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MANUFACTURING CHEMISTS ASSOCIATION 1925 CONNECTICUT AVENUE. N. W. WASHINGTON, D.C. 20009 (202)^83-6126 Copies^for: RWG JDBu JJL LNV KLS (RLL CLW) WRS DVP RGW (EAS REL) jj_ r , rjjA 'V ^ cm / r7 August 9, 1974 CHEMICALS research AUG 121974 FK To: Technical Task Group on Vinyl Chloride Research Subject: Translation of Maltoni's Report on Vinyl Chloride Research i WRS tM Gentlemen: Distributed herewith are copies of a (non-medical) translation of Dr. Maltoni's publication Le potenzialijia dei saggi sperimentali nella predizione dei rischi oncogenl ambientali. Un esempio: il cloruro di vinile. We are in- debted to NIOSH for having this translation prepared, j Sincerely, j KDJ/mb Enclosures cc: Dr. Mr. Dr. D. P. Duffield A. W. Barnes Tiziano Garlanda Kenneth D. Johnson, Ph.Dii. Secretary j Technical Task Group on j Vinyl Chloride Research VVC 000006038 Tracor Jitco, Inc. f30Q East Gude Drive, Rockville, Maryland 20S51 3r/ MALTONI, C. and G. LEFEMINE The potential of experimental tests in predicting! environmental oncogenic hazards. An example: vinyl chloride. Accademia Nazionale dei Lincei: Rendiconti della; Classe di Scienze Fisiche, Matematiche e Naturalij, 56(3), Series III: 1-11, March 1974 1 \ VVC 000006039 * Zb tiumin luiiaLe dci ...* i: ........ ....................... -- k...diconti Della Classe DI Scienz^ Fisiche, Matematiche e Naturali: Vol. 56, No. 3, Series III, pp. 11*11, March, 1974. I I The Potential of Experimental Tests in j Predicting Environmental Oncogenic Hazards , An Example: Vinyl Chloride \ i Cesare Maltoni and Giuseppe Lefemine j SUMMARY A wide project of correlated and integrated experiments, performed for testing the carcinogenic potentialities of vinyl chloride (VC) (a monomer of high industrial importance), is presented. > The results showed that VC induces Zymbal's gland carcinomas, nlephroblastomas, and hepatic and extra-hepatic angiosarcomas, in rats, and pulmonary (tumours, mammary carcinomas and liver angiosarcomas, in mice. The experimental data have oriented the clinical observations end the epidemiological investigations, which have recently brought to the 4etectln of the early cases of liver angiosarcomas among exposed workers in the U.S.A. and in the U.K. The experimental carcinogenicity bio-assays of VC should be considered, therefore, highly predictive. They represent a convincing example for potentiating experimental testing for all new industrial compounds, and for the ones already widespread, but on whose biological effects we are still ignorant. j In the past 10 years, the number and amount of oncogenic agents produced and scattered in the working environment have increased and continu^ to increase in a distressing way. These agents emitted by factories eijiter into the general environment and thus become an ecological problem. i As a result of this situation, an increase in occupational turners and of external environmental agents in a broad sense is recorded. Most oncogenic agents present in the human environment have be^n identified on Che basis of retrospective epidemiological studies. { VVC 000006040 Epidemiological proof should be avoi_ J For all new agents prod uce and used, systematic experimental tests should rather be carried out t predict their possible oncogenic potential. However, such tests have generally not been carried out in a systematic way, mainly for two reasons. The first one is the absence of standards. The second one lies in the fact that the design and performance of tests sre often not adequate, and, therefore, the results of such tests cannot be extrapolated to man; these tests have generated a certain amount of skepticism. In our opinion, experimental tests, if correctly formulated and parried out, have a high predictive value. An example of such tests are those reported here. To our knowledge, this is the first time that an oncogenic hazard, the importance of this hazard, and the target bases (foundations) can be predicted with absolute accuracy by means of an experimental test. The present studies deal with carcinogenicity tests on vinyl chlpride (VC). This monomer is of great industrial importance, and is used in the production of polyvinyl chloride (PVC), as a copolymer in the production of Saran and other plastics, as a solvent and a chemical intermediate product. For a short time, it has also been used in anesthesiology. The annual VC production is about 12 million tons. Workers who risk exposure to this product are; 1) Workers engaged in production of PVC and other resins containing PVC, in the production of VC and in the industrial use of VC for other purposes. 2) Workers who use PVC. 3) Residents of areas adjacent to plants producing VC and PVC. 4) Although to a minor extent, those persons using or coming into contact with plastics based on VC or with VC-containing materials. j The project for testing the oncogenic potential of VC follows tlje pre liminary results of the pioneering work done by Prof. Viola, presented at the 10th International Cancer Congress (Houston, 1970), later published jn "Cancer Research in 1971, (Viola et. al., 1971). j The results obtained by Prof. Viola showed that exposure to 30,000 ppm VC for 10 months, 4 hours/day and 5 days/week induced tumors in rats. In the interpretation of Prof. Viola, these tumors originated from the $kin, lungs, and bones. VVC OOC00604X Immediately after the Houston meeting, we contacted Prof. Viola, who graciously made available to us the histological sections of his tumors and his extensive report, which was still in the publishing stage at that time. On the basis of this material, we reached the following conclusions: 1) Under the experimental conditions used by Prof. Viola, VC clearly showed a carcinogenic effect in rats. 2) The amount of 30,000 ppm VC is an extremely high dose. 3) The tumors described as cutaneous tumors originated from Zyrabal glands, which are sensitive to a wide range of carcinogens, such as 2-acetylaninofluorene, benzidine, polycyclic hydrocarbons, aminostilbene, urethane, etc. Tumors described as pulmonary tumors were actually metastases of Zymbal gland carcinomas; locations of pulmonary neoplasms were all nated in animals carrying Zymbal gland tumors and were entirely similar to thjEese tumors. However, there is an urgent need for systematic research to furltther clarify the type and degree of the carcinogenic effect of VC, partialularly in regard to experimental factors correlated with exposure, such as the administration route, concentration, duration, etc., which can provi|ide more direct indications on the hazards of conditions found in an occupati)onal environment. In this respect, the Institute of Oncology and the Bologna Turner Center are particularly specialized in studies for the prevention and control of tumors, and the Montedison Co., the major Italian producer of VC, htis been directed to strengthen our program of tests on the biological effects of VC. The Montedison was later joined by ICI (Great Britain), Solvay (Belgium), and Rhone-Progil (France) (Cooperative European Group for the Study of the Biological Effects of VC). Prior to initiating the operational phase of this research, it was necessary to prepare suitable conditions for exposure by the inhalai :ion route. The study and the construction of an apparatus for the programmed and controlled exposure has required several months. Control is perfo:arjcd by means of gas chromatography. Such an apparatus allows exposure to concentrations ranging from 30,000 to 50 ppm, and the simultaneous treatment of 1200 test rodents. The apparatus consists mainly of stainless steel and crystal. 3 VjVC 000006042 VC was provided by Montedison, j'ach VC batch was analyzed prior to use to determine any eventual inpurities present; the VC used by us contained negligible amounts of impurities. Tests were carried out mainly on Sprague-Dawley rats, but Wistar rats, Swiss mice, and hamsters were also used. All animals, except hamsters, were bred for years at our Institute, and whatever their use, they were subjected to a complete autopsy, and for this reason their current spontaneous pathology is known to us. A consecutive series of 14 tests was initiated. Some of these tests were programmed from the beginning, while others were retained (held back) as necessary later, on the basis of the first experimental results. The design of the tests at the present date is shown in Table I. Essentially, we wanted to verify (check) the oncogenic action of VC in relation to various factors, such as the administration route, dosage, duration and rhythm (measure) of treatments, animal species, strain, and age. In addition, we wanted to test the eventual possibility of a transplacental action of the compound. !I All animals were observed until their natural death, and a complete autopsy was performed on each dead animal. As a rule, the following organs and parts were examined histologically: Zymbal glands, interscapular fat, salivary glands, tongue, lungs, liver, kidneys, spleen, stomach, various segments of the intestines, bladder, encephalum (brain), leg bones, and every other tissue with pathological lesions. All animals exposed tcj higher doses (30,000 and 10,000 ppm), with or without tumors, were examined i radiologically during treatment and/or at the tine of death, to chec^ the appearance of eventual acrosteolytic lesions. Animals exposed to lower doses, when carrying tumors, were also examined radiologically. Tables II-VI show preliminary data relating to test nos. BT1, BlJS, BT6, BT5, and BT4. In regard to the other experiments, we must still) wait to obtain any results. From the data given in the tables and histological studies, the following points can be derived: WC 00000604-3 TA I 0)J NDECU $PK1.MNTI Vil Trattamento an Doai di CV Cs) Durata UTl DT2 bt3 BT4 bt5 BT6 bt7 BT8 BT9 * BTio BTu BT12 BTij BTn Inalazione^?} Inalazione 10.000. O.ooo. z.500, 500. 250, 50 ppm. Controlli non tratcati/*7 ) Controlli traitaii com 2.500 ppm di ncetato di viuilc (AV) m 4h/d/ 5d/sctt/ 52 Sett. roo, 150, 100 ppm. Controlli noQ trattati. 4h/d/ 5d/sett./ 52 sett. Inalazione 10.000, 6.000, ^-soo.-joo, 250, 50 ppm. 4h/d/ 5d/sett./ 17 sett. Controlli non trattati. Inalazione io.ooo, 6.ooof 2.500,500, 250, 50 ppm. 4h/dj 5d/sctt./ 30 sett. Controlli non trattati Transplacentale 10.000, 6.000 ppm. Inalazione 30.000 ppm. 4h/d/ 7d/ (dal 1 al mlS*d di gravidanzk 4h/d/ 5d/sett./ 43 sett. Inalazione io.ooo, 6.000, 2.500, 500, 250, 50 ppm, 4h/d/ Sd/sett./ 52 sett. Controlli non trattati. Inalazione 10.000. 6.000, 2.500, 500, 250, joppm. 4h/d/ 5d/sett./ 30 sett. Controlli non trattati Inalazione 50 ppm. Controlli non trattati. 4h/d/ 5d/actt./ 52 sett. Inalazione Ingestione (to) Iniezione intrapcriioneate 10.000, 6.000 ppm. Controlli non trattati. (IAj) 16,6 mg; 3.32 mg; 50 mg/kg peso corpo rco m oho di oliva. Controlli: olio di ohva 4.25 mg in i,o cc di olio di oliva. Controlli; 1,0 cc di oho di oliva. , t/l)Iniezione sottocu- 4.25 mg in 1,0 cc di olio di oliva. tAllCA Conttolli: l.o cc di olio di oliva. 4h/d/ Sd/sctt./ 5 sett.; 4h/d/ td/sctt./ 25 sett. lli/d/ 4d/sctt./ 25 scit. i/d/ 5d/sett./ 52 ett. 4, 3. 2 volte ogni due mesi e 1 vojta 1 iniezione Inalazione 10.000, 6.000 ppm. 4h/d/ sd/sett./ 5 X--Test No. 2--Route 3--Treatment 4--VC dosage 5-- Duration 6--Inhalation 7-- -Untreated controls 9--From 12 to 18th day of pregnancy 10--Intrapcritoneal injcctio 11--Subcutaneous injection 12--Body weight in olive oil! 13--4,3,2 times in every 2 months and 1 time (?) VVC 000006044 5 TA2LE X (rout'd) Cl) Specie Ceppo 9 RattoC"? 3 SpragueDawley Ratto SpragueDawley Ratio SpragueDawley Topo (9 ) Swiss Ratio Ratto Ratto Sprague-- Dawley SpragueDawley Wistar Criew^} Dorato Ammali (settimanc) 9 13 368 *3 280 21 - 262 II 250 (\0) 19 (fattrici) fclrabrioni tli 12 giorty;* 17 ^ 1 IIO 39 II -- 11 -- *lumber Durata df.c tfcESPF.Rt.MHNT ALLA DATA S)pvr PREbF.NTE ; <? TotaJe ^ KTMPP<> (in settirriac 0 309 577 64-96 130 265 288 260 36 220 263 545 65-120 55 60-190 510 60-150 146 3-54 62 220 60 30-40 26S 3=-70 34 59 34 63 34 34 21 Ratto Ratto Ratio Sprague-- Dawley Sprague-- Dawley SpragueDawley II 200 200 400 300 (t) IOO (c) 11 420 4=o S40 120 13 160 160 3=0 80 Ratto Ratto Ratto Sp ragrtc-- Dawley SpragueDawley SpraguePawley 3 150 21 Neonati^*^ So 1--Animals 2--Species 3--Strain 4--A^e (weeks) 5--Per Rroup 6-- -Duration of tests up to the present date (in weeks) 150 300 60 70 150 75 S9 43-46 7--Rat S--Mouse 9--Hamster 10--Breeding females 11--12-day embryos 12--Newborn 6 * 6| 1 i 6 i 1 6 6 1 2! 6 VVC 000006045 TABLE JI Test No. BT1; Experimental Results After 130 Week3 f /jo (sfoujiS and Gkuppi E TKATTAMESTI . ^fnedfneni~ ------------------------ -1 ANtMALl x_ (RATT iSl'RACUE- DAWXEV) A N l JI \ L 1 CO N.TUMORI fair** U with ~>Urnct Totaly Sopravvit.su Ci Carrinomi dc!!c gJiiamiolc rti Zyrnbal (A) Q Ncfro* blasiomi (B) An^iosarcomi {3 i' Fct'.ito (C) (^AUr, iocnliz* zazioni Altri1- tipi f/o Iocnlizzazioni 1 otal^ (0) N. N. N. N. N. N. trtf 96I) -AV 2. SCO ppm -- -- -- -- -- ---- fe ll) CV lo.ooo ppm 69 -- 16 4 7 -- 6 (H) 25 Tt III) GV 6.000 ppm 7= -- 7 4 3 2 (D) i (I) 24 IV) V') VI) 2.500 ppm ( C' GV 500 pprn V'c CV 250 ppm 74 C7 67 -- -- I 2 3 -- 6 H `3 (E) 1 (L) 24 / 4 7 2 (F) 1 (M) 16 6 4 2 (G) 2 <N) 12 VII) 0/50 ppm 64 3 -- -- -- -- ---- VlIIJ.N'Un tratta- % y'tncmo . . . 6S 1 -- --- ' _ --- * -- -- Totale . . . 577 5 2S . 24 45 9 11 101 1--Zymbal gland carcinomas 2--Nephroblastomas 3~Angiosar comas 4--Other types and/or locati ons 5--Liver 6--Other locations A) Lung metastases B) Metastases in liver and/or lungs and spleen C) Lung metastases D) 1 angiosarcoma in a fibrosating subcutaneous angioma; 1 auricular ossifying angiosarcoma E) 2 intra-abdominal angiosarcomas (1 near the spleen, 1 near the ovary); 1 lateroccrvical ossifying angiosarcoma F) 1 pulmonary angiosarcoma; 1 angiosarcoma of the uterus G) 1 intra-abdoninal angiosarcoma (near the spleen); 1 intr athoracic ossifying angiosarcoma. II) 2 adenomas of Zymbal glands; 1 neurileimyomn of the auri colar pavillion (ear lap ?); 2 mammary carcinomas; 1 cystoadenocarcinoma of the ovary. I) 1 sebaceous skin carcinoma L) 1 Zymbal gland adenoma H) 1 hepatoma with minimal deviation \ N) 1 Zymbal gland adenoma; 1 salivary gland carcinoma O) Various animals with 2 or more tumors VVC 0P0006046 TABLE III Test No. BT3; Experimental Rnults After 59 Keeks ^ (same headings as in Tabic II) Gruppi TRATTAMENTI Avr 'f Al.t (RATTJ SPRAGUE- Dawley) AKIUAU CO S T U M O R mi dcllc Ntfro- TotaJe Soprav- "hiandolc blasiocni VlSSUtl di Zymbai Angiosarcomi Fegaio AKre locali zation! AUri npi e/o iocaliz- zatiom Totalp W N. N. N. n: N. N. -re I)' 'CV lo.ooo ppm II) 6.000 ppm rc. III) <3V 2.500 ppm IV) <?V 500 ppm V) <jV 250 ppm VI) 50 ppm VII) Ncssun trauamemo .... 60 60 60 60 60 60 *90 36 48 54 S<> 44 50 iaj 3 (> l (3) -- <2> -- (I) -- -- (2) -- (2) - (0 -- -- -- - (2) -- (3) -- (0 -- (i) -- (I) -- ------ _ -- (0 -- -- -- -- -- (4) 3 (15) -- t (9) -- (0 - (5) -- -- (2) -- - (0 ---- -- ---- Totale . . . 550 471 4 (17) -- (5) -- (8) - (t) -- (5) 4 (32) (1) The number of tumors found in test no. BT1, after 59 wee^s, is shown in parentheses. (2) Some animals with 2 tumors TABLE IV Test No. BT6; Experimental Results After 34 Keeks (same headings as in Table II) Gruppj E TRATTAMENTI rc- xy CV 30.000 ppm (ratAtni Simtk\uaci'eDawley) A X I M A L l CON TUMOR! Totnlc SopravviuU Carcinoini dcllc iglliiZi.yimmtlomlol NcUoblascomi Angiosarcomi Fcgato lzoAaiznliilroiczn-i AJtri tliopeinlcizfo- Totals zaziom N. N. N. N. N. N. 1j 60 60 2 --____ -- -- i 8 VVC 000006047 TAP' ' V Test No. CT5; Experimental Results After 68 Weeks (same headings an in Table II) GftUPPi TRATTAMENTI - ANIMAL! {RATT1 Srrag C E* Dawley) Asm Ul CO N T U >1 O R I TotaJe 5"pmvYIS}Uti Cnrcino* nii tlcllc plnnnifl<.` til Zymbal N'cfroblastoini Angiosarcomi Fcg.no zaziont W Allri tipi e/o localiz- zazioni N. N. N. N. N. CV io.ooo ppm Faltrici .... 3 38 ---- ------ CV G.oooppm Fattnci .... 3 28 -- -- -- ---- CV io.ooo ppm Nati................... CV 6.000 ppm N'ati................... 54 32 50 3 ---- ---- 1-- t-- N. -- -- 1 1 TOTALE . . . 146 136 -- -- -- (t) Souocute. 3 --3 (1) Subcutaneous 1) VC has an oncogenic effect under the experimental condition^ tested by us. It induces Zyrr.bal gland carcinomas (Fig. 1), nephroblastomas (Fig. 2), and angiosarcomas of the liver (Figs. 3, 4) and of other tissues and organs (Figs. 5, 6) in the rat; in the mouse, it induces pulmonary adenomas and adenocarcinomas, mammary carcinomas, and hepatic angiosarcomas. 2) There is a relationship between dose and response. 3) Nephroblastomas and Zymbal gland tumors can be bilateral. j j 4) The hepatic angiosarcomas are polycentric. j 5) In the animals treated, with or without angiosarcomas, diffuse vascular alterations in various tissues and organs are often present, consisting of a simple, distypical (untypical ?) and frankly atypical endothelial proliferation. The oncogenic action on the vessels is, therefore, considered as a systemic effect. - vVC 00000604S TABLE Vl Test No* I3T4; Experimental Lesu s After 34 Weeks 'CSujiSS x" 7'roups and Animali r (topi Swiss) ttriimixrs "J* Animali cos tumori Ctf.VPPt -TftATTAMENTr fazortmetit* Treats Trattati Sury)yor$ Sopravvhsuti ^dcnomi | "^VVW tin- tc adeno- cart morrul carcmomi ddt.i | sarcorni del m.irn- del poUnonc mdla 1 2 3fc4g.-xio oy.Mtn tp c/o Incalizzationi <* 1 ? [Total? 0 Total* N. N. N. N\ Vo I) cv 20.000 ppm rr II) CV 6.000 ppm i. III) CV 2.500 ppm rv IV) GV 500 ppm T* f V) CV 250 ppm 30 J jo 30 JO jo 30 30 3 3 60 60 60 60 60 8 (5 26 11 21 32 13 =4 14 26 23 2 t 37 40 44 22 12 6 8 4 5-- 41 3 2t 1 ---- 1 2 . ---2 ---- VI) CV 50 ppm 30 30 60 16 26 42 -- I ---- f N. i *3 13 i ,6 !9 5 l VII) Nes^un trattarnento .... 80 70 IJO - 61 6l 122 -- -- '-- ---- i\ 1 0i TOTAL^ . . . i6 $lO 146 197 343 42 IS 3 5 47 >-- (l) Ncllc feminine. (2) I carcinoma sqnamocellui.-ue, I chcrato.icaruom.i e r emar)iouia della cute. (3) 1 linfosarcorna timico, 1 carcinoma nasopanctalu. (4) Diversi animali ci(>n due o piu tumori. ___ . j 1-- Lung adenomas and adenocarcinomas 2-- Mammary gland adenocarcinomas 3-- Liver angiosarcomas 4-- Other types and locations (1) in females (2) 1 squamous cell carcinoma, 1 keratoacanthoma and 1 skin hemangioma. (3) 1 thymus gland lymphosarcoma, 1 nasoparietal carcinoma. (4) various animals with 2 or more tumors. 10 VVC 0000060^9 6) The observation of three ossifying angiosarcomas suggests new hints (cues) for a different pathogenetic interpretation of the acrooteolysis found in workers exposed to the action of VC. 7) Up to the present time, we have not observed any acrosteolytic lesions in rats treated by us. Carcinomas of Zymbal glands, hepatic and extrahepatic angiosarcomas and nephroblastomas have never been observed in untreated rats of our Sijrague- Dawley line. The only three cases of Zymbal gland carcinomas noted [in untreated rats were found by Dr. Tannenbaum et. al., in 1962; thesejanimals were Sprague-Dawley rats. ! To the best of our knowledge, spontaneous nephroblastomas and hjeoatlc angiosarcomas haye never been reported in rats. Nephroblastomas havle never been induced experimentally. Hepatic angiosarcomas have never been induced experimentally in rats with diethylnitrosamine (Reuber and Lee, 19GS; Hadjiolov, 1972). In mice, hepatic and extrahepatic angiosarcomas have been induced with O-aminoazotoluene (Andervont et. al., 1942; Andervont, 1950) and with p-dimethylaninobenzene-l-azo-2-naphthalene (Mullay and Saxon, 1953), and also with other agents, including urethane, diethylnitrosamine, dimethyln:.trosamine7 and dimethylhydrazine. In the rabbit, angiosarcomas have been induced with Thorotrast j (Zeithofer and Speiser, 1954). In man, angiosarcomas are rare. I In 1953, Landclls, in susanarizijng the status of angiosarcomas described in the literature, collected 11|7 such cases, of which only 21 were hepatic angiosarcomas; there seems to bej an increase in the number of such tumors in recent years. ! In man, the literature has recorded one case of hepatic angiosarjeoma induced by radium (Ross, 1932) and numerous cases of hepatic angiosarjeomas induced by Thorotrast ('lac Mahon et. al., 1947; Ludin, 1953; Da Silva! Morta et. al., 1965) and arsenic (Roth, 1957). As soon as it became clear, about 11/2 years ago, that VC provides an explanation of the oncogenic effect described here, wc have immediate;.y communicated this fact to not only the Society of the European Cooperative [ Group, but also to other major producing companies in the world. Our data have provided a point of orientation (direction) for clinical obsorvadions and epidemiological studies. 11 000006050 vve At the end of December, 1973, a worker in an American VC plant di^d from a liver disease, an autopsy disclosed the presence of an hepatic ! angiosarcoma. : Retrospective studies performed during the past few weeks have diLclosed 3 similar cases (7_ in the USA and 1 in Great Britain) of hepatic angiosarcomas, which in the past either have not been correctly diagnosed or have not been correlated with occupational exposure (Figs. 7, S). Such a number of cases will probably increase in the future. In the USA and in Germany, some workers exposed to VC and suffering from a suspected liver disease, are now kept under constant observation* la conclusion, we hope that experimental carcinogenicity tests will become a rule prior to the approved release into the ambient atmosphere of new agents, and that more work is done in that direction and less timej is spent on scholarly discussions (which is often done at sessions of committees and congresses) concerning- the validity and extrapolation to man of experimental results, for which basic requirements are often lacking. ! 12 VVC 000006051 PLATE I Figure 1--Carcinoma of Zymbal glands, scarcely (barely) differentiated, of the solid type, in a rat exposed to VC. llematoxylin-eosin. X 125 Figure 2 Nephroblastoma in a rat exposed to VC. Hematoxylin-eosin. X. 125 Figure 3--Hepatic angiosarcoma in a rat exposed to VC. Hematoxylin-eosin. X 125 Figure 4--Same as Figure 3. 13 VVC 000006052 PLATE II Figure 5 Laterocervical ossifying angiosarcoma in a rat exposed to VC. Heraatoxylin-eosin. X 125 Figure 6--Same as Figure 5. X 315 Figure 7--Hepatic angiosarcoma in a worker engaged in PVC production. Hematoxylin-eosin. X 125 Figure S--Same as Figure 7. 14 VVC 000006053 Bibliography Avoervont H. R., Gradv H. C. .-.r.d Eduards j. E., J. nat. Cancer. Inst. ,J, *31 (1942). AN'DERVONT H. B, J. nat. Career Inst.*, to, 9:7 (1950). Da Silva Uokta J., ahuat J. D.. Cayoli~v Da Motta L. and Roruz M*; L.. *The Lancet*, 301 (31 lug4tO 1963). HADJIOLOV l>.. N'copUsma*. jg. ill (1972). Landllls In: Kavex R. U'., * Cancer*. 2. 512 (1958). LC'UIN' M., Schwcii. Z. alt^.-Pash. , x<5, 9S7 (1953). MacMahon* M. E., Ml*ri*hv A. S. and Baths M. !., lAmrr. J. Path. *. 33, 5S5 (1947). MULAY A. S. and Saxv.S K. A.. *J. nat. Cancer Inst.*, 13. 1239 ('933). Kf.CHkk M. D. and Li.c C. \W, J. nat. Cancer Inst.*. 41, 1133 (u/jS). Koss J.M., * J. 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Nota di Cesare Maltoni e Giuseppe Lefemine, pre^entata (%) dal Socio G. Favilli. SUMMARY. -- A wide project of correlated and integrated experiments, performed for testing the carcinogenic potentialities of vinyl chloride (VC) (a monomer of hi^h industrial importance), is presented. The results showed that VC induces Zymbal's gland carcinomas, nephroblastomas, and hepatic and extra-hepatic angiosarcomas, in rats, and pulmonary tumour^ mammary carcinomas and liver angiosarcomas, in mice. The experimental data have oriented the clinical observations and the epjdcmiological investigations, which have recently brought to the detection of the early ejases of liver angiosarcomas among exposed workers in the U.S.A. and in the L'.K. ; The experimental carcinogenicity bio-assays of VC should be constdeijed therefore highly predictive. They represent a convincing example for potentiating experimental testing for all new industrial compounds, and for the ones already widespread, but on whose biological effects we are still ignorant. . Jn queste ultime decadi il numero e la quantita di agenti oncogeni prodotti e diffusi nell'ambiente di lavoro sono aumentati e vanno aumentando in ma- niera preoccupantc. Dalle fabbriche gli agenti oncogeni vengono immessi nell'ambiente generale diventando in tal modo un problema ecologico. Quale conscgucnza di questa situazione vicne registrato aumento dei tumori professional! e da agenti esogeni ambientali in senso |ato. La maggior parte degli agenti oncogeni present! nell'ambientd dell'uomo sono stati idcntificati sulla base di studi epidemiologici rctrospdttici. La prova epidcmiologica dovrebbe essere evitata. Andrebbero \ iuvecc ese- guiti per tutli gli agenti di nuova produzionc ed uso sisteniatici saggi sperimen tali per predire le loro eventuali potenzialita oncogene. Tali saggi non vengono tuttavia eseguiti in genere in maniera sistematica, essen2ialmente per due ragioni. La prima consiste nella mancanza di una normativa. La seconda nel fatto che, poiche spesso il disegno e la jeonduzione degli esperimenti non sono adeguati e pertanto lc loro risultanze rjon estrapo- labili airuomo, attorno ad essi si e creato un ccrto scetticismo. A nostro avviso invece il saggio sperimentalc, se correttamentB impostato e attuato, ha un alto valore predittivo. Ne e un esempio quello che qui vi riferiamo. A nostro concjscenza e la prima volta che mediante un saggio sperimentale vicne previsto don assoluta precisione il rischio oncogeno, 1'entita del rischio e i substrati bersaglio.(*) (*) Nella seduta del 9 marzo 1974. VVC 000006056 2 Lincci -- Rend. Sc. fis. mat. e nat. -- Vol. I.VI -- marzo 1974 Le presenti indagini si riferiscono a saggi di cancerogenicita del cloruro di vinile (CV). Questo monomero e di grande importanza industriale. Esso e usato nella produzionc di cloruro di polivinile (CPV), come copolimcro nella produzione di saran e di altre plastiche, come solvente e come intermedio chimico. Per un breve periodo e stato impicgato anche in anestescologia. II CV e prodotto nella quantita di circa 12.000.000 di tonncllate all'anno. Vanno incontro a rischio di essere esposti a questo prodotto: 1) gli operai addctti alia produzione di CPV e di altre resine di cui e costituente, alia produzione di CV e alia utilizzazione industriale di CV per altri scopi; 2) gli operai che utilizzano il CPV; 3) gli abitanti di zone circostanti le fabbriche in cui viene prodotto CV e CPV; e 4) sc pure in misura minore, coloro che utilizzano o vengono a contatto con plastiche a base di CV o con materiali in esse contenuti. II progetto di saggiare il potenzialc oncogeno del CV fece seguito ai risultati preliminari del lavoro pionieristico del prof. Viola, presentato al X Congresso Internazionale sul Cancro (Houston, 1970) e che lu in seguito pubblicato su Cancer Research nel 1971 (Viola e coll., 1971). I risultati del prof. Viola indicavano che I'esposizione a 30.000 ppm di CV, 4 ore al giorno, 5 giorni la settimana, per 10 mesi, produceva tumori nel ratto. Neirinterpretazione del prof. Viola questi tumori originavano dalla cute, dal polmone e dalle ossa. Immediatamente dope il resoconto di Houston entrammo in contatto con il prof. Viola, che gentilmente mise a nostra disposizione le sezioni istologiche dei suoi tumori e il suo resoconto in extenso, ancora in pubblicazione. Sulla base di questo materiale noi raggiungemmo le seguenti conclusioni: 1) nelle condizioni sperimentali del prof. Viola il CV mostrava chiaramente un effetto cancerogeno sul ratto; 2) 30.000 ppm di CV erano una dose cstremamente alta; 3) i tumori clcscritti come cutanei originavano dalle ghiandole di Zymbal, che sono sensibili ad un largo spettro di agenti cancerogcni (2-acetilaminofiuorene, benzidina, idrocarburi policiclici, aminostilbene, uretano, ecc.); 4) i tumori descritti come polmonari erano in realta metastasi da carcinomi delle ghiandole di Zymbal; le localizzazioni neoplastiche polmonari erano osservate tutte in animali portatori di tumori delle ghiandole di Zym bal ed erano in tutto e per tutto sirr ili a questi tumori. Si impose pertanto 1'urgenza d: ricerche sistematiche per chiarire u!teriormente il tipo e il grado di effetto cancerogeno del CV con particolare riguardo a quci fattori sperimentali, correlati con 1'esposizione, quali la via di somministrazione, la concentrazione, la durata, ecc., che possono dare piu dirztte indicazioni circa il rischio delle condizioni dell'ambicnte professional. o c A qu Bologna s dei tumor a potenzi; Montedisr e la Rhor Effetti Bi Prim preparare Lo si e controll; cromatogi zioni vari roditori < inossidabt II C\ zata prim contcnevr Gli * Sprague-1 gli animaJ qualunqu* per cui no Sono prograrmr sulla base II pi; Esser in relazio trattamen Tnolti centare d< Tutti Alla mort esaminati scapolare, lo stomact zampe e > alle dost |. radiologic; genza di Sono basse, qu; f el cloruro sato nella roduzione mico. Per ; prodotto s di cui e li CV per prodotto a contatto uito ai ritato al X juito pub- x> ppm di ori nel j dalla ntatto con stologiche one. mclusioni: -ava chia- e di Zym(2-acetilaano, ecc.); si da carpolmonari e di Zym- arire ulteare riguardi sommimi dirette onale. O C. Mai.tONJ e G. LEFEM1NE, Le po/emi.ali:a dei saggi sperimentali, etc. 3 1 A questo proposito poiche l'lstituto di Oncologia ed il Centro Tumori di Bologna sono particolarmcnte spccializzati in studi di prevenzione q controllo dei tumori, la Montedison, la maggiore p-oduttrice italiana diCV, si torientata a potcnziare il nostro programma di saggi sugli efTctti biologici dell CV. Alla Montedison si sono in seguito unite la ICT (Gran Brctagna), la Solvaiy (Belgio) e la Rhone-Progil (Francia) (GruppoCooperative Europco per lo Stiudio degli Effetti Biologici del CV). Prima di iniziare la fase operativa di questa ricerca e stato Inccessario preparare condizioni idonce per l'esposizionc per via inalatoria. r Lo studio e la costruzione di un apparato per esposizione projgrammata e controllata ha richiesto alcuni mesi. Il controllo viene cseguito mediante gascromatografia. Un tale apparato rende possibile l'csposizione a concentrazioni variabili da 30.000 ppm a 50 ppm, e il trattamento simultanfco di 1200 roditori da esperimonto. Essenzialmcnte 1'apparato e costituito jdi acciaio inossidabile c cristallo. Il CV e stato fornito dalla Montedison. Ciascuna fornitura e stBta analiz- zata prima dcll'uso per determinare le eventuali impurita: il CV da noi usato conteneva impurita di ordine trascurabile. Gli esperimenti sono stati condotti principalmente su ratti | del ceppo Sprague-Dawley; sono pure stati usati ratti Wistar, topi Swiss e crjiceti. Tutti gli animali eccetto i criceti sono stati allevati nel nostro Istituto iper anni e qualunque sia stato il loro uso essi sono stati sottoposti a complete autopsia, per cui noi conosciamo la loro patologia spontanea correntc. Sono stati iniziati in sequenza 14 esperimenti. Alcuni di essi! sono stati programmati fin dall'inizio, altri invece sono stati ritenuti necessari .in seguito, sulla base dei primi risultati sperimentali. 11 piano degli esperimenti alia data attuale e presentato nella iTabella I. Essenzialmente abbiamo voluto verificare 1'azione oncogen^ del CV, in relazione a vari fattori: vie di somministrazione, dosi, durata h ritmo dei trattamenti, specie a ccppo animalc, ed eta degli animali, Inoltre abbiamo voluto saggiare 1'eventuale possibility d'azione traspla- centare del composto. Tutti gli animali sono tenuti sotto osservazione fino a morte Ispontanea. Alla morte su ciascun animale viene eseguita una autopsia combleta. Sono esaminati istologicamcnte di regola: le ghiandole di Zymbal, il g:*asso inter- scapolare, le ghiandole salivari, la lingua, i pojmoni, il fegato, i rerli, la milza, lo stomaco, diversi segmenti dell'intestino, la vescica, I'encefalo, Id ossa delle zampe e ogni altro tessuto con lesioni patologiche. Tutti gli animali esposti alle dosi piu alte (30.000 e 10.000 ppm) con o senza tumori vengonp esaminati radiologicamente durante il trattamento e/o alia morte, per verificare Finsor- genza di eventuali lesioni acrosteoiitiche. 5 Sono stati esaminati radiologicamente anche gli animali esposti a dosi piu basse, quando portatori di tumori. Oqq 0605 a .1. . 4 Lincei - Rend. Sc. fis. mat. e nat. - Vol. LVI - marzo 1974 N. DEGLI ESPERIMENTI Via Trattamento Dosi di CV Tabe^la Piano degli esperim^nti ------------------------------ -.SfJ---- Durata BTl . BT2 BT3 BT4 BT5 BT6 BT7 BT3 BT9 BT10 BT11 BTiz BTI3 BTI4 Inalazione Inalazione ig 000, 6.000, 2.500, 500, 250, 50 ppm. Controlli non trattati. Controlli trattati con 2.500 ppm di acetato di vinile (AV) 4h/d/ 5d/sett/ 52 sfett. 200, 150, 100 ppm. Controlli non trattati. 4h/d/ 5d/sett./ 52 sfett. Inalazione 10.000, 6.000, 2.500, 500, 250, 50 ppm. 4h/d/ 5d/sett./ 17 sfett. Controlli non trattati. Inalazione 10.000, 6.000, 2.500, 500, 250, 50 ppm. 4h/d/ 5d/sett./ 30 sjett. Controlli non trattati Transplacentale 10.000, 6.000 ppm. 4h/d/ 7d/ (dal I2| al :8d di gravidanza)! Inalazione Inalazione Inalazione 30.000 ppm. 4h/d/ 5d/sctt./ 43 sjett. 10.000, 6.000, 2.500, 500, 250, 50 ppm. 4h/d/ 5d/sett./ 52 sjett. Controlli non trattati. 10.000, 6.000, 2.500, 500, 250, 50 ppm. 4h/d/ 5d/sett./ 30 setj. Controlli non trattati Inalazione 50 ppm. Controlli non trattati. 4h/d/ 5d/sctt./ 52 sejtt. Inalazione Ingcstionc 10.000, 6.000 ppm. Controlli non trattati. 4h/d/ 5d/sett./ 5 sett.; 4h/d/ id/sett./ 25 sfett.; ih/d/ 4d/sett./ 25 s^tt.; l6,6 mg; 3,32 mg; 50 mg/kg peso corporeo in olio di oliva. Controlli; olio di oliva i/d/ 5d/sett./ 52 sct(. Iniezionc intraperitoneale 4,25 mg in t,o cc di olio di oliva. Controlli: l.occ di olio di oliva. 4, 3, 2 volte ogni jdue mesi e 1 volta Iniezione sottocu* 4,2' mg in I,occ di olio di oliva. tanea Controlli: 1,0 cc di olio di oliva. 1 iniezione Inalazione 10.000, 6.000 ppm. 4h/d/ 51 /sett./ 5 sett, j WC 000006059 C. MA1.T0N1 e G. Lefemj.VE, Le potenzialita dr/ saggi spcrimcntali, ec(. 5 I all'1 mar2o f$74 Specie Ceppo Ratto SpragueDawley Ratto Ratto Topo Ratto Ratto Ratto SpragueDawlcy SpragucDawley Swiss SpragueDawlcy SpragueDawlcy Wistar Criceto Dorato Ratto Ratto Ratto Sprague-. Dawlcy SpragueDawley SpragueDawley Ratto Ratto Ratto SpragueDawley SpragueDawley SpragueDawley ANIMALI Eta (settimane) ? 13 268 13 280 21 262 1 1 250 19 (Yatlrici) Embrioni di 12 giorni 17 ii 110 30 -- n-- II 200 11 420 13 160 13 21 Neonati 150 80 -- N. <? Totalc Per gruppo DURAfTA DEGLI ESPEfUMEXTl ALL|A DATA PRtSEN'TE (in $cttimane) 309 S77 , 64-96 130 265 545 65-120 288 550 60-190 260 510 60-150 36 146 30-54 30 60 60 220 220 30-40 268 268 32-70 200 400 300 (t) IOO (c) 420 840 120 160 320 80 34 59 : 34 68 34 34 21 6 6 6 150 300 60 70 15 75 -- 89 43-46 6 6 2 VVC 000006060 6 Lincei - Rend. Sc. fis. mat. e nat. -- Vol. LVI - marzo 1974 Nelle Tabelle 11--VI vengono esposti i dati preliminari relativi agli esperi- menti BT r, BT 3, BT6, BT 5, BT4. Per quanto concerne gli altri esperimenti dobbiamo attendere ancora per avere risultati. Da quanto presentato nelle Tabelle e dallo studio istologico emergono i seguenti punti: 1) il CV e oncogeno nelle condizioni sperimentali da noi saggiate: esso provoca carcinomi delle ghiandole di Zymbal (fig. 1), nefroblastomi (fig. 2) e angiosarcomi cpatici (figg. 3, 4) e di altri tessuti ed organi (figg. 5, 6) nel ratto, e adenomi-adenocarcinomi polmonari, carcinomi mammarii e angiosar' comi epatici nel topo; Tabella II Esperimento BT 1: Risultati sperimentali a 130 settimane Gruppi TRATTAME.NTI ANIMALI (RATTI SPRAGt.'E- Dawley) ANIMALI co N TUN ORl Totale Sopravvissuti Carcino mi delle Nefroghiandole blastomi di Zymbal (A) (B) Angiosarcomi Fegato (C) Altre localizzazioni Altri tipi e/o localizzazioni Totale (0) N. N. N. N. N. N. D AV 2.500 ppm 96 -- -- -- -- -- -- -- II) CVio.oooppm 69 -- 16 4 7 -- 6 (H) 25 III) CV 6.000 ppm 72 -- 7 4 13 2 (D) (I) 24 IV) CV 2.500 ppm 74 -- 2 6 14 3 <E> 1 (L) 24 V) CV 500 ppm 67 -- 3 4 7 2 (F) 1 (M) 16 VI) CV 250 ppm 67 -- 6 4 2 (G) 2 (N) 12 VII) CV 50 ppm 64 3 -- -- -- ---- VIII) Nessun trattamento . . . 68 -- -- -- -- ---- Totai.e . . . 577 5 28 24 45 9 n 101 A) Metastasi al polmone. B) Metastasi al fegato e/o al polmone e alia milza. C) Metastasi al polmone. D) I angiosarcoma in angioma fibrosante sottocutaneo; 1 angiosarcoma ossificante auricolare. E) 2 angiosarcomi intraddominali (1 vicino alia milza, I vicino all'ovaio); I angii sarcoma ossificante latcrocervicale. F) I angiosarcoma polmonarc; 1 angiosarcoma dell'utero. G) 1 angiosarcoma intraddominalc (vicino alia milza); \ angiosarcoma ossificante intratoracico. H) 2 adenomi delle ghiandole di Zymbal; 1 neurilemmoma del padiglione auricolare; 2 carcinomi mammarii; 1 cistoadenocarcinoma dell'ovaio. I) 1 carcinoma sebaceo della cute. I.) 1 adenoma delle ghiandole di Zymbal. M) 1 epatoma a minima deviazione. X) t adenoma delle ghiandole di Zymbal; t car cinoma delle ghiandole salivari. 0) Diversi animali con due o pm tumori. VVC 000006061 C. Mai.toni e G. Lefemine, Le potenzialtta dci saggi spcrimentati, eci. 7 Tabella III Esperimento BT3: Risultati spenmentali a 59 settimane a> Gruppi TR YTTAMENTI Axjmai-1 (rattiSprague- Dawley) Akim UI CON TUMORI mi dclle Nefro- Totale Soprav- ghiandole blastomi vissuti di Zymbal Angiosarcomi Fegato Altre Iocalizzazioni A-Itri tipi e/o iobaliz* zazioni Totale (2) N. K. N'. N. N. N. I) CV 10.000 ppm II) CV 6.000 ppm HI) CV 2.500 ppm IV) CV 500 ppm V) CV 250 ppm VI) CV 50 ppm VII) Nessun tratta- mento .... 60 60 60 60 60 60 190 3^ 48 54 56 44 5 183 3 00 1 (3) -- (2) - (0 -- -- ~ 0) - (2) -- (0 -- -- -- -- (2) -- (3) -- (0 -- (1) -- (0 -- ------ _ -- CD -- -- -- -- (4) 3 (15) i- 1 (9) - CO -- (5) r~ -- (2) -- - CO i-- -- ---- Totale . . . 55 47i 4 (17) - (5) - (8) - CO f (5> 4 (32) (1) Tra parentesi viene indicato il numero di tumori riscontrati neH'esperiment|o BTi, dopo 59 settimane. (2) Alcuni animali con due tumori. ! Tabella IV Esperimento BT6: Risultati sperimentali a 34 settimane Gruppi e TRATTAMENTI Animali (rattiSpragueDawley) Animali con tumori Totale Sopravvissuti Carcinomi deile ghiandole di Zymbal Nefroblastomi Angiosarcomi Fegato Altre localizzazioni Altri 1 tipi! e/o loc^liz- Totale zazhoni N. N. N. N. N\ N. I) CV 30.000 ppm 60 60 2 -- -- -- WC 0000Q6'062 8 Lincei - Rend. Sc. fis. mat. e nat. -- Vol. LVI - marzo 1974 Tabella V Esperimento BT5: Risultati sperimcntali a 68 settimane Gruppi E TRATTAMEXTI Animali (ratti Sprague- Dawley) Animali con tumori TotaJe Sopravvissuti Carcino mi delle Nefro ghiandole blastomi di Zymbal Angiosarcorni Fegato Altre localizzazioni 0) Altri tipi e/o localizzazioni Totale N. N. N. N. N. N. I) CV io.ooo ppm ,_.Fattrici .... 30 28 ____ ____ ____ _ ____ II) CV 6.000 ppm Fattrici .... 30 28 -- -- -- -- ---- Ill) CV 10.000 ppm Nati.................. 54 50 -- -- -- IV) CV 6.000 ppm Nati.................. 3* 30 -- -- -- 1 --1 --1 Totale . . . 146 136 ---- 2 --2 (1) Sottocute. 2) esiste una relazione tra dose e risposta; 3) i nefroblastomi e i tumori delle ghiandole di Zymbal possono essere bilaterali; 4) gli angiosarcomi epatici sono policentrici; 5) in animali trattati, sia portatori di angiosarcomi o no, sono frequentemente presenti alterazioni vascolari diffuse a vari tessuti ed organi, consistent! in proliferazione endoteliale semplice, distipica e francamente atipica. L'azione oncogena sui vasi va ritenuta pertanto un effetto sistemico; 6) 1'osservazione di tre angiosarcomi ossificanti suggerisce nuovi spunti per una diversa interpretazione patogenetica deiracrosteolisi in operai esposti all'azione del CV; 7) fino ad oggi nei ratti da noi trattati non abbiamo osservato lesioni acrosteolitiche. Carcinomi delle ghiandole di Zymbal, angiosarcomi epatici ed extraepatici, e nefroblastomi non sono mai stati osservati in animali non trattati della nostra linea di ratti Sprague -Dawley. I soli tre casi noti di carcinomi delle ghiandole di Zymbal, in ratti non trattati, furono riscontrati dal dott. Tannenbaum e coll, nel 1962: si trattava di ratti Sprague-Dawley. 00006063 yVC 0 C. MaltON'I e G. Lefemine, Le pote/izialita dei sajrji sftrimenlali, ccQ. 9 Tabella VI Espcrimento BT4: Risultati spcrimcntali a 34 settimane Gruppi E TRATTAMENT! Animali (topi Swiss) Animali CON TUMORI Trattati Sopravvissuti Aileuorni Adcnoe adeuo- carcinomi ca cinomi della del mam- polmone inella (*> Angiosarcomi del fegato Altri tipi e/o lpcalizz^zioni Totale M> rf * Totaie <3 Totale N. N. N. 'N. N. I) CV 10.000 ppm 30 30 60 8 18 26 12 5-- 3 (2) 13 11) CV 6.000 ppm 30 30 60 III) CV 2.500 ppm 30 30 60 11 21 32 13 24 37 12 6 4 1 2 P> 13 2 -- i-- 6 IV) CV 500 ppm 30 30 60 4 26 40 8 29 V) CV 250 ppm 30 30 . 60 23 21 44 4 2---- 5 VI) CV 50 ppm 3 3 60 16 26 42 -- ---- 1 VII) Nessun trattamento .... 80 70 150 61 122 -- -- -- ; -- -- Totale . . . 260 250 510 146 *97 343 \ 42 15 3 ;s 47 (1) Nelle feinmine. (2) I carcinoma squamocelJulare, 1 cheratoacantoma ej I emangioma della cute. (3) 1 linfosarcoma timico, 1 carcinoma nasoparietale. (4) Diversi animali con due o piu tumori. A nostra conosccnza sul ratto non sono mai stati riportati neftoblastomi e angiosarcomi epatici spontanei. j I nefroblastomi non sono mai stati provocati sperimentalmente. Angiosarcomi epatici sono mai stati indotti sperimentalmente nel ratto con dietilnitrosamina (Reuber e Lee, 1968; Hadjiolov, 1972). Nel topo angiosarcomi epatici ed extraepatici sono stati indotti con tf-aminoazotoluene (Andervont e coll., 1942; Andervont, 1950) e cod ^-dimen- tilaminobenzene-i--azo--2-naftalene (Mulay e Saxen, 1953), e con altri agenti tra cui urctano, dietilnitrosamina, dimetilnitrosamina e dimetilidrazina. Nel coniglio angiosarcomi sono stati provocati con thorotrast (Zeitlhofer e Speiser, 1954). Nell'uomo gli angiosarcomi sono rari. Landells nel 1958, facentfio il punto sulla situazione degli angiosarcomi descritti in letteratura, ne racccglieva 117 casi, di cui solo 21 epatici. Essi pero sembrano andare aumentand(o in questi ultimi tempi. VVC 000006064 IO ' Lincei - Rend. Sc. fis. mat. e nat. - Vol. LVI - marzo 1974 In letteratura sono stati riferiti nell'uomo, 1 caso di angiosarcoma epatio da infissione di radium (Ross, 1932) e numerosi casi di angiosarconhi epatic da thorotrast (MacMahon e coll., 1947; Liidin, 1953; Da Silva Horia e coll. 1965) e da arsenico (Roth, 1957). Non appena ci fu chiaro, circa 1 anno e mezzo fa, che il CV jesplicav? I'azionc oncogena su riferita, ne demmo immediata comunicazione Inon. sole alle Societa del Gruppo Cooperative Europeo, ma anche alle altre maggior Societa produttrici del mondo. I nostri dati hanno orientato l'osservazione clinica e l'indagine dpidemiologica. Alla fine di dicembre del 1973 un operaio di una fabbrica ameficana d CPV veniva a morte per epatopatia. L'autopsia rivelava trattarsi di angiosarcoma epatico. L'indagine retrospettica condotta in queste ultimo settimane ha( portatc al riscontro di 8 casi analoghi (7 degli USA e \ in Gran Bretagna) di Angiosarcomi epatici, che in passato o non erano stati correttamente diagnpsticati 0 comitnque non correlati con l'esposizione lavorativa (figg. 7, 8). Tale; numero e dcstinato ad aumentare. Negli USA e in Germania alcuni operai esposti al CV, con epatopatia sospetta, sono ora sottoposti a costante osservazione. A conclusione vogliamo auspicare che saggi sperimentali di jcancerogenicita diventino una rcgola prima che venga approvata rimmissijme nel* l'ambiente di nuovi agenti, e che si lavori di piu in tal senso e meno njella scolastica discussione (spesso occasione di Comitati e Congressi) sulla validity ed estrapolabilita all'uomo di risultanze sperimentali a cui mancanq troppo spesso requisiti di base. Bibliografia ; Andervoxt H. B., Grady H. G. and Edwards J. E., J. nat. Cancer. Inst. *,3, iji (194a). ANDERVOXT H. B., <1 J. nat. 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VVC 000006065 1974 sarcoma cpatico osarcomi epatici /a Horta e coll., il CV csplicava :azione non solo e altrc maggiori lagine epidemio- ca americana di lane ha portato rna) di angiosar- diagnosticati o ;). Tale numero con epatopatia ali di canceroimmissione nelmeno nella sco) sulla validita aancano troppo 1I o t Acc. Lincei - Rend. A. Cl. di Sc. P.s.. n.at. e nat - Vol. LVI. Mai.toni e G. Lefemine Le potenziaHia dei saggi sperimenlali, cc^. - TAV. I, st. * 3t 131 {1942). L., The Lancet , i. 585 (1947). >. * Cancer Res. *, VVC 000006066 Z.9C900000 DAA n s* i ' - -g 'Sij l '- L I / - *9 Sij - *S 'SIJ v - *t 'Stj v - -Stj aj - 'Z ut 33 - *i '3ijj D II `AVX " ` i]v)U2utix3$s iSSvs tap vjij vizu?io<f ^7 - 3.siiwaj3T o a iKonviv D IAT IA " ItU 3 *JtU sy *3S IP "ID "P PU3H - 13DUIT `33V ptr hotettzia- rAV. It. ^ I t ***** 6 V i'. ..I lx. * -v .a | 4 ! f, j I 1 C. MALTONI c G. LEFEMINE, Le potenzialita dei saggi sperimentali, epc. 11 SPIEGAZIONE DELLE TAVOLE I-II Tavola I Fig. I. - Carcinoma delie ghiandole di Zymbal, scarsamente differenziato, dijtipo solido, in ratio esposto a CV. Ematossilina-Eosina. x 125. Fig. 2. - Nefroblastoma, in ratto esposto a CV. Ematossilina-Eosina. XI2J. Fig. 3. - Angiosarcoma cpatico in ratto esposto a CV. Ematossilina-Eosina. X125. Fig. 4. - Angiosarcoma epatico in ratto esposto a CV. Ematossilina-Eosina. X 125. Tavola II Fig. 5. - Angiosarcoma ossificante laterocervicale in Eosina. X125. ratto o esposto a CV. Etnatossilina- Fig. 6. - Angiosarcoma ossificante laterocervicale in ratto esposto a CV. ElnatossilinaEosina. X3J5. Fig. 7. -- Angiosarcoma epatico in operaio addetto alia produzione di CPV. EtnatossilinaEosina. X125. Fig. 8. -- Angiosarcoma cpatico in operaio addetto alia produzione di CPV. EJnatossilinaEosina. X125. t .V ^ r- . V ** *~:B 'i VVC 000006068