Document R2gLbwg9RemxR1a3EXBnDoQv

DownloadRandom document
ONTWERPMETHODE MB 2023 Compendium voor monsterneming en analyse in uitvoering van het Materialendecreet en het Bodemdecreet Per- en polyfluoralkylverbindingen (PFAS) in bodem en sediment ONTWERPMETHODE MB 2023 Versie juli 2022 CMA/3/D ONTWERPMETHODE MB 2023 INHOUD Inhoud 1 Doel en toepassingsgebied_____________________________________________________ 3 2 Principe ____________________________________________________________________ 5 3 Apparatuur en materiaal ______________________________________________________ 5 4 Reagentia en standaarden _____________________________________________________ 5 5 Monsterbewaring en -voorbehandeling __________________________________________ 6 6 Analyseprocedure____________________________________________________________ 7 6.1 Extractie 7 6.2 Zuivering van het extract 7 6.3 LC-MS/MS analyse 7 6.3.1 LC-condities _________________________________________________________ 8 6.3.2 MS-condities ________________________________________________________ 9 6.3.3 Identificatie en integratie _____________________________________________ 12 6.3.4 Kalibratie __________________________________________________________ 12 7 Berekeningen ______________________________________________________________ 13 8 Kwaliteitscontrole___________________________________________________________ 13 8.1 Terugvinding van de isotoopgemerkte fluorverbindingen 13 9 Prestatiekenmerken _________________________________________________________ 14 10 Referenties ______________________________________________________________ 14 ONTWERPMETHODE MB 2023 ONTWERPMETHODE MB 2023 Organische analysemethoden PFAS in bodem en sediment 1 DOEL EN TOEPASSINGSGEBIED Deze procedure vervangt de procedure CMA/3/D van november 2021 en beschrijft de kwantitatieve bepaling van per- en polyfluoralkylverbindingen in bodem en sediment met behulp van vloeistofchromatografie. De methode kan ook gebruikt worden voor de bepaling van PFAS in anorganische afvalstoffen. Voor de bepaling van PFAS in grondwater wordt verwezen naar WAC/IV/A/025. De verbindingen worden veelvuldig gebruikt voor het water- en vuilafstotend maken van textiel (incl. tapijten), leder, papier en karton en in brandblusmiddelen. Deze verbindingen zijn schadelijk bij langdurige blootstelling, zijn persistent en bioaccumuleren. De belangrijkste van deze verbindingen zijn perfluoralkaanzuren (bv. PFOA), perfluoralkaan-sulfonzuren (bv. PFOS) en -amides en fluortelomeerverbindingen. De laatste verbindingen gelden ook als precursoren voor de eerste. Deze methode beschrijft de extractie en analyse van volgende verbindingen: PFAS perfluoro-n-butaanzuur perfluor-n-pentaanzuur perfluor-n-hexaanzuur perfluor-n-heptaanzuur perfluor-n-octaanzuur perfluor-n-nonaanzuur perfluor-n-decaanzuur perfluor-n-undecaanzuur perfluor-n-dodecaanzuur perfluor-n-tridecaanzuur perfluor-n-tetradecanoic acid perfluor-n-tetradecaanzuur perfluor-n-hexadecaanzuur perfluor-n-butaansulfonzuur Perfluor-n-pentaansulfonzuur perfluor-n-hexaansulfonzuur perfluor-n-heptaansulfonzuur perfluor-n-octaansulfonzuur perfluor-n-nonaansulfonzuur perfluor-n-decaansulfonzuur perfluor-n-octaansulfonamide N-methylperfluor-n-octaansulfonamide N-ethylperfluor-n-octaansulfonamide N-methylperfluor-n-octaansulfonamidoazijnzuur N-ethylperfluor-n-octaansulfonamidoazijnzuur 4:2 fluortelomeersulfonzuur 6:2 fluortelomeersulfonzuur 8:2 fluortelomeersulfonzuur 8:2 fluortelomeerfosfaat diester Hexafluorpropyleenoxidedimeerzuur Afkorting PFBA PFPeA PFHxA PFHpA PFOA PFNA PFDA PFUnDA PFDoDA PFTrDA PFTeDA PFHxDA PFBS PFPeS PFHxS PFHpS PFOS PFNS PFDS PFOSA MePFOSA EtPFOSA MePFOSAA EtPFOSAA 4:2 FTS 6:2 FTS 8:2 FTS 8:2 diPAP HFPO-DA CAS nr 375-22-4 2706-90-3 307-24-4 375-85-9 335-67-1 375-95-1 335-76-2 2058-94-8 307-55-1 72629-94-8 376-06-7 67905-19-5 375-73-5 2706-91-4 355-46-4 375-92-8 1763-23-1 68259-12-1 335-77-3 754-91-6 31506-32-8 4151-50-2 2355-31-9 2991-50-6 757124-72-4 27619-97-2 39108-34-4 678-41-1 13252-13-6 versie juli 2022 3 van 14 CMA/3/D ONTWERPMETHODE MB 2023 ONTWERPMETHODE MB 2023 Organische analysemethoden PFAS in bodem en sediment perfluor-2-propoxypropaanzuur 4,8-dioxa-3H-perfluornonaanzuur perfluor-4-ethylcyclohexaansulfonzuur perfluor-n-butaansulfonamide N-methylperfluor-n-butaansulfonamide perfluor-n-hexaansulfonamide DONA PFECHS PFBSA MePFBSA PFHxSA 919005-14-4 646-83-3 30334-69-1 68298-12-4 41997-13-1 Tegelijk kunnen ook de onderstaande verbindingen bepaald worden. Hiervoor worden echter minder betrouwbare gehalten bekomen als gevolg van onvoldoende terugvinding, verlies door adsorptie of mogelijke interferentie. De gemeten gehalten kunnen in dat geval enkel gerapporteerd worden als indicatief. PFAS perfluor-n-octadecaanzuur perfluor-n-dodecaansulfonzuur 6:2 fluortelomeerfosfaat diester 6:2/8:2 fluortelomeerfosfaat diester 10:2 fluortelomeersulfonzuur perfluorbutaansulfonamide N-methylperfluorbutaansulfonamide N-methylperfluor-n-butaansulfonylamide acetaat azijnzuur perfluorhexaansulfonamide Afkorting PFODA PFDoDS 6:2 diPAP 6:2/8:2 diPAP 10:2 FTS PFBSA MePFBSA MePFBSAA PFHxSA CAS nr 16517-11-6 79780-39-5 57677-95-9 943913-15-3 120226-60-0 30334-69-1 68298-12-4 159381-10-9 41997-13-1 Daarnaast kunnen optioneel (wanneer de aanwezigheid vermoed wordt), de onderstaande verbindingen bepaald worden; de bepaling hiervan maakt echter gebruik van een LC-MS methode met een andere mobiele fase. PFAS perfluor-n-octaansulfonamidoazijnzuur 6:2 fluortelomeerfosfaat monoester 8:2 fluortelomeerfosfaat monoester Afkorting PFOSAA 6:2 PAP 8:2 PAP CAS nr 2806-24-8 57678-01-0 57678-03-2 Opmerkingen: - Voor de bepaling van per- en polyfluoralkylverbindingen in grondwater wordt verwezen naar procedure WAC/IV/A/025 van het Compendium voor Analyse van Water. - Van de meeste perfluorverbindingen PFAS komt uitsluitend de lineaire vorm voor; de beschikbare standaarden zijn ook lineair. Van een aantal perfluorverbindingen PFAS (PFOA, PFOS, en PFOSA, MePFOSA, EtPFOSA en PFHxS) kan kunnen ook de vertakte vormen teruggevonden worden. In deze procedure wordt met PFOS, PFOA, PFOSA, MePFOSA, EtPFOSA en PFHxS de som van de lineaire en de vertakte vormen bedoeld van resp. PFOS, PFOA, PFOSA, MePFOSA, EtPFOSA en PFHxS. In deze procedure worden voor PFOA, PFOS, PFOSA, MePFOSA, EtPFOSA en PFHxS zowel de lineaire vormen als de som van de lineaire en vertakte vormen bepaald. De som wordt gerapporteerd als resp. PFOAtotaal, PFOStotaal, PFOSAtotaal, MePFOSAtotaal, EtPFOSAtotaal en PFHxStotaal. ONTWERPMETHODE MB 2023 versie juli 2022 4 van 14 CMA/3/D ONTWERPMETHODE MB 2023 Organische analysemethoden 2 PRINCIPE PFAS in bodem en sediment Aan de gedroogde stalen worden gekende hoeveelheden isotoopgemerkte fluorverbindingen toegevoegd. De stalen worden vervolgens gextraheerd waarna het extract verder opgezuiverd wordt. Het extract wordt opgenomen in een gekend volume mobiele fase en geanalyseerd met vloeistofchromatografie met tandem massaspectrometrische detectie. Het gehalte van de verschillende PFAS wordt berekend met de interne standaard methode. 3 APPARATUUR EN MATERIAAL 3.1 Analytische balans met een afleesnauwkeurigheid van 0,1 mg 3.2 Bovenweger met een afleesnauwkeurigheid van 0,01 g 3.3 Schudtoestel 3.4 Vortexmenger 3.5 Centrifugetoestel 3.6 Eenheid voor indampen onder stikstofstroom met regelbaar debiet 3.7 Polypropyleen centrifugebuizen van bv. 50 ml en 15 ml 3.8 Aktieve kool SPE-patronen (bv. ENVI-Carb) 3.9 SPE patronen met een zwakke anionenwisselaar fase: bv. OASIS WAX 6cc cart, 150mg. Andere patronen kunnen ook gebruikt worden mits gevalideerd 3.10 Glasvezelfilters (bv. Pall Glass Acrodisc 1 m) 3.11 Meetvials van 1,5 ml 3.12 LC-MS systeem bestaande uit: - Een HPLC of UPLC vloeistofchromatograaf met injectie-automaat, vloeistofpomp, gethermostatiseerde kolom en ontgassingseenheid. Opm.: met het oog op de reductie van de systeemblanco wordt een isolator kolom, die geplaatst wordt tussen LC-pomp en injector, sterk aanbevolen - Een tandem quadrupool massaspectrometer met electrospray ionisatiekamer Opm.: Alternatief kan gebruik gemaakt worden van een ion trap of een hoge resolutie accurate massa (time-of-flight (TOF) of Fourier Transform) massaspectrometer - Een datastation voor de instelling van de instrumentele settings, de data-acquisitie en de data-analyse 3.13 HPLC of UPLC-kolom, bv. Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7m kolom, 2.1x100 mm 3.14 Ultrasoonbad 3.15 SPE vacuum- of drukeenheid 4 REAGENTIA EN STANDAARDEN 4.1 Methanol, acetonitrile: residukwaliteit 4.2 Water: ultrapuur (Milli-Q) 4.3 Ammoniumacetaat p.a. 4.4 Mierezuur p.a. 4.5 Ammoniak/methanol oplossing (0.1%): voeg 0,4 ml van een 25 % NH3-oplossing toe aan 99,6 ml methanol 4.6 Acetaatbufferoplossing: los 0,286 ml azijnzuur op in 200 ml ultrapuur water (oplossing 1). Los 0,097 g ammoniumacetaat op in 50 ml ultrapuur water (oplossing 2). Voeg oplossing 1 en oplossing 2 samen, eindvolume is 250 ml ONTWERPMETHODE MB 2023 versie juli 2022 5 van 14 CMA/3/D ONTWERPMETHODE MB 2023 Organische analysemethoden PFAS in bodem en sediment 4.7 Stock kalibratie-oplossingen van natieve PFAS in methanol: monocomponent- of mengstockoplossingen, aangekocht of zelf aangemaakt vanuit de zuivere stoffen 4.8 Stock controlestandaard van natieve PFAS: dit is een onafhankelijke mengstandaard in methanol 4.9 Standaardoplossing van isotoop aangerijkte PFAS (inwendige standaarden): deze wordt als mengstandaardoplossing aangekocht of aangemaakt obv. individuele standaarden en verdund naar een concentratie van bv.400 g/l. De volgende isotoopgemerkte PFAS worden minimaal gebruikt: perfluor-n-[1,2,3,4-13C1]-butaanzuur perfluor-n-[13C5]-hexaanpentaanzuur perfluor-n-[1,2-13C2]-hexaanzuur perfluor -n-[1,2,3,4-13C4]-octaanzuur perfluor-n-[1,2,3,4,5-13C5]-nonaanzuur perfluor-n-[1,2-13C2]-decaanzuur Perfluor-n-[1,2-13C2]-undecaanzuur perfluor-n-[1,2-13C2]-dodecaanzuur perfluor-n-[1,2-13C2]-tetradecaanzuur perfluor-n-[1,2-13C2]-hexadecaanzuur perfluor-n-hexaan[18O2]sulfonzuur perfluor-n-[1,2,3,4-13C4]-octaansulfonaat natrium-1H,1H,2H,2H-perfluor-1-[1,2-13C2]-noctaansulfonaat perfluor-1-[13C8]-n-octaansulfonamide N-methyl-d3-perfluor-n-octaansulfonamide N-methyl-d3-perfluor-n-octaansulfonamidoazijnzuur natrium bis(1H,1H,2H,2H-[1,2-13C2]perfluordecyl)fosfaat 2,3,3,3-tetrafluor-2-(1,1,2,2,3,3,3-heptafluorpropoxy)-13C3propaanzuur 13C4-PFBA 13C5-PFPeA 13C2-PFHxA 13C4-PFOA 13C5-PFNA 13C2-PFDA 13C2-PUnDA 13C2-PFDoDA 13C2-PFTeDA 13C2-PFHxDA 18O2-PFHxS 13C4-PFOS 13C2-6:2FTS 13C8-PFOSA D3-MePFOSA D3-MePFOSAA 13C2-8:2 diPAP 13C3-HFPO-DA Opmerkingen : o Van sommige isotoop gemerkte verbindingen zijn ook varianten beschikbaar (bv. 13C3-PFHxS, 13C8-PFOS,...) o 13C3-HFPO-DA is mogelijk niet stabiel in acetonitrile en oplossingen worden beter aangemaakt in methanol 4.10 Kalibratiestandaarden: maak uitgaande van de stock kalibratieoplossingen van natieve PFAS (4.7) en de standaardoplossing van isotoop aangerijkte PFAS (4.9) een reeks verdunningen in 1/1 methanol/water met wisselende concentraties aan natieve PFAS, lopende van bv. 0.1 tot 100 g/l en constante concentraties aan isotoop aangerijkte PFAS van ca. 4 g/l; deze oplossingen worden bij elke meetreeks opnieuw aangemaakt 4.11 QC standaarden: uitgaande van de stock controlestandaard (4.8) worden QC standaarden in 1/1 methanol/water aangemaakt op n of meer concentratieniveaus 5 MONSTERBEWARING EN -VOORBEHANDELING Voor de monsterbewaring wordt verwezen naar CMA/1/B. Voor de monstervoorbehandeling wordt verwezen naar CMA/5/B. ONTWERPMETHODE MB 2023 versie juli 2022 6 van 14 CMA/3/D ONTWERPMETHODE MB 2023 Organische analysemethoden PFAS in bodem en sediment De stalen worden vooraf gedroogd door middel van overnacht drogen aan de lucht bij 40C, vriesdrogen of chemisch drogen. Opmerkingen: - Contact met teflon of andere fluorhoudende polymeren dient vermeden te worden - Indien de stalen verkleind worden mbv een kogelmolen dan mag het staal enkel gedroogd worden aan de lucht bij 40C. 6 ANALYSEPROCEDURE 6.1 EXTRACTIE - Weeg 1 tot 5 g gedroogd en gehomogeniseerd staal af in een polypropyleen (PP) centrifugebuis - Voeg de aangewezen hoeveelheid van de interne standaard oplossing (4.9) toe, zodanig dat de concentratie van de inwendige standaarden in het eindextract gelijk is aan deze van de kalibratiestandaarden. Laat de interne standaarden ongeveer 15 min inwerken alvorens de extractievloeistof aan het staal toe te voegen. - Voeg minstens 5 ml methanol toe per gram staalinname, vortex het staal en schud gedurende 60 min. op een schudtoestel. - Laat de vaste fase bezinken, al dan niet met behulp van centrifugatie, en neem het supernatans af. Opmerking.: Afhv. de matrix worden soms lagere extractierendementen bekomen voor MePFOSAA, EtPFOSAA en diPAPS; in dat geval kunnen betere extractierendementen bekomen worden bij aanwending van alkalische methanol (bv. 50 mM NaOH) als extractiesolvent. 6.2 ZUIVERING VAN HET EXTRACT - Het extract (6.1) wordt opgezuiverd door het over een aktieve kool patroon (3.8) te brengen, die voorafgaandelijk werd gespoeld met 10 ml acetonitrile. Het eluaat wordt opgevangen in een PP centrifugebuis van 15 ml. Het patroon wordt nagespoeld met twee maal 2,5 ml acetonitrile. - Indien nodig wordt het opgezuiverde extract ingedampt onder een stikstofstroom bij 40 - 65 C; daaarbij moet vermeden worden dat het extract droog dampt (voeg eventueel een keeper toe, bv. 50 l DMF); - Leng het extract desgewenst aan met ultra puur water en/of methanol. De meetoplossingen van de kalibratiestandaarden worden in hetzelfde solventmengsel aangemaakt als het meetextract van het staal; deze meetoplossing wordt voor de analyse alleen indien noodzakelijk gefiltreerd over een glasvezelfilter of gecentrifugeerd. 6.3 LC-MS/MS ANALYSE Opm.: De houdbaarheid van preparaten bedraagt, bij bewaring in de koelkast, 1 maand. Preparaten die in de koelkast hebben gestaan worden best gevortext vooraleer deze in de injectie-automaat te plaatsen. ONTWERPMETHODE MB 2023 versie juli 2022 7 van 14 CMA/3/D ONTWERPMETHODE MB 2023 Organische analysemethoden PFAS in bodem en sediment 6.3.1 LC-CONDITIES Een UPLC-analyse gebeurt bv. op een UPLC BEH C18 kolom, 1.7m, 2.1 x 100 mm, met gradintelutie. Typische UPLC-instellingen zijn: - mobiele fase: A= Water + 5 % MeOH en 2 mM ammoniumacetaat B= MeOH + 2 mM ammoniumacetaat - debiet: 0.3 ml/min - kolomtemperatuur: 40C - injectievolume: 10 l - gradint: Tijd A% B% min % % 0,00 70 30 0,50 70 30 25,00 10 90 27,00 10 90 28,00 1 99 30,00 70 30 ONTWERPMETHODE MB 2023 De LC-analyse kan ook gebeuren op een HPLC installatie, op een C18 kolom met gradintelutie. Typische HPLC instellingen zijn: - mobiele fase: A= methanol B= water + 2 mM ammoniumacetaat - debiet: 1 ml/min. - kolomtemperatuur: 35C - injectievolume: 100 l - gradint: Time A B min % % 0 50 50 15 100 0 16 100 0 17 50 50 23 50 50 Voor de detectie van FOSAA, 6:2 PAP en 8:2 PAP is een alkalische mobiele fase nodig; een voorbeeld van UPLC-instellingen is hieronder gegeven: - mobiele fase: A = Water + 2 mM ammoniumacetaat + NH3 (pH 10.5) B = ACN/MeOH 1/1 + 5 mM methylpiperidine C = Water/MeOH/ACN/isopropanol 25/25/25/25 - debiet: 0.3 ml/min - kolomtemperatuur: 40C - injectievolume: 10 l versie juli 2022 8 van 14 CMA/3/D ONTWERPMETHODE MB 2023 Organische analysemethoden PFAS in bodem en sediment - gradint: Tijd A B C (%) (%) (%) 0.0 90 10 0 0.5 90 10 0 5 55 45 0 10 55 45 0 20 0 95 5 23 0 95 5 25 90 10 0 6.3.2 MS-CONDITIES Alle opnamen worden met Multiple Reaction Monitoring (MRM) uitgevoerd, met ionisatie via electrospray in negatieve modus (ES-). Typische instellingen voor de MS-acquisitie zijn hieronder voor een Waters Xevo TQ-S gegeven: Ion Mode : Cappillary Voltage : Cone Voltage : Source Offset : Desolvation Temperature : Source Temperature : Desolvation : Cone : Nebuliser : Ion Energy1 : Ion Energy2 : Collision gas flow : Collision energy: ES1kV componentafhankelijk 30V 450C 150C 800L/Hr 150L/Hr 7Bar 0.9 1.1 0.20ml/min componentafhankelijk De onderstaande ionentransities worden geregistreerd. Tegelijk zijn typische UPLC retentietijden aangegeven. Deze kunnen verschuiven afhankelijk van de gebruikte kolom. In de tabel is ook aangegeven welke isotoop gemerkte inwendige standaard gebruikt kan worden voor de kwantificatie van de natieve verbinding. Om zoveel mogelijk problemen van geringe terugvinding of spreiding van resultaten te vermijden (agv. sorptie aan recipintwand of injector en/of matrixonderdukking/versterking), dient ernaar gestreefd te worden om een zo groot mogelijk aantal overeenkomstige inwendige standaarden te gebruiken. ONTWERPMETHODE MB 2023 Compound PFBA PFPeA Parent (m/z) 213 263 Daughter (m/z) 169 219 69 (Q/q) Q Q q Cone (V) 30 30 40 Collision (V) 8 8 8 IS 13C-PFBA 13C-PFPeA Rt NH4Ac (min) 2.01 4.78 Rt NH3 (min) 3.91 5.96 versie juli 2022 9 van 14 CMA/3/D ONTWERPMETHODE MB 2023 Organische analysemethoden PFHxA PFHpA PFOA PFNA PFDA PFUnDA PFDoDA PFTrDA PFTeDA PFHxDA PFODA PFBS PFPeS PFHxS PFHpS PFOS PFNS PFDS PFDoDS 4:2 FTS 6:2 FTS 8:2 FTS 10:2 FTS PFOSA 313 119 269 363 169 319 413 169 369 463 169 419 513 219 469 563 169 519 613 319 569 663 319 619 713 319 669 813 219 769 913 219 869 299 80 99 349 80 99 399 80 99 449 80 99 499 80 99 549 80 99 599 80 99 699 80 99 327 80.5 306.9 427 80.7 406.9 527 80.7 506.9 627 80.7 606.9 498 78 PFAS in bodem en sediment q 40 20 13C-PFHxA 8.72 7.24 Q 40 8 q 40 20 13C-PFHxA 12.21 8.75 Q 40 11 q 40 17 13C-PFOA 14.94 11.81 Q 40 11 q 40 17 13C-PFNA 17.13 14.48 Q 40 11 q 40 20 13C-PFDA 18.95 15.69 Q 40 11 q 40 23 13C-PFUnDA 20.5 16.57 Q 40 11 q 40 20 13C-PFDoDA 21.84 17.27 Q 40 11 q 40 23 13C-PFDoDA 22.97 17.87 Q 40 14 q 40 20 13C-PFTeDA 23.96 18.4 Q 40 14 q 40 32 13C-PFHxDA 25.56 19.24 Q 40 14 q 50 29 13C-PFHxDA 26.79 19.89 Q 50 17 Q 50 41 13C-PFHxS 5.76 6.84 q 50 41 Q 50 32 18O2-PFHxS 9.53 8.09 q 50 30 Q 50 38 18O2-PFHxS 12.7 10.4 q 50 32 Q 50 41 13C-PFHxS 15.23 13.8 q 50 36 Q 60 50 13C-PFOS 17.29 15.26 q 60 40 Q 60 46 13C-PFOS 19.04 16.2 q 60 45 Q 65 50 13C-PFOS 20.53 16.94 q 65 50 Q 65 49 13C-PFOS 22.95 18.11 q 65 47 q 40 26 13C 6:2 FTS 8.37 7 Q 40 20 q 40 28 13C 6:2 FTS 14.8 10.83 Q 40 30 q 40 32 13C 6:2 FTS 18.92 15.44 Q 40 34 q 40 37 13C 6:2 FTS 21.87 17.14 Q 40 30 Q 50 29 13C-PFOSA 19.99 14.67 ONTWERPMETHODE MB 2023 versie juli 2022 10 van 14 CMA/3/D ONTWERPMETHODE MB 2023 Organische analysemethoden PFAS in bodem en sediment 169 q 50 32 MePFOSA 512 169 Q 40 25 D3-MePFOSA 22.64 15.84 219 q 40 22 EtPFOSA 526 169 Q 50 25 D3-MePFOSA 23.49 16.69 219 q 50 25 PFOSAA 556 419 q 86 26 D3-MePFOSAA - 9.61 498 Q 86 28 MePFOSAA 570 419 Q 40 19 D3-MePFOSAA 19.7 16.05 483 q 40 15 EtPFOSAA 584 419 Q 40 20 D3-MePFOSAA 20.44 16.45 526 q 40 20 6:2 PAP 443 79 q 28 46 13C 8:2 PAP - 6.5 443 97 Q 28 18 8:2 PAP 543 79 q 32 58 13C 8:2 PAP - 8.62 97 Q 32 16 6:2 diPAP 789 97 Q 40 31 13C 8:2 diPAP 23.75 18.19 443 q 40 19 6:2/8:2 diPAP 889 97 Q 40 30 13C 8:2 diPAP 25.18 19 443 q 40 20 8:2 diPAP 989 97 Q 50 30 13C 8:2 diPAP 26.3 19.63 543 q 50 25 HFPO-DA 285 119 185 Q 7 18 13C HFPO-DA 9.7 7.64 169 q 7 14 ADONA 376.97 84.95 q 8 26 13C HFPO-DA 12.54 9.31 250.96 Q 8 12 PFECHS 461 99 q 40 24 13C-PFOA 14.84 13.47 PFBSA MePFBSA MePFBSAA PFHxSA 381 298 78 64 312 219 65 370 283 312 398 78 119 Q 40 24 q 50 29 Q 50 32 q 40 25 Q 40 22 q 86 26 Q 86 28 q 50 29 Q 50 32 13C-PFOSA 13C-PFOSA 13C-PFOSA 13C-PFOSA 13C-PFBA 217 172 IS 30 8 2.01 3.9 13C-PFPeA 268 223 IS 30 8 4.77 5.96 13C-PFHxA 315 270 IS 40 11 8.72 7.24 13C-PFOA 417 372 IS 40 8 14.95 11.8 13C-PFNA 468 423 IS 40 11 17.13 14.47 13C-PFDA 515 470 IS 50 11 18.95 15.69 13C-PFUnDA 565 520 IS 50 14 20.5 16.57 13C-PFDoDA 615 570 IS 50 14 21.84 17.27 13C-PFTeDA 715 670 IS 50 14 23.96 18.4 13C-PFHxDA 815 770 IS 50 14 25.56 19.25 18O2-PFHxS 403 84 IS 50 40 12.7 10.41 13C-PFOS 503 80 IS 60 40 17.28 15.26 ONTWERPMETHODE MB 2023 versie juli 2022 11 van 14 CMA/3/D ONTWERPMETHODE MB 2023 Organische analysemethoden PFAS in bodem en sediment 13C 6:2 FTS 429 409 13C-PFOSA 506 78 D3-MePFOSA 515 169 D3-MePFOSAA 573 419 13C 8:2 PAP 545 97 13C 8:2 diPAP 993 97 13C HFPO-DA 287 119 IS 10 24 IS 50 40 IS 50 40 IS 40 20 IS 32 16 IS 25 20 IS 10 18 Q: Transitie voor kwantificatie van de component q: Transitie ter bevestiging (kwalificatie) van de kwantificatietransitie 14.8 19.99 22.62 19.69 23.75 9.7 10.82 14.68 15.82 16.03 8.62 18.19 7.64 6.3.3 IDENTIFICATIE EN INTEGRATIE De aanwezigheid van natieve fluorverbindingen in de monsters wordt bevestigd op basis van de criteria voor retentietijden en ionenratio's zoals vermeld in CMA/6/D. De identificatie van de isotoop aangerijkte verbindingen is eveneens gebaseerd op de karakteristieke m/z en de retentietijd. De gedentificeerde pieken worden gentegreerd met behulp van de software van de apparatuur en manueel geverifieerd. 6.3.4 KALIBRATIE De kalibratie omvat de injectie van minstens 5 standaardoplossingen die de te bepalen fluorverbindingen bevatten in oplopende concentraties en de isotoopgemerkte verbindingen in een constante concentratie De berekening van de kalibratiecurve gebeurt bij elke analysereeks. De kalibratie kan op een aantal verschillende manieren gebeuren (voor de kwaliteitseisen waaraan de kalibratie moet voldoen wordt verwezen naar CMA/6/D) : aan de hand van kalibratierechten. In dit geval worden aan het begin van de analysereeks minimaal 4 kalibratieoplossingen geanalyseerd met concentraties groter dan 0 en verspreid over het lineair gebied. De laagste concentratie mag niet hoger zijn dan 2 keer de ondergrens van het meetbereik. Op de X-as en de Y-as worden de verhoudingen uitgezet van resp. de concentraties en de piekoppervlakten van de natieve PFAS en de overeenkomstige interne standaard. Vervolgens wordt dmv lineaire regressie de vergelijking van de kalibratierechte berekend. De afwijking van elk punt tot de rechte mag niet meer dan 20% bedragen. aan de hand van kwadratische curven. Indien bij de lineariteitstest gebleken is dat er geen lineair maar een kwadratisch verband is tussen concentratie en respons, dan kunnen kwadratische curven gebruikt worden voor de kalibratie. Daartoe worden aan het begin van de analysereeks minimaal 5 kalibratie-oplossingen geanalyseerd met concentraties verspreid over het meetgebied. De laagste concentratie mag niet hoger zijn dan 2 keer de ondergrens van het meetbereik.Op de X-as en de Y-as worden de verhoudingen uitgezet van resp. de concentraties en de piekoppervlakten van de natieve PFAS en de overeenkomstige interne standaard. Vervolgens wordt dmv kwadratische curve fitting de vergelijking van de curve berekend. De afwijking van elk punt tot de curve mag niet meer dan 15% bedragen. ONTWERPMETHODE MB 2023 versie juli 2022 12 van 14 CMA/3/D ONTWERPMETHODE MB 2023 Organische analysemethoden 7 BEREKENINGEN PFAS in bodem en sediment Voor de monsterextracten worden de transities geregistreerd op identieke wijze als hierboven beschreven voor de standaardoplossingen. Uitgaande van de integratiewaarden voor het monster en de kalibratierechte/curve bepaald voor de kalibratiestandaard worden de gehalten van de verschillende verbindingen in het monster berekend. De bepalingsgrenzen van de methode bedragen voor de kwantitatieve PFAS in bodem ten hoogste 0.5 g/kg ds per component. Opmerkingen: - Bij overschrijding van de bovenste grens van het werkgebied dient voor de bepaling van de betrokken fluorverbinding het extract verdund te worden en opnieuw gemeten. o wordt het extract maximum 10 keer verdund en opnieuw gemeten; o als de terugvinding van de interne standaarden hoger ligt dan 70% mag meer dan 10 keer verdund worden met extra additie van interne standaard; o alternatief wordt het staal opnieuw opgewerkt met minder staalinname en/of meer extractiesolvent. - Voor PFOS, PFOA, PFOSA, MePFOSA, EtPFOSA en PFHxS bestaan de technische mengsels uit zowel lineaire als vertakte isomeren. De standaarden daarentegen zijn zuiver lineaire vormen. Kwantificeer, in afwachting van geschikte standaarden en duidelijke regelgeving/internationale afspraken, zowel de lineaire als de vertakte vormen gebruikmakend van de MRM transitie en RRF-waarde van de lineaire vorm. - Voor PFOA, PFOS, PFOSA, MePFOSA, EtPFOSA en PFHxS worden zowel de lineaire vormen als de som van de lineaire en vertakte vormen bepaald. Deze som wordt gerapporteerd als resp. PFOAtotaal, PFOStotaal, PFOSAtotaal, MePFOSAtotaal, EtPFOSAtotaal en PFHxStotaal. - Voor de bepaling van totaal PFAS wordt de som gemaakt van de concentraties van de kwantitatieve PFAS, waarbij het "lower bound" principe toegepast wordt. - Indien de vertakte PFAS afzonderlijk gerapporteerd dienen te worden dan worden deze berekend als het verschil van het resultaat voor de lineaire en vertakte vormen en het resultaat van de lineaire vorm. ONTWERPMETHODE MB 2023 8 KWALITEITSCONTROLE Voor de kwaliteitseisen ivm kalibratie, procedureblanco, controle op gevoeligheid, controlestaal, driftcontrole en onafhankelijke controlestandaard wordt verwezen naar CMA/6/D. Opmerking: - Voor de procedureblanco dient een blanco bodem (eventueel voorgespoeld met methanol) als staal ingenomen te worden. De procedureblanco dient de volledige voorbehandeling en opwerking te doorlopen, inclusief het drogen en homogeniseren van het staal. 8.1 TERUGVINDING VAN DE ISOTOOPGEMERKTE FLUORVERBINDINGEN Voor elk monster wordt de terugvinding van isotoopgemerkte inwendige standaarden bepaald, d.i. de experimenteel teruggevonden hoeveelheid van elk van de bij het begin van de analyse toegevoegde standaarden. Dit gebeurt door vergelijking van de oppervlakte van de isotoop aangerijkte verbinding bekomen voor het monster (Ais(monster)) t.o.v. de oppervlakte verwacht voor een kalibratiestandaard (Ais(kalibratiestandaard)) waarin ongeveer dezelfde concentratie aan versie juli 2022 13 van 14 CMA/3/D ONTWERPMETHODE MB 2023 Organische analysemethoden PFAS in bodem en sediment natieve verbinding aanwezig is als gemeten in het monsterpreparaat (dit om rekening te houden met de onderdrukking van het signaal van de isotoopgemerkte verbinding door de coluerende natieve verbinding). De terugvinding wordt gegeven door: R% = Ais(monster) * 100 / Ais(kalibratiestandaard) Het terugvindingsrendement is afhankelijk van sorptiefenomenen, signaalsuppressie/versterking door matrixbestanddelen en extractie/clean up rendement. Voor een verantwoorde kwantificering dient het terugvindingsrendement van de 13C-gemerkte fluorverbindingen minimaal 30 % en maximaal 200 % te bedragen. Indien desgevallend (bv. indien geen monster meer beschikbaar is of indien heranalyse niet relevant is i.f.v. gebruik van het resultaat ...) toch resultaten worden gerapporteerd waarbij aan het criterium voor terugvinding niet voldaan is, dient dit als opmerking op het verslag vermeld te worden. 9 PRESTATIEKENMERKEN Voor de prestatiekenmerken wordt verwezen naar CMA deel 6. 10 REFERENTIES - DIN 38414-14 Deutsche Einheitsverfahren zur Wasser-, Abwasser- und Schlammuntersuchung Schlamm und Sedimente (Gruppe S) - Teil 14: Bestimmung ausgewhlter polyfluorierter Verbindungen (PFC) in Schlamm, Kompost und Boden - Verfahren mittels HochleistungsFlssigkeitschromatographie und massenspektrometrischer Detektion (HPLC-MS/MS) (S 14) - ISO 21675:2019: Water quality -- Determination of perfluoroalkyl and polyfluoroalkyl substances (PFAS) in water -- Method using solid phase extraction and liquid chromatographytandem mass spectrometry (LC-MS/MS) - C.R. Powley, S.W. George, T.W. Ryan, R.C. Buck, Matrix Effect-Free Analytical Methods for Determination of Perfluorinated Carboxylic Acids in Environmental Matrixes, Analytical Chemistry 2005, 77 (19) - Nederlandse Technische Afspraak (NTA): Analyse van PFAS in bodem, waterbodem en slib, met HPLC en massaspectrometrie. ONTWERPMETHODE MB 2023 versie juli 2022 14 van 14 CMA/3/D