Document JvDexG3d1aZ28Gm1qKzrG4eBv

To. THGHCAL comumcATIONS CENTER - 204 Ais inna TTEECCHHNNIICCAALL RREEPPOORRTT SSUUMMMMAARRYY TO: TECHNICAL COMMUNICATIONS CENTER - 201-2CN -- [RAuuRsus~t 1266. , 1078 TT EEnnvviirroonnmmeennttaall L Laabboorraattoorryy ((EEEE && PPCC)) face of Fiworoshemtonts Te Fate o Fluorochemicals Eatuscion of te Bloconcentration Potential of ru su | 2 Evaluation of the Bioconcentration Potential of FM 3422 Tou bien D. L. Bacon ki02)22 9970612623 Tkz weteer = Fry a oo2sr SCT 2000, coast oneal umenanion) nic Ove Bae CURRENT OBJECTIVE: ESTan | rome seen Progress Report 1. Bualuate Bloconcentration Potential of PM 422. I. Evaluate Bioconcentration Potential of FM 3422. 2. DhaetleerniHnieenuptake and closrance rates of Fi 9473 in 2. Eades thes EEEE & PC -- DDiivv.. | 33.. Determine uptake and clearance rates of PM 3422 in whole fish and/or tissue. DDeetteerrmmiinnee eexxccrreettoorryy pathway foor FFMM 33442222.. Cerca % F(lAu(qoAruqouacathtiieccm))icals i 0 Company RA. 1 REPORT ABSTRACT: 1200-2S0 ain't 31~'trl to C~m~lnV R&D. It 1 Companycombos mur words] This abstract inf0rmalion is Co~any conli~tial 1 is diswibumd 0 by the Tlchnll CommasGomer C0mmun~r.~ti0~$ Center 0to Toxsesty Toxicity ttersaitaicoenn- (Bioconcen- tration) ce: 4ImDRiuLLaBBn MTB Rbrokop-aze- R.Prokop-236-~ EhdsEAR - | Troe am connoENTIAL 3M CONFIDENTIAL 22559955..00000011 0033 003388663999 Exhibit 2595 33MMAA0000332266880033 2 -2- IIN~TTRROODDUUCCTTIIOONN LLiivviinngg oorrggaanniissmmss ppoosssseessss tthhee aabbiilliittyy ttoo ccoonncceennttrraattee aanndd aaccccuummuullaattee hhigghh ccoonncceennttrraattiioonnss ooff lliippoopphhiilliicc oorrKgaanniicc ccoom mppoouunnddss eeiitthheerr ddiirreeccttllyy ffrroomm tthheeiirr eennvviirroonnmmeenntt oorr ffrroomm tthheeiirr ffoooodd ssoouurrccee,, aapphheennoommeennoonn w whhiicchh l1ss w weellll ddooccuum meenntteedd ((~Buurrnneetttt,, 11997711;; GGuussttaaffssoonn,, 1189770)0.). TThhiiss aabbiilliittyy ttoo hbiiooccoonncceennttrraattee sseeeem miinnggllyy nnoonn--ttooxxiicc ssuubb-- ssttaanncceess mmiigghhtt wweellll ppoossee aa hhaazzaarrdd ffoorr tthhee uullttiimmaattee pprreeddaattoorr ssppeeccileess.. TThhiiss iinnvveessttiiKgaattiioonn wwaass ccoonndduucctteedd ttoo ddeetteerrmmiinnee w whheetthheerr aa fflluuoorroocchheemmiiccaall,, FFM H33442222,, ddooeess bbiiooccoonncceennttrraattee iinn oorrggaanniissmmss aanndd iiff 5s0o,, ddooeess tthhee m maatteerriiaall ddeeppuurraattee rraappiiddllyy.. SSeelleeccttiivvee oorrggaann ssyysstteemmss wweerree aannaallyyzzeedd ffoorr ~thhee ssuubbjjeecctt fflluuoorroocchheem miiccaall aass ppootteennttiiaall uuppttaakkee - sites. sites. SSi~nnccee tthhee aaqquuaattiicc eennvviirroonnmmeenntt sseerrvveess aass aa pprriimmaarryy mmooddee ooff eennttrryy ffoorr FF~N33442222 iinnttoo tthhee eennvviirroonnmm enetn,t,'tthhiiss ssttuuddyy wwaass ccoonndduucctteedd uussiinngg tthhee cchhaannneell ccaattffiisshh i~lio!ta~laamLi~ssp.upsuc~tatt~u))s aast~hhee ttoesstt ssppeecciieess.. TThhee ssuubbjjeecctt fflluuoorroocchheemmiiccaall,, FFUM33442222 iiss aa wwhhiittee ggrraannuullaarr mmaatteerr-- 421, i~l, m moolleeccuullaarr w weeiigghhtt--55771],, ppoosssseessssiinngg pphhyyssiiccoo--cchheem miiccaall pprrooppeerrttiieess wwhhiicchh ssuuggggeesstt tthhaatt tthhiiss m maateterriiaall mmaayy bbilooccoonncceenntrtraattee.. TThhuuss,, tthhee mmaateterriiaall wwaass ffoouunndd ttoo bbee rreellaattiivveellyy w waatteerr iinnssoolluubbllee aanndd ppoosssseesssseedd aa hhiigghh ddiissttrriibbuuttiioonn ccooeeffffiicciieenntt,, ddaattaa w whhiicchh iiss Iinnddiiccaattiivvee oo~f aa hhiigghhllyy lliippoopphhiilliicc m moolleeccuullee.. TThhiiss pprrooffiillee iiss ggeenneerraallllyy aacccceepptteedd aass tthhaatt ooff aa ssuubbssttaannccee w whhiicchh w wiillll tteenndd ttoo bbiiooccoonncceenntrtraattee.. MMEETTHHOODDSS TThhee hhyyddrroopphhoobbiicciittyy ooff FFNM33442222 pprreecclluuddeedd aa ssiimmpplliissttiicc ddeetteerrmmiinn- ~ aattiioonn oof~ iittss wwaat~eerr ssoolluubbiilliittyy.. UUss~e oof~ tthhee VVeelitthh--CCoonm~sttoocckk tt~ecchhnniiQquuee 0033 00338770000 22559955..00000022 33MMAA0000332266880044 a-3- ((11997755)) w whheerreetinn wwaatteerr ously saturated with PiinHnSAaa22ccoonbnsysttacanintrt-c-luleelvvaetelilngrreessteehrervvowoiairtrerwwaastshrccooounngtthiinnuu- 4 bed ously a bed of inert saturated o5 inert substrate impregnated with with FM3422 by circulating substrate impregnated with FM34Z2. the water FM3422. Samples through ~amples foorr aannaallyyttiiccaall asasaallyyosiios ~weerree oobbttaaiinneedd vviias aa ssaammpplliinngg ppoorrtt.. RReepplliiccaattee ssttuuddiieess were were ppeerrffoorrmneedd. The The ddiissttrriibbuuttiioonn ccooeeffffiicciieenntt of of FFNH33M42222 in in nn--ooccttaannosll//waatteerr was was ddeetteerrmniinneedd uussiinngg the the mmeetthhooddss ddeessccrriibbeedd by by CChhiioouu eett.. al. al. ((11997777)) and and FFuujjittaa ot. et. al. al. ((11996644)).. CChhaannnneell ccaattffiisshh ((Ifuottaallaarruuss ppuunncut~aatu~ss)) wweerree aacccclliimmaatteedd to to the the ffoolllloowwiinngg test test ccoonnddiittiioonnss for for a a mmiinniimmuumm of of 14 14 days: days: 4ttee3m mpperemaritanuturutere,e, 2211++11CC,, 1166--hhoouurr transition period lliigghhtt and aanndd vere 88f-e-hdhooudurarilddyaarrkk(TppehthrooattoopNpeienrr)iio.odd wwiitt~h a 30 minute transition period and were fed dally (Tetra Mln). FUB42, FM3422, pprreevviioouussllyy iimmpprreeggnnaatteedd on on 33..55 mn mm cgllaassss bbeeaaddss wwiass ppllaacceedd 1n in a a 114 114 & aaqquuaarriiuum s,, ffoorrmmiinngg a a llaayyeerr sapppprrooxxiimmtateellyy 2 cn 2 cm asbhoovvee tthhee ggrraavveell ffiilltteerr w whhiicchh wwaass tthheenn ccoovveerreedd by by smd. sand. TThhee eftevessstttenttaannukkndewwraasscotthnheteninnuffoiiulllsleeddacw wriaitbthhiccccaaorrnbbdooinnt-i-ifolinltsteerrgeeeddnerw waeetllelldw wa&atteserar.t. uraTTthhieisds system under continuous aerobic conditions generated a saturated wwaatteerr ssoolluuttiioonn of of FFuMS3M42222,, hhaavviinngg & a fflinnaall llooaaddiinngg rraattiioo of of 00..S5gg//L~.. BBaasseedd on on a a pprreevviioouuss ssttuuddyy ((11907777)) wwhhiicchh iinnddiiccaatteedd rraappiidd uuppttaakkee and and ddeeppuurraattiloonn rraatteess tost was modified so for tfhoart FPN~33442222 the u in in tthhiiss ptake and ssppeecciieess,, clearanc etthheeperbbiiiooodccsoonncwceeenrntetrraattiioonn test was modified so that the uptake and clearance periods were sseevveenn awnnda t~ilvvee sys days Following the rrieensstppreoedccuttciivtvieeollnyy. of the channel catfish ato the expertoeatal aad control aquaria Following the introduction experimental and control aquarla samples of 4 channel catrish and of the channel catfish into the samples of 4 c~annel c~tish and tthhrreeee w waatteerr ssaam mpplleess,, ttoonp,, mmiiddddllee aanndd bbootttioomn llaayyeerr., ffoorr P32 FM3422 Wtake uptake aannaallyyssiiss wweerree oobbttaaiinneedd aatt tthhee ffoolllloowwiinngg t~iimn~e ppeerriioodds~:: ccoonnttrrooll. - 0033 003388770011 22559955..0000033 33MMAA0000332266880055 prior to introduction, 15 m-i4n-utes, one hour, v0 hours, four hours, prior to introduction, 15 minutes, one hour, two hours, four hours, ceiiegnhtt hhoouurrss,, ttwweellvvee hhoouurrss,, ssiixxtteeeenn hhoouurrss,, ttwweennttyy bhoouurrss,, ttwweennttyy-- ffoouurr hhoouurrss,, aanndd aatt ttwweennttyy--ffoouurr hhoouurr iinntteerrvvaallss ffoorr aa ppeerriioodd ooff sseevveenn ddaayyss., TThhee cchhaannnneell ccaattffiisshh wweerree tthheenn rreemmoovveedd ttoo cclleeaarraannccee ttaannkkss ffoorr ttwwoo hhoouurrss aanndd ffiinnaallllyy ttrraannssffeerrrreedd ttoo aa ffllooww--tthhrroouugghh ssyysstteemm bhaavviiangg ffllooww rraatteess tthhrroouugghh tthhee tteesstt cchhaammbbeerrss ooff ffoouurr wwaatteerr vvoolluummeess ppeerr 2244 hhoouurrss.. AA ssaammpplliinngg rreeggiimmeenn iiddeennttiiccaall ttoo tthhaatt ooff tthhee uuppttaakkee pPhhaassee ooff tthhiiss ssttuuddyy wwaass iimmmmeeddiiaatteellyy iinniittiiastteedd aanadd tteerrmmiinnaatteedd aafftteerr ftiivvee ddaayyss.. Individual (whole fish, n=2) and pooled tissue samples Individual (whole fish. n=2) and pooled tissue samples ((nn==22)) w veerree w weeiigghheedd,, ttiissssuueemmii~zeedd,, rreeffrriiggeerraatteedd aanndd ssttoorreedd iinn eetthhyyll acetate prior to the analytical determination for FM3422. Whole acetate prior to the analytical determination for FM34~2. Whole fish were blotted before the weighing procedure. The pooled fish were blotted before the weighing procedure. The pooled samples consisted of the following tissue: brain, gills, liver, samples consisted of the following tissue: brain, gills, liver, all bladder, kidney, gastrointestinal tract, skin, muscle and gall bladder, kidney, gastrointestinal tract, skin, muscle and sskkeelleettoonn.. - T Tiissssuuee aanndd w waatteerr ssaam mpplleess wweerree aannaallyyzzeedd ffoorr FFM3324222 uussiinngg aa HHeewwlleetttt--PPaacckkaarrdd mmooddeell S5T71133 ggaass cchhrroommaattooggrraapphh eeqquuiippppeedd wwiitthh aann eelleeccttrroonn ccaappttuurree ddeetteeccttoorr (v1). (.~'1~3). SSppeecciiffiiccaattiioonnss aanndd ooppeerraattiinngg ccoonnddiittiioonnss wweerree aass ffoolllloowws:s: ssttaaiinnlleessss sstteeeell ccoolluumm-nl-leennggtthh--66 ffeeeett X 1/8"; column packing and support-10% Carbowax 20 Mon Chromosorb- x 1/8"; column packing and support-10% Carbowax ~-0 Mon Chromosorb- W aacciidd w waasshheedd 6600//8800 m meesshh;; ooppeerraattiinngg tteem mppeerraattuurree--iissootthheerrmmaall 118800CC., ddeetteeccttoorr--330000CC;; ccaarrrriieerr ggaass--55~% m meetthhaannee iinn aarrggoonn.. R Reeccoovveerryy rraattee wwaass aabboovvee 9900%%.. SSttaattiissttiiccaall ttrroeaattmmeenntt ooff tthhee ddaattaa uuttiilliizzeedd tthhee I3M TTrraacc ssyysstteemm,, MMIINFIITTAA~R I1I1 pprrooggrraamm.. BBiiooccoonncceennttrraattiioonn ffaaccttoorrss aanndd uuppttaakkee rraattee ccoonn-- ssttaannttss wweerree ccaallccuullaatteedd bbaasseedd oonn ffoorrmmuullaaee pprrooppoosseedd bbyy aann AASSTTMH ccoommmmiitt-- tteeee ddeevveellooppiinngg aa ssttaannddaarrdd mmeetthhoodd ffoorr ccoonndduuccttiinngg bbiiooccoonncceennttrraattiioonn sSttuuddiieess wwii~thh ffiisshh ((11997777)). 0033 00338770022 22559955..00000044 33MMAA0000332266880066 5 -5- RREESSUULLTTSS TThhee wwaatteerr ssoolluubbiilliittyy ooff FFMU334422~2 wwaass 5500 ppspbb ((VVeeiitthh--CCoommsst%oocckk technique) coupled with the added observation that this chemical technique) coupled with the added observation that this chemical wwaass sslliigghhttllyy vvoollaattiillee ((MMeennddeell,, 11997777)).. UUssiinngg tthhee mmeetthhoodd ddeessccrriibbeedd bbyy CChhiioouu,, eett.. aall.. ((11997777)) tthhee ddiissttrriibbuuttiioonn ccooeefffflicclieenntt ffoorr FFMM33442222 wwaass ddeetteerrmmiinneedd ttoo bbee iinn eexxcceessss ooff 11005%,, i1nn aann nn--ooccttaannooll//wwaatteerr ssyysstteemm.. VVaalluueess ooff tthhiiss oorrddeerr ooff mmaaggnniittuuddee aarree iinnddiiccaattiivvee ooff tthhee hhiigghhllyy lliippoopphhiilllicc nnaattuurree ooff tthhee tteesstt ssuubbssttaannccee. IInn ccoonnssiiddeerraattiioonn ooff tthhee sslliigghhttllyy vvoollaattiillee nnaattuurree oo~f FFM3324222,, tthhee tteesstt oorrggaanniissmmss wweerree iinnttrroodduucceedd into into the the newly newly filled filled experimen- experimen- ttaall aaqquuaarriiuumm aanndd ssaam mpplliinngg ooff bbootthh cchhaannnneell ccaattffiisshh aanndd eexxppoossuurree _ w waatteerr bbeeggaann f~iifftteeeenn m miinnuutteess llaatteerr. TTaabbllee 1laa iilllluussttrraatteess tthhee mmeeaann ccoonncceennttrraattiioonnss ooff FFM N33442322 iinn vvaarriioouuss llaayyeerrss ooff tthhee eexxppoossuurree w waatteerr.. TThhee tteesstt ssuubbssttaannccee vwaass qquuiittee eevveennllyy ddiissttrriibbuutteedd tthhrroouugghhoouutt tthhee aaqquuaarriiuumm aass iinnddiiccaatteedd bbyy ccoonncceenn-- ttrraattiioonnss ooff 00..4499,, 00..5544,, aanndd 00..5522uu1//t ooff FFM H33442222 iinn tthhee ttoopp,, m miiddddllee 4a8ndd lloowweerr wwaatteerr llaayyeerr ooff tthhee aaqquuaarriiuumm.. SSiinnccee FFM U33443~22 wwaass pprreesseenntt aa5s aa ssuussppeennssiioonn,, eexxcciittaabbiilliittyy ooff tthhee tteesstt oorrggaanniissmmss rreessuullttiinngg iinn uunnuussuusall ddiissttuurrbbaannccee ooff tthhee bboottttoomm ssaanndd//FTMH334I~322 llaayyeerr wwoouulldd ccoonnttrriibbuuttee ttoo tthhee vvaarriiaabbiilliittyy ooff mmeeaann ccoonncceennttrraattiioonn vvaalluueess aass iinnddiiccaatteedd bbyy tthhee m maaggnniittuuddee ooff tthhee ssttaannddaarrdd eerrrroorr ((TTaabbllee l1aa)).. UUppoonn aannaallyyssiiss ooff tthhee eexxppoossuurree wwaatteerr ssaam mpplleess ffoorr FFMM33442222., eevviiddeennccee wwaass oobbttaaiinneedd tthhaatt tthhiiss m maateterriiaall wwaass bbeeiinngg rraappiiddllyy rreelleeaasseedd iinnttoo ssoolluuttiioonn ((TTaabbllee l1bb).). TThheessee ddaattaa ssuuggggeesstt tthhaatt ccoonncceennttrraattiioonnss approaching approaching equilibriun equilibrium vvaal]uueess wweerree aattttaaiinneedd w wiitthhiinn 1] hhoouurr ooff eexxppoossuurree.. 0033 003388770033 22559955..00000055 33MMAA0000332266880077 --6- TTaabbllee 1laa ---- PMMoeeraannioaCCoonncceennttrraattiioonn ooff FFMM334A2222 EExxppoossuurree WWaatteerr:: EExxppeerriimmeennttaall Period SSaammpplliinngg SSiittee Top ayer Top layer uiddle 1aver Middle layer Lower layer Lower layer "Mean concentration aMean concentration n n 1 1155 15 15 15 of exposure of exposure ccoonntceennttrraattiioonnavut~/./t& 191.08 .49+.06 542.06 54+. O6 521.08 .52.04 period + 8.E. period + S.E. TTaabbllee i1bb ----- CCoonncceennttrraattiioonn ((ppppmm)) dduurriinngg IInniittiiaall 44 HHoouurrss ooff tteesstt SSaammpplliinngg SSiittee 1155 mmion.. 1 hour i hour hour 2 hour 4 hour 4 hour Top layer a0 as az as Top layer .19 .45 .43 .35 - MMiiddddllee ayer layer a a0 .31 a "2 Lover Laver 2 5.49 a.47 5.42 Lower layer .23 .54 .47 .55 "Expressed aa ut/t aExpressed as ~/~ WWHHOOLLEE FFIISSHH UUPPTTAAKKEE AANNDD CCLLEEAARRAANNCCEE UUppttaakkee ooff tthhee fflluuoorroocchheemmiiccaall FFUMS3442232 bbyy cchhaannnneell ccaattffdisshh hhaass been tabulated (Table 2) and {llustrated (Figs. 1, 2). During been tabulated (Table 2) and illustrated (Figs. I, 2). During the first 2244 hour exposure period, botn Fish A and Fish 8 snowed t4herapfiirdstuptakehooufr ethxepotseusrte psuebrsiotadn,ce.bothThFiissh iAnitaindalFulsphtakBe rate showed msnaauayybraspebbqeeidueaantuttttprrtiaibbkbiueunttdaaiobbnflgleethteottoo tlemmiospovtovepemhsmeuienlbntist ctaoonftficsFFesM H.u3e34s4ZT.222hisaacAcriron osslsissotwiaetthrlheeure ,aipintntatetekegegoe ufummreaFentniettS2w w2iltthh subsequent binding to lipophilic tissues. A slower rate of FM34~2 uptake was noted for both organisms which was possibly accounted for buypta2kedewcraes asneodtedwatfeorr/obrogthaniosrgnanciosnmcsentwrhaicthionwags rapdoisesnitb.ly accounted Ko uptake for - Pbylataeaduecirenadsiecdatiwvaeteor/foragasntiesamdy-csotnacteentvraastioonbtagirnaeddienfot.llow~iongupatankaelysis plateau indicative of a steady-state was obtained following analysis 0033 003388770044 22559955..00000066 33MMAA0000332266880088 1 -7- Table 2 -- FU342Z Uptake by Channel Catfish (Iotalane punctatus) a Time Fish A Fish B Paour : : 15 mmiinn.. I 1 1 4i22 nhhhoooouuuurrrrsss 116649 11004 229 14288 hhhhoooouuuurrrrssss. a6552288 a86420 11126260 hhhhoooouuuurrrrssss. 65851111 57s36 e4 22240448 hhhhoooouuuurrrrssss 111100332442 221E111Y303 49776822 hhhhoooouuuurrrrssss. 221129292020 221155557799 11192246040 hhhhoooouuuurrrrssss 32m2101 222007119 279 111466488 hhhooouuurrrsss 835825202 115388 _ a EExxpprreesssseedd aass uugg//gg.. ooff FFMM 33442222 ccoonn~teenntt ooff tthhoossee ffiisshh ccoommpprriissiinngg tthhee ccoommppoossiittee oorrggaanniissmm AA ((FFiigguurree 11)).. TThhee 116688--hhoouurr vvaalluuee ffoorr tthhee tteesstt fflluuoorroo~chheommiiccaall mmaayy bbee aann oouuttlliieerr aass tthheessee vvaalluueess eennccoommppaassssiinngg tthhee ppeerriioodd ffrroomm 7722 -112200 hhoouurrss ssuuggggeesstt aa ppllaatteeaauu ((sstteeaaddyy ssttaattee)) aatt FFMM 33442222 ccoonncceennttrraattiioonnss ooff 1%320000 u~gg//gg.. AA ppllaatteeaauu eeffffeecctt wwaass oobbsseerrvveedd ttoo ooccccuurr wwiitthh ssaammppllee BB,, hhaavviinngg aann uuppttaakkee vvaalluuee ooff aapppprrooxxiimmaatteellyy 222200 ~ugg//gg FFMM 33442222 ((FFiigguurree 22)).. CCoonncceenntrtraattiioonnss ooff FFMM 33442222 D bliooaaceccuummiullaatteedd bbyy tthheessee tteesstt oorrggaanniissmms wweerree oobbsseerrvveedd ttoo vvaarryy iinnddeeppeennddeenn~t ooff wwhhoollee ffiisshh wweeiigghhtt.. CClleeaarraannccee ooff FFMM 33442222 bbyy tthhee cchhaannnneell ccaattffiisshh rreeqquuiirreedd iinn eexxcceessss ooff 55 ddaayyss ((TTaabbllee 33)).. 22559955..00000077 0033 00338770055 33MMAA0000332266880099 8 -8- Table 3 -- PM3422 Clearance of Fotalarus punctatus" TTiimmee 111 55hommiiunnr.. 2421 hhhhoooouuuurrrrsss 14828 hhhhoooouuuurrrrssss 12116062 hhhhoooouuuurrrrssss 22424048 hhhhoooouuuurrrrssss. 7647282 hhhhoooouuuurrrrssss 11922600 hhhooouuurrrsss WWhhoollee PFiisshh AA E2306d69 222265560292 222266560030 222233358553 222333-778,b 22100-300 111003668 WWhhoollee FFiisshh BB 332111986 223341002689 222244602262 Z12107756775 222100591150 221222296707 227868 *a EExxpprreesssseedd aass ~ugg//gg. b sSaaomppllee lloosstt TTIISSSSUUEE AANNAALLYYSSIISS:: MMUUSSCCLLEE OOff tthhee ttiissssuuee aannaallyyzzeedd ffoorr FFMU3342222,, tthhee mmuussccllee llaayyeerr ooff tthhee cchhaannnneell ccaattffiisshh wwaass ffoouunndd ttoo ppoosssseessss tthhee lleeaasstt pprrooppeennssiittyy ttoo hbiiooaaccccuummuullaat~ee tthhiiss fflluuoorroocchheemmliccaall ((TTaabbllee 44,, FFiigguurree 33)).. AA pPllaatteeaauu eeffffeecctt wwaass oobbsseerrvveedd ~too ooccccuurr iinn tthhee ccoonncceennttrraattiioonn rraannggee ooff 110000--220000 u~gg//gg ((TTaabbllee 44)).. TTiissssuuee wweeiigghhtt wwaass aann iinnddeeppeennddeenutt vvaarriiaabbllee,, nnoott aaffffeeccttiinngg tthhee bbiiooaaccccuummuullaattiioonn lleevveell ooff FFMH33442222.. DDeeppuurraattiloonn ooff tthhee ssuubb~jeecctt fflluuoorroocchheemmiiccaall,, FFMM33442222,, ~vaass ddeellaayyeedd,, aapppprrooxxiimmaaZteellyy 5500~% ooff tthhee mmaatteerriiaall hhaavviinngg cclleeaarreedd wwi~tthhiinn ffoouurr ddaayvss ((FFiigguurree 33 TTaabbllee 55)).. TTIISSSSUUEE AANNAALLYYSSIISS -- BBRRAAIINN,, GGAASSTTRROOIINNTTEESSTTIINNAALL TTRRAACCTT UUppttaakkee ooff FFMN33442222 bbyy bbrraaiinn aanndd tthhee ggaassttrrooiinntteessttiinnaall ttrraacctt wwaass eelleevvaatteedd dduuee ttoo tthhee l1iippiidd nnaattuurree ooff tthheessee mmaatteerriiaallss ((TTaabbllee 66)). BBrraaiinn uuppttaakkee ooff FFMW33442222 ccoonnttiinnuueedd tthhrroouugghhoouutt tthhee eexxppeerriimmeenntt ((FFiigguurree 44)) 0033 0033181770066 22559955..00000088 33MMAA0000332266881100 E-9X- TTaabbllee 44 ----T--otFFaMlMa33r44i22s22PuUUnppotttaaakktuees bbWyyscle TCToiinnmteerol C111 o55ahtomrautrinron.l. 224I hhhhoooouuuurrrrsss 12488 hhhhoooouuuurrrrssss 21110626 hhhhoooouuuurrrrssss. 24224840 hhhhoooouuuurrrrssss 47972682 hhhhoooouuuurrrrssss. 1119224S004 hhhhoooouuuurrrrssss. 111466848 hhhooouuurrrsss HMuu"ss0cc.ll1ee <<0030..11 1035 22132201 34338981 166141198 111112328757 111155395337 14194777 * EExxpprreesssseedd aass ug/g. ~g/g. TTaabbllee 55 ---- TTiimmee 11155hommiiunnr. 2421 hhhhoooouuuurrrrsss 14288 hhhhoooouuuurrrrssss 11210662 hhhhoooouuuurrrrssss 24224408 hhhhoooouuuurrrrssss 94776822 hhhhoooouuuurrrrssss 11922600 hhhooouuurrrsss FFUM33442222 CClleeaarraannccee ooff MMuussccllee 11112878 111120207888 7 111244878 1u118487118 1171075~72 16077277 677922 *a EExxpprreesssseedd aass .uEg//Eg.. IIe~taaZlaa~ruu#s ppuun~taa%tuu~s mmuusscclleea 22559955..00000099 0033 003388770077 33MMAA0000332266881111 -10- -10- Table Table 6 -- -- FFtMUh3e344~2g.22asUUtprptotaiaknketeesbbtyyinIIcao~tlaal~taarrrua~sct~puuro~cfttaaTt#ou~tsalbbmrruaaisinn puttinisscsstuuaeetusuasnndd the gastrointestinal tract of Io~aZ~us pu~t~a CTToiinmmteerol C111o58hntommiruinnor..l 2421 nnhhoooouuuurrrsss 12488 hhhhoooouuuurrrrssss 21112066 hnnhoooouuuurrrrssss 442227880442 hnhnhhoooooouuuuuurrrrrrssssss 111922937606402 hhhhhhoooooouuuuuurrrrrrssssss 111646884 hnhooouuurrrsss a2 EExxpprreesssseedd aass ~vsg//sg.. BrB0ra.at1ian <2520.~ 225888 1111~0111050s5s00 322225142424205059 833S05226288 266650599088355688 905 GGaassttrrooiinn0tt.eess1ttiinnaall TTrraacctt <<s00..ii a11226 ~o151450e4140 221200109616 22253i30313e10009 6$655588003548483 533 TTaabbllee 77 ---- FoFfUM3344T22o2t2atCCallneeaaarrpaaunnrsccteeatoouffa BBrraaiinn aanndd tthhee GGaassttrrooiinntteessttiinnaall TTrraacctt of Io~a~a~s~pu,~t~.sa Tine 11155homrauiirnns.. 4212 hhhhoooouuuurrrrssss 18248 hhhhoooouuuurrrrssss 2i1105~2 nhhhoooouuuurrrrssss 21220448 hnhhoooouuuurrrrssss 97476282 hhhhoooouuuurrrrssss 11922600 hhhooouuurrrsss Brain 17111855122 7770612212 s6i55081l221 356551189882 355585228933 5432850360 ir423 417 Gastrotntestinal Tract Gastrointestinal 623801281 Tract 63s332200557 325306002237 11258282050060545553 522366~54434 3m339952003 712 a* EExxpprreesssseedd aass s~/g/sg.. 22559955..00001100 0033 003388770088 33MMAA0000332266881122 -11- Table Table 8 8 -- -- FFtiMhe3344C22h22annUUepplttaakkCaeetfbbiyysh'LLj~vveerr,, Kidaey, Kidney, and Gall ~nd Gall Bladder Bladder of the Channel Catfish TTiimmee LLiivveerr 11551 mbmiionau..r 2241 hhhhoooouuuurrrrsss 12848 hhhhoooouuuurrrrssss 12116026 hBhhoooouuuurrrrssss 22424408 nhhhoooouuuurrrrssss 6747228 hhhhoooouuuurrrrssss 11129240604 hnhhoooouuuurrrrssss 111466488 hhhooouuurrrsss <100..11 a111111 6863711 196989199 113146241999 242368621119 446891 843536668819144 * EExxpprreesssseedd aass uugg//gg.. KiKiddaneeyy <000...111 3<<7000...111 57539797 194973973 1891499999 322150080009 331559 33345149295 452 Gaallll BBllaaddddeerr <<000...111 <<0000...111i 15<<<8001..11 122254748515 1223244782123 1111553587883355 2231882577673153 11333828060155 Table Table 9 9 -- -- oF1~fi I3344c22t22alaCCrllueesaarraapnnuccneectabbtyyusLLi~vveerr,, Kidney, Kidney, and Gall and Gall Bladder Bladder of Ictu~urus punctatus TTiimmee 11551 mhmoiiuanr... 2214 hhhhoooouuuurrrrsss 12488 hhhhoooouuuurrrrssss 12112066 hhhhoooouuuurrrrssss 22420448 hhhhoooouuuurrrrssss 49778622 hhhhoooouuuurrrrssss 11292060 hhhooouuurrrsss LiLvzveerr 655500044 76775559808 455740076977 447742226088 544474245303 37531716665 55007776 KK ididnneeyy 22677744 54443364977 4E3349%g07 355565115955 3223s5569105 122380052313 221888255 GGaallll BBllaaddddeerr 411955044383 4511922080856688 4533307725111008 4424324224941577 2233480991115202 2111824212120111 661444991771 *a EExxpprreesssseedd aass uvgg//ge. 22559955..00001111 0033 003388770099 33MMAA0000332266881133 --1122-- wwiitthh nnoo aappppaarreenntt ppllaatteeaauu eeffffeecctt.. AAtt 11~988 hh tthhee ccoonncceennttrraattiioonn ooff FMM33442222 iinn tthhiiss oorrggaann wwaass eeqquuiivvaalleenntt ttoo 9900S5upgg//gg ttiissssuuee.. TThhee bbrraaiinn ttiissssuuee lleevveellss ooff FFM U33442222 rreemmaaiinneedd eelleevvaatteedd uuppoonn ccoommpplleettiioonn ooff tthhee cclleeaarraannccee pphhaassee ooff tthhiiss tteesstt;; 441177uugg//gg ((TTaabbllee 77,, FFiigguurree 44)). TThhee ggaassttrrooiinntteessttiinnaall ttrraacctt uuppttaakkee ooff FFUM33442222 iiddeennttiiffiieedd tthhrreeee pphhaassees:s: rraappiidd aanadd ssllooww uuppttaakkee ccoommppoonneennttss w wiitthh aa ddeemmoonnststrraabbllee ppllaatteeaauu ((TTaabbllee 66,, FFiigguurree 55)).. T~hhee ffiirrsstt ttwwoo pphhaasseess ppeerrssiisstteedd ffoorr 2244 aanndd 4488 hhoouurrss rreessppeeccttiivveellyy w whhiillee tthhee ppllaatteeaauu eeffffeecctt wwaass mmiinniimmaallllyy ooff 9966 hhoouurrSSdduurraattiioonn.. AAss mmaayy bbee nnootteedd ((TTaabbllee 77 aanndd FFiigguurree 55)),, tthhiiss oorrggaann d4i1dd nnoott cclleeaarr FFUM33442222 rreeaaddiillyy,, rraatthheerr aann iinneexxpplliiccaabbllee rriissee iinn oorrggaann ccoonntteenntt ooff FFM U3~442222 ooccccuurrrreedddduurriinnggtthhee llaatttteerr ssttaaggeess ooff ddee-- ppuurtaattiioonn.. TTIISSSSUUEE A~NAALLYYSSIISS -- GGaallllbbllaaddddeerr - TThhiiss oorrggaann ddeemmoonsntsrtraatteedd aa ddeellaayyeedd ""uuppttaakkee"" ooff FFM U3324222,, ddeetteeccttaabbllee lleevveellss bbeeiinngg iinniittiiaallllyy nnootteedd aatt 1122 hhoouurrss eexxppoossuurree ((TTaabbllee 88)).. TThhee ""uuppttaakkee"" ppaatttteerrnn ddiiffffeerreedd ffrroomm tthhoossee ooff ootthheerr oorrggaann ssyysstteemmss bbeeiinngg aaansallyyzseedd iinn tthhaatt tthhee ccoonncceennttrraattiioonn ooff fflluuoorroocchheem miiccaall iinnccrreeaasseedd tthhrroouugghhoouutt tthhee eexxppoossuurree ppeerriioodd. . TThhiiss oorrggaann sshhoowweedd aanneerrrraattiicc cclleeaarr-- aannccee ppaatttteerrnn,, aann iinniittiiaall ddeeppuutraattiioonn ffoolllloowweedd bbyy iinnccrreeamsseedd lleevveellss ooff fflluuoorroocchheemmiiccaall,, aa pphheennoommeennoonn wwhhiicchh wwaass oobbsseerrvveedd tthhrroouugghhoouutt tthhee rreem maaiinnddeerr ooff tthhee eexxppeerriimmeenntt ((TTaabbllee 99 FFiigguurree 66)).. The The rreemmaaiinniinngg ttiissssuueess tteesstteedd eexxhhiibbiitteedd ssiimmiillaarr lleevveellss ooff FFM33442222 uuppttaakkee.. IInn aallll ccaasseess aa sstteeaaddyy--ssttaattee ccoonncceennttrraattiioonn ccoouulldd bbee ccaallccuullaatteedd uussiinngg tthhee ppllaatteeaauu mmeetthhoodd.. DDeeppuurtaattiioonn ddaattaa ddiidd nnoott eessttaabblliisshh ddeeffiinniittiivvee eevviiddeennccee ffoorr tthhee cclleeaarraannccee ooff FFMU3342222 bbyy tthheessee ttiissssuueess:: ggiillllss,, sskkeel]oettoonn amnndd s.kgiknl.n. TThhee lliivveerr ddiidd oexxhhiibbiitt pprroonnoouunncceedd ddeeppuurraattiioonn ooff tthhee tteesstt cchheemmiiccaall ffoolllloowweedd bbyy rraappiidd uuppttaakkee,, aa pphheenn-- ~ oom meennoonn aassssoocciiaatteedd wwiitthh ddeeppuurtaattiioonn ddaattaa oobbtt:a~iinneedd ffoorr tthhee ggaassttrroo-- iinBtt~essltJinnaull ttrra~cct~ annndd tthhoe ggaall)l b~llaaddddeerr, 0033 003388771100 22559955..00001122 33MMAA0000332266814 "13 -13- TTaabbllee I100 =-=- CCcooemmnpptiirllaatatitoiinoonn PooaffctoWWrhhsoolleeDurFFiiissnhhg EaanxnddposOOurrrggeaanntoSSyyssFtt4eemm22Bjogon- centration Factors During Exposure to FM3422 SSaammppllee WWeeiigghhttc g BiBoioccoonnFccaeecnntttorrraattiioonn FacZor WWhhoollee FFiisshh ##1I 1010..882.44..55 557755 WWhhoollee FFiisshh ##22 1111..55:22..44 440066 SSkkeelleettoonn I111..88:+22..33 550011 skin Skin 2.91.9 2.9+.9 553344 GGiinllss .164r..22 S54422 Liver Liver .55114+..1I ar 474 KKiiddnneeyy .-3366+5..11 770098 GGaassttrrooiinntteessttiinnaall 11..443+..44 11008644 GGaallll BBllaaddddeerr .0.033:+..0022 2266554488d Brain Brain ..1199+1..0033 11334444 - MuMsusccllee 77..00:+22..00 228811 aBBCCFF -- ccaallccuullaatteedd uussiinngg ppllaatteeaauu mmeetthhoodd abAvveerraaggee wwaatteerr ccoonncceennttrraattiioonn ooff FFMM33442222,, 00..5522 ppppmm "CDDaattaa eexxpprreesssseedd aass mmeeaann ++ SS..DD.. "dSseevveenn ddaayy BBCCFF vvaalluuee,, aabbsseennssee ooff ppllaatteeaauu eeffffeecctt.. 22559955..00001133 0033 003388771111 33MMAA0000332266881155 --1u4-- TTaabbllee 1I3I..-.-. (UUCppotatnaankke)ee. RRCaaatt%teeisCCn)oonnssttaanntt ooff FFM332222 iinn Iotalamus punctatus sSaammppllee UUcppottnaaskkteeantrraattceeomposite RRaappiidd PPhhaassee SSllooww PPhhaassee constant eompos~re w~nhoollee FFiisshh AA 33..22+011.33 55..77 22..77 Wmhoollee FFiisshh BB 66..445+33.,11 88..88 33..99 Brain 7.7:2.4 9.3 5.1 5 .I Brain GGGiiallslltssrointestinal 57..74+132..43 56..40++32..34 9.3 77..33 22..77 7.3 4.4 GastroiTnratcetstinal 6.0+2.4 7,3 4.4 Tract Liver 4.502.3 6.3 3.6 Liver 4.5+2.3 6.3 3.6 Gall Bladder 82a? - - KiG Kid~dnlnleeyyBladder 48.20.11a.4 4.0~1.4 - - 55..44 33..00 MuMussccllee 1.18,84+00..66b - = - - - SkSkiinn 66..71+33..22 88..9 33..66 Skeleton 3.14.0 3.3 2.4 Skeleton 3.1+1.0 3.5 2.4 2a Uptake rate constant at 168 hours b VUapltuaekse sratateklacronasttanaltl attim1e68pheroiuordss Values slm~,lar at all time periods 22559955..00001144. 0033 0033S8771122 3MA00326816 3MA00326816 -15- -15- A tabulation of the bioconcentration factors (ECF) determined A tabulation of the bioconeentration factors (~CF) determined at an approximate steady state, using the plateau method,provided at an approximate steady state~ using the plateau method,provided evidence demonstrating the lipophilicity of FN3422 (Table 10) evidence demonstrating the lipophilicity of FM3422 (Table lO). Although the gall bladder possessed the highest BCP for comparative Although the gall bladder possessed the hghest 9CF for comparative purposes these data can be ignored for reasons to be discussed. Of purposes these data can be ignored for reasons to be discussed. Of tthhee rreem maaiinniinngg oorrggaann ssyysstteemmss tthhee pprrooppeennssiittyy to to bioaccumulate bioaecumulate FM3122 FM3422 wwaass mmoosstt pprroom miinneenntt iinn tthhee bbrraaiinn aanndd ggaassttrrooiinntteessttiinnaall ttrraacctt.. TThhee eeddilbbllee ppoorrttiioonn,, mmuussccllee,, m minniimma~llllyy bbiiooccoonncceennttrraatteedd FFHH33442222.. AA ttaabbuullaattiioonn ooff uupptta~kee rraattee ccoonnssttaannttss ffoorr ~whhoollee ffiisshh aanndd organ systens provides further evidence that the lipophilic nature of organ syste~ provides further evidence that the lipophllic nature of FFN~33442222 ddooee~s ~innfflluueennccee uuppttaakkee rraattee ((TTaabbllee 1111)).. BBootthh bbrraaiinn aanndd tthhee gastrointestinal tract had high uptake rate constants. A second ~astrointestinal tract had high upt~e rate constants. A second pprreem miissee mmaayy bbee eessttaabblliisshheedd tthhaatt bbeeiinn~g tthhee ggrreeaatteerr t~hhee ssuurrffaaccee aarreeaa exposed to the material the greater the uptake rate, hence elevated exposed to the material the greater the uptake rate, hence elevated uptake rate constants for both skin and gills. The former instance uptake rate const~ts for both skin and gills. The for~r instance pprroovviiddeess aa pphhyyssiioollooggiiccaall bbaassiiss ffoorr uuppttaakkee wwhhiillee iinn tthhee llaatttteerr ecaassee both mechanical and physiological mechanisms were operative both mechanical and physiological ~chani~ were operative. Clearance rate constants could not be calculated due to data Clearance rate constants could not be calculated due to data variability. variability. DISCUSSION DISCUSS ION IInn tthheessee ssttuuddiieess tthhee pprriinncciippaall mmeecchhanainsism~s ffoorr iinniittiiaall uupptta~kee ooff M3422 were the gills and integument. Substanciating evidence consist- FM3422 were the ~111s and integument. 3ubs~an~iating evldence conslst- iinn~g ooff uupptta~kee rraattee ccoonnssttaannttss wwhhiicchh eexxcceeeeddeedd aal]ll ootthheerr oorrggaann ssyysstteem~s eexx-- cceeppttiinn~g bbrraaiinn,, g~aassttrrooiinntteessttiinnaall ttrraacctt aanndd tthhee ~gaalll] bbllaaddddeerr.. TThhee g~i1l1l1 cciirr-- ccuullaattiioonn ffuunnccttiioonnss aass aa ttrraannssppoorrtt ssyysstteemm ddiissppeerrssiinngg tthhee fflluuoorroocchheem miiccaall ttoo vvaarriioouuss ssii~teess iinn tthhee bbooddy.y. TThhee ~immppoorrttaannccee ooff tthhiiss ssyysstteemm iinn tteerrmmss ooff bbootthh uuppttaakkee aanndd ttrraannssppoorrtt, ooff ffoorreeiiggnn cchheemmiiccaallss hhaass bbeeeenn tthhee 0033 00338771133 22559955..00001155 33MMAA0000332266881177 --1166-- ssuubbjjeecctt ooff rreecceenntt ppaappeerrss bbyy GGrraannmmoo aanndd KKoollllbbeerrgg ((119977~5)) aanndd BBaassss aanndd HHeeaatthh ((11997777)).. MMoovveenmeenntt ooff FFMM33442222 aaccrroossss tthhee iinntteegguummeenntt aallssoo ccoonnttrriibbuutteess ttoo tthhee bbooddyy bbuurrddeenn ooff FFMM33442222 bbaasseedd oonn uuppttaakkee rraattee ccoonnssttaannttss.. DDeeffiinniittiioonn ooff tthhee eexxtteenntt ooff tthhiiss ccoonnttrriibbuuttiioonn ccaannnnoott bbee ddeetteerrmmiinneedd aass tthhee eexxaacctt ttrraannssppoorrtt ppaatthhwwaayy hhaass nnoott bbeeeenn eessttaabbllilsshheedd.. OOuurr pprreevviioouuss ssttuuddyy ((11997777)) ddiidd ddeemmoonnssttrraattee tthhee eexxiisstteennccee ooff aa hhiigghhllyy 1l~1ppiidd llaayyeerr uunnddeerrllyyiinngg tthhee sskkilnn wwhhiicchh tthheeoorreettiiccaallllyy bbaasseedd oonn tthhee lliippoopphhiilliicciittyy ooff FFAM33442222 sshhoouulldd sseerrvvee aass aa ssttoorraaggee ((bbiinnddiinngg)) ssiittee ffoorr tthhiiss cchheemmiiccaall.. VVaassccuullaarr ppeerrffuussiioonn oof~ tthhiiss aarreeaa ccoouulldd sseerrvvee ttoo ttrraannssppoorrtt tthhee fflluuoorroocchheemmiiccaall ttoo ootthheerr ssiitteess iinn tthhee bbooddyy,, hhoowweevveerr,, tthhee mmaaggnniittuuddee ooff ppeerrffuussiioonn iiss aann uunnkknnoowwnn.. SSiimmiillaarrllyy,, iiff oonnee vviieewwss tthhee l1iippiidd llaayyeerr aass aa bbiinnddiinngg ssiittee ffoorr FFMU33442222,, tthhee nnaattuurree ooff tthhee BR bbiinnddiinngg bbeceomecsoofofrremelleeevvaannsccee iinn ddeetteerrmmiinniinngg tthhee eeaassee wwiitthh wwhhiicchh mmaatteerriiaall mmaayy bbee ttrraannssppoorrtteedd eellsseewwhheerree. IItt wwaass ddeemmoonsntsrtraatteedd pprreevvioouussllyy iinn oouurr llaabboorraattoorryy tthhaatt tthhee mmoorree hhiigghhllyy lliippiidd--ccoonnttaaiinniinngg oorrggaannss tteennddeedd ttoo bbiiooccoonncceennttrraattee tthhee ssuubbjjeecctt fflluuoorroocchheemmiiccaall mmoorree rreeaaddiillyy.. TThhiiss ffiinnddiinngg hhaass bbeeeenn ssuubbssttaannttiiaatteedd bbyy tthhee pprreesseenntt, ssttuuddyy.. TTrraannssppoorrtt ooff FFMM33442222 ttoo tthhee bbrraaiLnn aanndd ggaassttrrooiinntteessttiinnaall ttrraacctt bbyy tthhee cciirrccuullaattoorryy s~yysstteemm ooff tthhee ffisshh sseeeemmss sseellff--eevviiddeenntt aass tthheessee oorrggaannss aarree hhiigghhllyy vvaassccuullaarr.. EEvviiddeennccee oobbttaaiinneedd iinn tthhiiss ssttuuddyy ssuuggggeessttss tthhaatt tthhee ssuubbjjeecctt cchheemmiiccaall iiss bboouunndd ttiigghhttllyy aass iitt ddooeess nnoott ddeeppuurraattee aapppprreecciiaabbl]y~.. BByy iimmpplliiccaattiioonn aa ssiimmiillaarr ssiittuuaattiioonn mmaayF eexxiisstt aatt tthhee oofill llaayyeerr//iinntetgeguumoeenntt iinnZ teerrffaaccee., tthheerreebbyy rreedduucciinngg tthhee oovveerraallll ccoonnttrriibbuuttiioonn ooff tthhee iinntteegguummeenntt aass aa ssoouurrccee ooff fflluuoorroocchheem miiccaall ffoorr ootthheerr oorrggaannss iinn tthhee bbooddsy.. OOrrggaannss ccoonnttrriibbuuttiinngg ttoo tthhee ddiiggeessttiivvee p~rroocceessss ooff I:~o,t~anlZa~mre~ pru~ncet~a$tu~s 0033 003388771144 22559955..00001166 33MMAA00003322668188 -17- -17- presented presented aann iinntteerreessttiinngg pprrooffiillee.. TThhee ggaallll bbllaaddddeerr,, sseerrvviinngg aass aa rreesseerrvvooiirr ffoorr bbiillee mmaannuuffaaccttuurreedd bbyy tthhee lliivveerr,, ppoosssseesssseedd tthhee ggrreeaatteesstt ccoonncceennttrraattiioonn ooff f~lluuoorroocehheemmiiccaall oobbsseerrvveedd iinn tthheessee ssttuuddiieess.. W~heenn ssaammpplleess wweerree oobbttaailnneodd ffoorr FFMM33442222 aannaallyyssiiss,, ddiisstteennttiioonn ooff tthhee ggaallll bbllaaddddeerr wwaass oobbsseerrvveedd,, iinnddiiccaattiinngg tthhaatt aatt oouurr ssaammpplliinngg ttiimmee wwee wweerree iinn rreeaalliittyy aannaallyyzziinngg aa ccoonncceennttrraatteedd ssaammppllee oof~ bbiillee.. IItt iiss aallssoo pprroobbaabbllee tthhaatt tthhiiss oorrggaann ppaarrttiicciippaatteess iinn tthhee eexxccrreettiioonn ooff FFMM33442222 ffrroomm tthhee bbooddyy.. TThhee ccoommppoossiittiioonn ooff bbiillee iiss ssuucchh tthhaa~t ggiivveenn tthhee lliippoopphhiilliicciittyy ooff FFUM 33442222,, bbiinnddiinngg ssiitteess,, ccoommpplleexxaattioonn aanndd//oorr ccoonnjjuuggaattiioonn ooff tthhiiss fflluuoorroocchheemmiiccaall ttoo bbiilliiaarryy ccoommppoonneennttss iiss aa ddiissttiinncctt ppoossssiibbiilliittyy.. CCoonn-- ttrraaccttiioonn ooff tthhee ggaallll bbllaaddddeerr wwiitthh tthhee rreessuullttaanntt eemmppttyyiinngg ooff iittss ccoonntteennttss iinnttoo tthhee ggaassttrrooiinntteessttiinnaall ttrraacctt mmaayy aaccccoouunntt ffoorr tthhee ssppoorraaddiicc nnaattuurree ooff tthhee cclleeaarraannccee ccuurrvvee ffoorr tthhiiss oorrggaann.. OOnnee mmaayy vviieeww tthhee sseeqquueennccee ooff eevveennttss ooccccuurriinngg iinn tthhee ddeeppuurraattiioonn pphhaassee ooff tthhiiss ssttuuddyy aass iitt rTeellaatteess ttoo tthhee ddiiggeessttiivvee ssyysstteemm iinn tthhee ffoolllloowwiinngg mmaannnneerr:: FFMM33442222 iiss cclleeaarreedd aatt aa mmeeaassuurraabbllee rraattee bbyy vvaarriioouuss oorrggaannss,, bbeeiinngg ttrraannssppoorrtteedd ttoo tthhee lliivveerr bbyy tthhee cciirrccuullaattoorryy ssyysstteemm.. IInn tthhee lliivveerr,, FFMU33442222 eeiitthheerr bbiinnddss,, ccoommpplleexxeess aanndd//oorr bbeeccoommeess aa ccoonnjjuuggaattee ooff nneewwllyy mmaannuuffaaccttuurreedd bbiillee.. TThhee bbiillee iiss tthheenn ssttoorreedd iinn tthhee ggaallll bbllaaddddeerr bbeeiinngg eexxpprreesssseedd iinnttoo tthhee dduuooddeennaall aarreeaa ooff tthhee iinntteessttiinnee.. TThhiiss mmaatteerriiaall mmaayy-ft,hheenn bbee oeiitthheerr eexxccrreetteedd wwiitthhiinn ffeeccaall mmaatttteerr aanndd//oorr ssoommee FFMU33442222 mmaayy uunnddeerrggoo rree--uuppttaakkee ffoorr bbooddi1lyy ddiissttrriibbuuttiioonn.. EExxccrreettiioonn ooff FFMM33442222 iiss nnoott ssoolleellyy vviiaa ffeeccaall mmaatttteerr aass aa ssiimmiillaarr sscceennaarriioo ccaann bbee ddeessccrriibbeedd ffoorr rreennaall cclleeaarraannccee wwhheerreeiinn eelleevvaatteedd lleevveellss ooff FFMH33442222 aarree mmaaiinnttaaiinneedd tthhrroouugghh tthhee ffiirrsstt 7722 hhoouurrss ooff ddeeppuurr-- aattiioonn. 22559955..00001177 0033 00338771155 33MMAA0000332266881199 18- TThhee eeddiibbllee ppoorrttiioonn ooff tthhee cchhaannnneell ccaattffiisshh., tthhee m muussccllee ffiilllleett,, 14 did nnoott bbiiooaaccccuummuullaattee FFMN33442222 ttoo aann aapppprreecciiaabbllee eexxtteenntt ssuubbssttaannttiiaattiinngg oouurr pprreevviioouuss oobbsseerrvvaattiioonn ffoorr tthhiiss ttiissssuuee.. IInn ggeenneerraall,, nnoo aaddvveerrssee ssiiggnnss wweerree oobbsseerrvveedd dduurriinngg tthhee dduurraattiioonn ooff tthhee eexxppeerriimmeenntt aatttteessttiinngg ttoo tthhee nnoonn--ttooxxiicc mnaattuurree ooff tthhiiss cchheemmiiccaall uunnddeerr tthhee ccoonnddiittiioonnss eemmppllooyyeedd iinn tthhiiss tteesstt. cCoOnNcCLLuUsStIOonNsS TTahiss ssttuuddyy ooff tthhee aabbiilliittyy ooff tthhee cchhaRnnnneell ccaattffiisshh Uctalarus ppuunact~aatu~s)) ttoo bbiiooccoonncceennttrraattee tthhee fflluuoorroocchheemmiiccaall FFMM33442222 hh~ass lleedd ttoo tthhee ffoolllloowwiinngg ccoonncclluussiioonnss:: I1.. BBootthh lllippoopphhiilliicc oorrggaannss aanndd oorrggaannss ppoosssseessssilnngE aa llaarrggee ssuurrffaaccee aarreeaa aatt tthhee wwaatteerr//oorrggaann iinntteerrffaaccee ppoosssseessss tthhee hhiigghheesstt uuppttaakkee rraattse ccoonnssttaannttss.. - 22.. TThhee bbrraaiinn aanndd ggaassttrrooiinntteessttiinnaall ttrraacctt hhaavvee BBCCFF''ss iinn eexxcceessss ooff 1I00%3 dduuee ttoo tthhee lliippoopphhillliicc nnaattuurree ooff tthhee ssuubbjjeecctt fflluuoorroocchheemmiiecaall.. 33.. TThhee ggaallll bbllaaddddeerr dduuee ttoo iittss ssttoorraaggee ffuunnccttiioonn sshhoowweedd tthhee hhiigghheesstt ccoonncceennttrraattiioonn ooff FFNM33442222 oonn aa ~ugg//gg bbaassiiss.. 44.. WWnhoollee ffiisshh oorr oorrggaann wweeiigghhtt wwaass aann iinnddeeppeennddeenntt vvaarriiaabbllee,, nnoott aa ddeetteerrmmiinnaanntt Iinn tthhee bbiiooccoonncceennttrraattlioonn ooff FFMN334a2222.. 5. EExxccrreettiioonn ooff FFUM33A42222 ccoonnssiissttss ooff bbootthh uurriinnaarryy aanndd ffeeccaall ppaatthhwwaayyss.. 66.. CClleeaarraannccee ooff FFMU34Z2Z2 bbyy ccoommppoonneennttss ooff tthhee ddiiggeessttiivvee ssyysstteemm ccoonnttrriibbuutteess ttoo tthhee eerrrraattiicc nnaattuurree ooff tthhee ddeeppuurraattiloonn ccuurrvveess.. 77.. MFM34342222 aatt tthhee eexxppoossuurree ccoonncceennttrraattiioonn ddiidd nnoott eelliicciitt ssiiggnnss ooff ttooxxiicciittyy,, tthheerreeffoorree,, uunnddeerr tthhee ccoonnddiittiioonnss ooff tthhiiss eexxppeerriimmeenntt,, tthhiiss fluorochemical fluorochemical ccaann bbee ccoonnssiiddeerreedd nnoonn--ttooxxiicc.. - SE te AANNWW/lvvompp 03 038716 03 03S716 22559955..00001188 33MMAA0000332266882200 -19- -19- `BBIBILBLIOIGOGRRAAPPHHYY 11.. 4BBa9as7ss-s,3, 02M M,iicch1ha9ae7e7ll. L. L. and Alan and Alan G. G. Heath. Heath. Water Research 11: Water Research 11: 497-502, 1977. ~ 22.. Buroett, RB. Burnett, R. Science 174:606, 1971. Science 174:606, 1971. 33.. CCKhohihionoueu,r,t,CC.. R.TT..,,L. FFrreBeeaedvd,., VVS.c.i.HH..,T, ecSShcc.hhmm1ee1dd:dd4i7nn5gg,,, DD1.9. 77W W...,, aanndd Kohnert, R. L. Env. ScL. Tech. 11:475, 1977. 4. 4. Baton, Eaton, JJoohhnn - - CChha&iirrmmaann~, A&SSTqM~ D Drraaff~t GGuuiiddeelliinneess,, 11097777.. 55.. EEllnnaabbaarraawwyy~, MM.. TT.. T Teecchhnniiccaall R Reeppoorrtt,, 11997777.. 66.. F1F9uu8gl4ilt,aa,, TT..,~ lIwwaassaa,, JJ..,, HHaannsscchh,, CC.. JJ.. AAmm.. CChheemm.. SSoocc.. 8866::5511775~,, 1964. -- 77.. GGrraaonmmoo,, AA.. aanndd S5.. K Koollllbbeerrgg.. WWaatteere RReesseeaarrcchh 1100::118809,, 11997766.. 88.. GGuussttaa~fssoonn,, CC.. GG.. EEnnvv.. SSccil.. TTeeechh.. ~4::881144,, 11997700.. - 99.. MMeennddeell0, AA.. TTeecchhnniiccaall RReeppoorrtt,, 11997777.. 1I00.. 3VV2ee:iitt1hh8,,d9,GG.. 1DD9..75.aanndd CCoommssttoocckk,, VV.. MM.. JJ.. FFiisshh RReess.. BBooaarrdd CCaann.. 3--2: 1849, 1975. I1I1.. WWeelltteerr,, AA.. NN.. TTeecchhnniiccaall RReeppoorrtt,, 11997777.. 22559955..00001199 0033 003358771177 33MMAA0000332266882211 Clima iH bf SLEiT mS e e eeeT asnie | a 4 scihl ammEMsTUaREeRG] maEl LoEh Co DS EELR N EamEeLe EREELE R L DREF hie goood GRRE GEE ET Ff 22559955..00002200 33MMAAQ000332266882222 oCbL EEEEETEHERBRERL am Ee a 8i POUUERRDURE See | FF OEE me Lae TH SEE SET TT ool snr BREET BECELT , 2 Cm ese we gevn eh t 22559955..00002211 33MMAA0000332266882233 TEE og camel Bg dl sf B LBo HEEeHmAiEa H EEL lH BEE abiemes RL | oo d TIE i REEEe EE RRl EETT DRTEWITCk 3BSehleawes me HE bodyTH TERT CRE Te aa g] E ETL fas PJ ED CwoSe 2 iI Ea EER 22559955..00002222 33MMAA0000332266882244 CGE Cm ; :x Te LE - SEE I Es Coomera af i PnCAHEE 7 ERE ha bo ef ETT] NEW T GERTOMITL eATerge [hl fie - ie LE Lo po Eh rE |: rCENT TBem SHTeT TH Lg I . wanes Tenn ae RE 22559955..00002233 33MMAA0000332266882255 . pEDEE a rh CSSPEREESobJ EIaEE If eed He pf TTT WH jul fDoa lEe AT e EERBEe WEBLLE CLGo HEEL EEE) HEE| 5: bn 3 LE | - Lo nd E Be ET i HIED A dees By CELL CHEE CER CEE ETD a Ea dl 22559955..00002244 33MMAA0000332266882266 GUE HR . NEL EE] BEETLE i : he EEE CperL1h fo DEElTEmsn ann dn [Ch i yaa ra hE + SdNiElLL mEmEm)ECRRDE BHIEET) ds THE HET Ar Ea hme EET ORHEHO BET) EBnEhRELaE CmRE TC ETTod pobll SPREE gEt EET CF 22559955..00002255 33MMAA0000332266882277