La titration de l'hydroxyde de baryum restant est faite par neutralisation au moyen d'une solution d'acide chlorhydrique, en prsence de phnolphtaline. 7. RSULTATS ' 7.1. C alcul Les rsultats obtenus sont rassembls dans les tableaux en annexe 2. Sur la premire page sont ports les volumes V d'HCI de neutralisation du B a(O H )2 restant dans les piges. Le nombre m de mg de CO2 capt est donn par l'quation : m = 1,1 x ( 5 0 - V ) La masse de CO 2 produit par la dgradation de la substance est calcule partir du CO2 issu des flacons Ft dduction faite du CO2 produit par l'inoculum. Il en est fait de mme pour les flacons Fc et Fi Les quantits de CO 2 chaque dosage et cumules sont indiques sur la seconde page de l'annexe 2, ainsi que les pourcentages de dgradation. A partir du cumul du CO2 , la dgradation est calcule selon l'quation gnrale suivante : _______ mg CO-, produit % dgradation = mg COT ajout dans l'essai x 100 44 12 Le dnominateur de l'quation exprime le CO2 thorique pouvant se former partir de la quantit de carbone organique introduite. La fiole de, dgradation abiotique (strile) Fs permet de dterminer si une dgradation due des phnom nes physiques ou chimiques a lieu. Elle permet ainsi de vrifier les hypothses de dpart quant la stabilit de la substance lors de l'essai. La formule de calcul de la'dgradation abiotique est la suivante : ~ le document est te proorit d'ELF ATOCHEM. Il ns peut tre ni copi, ni communiqu s des tiers sans autorisation formslie La reproouciion d" c rapport d'tude n'est autorise oue sous tonne de rac-simil photographique intgrai. " RC4C2S76.DOC page 11/19 no! eonaln TSCA CBi ELF ATOCHEM Centre 'Application de Levallois C 0 2 produit par le flacon strile aprs 28 jours (mg) _ % de dgradation abiotique CO2Th (mg) .X Le graphique en annexe 3 montre ie pourcentage de dgradation en fonction du temps pour les sries Ft, Fc et Fi (fioles d'essai, de rfrence et d'inhibition). 7.2. R su ltats de l'tu d e Le niveau maximal de dgradation d La phase de latence pour la dgradation de la substance (temps coul entre le dbut de l'essai et 10% de dgradation) est d'environ 3 jours et le pourcentage de dgradation au bout de l'intervalle de temps de 10 jours suivant cette phase de latence est de 68 %. La fiole Fs (strile) montre qu'aucune dgradation, due des phnomnes physiques ou chimiques, n'a eu lieu. 7 .3. C lau ses d e v a lid it d e t'tu d e La diffrence entre les valeurs extrmes obtenues pour Ft1 et Ft2 est infrieure 20 % . Le pourcentage de dgradation de la substance de rfrence (Fc) est suprieur 60 % en 14 jours. Dans la fiole Fi, la dgradation de la substance de rfrence est suprieure 2 5 % au cours des 14 premiers jours : la dgradation de la substance de rfrence n'a donc pas t inhibe par la prsence de la substance d'essai. La quantit cumule de CO 2 dgage par les flacons Fb est infrieure 40 mg/l de milieu, soit 60 mg. La teneur en carbone inorganique (C I) dans la suspension de la substance tudier en milieu minral (flacons Ft) au dbut de l'essai n'a pas pu tre dtermine. Le critre mentionnant que cette teneur doit tre infrieure 5 % du carbone organique total n'a pas t vrifi. La teneur en Cl dans les flacons Fb est de 0 .2 7 mg/l (annexe 5). 8. C O N C LU S IO N S L'tude de la biodgradabilit arobie ultime facile d u f l B H m W J s e l o n la mthode de l'annexe C .4-C de la Directive 9 2 /6 9 /C E E , r e n tr e que cette substance prsente un niveau maximum de biodgradation de 84 % en 28 jours. Le pourcentage de dgradation au bout de l'intervalle de temps de 10 jours suivant la phase de latence ssi de 68 %. Ce document est la proprit d'ELF ATOCHEM. Hne peut tre ni copi, ni communiqu des tiers sens autorisation formels La reproduction oe ce rapport d'tuae n est autorise aue sous forme de fac-simil pnotographique integra!^ ` " RC4C2876.DOC page 12/19 ` 'm t coni ELF ATOCHEM Centre d'Application de Levailois Selon les indications de la Ligne Directrice de I O C D E 301, une substance est considre comme facilem ent biodgradable selon cette mthode si un niveau de 60 % de dgradation est atteint dans les 10 jours suivant le dbut de la phase de dgradation (laquelle dbute lorsque 10% du C O T a t biodgrad). Ces 60 % doivent tre atteints dans la priode d'essai de 28 jours. Selon ces critres, dgradable. tre considr comme facilement Cs document est is proprit d'ELF ATOCHEM. Il ne peut tre ni copi, ni communiqu des tiers sans autorisation flortmenlle. la reproduction oe ce rapport d'tude n'est autorise aue sous forme de fac-simii pnotonrepnique intq ' " RC4C2S76.DOC page 13/1S pinpWySanTMz t r H&t ELF ATOCHEM Centre d'Application de Levallois 9. ANNEXES 9.1. A N N EXE 1 - Schm a de m ontage Pompe pristaltique NaOH 5M Ba(OH)2 Ba(OH)2 Ba(OH)2 0,0125 M 0,0125 M 0,0125 M Mlange ractionnel om. i:i aOt, i', es a; a Ce document est l proprit d'ELF A t OCHEM. Il ne peut tre ni copi, ni communiqu des tiers sans autorisation formelle La reproduction de ce rapport d'tude n'est autorise que sous forme de fac-simil photographique intgral RC4C2876.DOC page 14/19 / ELFATOCHEM Centre d'Application de Levaliois 9.2. A N N EXE 2 - T a b le a u d e r su ltats e t c alcu ls BIODGRADABLIT FACILE Essai de dgagement de C 0 2 92/69/CEE : C.4-C N - d'tude Substance tudie Substance de rfrence iB enzoate de sotfium Substance tudie : Substance de rfrence : Srie inhibition : mg 67,7 39 %C 33,3 57,7 mg carbone 22,5 22,5 45,0 m gC 02th. 82,7 82,5 1653 VOLUME HCL (m l) I Vba Baryte nombre de piges Vb Fb1 pige 1 pige 2 pige 3 TOTAL Fb2 pige 1 pige 2 pige 3 Moyenne Fb TOTAL Vt Ft1 pige 1 pige 2 pige 3 TOTAL Ft2 pige 1 pige 2 pige 3 TOTAL Moyenne Ft Vc Fe1 pige 1 pige 2 pige 3 TOTAL Fa2 pige 1 piege 2 pige 3 TOTAL Moyenne Fc Vi Fi pige 1 pige 2 pige 3 TOTAL Vbs Fbs pige 1 pige 2 pige 3 TOTAL Vs Fs pige 1 pige 2 sige 3 TOTAL Jour| ( 1 0,0 0,0 0,0 " o il 0,0 25 7 c 12 16 20 23 25,0 25,0 24,8 25.0 25,0 25,0 25,0 24,9 24,7 A3 A A4 4 3 3 a 36,1 23,8 34.4 36,4 36,4 36,5 23.4 23,7 23,1 36,8 24,3 36,0 37,1 37,1 37,1 24.5 24,4 24,0 24,5 24,6 24.4 24,8 24,8 24,7 24.7 24,6 24,4 97,4 "'"72,7 **'"943 "' 98**3 '"963 '' 9 83 .....7 26 '"'7 2 ,7 ""71,5 35,2 23,9 33.2 34,1 36,4 34,1 23,2 23,6 23,5 28 29 24,8 24,8 33 2 35 24.6 2 4 3 24.6 24,5 24.7 72,2 ""'73,9 23.1 24,5 0.0 38,0 24,5 0,0 24,7 24,7 " '6 2 '""9 7 2 7 3 /f 0,0 97,7 72,9 0,0 35.4 21,6 0.0 36.5 23.7 0,0 24,4 24,4 " '5 2 .... 96,3 " " 69,7 ' 37,1 24.3 94,6 94,7 17,6 285 21,3 674 39,5 24,8 '98,4 96,4 30.6 34.7 23.8 69,` " 37,1 3 8 3 24,8 24,7 98,3 .....97,7 " 98,3 33,9 983 33,9 36,0 36,0 24,4 24,4 94,3 " '9 4 3 24,5 24,2 2 43 24.1 24.7 24,7 . TM24,8 24,3 24,5 24.8 72,4 "'"7 2 ,0 .....7 7 *"'7 4 ,0 7 2 5 72,7 71,8 72,0 74,0 21.3 2 1 3 22,5 21,6 24,0 23,6 23,7 24.0 23,6 24,4 24.4 24,6 24.0 24,4 24,6 69,3 '6 9 ,9 .... 70,5 .....6 9 3 73*0 0.0 35.4 21,6 1 73 3 0 3 33.3 32.8 19.6 2 1 3 2 1 5 20,0 23,7 0 3 36.4 23.5 28,7 34.7 35,9 35.9 23,1 23.4 23.4 23.0 24,6 0,0 24.5 24.5 21,3 23.8 24.3 24,4 2 4 3 24.4 24.4 24.1 24,5 0.0 96,3 69,6 67,3 68,7 93,5 93,1 67,0 69,6 69,3 67,1 72,8 0,0 98,3 69,7 67,4 88,9 93,9 93,7 6 8 3 69,8 6 9 3 66,4 72,9 0,0 24.4 16,2 23.0 33,6 34,9 34,6 2 2 3 22,7 23,4 223 23.6 0.0 31,0 20,5 31.1 35,9 36.5 36,4 24,0 24,0 24.3 23,8 24.3 0,0 22.4 22,7 22,5 24,1 24.6 24,3 24,6 2 4 3 24.4 24,4 24.7 0,0 77,8 59.4 76, 93,6 96,0 95.3 7 0 3 70,9 72,1 70,5 72,6 0,0 0 ,0 0.0 0,0 #N/A #N/A V A #N/A #N/A #NfA #N/A NIA #N/A NfA NIA o.o! 77.8 59.4 76,6 93,6 95.0 S5.3 70,8 70,9 72,1 7 0 5 72,6 0.0 22,9 13.9 10,0 29.9 33,5 335 2 0 3 21.1 2 2 3 22,6 24,2 0,0 30,5 20,4 22,8 34,3 35,8 3 6 3 23,4 23,5 23,8 24,0 24.6 0.0 21.8 23.0 18.3 23.6 24,3 24,4 2 4 3 2 4 3 2 4 3 24,5 24.6 r 0 0 75.2 57.3 51,1 87,8 93,6 94,0 6 8 5 68,9 70,9 71,1 73,4 0.0 36,7 24,6 36,9 37.5 3 7 3 37.4 2 4 3 24,7 2 4 5 2 4 5 24.6 0,0 37.1 24.8 37,1 37.5 37,3 37.4 24.8 24.9 24.6 24.6 24.7 0,0 24.6 24.8 '"cio ""'95,4 .... 74,2 0.0 36,7 24,4 0,0 37.1 24.7 24.6 24.9 24,9 2 5 3 98.6 .... 9 9 9 ""'9 8 3 " 99,8 34.1 3 7 3 37,1 37.4 39.7 37,4 37,5 37.4 24.8 24.9 24.6 24.6 24.8 74,4 "'"74,5 ""7377 .....73,7 ''"7 4,T 24,3 24,1 23.5 2 4 3 24.7 24.5 24.7 24.6 24.5 24.7 03 24,5 24.8 24,6 24,9 2 43 24,8 " 2 2 " 98,3 '' 73,9 """984 ~ "99,5 ""99,5 "' 99,6 24,7 73.5 24.8 24.7 24.6 24.7 73,6 " " 7 2 3 ""73 3 " 74,1 aooumeni est te proprit ri'ELF ATOCHEWI. li ne peut tre ni copi, ni communiqu s des tiers sans autorisation formelle. La reproduction ' oe ce rapport " d'tude n esf autorise que RCAC2876.DOC sous forme de page 15/18 fac-simil' gt p ^ S s S S B e a . Does n d contain TSCA eft! ELF ATOCHEM Centre d'Application de Levaliois BIODGRADABIUT FACILE Essai de dgagement de C 02 92/69/CEE : C.4-C N* d'tude ;,2876/95/A - Substance tudie J Substance de rfrence : Benzoate de socSum CQ2 (me) / iour 1,1*(Vba-Vb) 1,1-(Vba-Vb) 1,1*(Vba-Vb) 1,1` fVb-Vt) 1,1*(Vb-Vt) 1,1*(Vb-Vt) 1,1*(Vb-Ve) 1,1'(V b -V c ) 1,1*(Vb-Ve) 1,r(V b -V i) 1,1'(Vbs-Vs) Jour Fb1 Fb2 Moyenne Fb F tl Ft2 Moyenne Ft Fc1 Fc2 Moyenne Fc Fi Fs 0 12 0 2,9 2.5 0 2,3 2,1 0 2.6 29 0 1.5 3.5 0 1.5 3.6 0 1.5 3.6 0 21,8 t4 ,9 0 m /A #N/A 0 21.8 14.9 0 24,7 17,2 0 0,1 0,3 5 4.8 5,1 4.9 30.0 30.1 30.1 19.9 #N/A 19.9 48,0 02 7 1.9 1.8 1,8 102 10,6 10,4 52 #N/A 52 11.6 0,4 9 1.9 1.9 1.9 4.4 52 4 ,8 2.5 # N /A 2.5 5.2 0.0 12 12 2,5 22 4,1 5.4 4,7 3.0 #N/A 3.0 4.4 02 16 ' 2,6 22 22 3 ,5 6,1 4,8 12 #N/A 12 4,4 1,0 20 22 2.3 22 3.0 3.4 32 12 m /A 12 4.1 1,0 2,9 2.3 2,6 1.4 2.7 2,0 A4 m /A -0 ,4 0,9 1.0 2,4 3.0 2,7 2.6 5,3 4.0 1,6 #N/A 1.6 0,9 0,4 0,6 0,4 02 1,0 1.3 1.2 1.5 # N /A 1.5 0,6 0,0 iC 0 2 cumul (mg) Jour 0 1 2 5 7 9 12 16 20 23 28 29 Fb1 0,0 2,9 5.4 10,2 12,1 14.0 15,8 1 8 2 20.7 23.5 26,0 26.5 Fb2 0.0 2,3 4.4 9,5 11,2 13.1 15.6 18.5 20.8 23.1 26,1 2 6 2 Moyenne Fb 0,0 2,6 4,9 9,8 11.7 13.5 15.7 18.5 20,7 23,3 26,0 26.5 F tl A O 1.5 5.0 35.0 4 5 2 49.6 53.7 5 7 2 60,2 61.6 6 4 2 65,2 Ft2 0,0 1.5 5.1 35,3 45,9 51.2 56,5 62.6 65,9 68,6 74.0 7 5 2 Moyenne Ft 0,0 1.5 5.1 35.1 45,5 50.4 55,1 59,9 63.1 65.1 69.1 7 0 2 Fe1 0,0 21,8 35.7 56.6 61.8 64.4 6 7 2 69,2 71.1 70.7 72,3 73.8 Fc2 0.0 #N/A m /A m iA #N/A #N/A m /A UA #J/A #N/A #N/A #N/A Moyenne Fc 0,0 21,8 35.7 56.6 61,8 64.4 67,3 6 9 2 71.1 70.7 7 22 73.8 Fi 0,0 24,7 41,9 89,8 101,4 106,6 111,0 115,4 119,5 120,5 121,4 122,0 Fs 0,0 0.1 0.4 0,7 1,1 1,1 1,3 2,3 3,3 4,3 4,7 4,7 [DEGRADATION (%) Ft1 Ft2 Moyenne Ft Fc1 Fc2 Moyenne Fc Fi Fs 0 1 2 5 7 9 12 16 20 23 28 29 0 2 6 42 55 60 65 69 73 75 78 79 0 2 6 43 55 62 68 76 80 83 89 91 0 2 6 43 55 61 67 72 76 79 84 85 0 26 44 69 75 78 82 84 86 66 88 69 0 #N/A #n /a m/A m/A m/A m/A m/A m/A m /A m/A m/A 0 26 44 69 75 78 82 64 86 86 88 89 0 15 25 54 61 65 67 70 72 73 73 74 0 0 11 1 1 2 3 4 5 6 6 2e documen: ssi is orodrit d'ELF ATOCHEM. li ne peut tre ni copi, ni communiqu s des tiers sans autorisation formelie. _ " Le reproduction de ce rapport d'tude n'est autonse que sous forme de fac-simil photographique intgra! " RC4C2576.DOC page 16/19 --" -- DO ELF ATOCHEM Centre d'Application de Levallois J Ce document est la proprit d'ELF ATOCHEM. Il ne peut tre ni copi, ni communiqu des tiers sans autorisation formelle. La reproduction de ce rapport d'tude n'est autorise que sous forme de fac-simil photographique Intgral 1 1 RC4C2876.DOC page 17/19 ELF ATOCHEM Centre ('Application de Levaliois 9 .4 . A N N E X E 4 - M Hieu d 'essai Le milieu d'essai est ralis partir des solutions suivantes: Solution a Dihydrognophosphate de potassium anhydre (KH2PO4) 8,5 Monohydrognophosphate de potassium anhydre (K2HPO4) 21,75 Monohydrognophosphate de sodium dihydrat (N a 2 H P 0 4 ,2 H 2 0 ) 33,4 Chlorure d'ammonium (NH4CI) 0,5 Eau ultra-pure, P S P- 1000 g g g g ml Le pH de ce mlange est de 7,4 Solution b 2 2 ,5 g de sulfate de magnsium heptahydrat (M g S 0 4 ,7 H 2 0 ) dans 1000 ml d'eau ultra-pure. Solution c 27,5 g de chlorure de calcium anhydre (C aC l2) dans 1000 ml d'eau ultra-pure . Solution d 0,25 g de chlorure de fer(lll) hexahydrat (FeC l3,6H2 0 ) dans 1000 ml d'eau ultra pure. Cette solution est prpare le jour du dbut de l'essai Pour 1 I de milieu, ajouter 800 ml d'eau ultra-pure : 10 ml de solution a, 1 ml de chacune des solutions b d e t complter 1000 ml avec de l'eau ultra-pure. ;e Document est le proprit d'ELF ATCOHEfi/i. li ns oeut tre ni copi, ni communiau S des tiers sans autorisation fo rm el^ i a reproduction oe ce racaori d'tude n'est autorise due sous forme de iac-stmii photograDniqusjrjeatj ' RC4C2876.DOC page 16/19 `` ilrstSCACB^ ELF ATOCHEM Centre d'Application de Levaliois 9-5. A N N E X E 5 - B u lle tin s cPanalyses Cette annexe est constitue de 4 feuillets non pagins la suite de la prsente page.