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R&S 108481 .BIO-MEDICAL RESEARCH DOCUMENT DESCRIPTION FORM Duplicate in all cards:--> year as-1961- File number [Right justify [Numeric only] Sub-Index Code Author(s), as Last Name FS (No Punctuation) and coden for journal as JAMA preceeded by one blank space 1 20 21 AA-r/rtj?r, S P/tuPi, <7- 7try ^ 40 41 S'! 4 & 60 C ._________________ d' , P> 61 62 11 12 13 Title of Report; end with space-hyphen-hyphen-space. Follow with Index Terms, separated from each other with comma-space. Avoid other punctuation; do not abbreviate. 61 62 21 22 23 24 Source (Journal, Vol., Number, Pages, Date ) 1 2 ________________________________________________________________________ _ /fl,/ ^7 ^____________ 61 62 31 32 Brief Summary 12 10 SUMMARY: 61 62 61 62 63 64 U lONovembre 1979. Institut du Radium. Formation Curie. Paris "S i-: -j 'I ^ ^ V-' ^ -ijvc " - "j* , k . V *"Wl* 1 . - ;v. . ' , ' :- ; 7 4--- ;? > v -' ' ' " "J' JiixXe REUNION DU CLUB DE CANCEROGENESE CHIMIQUE '% rj!;,. sous la pr&idence du Professeur Raymond LATARJET Final report on VCM studies by Professor Cesare MALtONI 1 - 'ft, * ''1 I" -`-Vi* \'*e<S '' -f " .\ 'A i PUBLICATIONS ESSENTIELLES i i!! / / \_/ cndsmlologie animate et epidemioiogie humaine: ; cas du cfilomre de vinyle monomere If PUBLICATIONS ESSENTIELLES Editeur 10, avenue de Messine 75008 PARIS R&S 108483 Epidemiologie animate et epidemiologie humaine : le cas du chlorure de vinyle monomere XXs reunion du Club de Cancerogenese Chimique tenue le 10 novembre 1979 a I'lnstitutdu Radium - Fondation Curie - Paris, sous la presidence du Professeur Raymond LATARJET, avec la participation du Professeur Cesare MALTONI. COMPTE-RENDU INTEGRAL DES EXPOSES ET DEBATS, AUGMENTE DE : - Vinyl Chloride carcinogenicity bioassays (BT project) as an experimental model for risk identification and assessment in environmental and occupational carcinogene sis. - Final results of the effects of long-term exposure to a range of 14 doses by inhalation (from 30,000 to 1 ppm) and of 6 doses by ingestion (from 50 mg to 0.03 mg/kg b. w.), on SpragueDaw/ey rats, by Cesare Maltoni, Giuseppe Lefemine, Adriano Ciliberti, Giuliano Cotti and Donata Carretti (Institute of Oncology and Tumour Center, Bologna, Italy). R&S 108484 P & S 108485 SOMMAIRE Presentation de la Journ6e Pr Raymond LATARJET ......................................... 7 Historique du cas CVM Dr Jean BERROD................................................................................................ 9 Epidgmiologie animale 11 - Etude de I'effet cancrig&ne du chlorure de vinyle (projet BT) pre sents comme module pour ('identification du risque cancrig$ne et son evaluation dans I'environnement general et professionnel. R6suitats difinitifs des effets de /'exposition a long terme de rats SpragueDawiey a 14 niveaux de doses par inhalation (de 30.000 a 1 ppm) et a 6 doses par ingestion (de 50 a 0,03 mg /kg). Pr Cesare MALTONI .......................................................................................... 11 - Vinyl chloride carcinogenicity bioassays (BT project) as an experimental model for risk identification and assessment in environmental and occupa tional carcinogenesis. Final results of the effects of long-term exposure to a range of 14 doses by inhalation (from 30,000 to 1 ppm) and of 6 doses by ingestion (from 50mg to 0.03 mg /kg b.w.), on Sprague-Daw/ey rats. by Cesare MALTONI, Giuseppe LEFEMINE, Adriano CILIBERTI, Giuliano COTTI and Donata CARRETTI .......................................................................... 15 - Tables 1 to 108.................... (pages jaunes. yellow pages)....................... 21 IV Methodologie du traitement des donnees de I'Etude du Professeur MALTONI Dr Jean-Pierre TASSIGNON.................. '........................................................ 113 Epidemiologie humaine V L'industrie du CVM et du PVC M. Michel BONNEFOY...................................................................................... 127 VI Enqugtes europennes Dr Pierre LAZARD.............................................................................................. 131 VII Enquetes - Solvay (Tavaux, France) Dr Claude PIERRE.............................................................................................. 135 VIII Enquete nati nale fran^aise - Protocole Pr Robert FLAMANT.......................................................................................... 139 IX Discussion gnraie et conclusions ............................. 143 5 R&S 108486 Presentation de la journee par le Professeur Raymond LATARJET --a reunion que le Club de Cancerogenese Chimique organise aujourd'hui temoigne de I'interer qua nous portons tous aux problemes de la pollution genotoxique, mutag^ne et eventuellerr;ent cancerigne. Elle fait suite & une premiere reunion consacree au chlorure de vinyle, que nous avions organisee I'lnstitut Curie en 1976. L'un des grands obstacles la solution des problemes que pose cette pollution est que .''experimentation avec les faibles doses administrees sur des temps trs longs est impossible. Et, si i'on veut utiliser ^experimentation, il faut extrapoler avec tous les aleas que cela comcorte. La maniere la plus efficace de tourner cette difficulty, c'est le recours aux etudes epidemiologiques qui peuvent porter sur des groupes importants d'humains et nous dire parfois si tel type d'exposition, quantitativement d^fini, s'accompagne ou non d'un ecart significatif visa-vis de I'incidence normale de telle ou telle lesion genetique ou somatique. Avant de donner la parole au Dr BERROD, j'ai un certain nombre de remerciements expri mer aux membres actifs et aux animateurs du Club de Cancerogenese Chimique, societe scientifique particuli^rement dynamique bien qu'elle n'ait pas de finance, pas de cotisation, pas d inscription, mais une liberte totaie avec tout ce que cela comporte de flexibility. Je remercie M. Jean-Claude THOMAS et le Dr BERROD qui ont ete des chevilles ouvrieres particulidrement efficaces, je remercie le Professeur COUSSEMENT qui a mis I'amphithdatre notre disposition et mon ami le Professeur TRUHAUT, membre de I'lnstitut, de nous faire hommage de sa presence ; je remercie certains etrangers bien connus dans ce domaine, qui ont fait le ddplacement malgre les difficultes de transport que nous connaissons actuellement, en particulier le Pr HOPKINS, venu de Londres, le Dr Robert FROIS de Louvain, le Docteur de BOER de Hollande et le Pr VIOLA qui vient de Rome et en qui je salue le pdre de toute cette longue histoire. Je donne la parole au Docteur BERROD. 7 Historique du cas CVM Docteur Jean BERROD Monsieur le President, Mesdames, Messieurs, je voudrais, pour cette 20feme reunion du Club de Cancferogfenfese Chimique, faire un rapide survol historique de la pathologie de ce probifeme du chlorure de vinyle. Le chlorure de vinyle ou monochlorfethylfene fetait connu des chimistes depuis plus d'un sifecle, depuis sa dfecouverte par REGNAULT en 1835. C'est un dferivfe halogfenfe des hydrocarbures aliphatiques que Lessor de I'industrie des plastiques, aprfes la 2feme guerre mondiale, a dfeveloppfe pour des utilisations multiples. Le polychlorure de vinyle est obtenu fe partir du monomfere : le chlorure de vinyle, qui se polymerise trfes facilement, Le polychlorure de vinyle a etfe fe la base de nombreuses utilisations ; il est probablement le plus utilise dans le domaine des matiferes plastiques jctuelles, et ce, dans de nombreuses applications. Pour ne citer qu'un chiffre, I'industrie frangaise fe elle seule en proauit plus de 700.000 tonnes par an, Cette polymerisation du chlorure de vinyle se fait par oolyaddition de molecules de monomfere. La chafne macromolfeculaire s'allonge, presque fe volontfe, en processus mdustriel, ce qui veut dire que, dans I'hygifene industrielle, t'homme a fe intervenir beaucoup moins aujourd'hui que par le passfe ; mais il intervient tout de meme et, par conse quent, cela nfecessite des mesures de prevention extrfemement importantes. Cette polymerisation, pour donner differentes qualites fe la matiere de base : la resine, doit s'accompagner d'additifs multiples, en particular de plastifiants qui assurent la souplesse, ou de stabilisants qui fevitent la degradation. Que savait-on des proprietes toxicologiques du chlorure de vinyle monomere ? On en connaissait les effets narcotiques en raison d'une liposolubilite importante et d'une volatility egalement notable ; on avait connaissance de quelques cas de coma par inhalation massive et on savait surtout que c'etait un produit inflammable et explosif dans un melange avec des quantites d'air variant entre 4et 20 % en volume. Par consequent, I'industrie connaissait certaines caracteristiques, mais c'etait tout jusqu'en 1963, annee ou I'on a observe pour la premiere fois chez certains ouvriers, en ateliers de polymerisation, des troubles osseux trfes particuliers avec bandes d'osteolyse sur les phalanges ungueales de plusieurs doigts des mains, d'ou le nom d'acro-osteolyse qui a ete donne fe ce syndrome ; ils s'accompagnaient ou non de phenomenes circulatoires fe type d'asphyxie des extremitfes, comme dans la maladie de Raynaud. Cette pathologie a fait I'objet, en 1969, de trois publica tions au Congres International de Medecine du Travail de Tokyo et c'est IS que j'ai eu I'occasion de rencontrer le Professeur VIOLA, ici present, auteur d'une des premieres communications sur I'acro-ostfeolyse. Un an aprfes, on ne savait toujours pas si c'etait le chlo rure de vinyle monomfere ou I'un des ingredients qui fetait en cause. On savait que les troubles touchaient les gens qui manipulaient le plus le produit, et qui allaient dans les auto claves gratter leurs parois pour enlever les croutes rfesiduel- les en fin d'operation, et par consequent, pouvaient pre senter ces troubles des doigts. Mais ce qu'on savait aussi, c'est que certains avaient des troubles osseux importants sans aucune lesion cutanee, et il semblait alors difficile d'admettre qu'il n'y ait qu'une cause uniquement locale. On s'orientait done vers une maladie de systfeme. Je suis ally voir le Professeur VIOLA en Italie au sujet de ces problfemes d'acro-ostfeolyse et il m'a fait part confidentiellement, avec beaucoup de gentillesse confraternelle, de son inquietude : car, en poursuivant I'expferimentation animale pour voir les dfesordres osseux, il avait trouvfe des lesions tumorales extremement importantes avec des loca lisations diverses. Ceci I'a d'ailleurs amene trfes peu de temps aprfes, en 1970, fe faire une communication au Congrfes de Carcinologie tenu fe Houston, communication qui a eu un trfes grand retentissement. Devant ce probifeme, les industries franpaises et europeennes ont rfeagi. L'industrie italienne a confife fe ce moment-lfe au Professeur MALTONI, aujourd'hui parmi nous, fe I'lnstitut d'Oncologie de Bologne, une experimen tation animalifere chronique entreprise dans des conditions extremement rigoureuses. II en sera question tout fe I'heure par I'auteur lui-meme et c'est je crois fe ce jour, en matifere de cancferogfenfese chimique, la plus grande experimenta tion animalifere qui ait certainement fetfe entreprise dans le monde. La Socifetfe francaise Pfechiney-Saint-Gobain, la Socifetfe beige Solvay, anglaise ICI, ont dfecidfe de s'associer fe la Montedison italienne pour participer fe cette expferimentation entreprise par le Professeur MALTONI, qui a com mencfe en 1971 pour se terminer, comme il vous le dira, en 1977. Celle-ci a confirme les premiferes donnfees du Profes seur VIOLA. On fetait alors en droit d'esperer que, s'agissant d'un cancerogfene animalier, on n'aurait peut-fetre pas la dfesagrfeable surprise de trouver que c'fetait aussi un can cerogfene humain. Hfelas, fe la suite des experimentations du Professeur MALTONI, les Etats-Unis qui savaient ce qu'il en fetait au point de vue animalier, avec la rigueur qu'on leur connait et surtout la relative facility qu'ils avaient puisqu'ils possfedaient des registres du cancer, ont commencfe une fetude fepidfemiologique qui a abouti fe la dfecouverte de cas tumoraux humains fe type d'angiosarcomes hfepatiques. Nous fetions done devant un cancferogfene animalier et humain. Au monde industriel et de I'hygifene du travail se posait un problfeme difficile, dans un climat femotionnel et bien entendu comme toujours asset politisfe. Alors, que s'est-il passfe ? Aprfes de premiferes mesures prises en 1973, c'est en 1974, fe I'annonce de cette fepidfemiologie humaine, qu'on a commencfe fe erfeer des commis sions analytiques, techniques et mfedicales. Les mfethodes d'analyse du dfebut, par explosimfetre, ont fetfe rapidement remplacfees par d'autres bien plus sophistiqufees de dosage atmosphferique par chromatographie en phase gazeuse. Ensuite, on a fetabli dans les ateliers des mesures d'ambiance extrfemement prfecises qui aboutissent aujourd'hui fe une chromatographie industrielle automatique. II y a dans R&S 108487 R&S 108488 les ateliers une dizaine de points ou des sondes donnent des mesures toutes les deux minutes ; ainsi, chaque point est analyse & peu pr&s toutes les vingt minutes ce qui fait un total de I'ordre de plus de 700 analyses par jour, necessitant un ordinateur pour le traitement des donnees. Ceci aboutit chaque jour, pour un poste de 8 heures, k connaftre I'ambiance moyenne, ce qui est extremement important. J'ajoute qu'il y a un systeme d'alarme preregie pour avertir le personnel quand on depasse une dose determinee. Le personnel est done parfaitement au courant du suivi qu'il a, correspondant I'ambiance de I'atelier. J'ajoute aussi qu'il y a, precisement en cas d'alarme, des appareils d'analyse portatifs que Ton place aux endroits litigieux et qui par con sequent, k ce moment-IS, permettent une intervention en prenant les precautions ind/viduelles classiques en pareil cas comma, par exemple, le port de masques k adduction d'air. Differentes mesures de prevention ont ete prises par la sous-commission technique qui, conjointement, a suivi revolution des moyens de mesure, avec une verification bien plus poussee de I'etancheite des cuves, une diminu tion du temps d'ouverture des appareils et surtout la mise en oeuvre, en 1974, d'un d&troutage hydraulique prolonge grace auquel on a pu minimiser ('intervention de I'homme d'entretien ; de plus, un degazage prolonge fait que les doses trouvees aujourd'hui sont vraiment insignifiantes. En meme temps, se faisait I'education du personnel ; on a responsabilise la maitrise, cheville ouvri^re dans une entreprise, comme on le sait. Quant au problems medical, une commission des medecins franqais du chlorure de vinyle a essaye de prendre le problem en main. Nous savons tous la limite et la grande difficult^ que Ton a k trouver des paramfetres de surveil lance biologique precoce cancSrologique : nous n'en avons pratiquement pas encore aujourd'hui de valable ; mais nous avons tout de meme suivi revolution de la science et 6tabli un protocole de surveillance, en particulier par echotomographie h^patique. Par ailteurs, des 6tudes 6pidemiologiques ont ete entreprises : I'une, retrospective, pour retrouver le pass6 des individus, ce qui fut tr&s difficile, et I'autre, prospective, que nous d6marrons pour savoir, k partir de maintenant, ce qui se passera ulterieurement. Nous avons tenu de multiples reunions avec le person nel, en particulier lors de celles des comit& d'hygi6ne et de s6curit6, expliquant ce qui se passait et nous avons mainte nant dit au personnel que I'on pouvait, avec toute la pru dence qui convient en pareil cas, etre relativement optimiste pour I'avenir et penser que la pathologie devant laquelle nous sommes actuellement, et que nous risquons h6las encore de trouver puisqu'elle se rapporte au pass6, va s'attSnuer et, nous I'esp^rons, disparaftre dans un proche avenir, Voiia, tr6s rapidement, I'histoire du chlorure de vinyleL En conclusion, je voudrais dire simplement ceci : e'est que ce fut un problfeme exemplaire. Exemplaire parce que, devant une toxicity inconnue pour un produit de trfes grande diffusion, il a mobilise tout le monde sciemifique, medical, industriel et meme politique. Tous les biologistes, les 6pidemiologistes, les anatomo-pathologistes et les fondamentalistes se sont concertos k ce sujet, Tous les medecins concernes, confreres franpais et europeens, se sont reunis et leurs discussions ont te assez fructueuses. Les industries ont 6te solidaires ; aprfes les quatre society initialement associees aux travaux du Professeur Maltoni, il y a eu des contacts multiples avec d'autres societes europ^ennes et mondiales, et ceci malgr6 des interets materiels concurrents. Monsieur le Professeur TRUHAUT, mon cher Maitre, permettez-moi de rappeler k propos de I'industrie qu'un jour de I'ete 1975, alors que nous redigions une note destinee aux Cahiers documentaires de ITNRS, vous m'avez dit : il faut etre s6v6re et il faut donner k I'industrie des normes qui seront peut-etre contraignantes pour elle, mais nous ne pouvons pas faire autrement, compte tenu de ce que nous savons ; j'acquiescais parfaitement k ce propos bien sur, tout en etant quelque peu inquiet de les rapporter & la direction generate des polymteres de ma Societe mais, devant des fails aussi graves, elle s'est montree parfaite ment d'accord, sachant d'ailleurs dejk les mesures que I'on avait commence k prendre. Du point de vue politique enfin, ce probteme du chlorure de vinyle a permis d'instaurer un dialogue avec les Pouvoirs Publics, avec le monde syndical tenu au courant et qui s'est rendu compte que les seules notions de profit ntetaient pas de mise en regard de la protection et de la sante des ouvriers et des travailleurs. Je pense, en conclusion, que les efforts conjugues de tout le monde pour ce probteme du chlorure de vinyle ont sont, et resteront encore un modfele pour differentes etudes de corps chimiques que nous manipulons actuelle ment dans le monde industriel ou nous vivons. Je vous remercie de votre attention. Le Pr LATABJET donne la parole au Pr MAL TONI. 1A R&S 108489 Epidteniologie animate itude de I'effet cancerigene du chlorure de vinyle (Projet BT) presente comme modele pour ('identification du risque cancerigene et son evaluation dans i'environnement general et professionnel. .1 ksu/tats dkfinitifs des effets de /'exposition k long terme de rats Sprague-Daw/ey a 14 niveaux de doses par .nha/ation (de 30.000 k 1 ppm) et k 6 doses par ingestion (de 50 k 0,03 mg/kg). Professeur Cesare M ALTON I REMARQUES GENERALES i Introduction Tout d'abord, nous voudrions remercier le Pr Daudel et Pr Latarjet de leur aimable invitation k presenter ce rapjurt mis jour de nos etudes du chlorure de vinyle fCVM). ,'ous aimenons egatement exprimer notre plaisir de nous jrrouver a nouveau k I'lnstitut Curie. II y a quelques anntes, nous avions d6jS prfeent6 ici des . teultats prdliminaires de notre projet dtetude sur les effets long terme du CVM. Ce projet a 6t6 r6alis6 dans notre .boratoire de Canterogtetee expteimentale de Bentivo- :o (BTI prte de Bologne. Ce projet a 6t6 conjointement ubventionn6 par quatre soctetfe europtennes [ Montedien (Italie), Rhone-Poulenc (France), ICI (Grande Bretams), Solvay (Belgique) ] et le Centre des Tumeurs de Jogne (Italie). II rassemble 17 Etudes difterentes, com'anctes de fagon s4quentielle entre 1971 et 1975. . ensemble du projet a dur6 prte de 7 ans. Historiquement, .:s rteultats initiaux des premieres experimentations ont . jrqu6 les debuts d'une nouvelle approche du probteme le ia cancteogtetee professionnelle ou lite & I'environne'ent, en ce sens qu'ils ont montr6 de fagon 6vidente la nleur des experimentations animates dans ('identification .t revaluation du risque canctegfene chez I'homme. La prteente communication va porter sur les rteultats lefinitifs des 7 experiences de base du projet BT qui ont 6te ttefinies dans le but dtetudier les effets k long terme d'un raitement par le monomtee & diffteents niveaux de dose. Le produit a ktk administr6 par inhalation dans 5 Etudes et par ingestion dans les 2 autres. Ceci constitue la premifere presentation officielle d'une oartie des rteultats d6finitifs de I'aboutissement de nomDreuses anntes consacrtes k cette 6tude. Et, ce qui est encore plus important, nous sommes conscients de ('influence que les rteultats, qui seront prteentte ici, pourra avoir dans le choix des strategies pour la maitrise des effets du CVM et pour la definition des mesures de pre vention les mieux adapttes. De plus, cette reunion nous offre ici I'occasion de pre senter le projet dtetude de la carcinogtetee du CVM, comme un module experimental, non seulement pour 'identification d'un agent oncogene dans I'environnement g6n6ral ou professionnel, mais encore pour Evaluation du niveau de risque qu'il reprteente en fonction des doses et par rapport k d'autres produits. Ce second objectif revenant. d'aprte nous, pour I'avenir k la communaut^ scientifique qui se trouve impliqute dans la canterogtetee dans I'environnement gteteral ou professionnel. 2) Strat6gie d'identification et devaluation du risque dans I'environnement g6n6ral ou pro fessionnel C'est un fait connu que I'induction de processus canc6reux chez I'homme depend largement de I'exposition k des agents carcinogtees qui peuvent se trouver dans I'environnement gteteral ou professionnel. C'est un fait 6galement connu que certains de ces agents sont naturels, et d'autres syntftetiste par I'homme, Le nombre de ces derniers peut augmenter dans I'environnement humain, car le ddveloppement de la chimie de synthtee amdne la fabrication de nouveaux produits. On accepte-gtetealement I'idte que la meilleure arme pour maitriser le cancer, c'est la surveillance du potentiel carcinogdne de I'environnement. Pour rteliser une telle strategie, il faut commencer par depister le risque carcinogtee, et ensuite prot^ger I'hurnanitk. On peut remarquer de fagon generate que la strat6gie scientifique, pour depister le risque industries est diffteente selon qu'il s'agit d'agents dej& largement repandus dans I'environnement, ou de produits nouvellement syntftetiste qui, presents en laboratoire, ne sont pas encore ni fabriques en quantite, ni largement diffuses. On admet habituellement pour ces derniers qu'un dia gnostic prteoce d'un effet carcinogfene suffit pour en dteourager la production si I'homme devait y dtre expose. Pour des agents dj& r6pandus, les mesures de protec tion - quelque soit leur nature (actes, r^glementations, perfectionnements technologiques, etc.,.) - rteultent non seulement de I'identification du carcinogtee, mais aussi d'autres facteurs de nature socio-teonomique et politique. II en rteultera en definitive des appreciations quantitatives du risque, du benefice et des possibilites de mesures tech niques de prevention ainsi que de leur faisabilite, Le rdle essentiel de la communaute scientifique sera, dans ce cas,d'apportef k tous ceux qui sont ainsi concern6s, toutes les donnees susceptibles de contribuer k caracteriser ce ris que en termes quantitatifs et qualitatifs. On peut mettre en paraltele le degr6 de responsabilit6 de cette ttiche et le niveau de I'impact socio-teonomique de I'agent teudi6. Par consequent, I'approche scientifique -k la fois exp6rimentale et 6pid6miologique-, devra se porter au plus haut niveau de sophistication et de precision. Le protocole d'identification et devaluation du risque carcinogtee d'un agent tel qu'on peut se le reprfeenter aujourd'hui, en termes k la fois thteriques et pratiques, comporte une sequence dtetapes au cours desquelles on peut apprteier de fagon convcnable le risque pour I'homme (T.ir. Dans un premier temps, on prend en consideration toute denote biologique susceptible d'indiquer un effet mutagkne in vitro ou simplement proliteratif in vivo. Ensuite, sur un module animal, on recherche tous les faits nteplasiques, quel qu'en soit le type et quel que soit le systtene experimental. Puis on tente, chez ('animal, de se rapprocher des conditions d'exposition auxquelles I'homme est soumis, sans tenir compte du type de rdponse neoplasique.mais avec une attention toute particultere si la * Les tableaux auxqueh il est fait reference dans cet expose, se trouvent en pages 21 k 112 Ifeuillets de couleur/. ii R&S 108490 riponse se virifie comme itant de la meme nature que celle qu'on peut evemuellement trouver chez I'homme, On passe par differents niveaux de doses dans le systime experimental. On evalue le risque chez I'animal et parallilement on recueille chez I'homme les donnies ipidimiologiques. On Rvalue, dans la population exposie, le niveau et la durie d'exposition. On tente d'itablir des equivalences qualitatives et quantitatives animal-homme, en cherchant b ameliorer le systime animalier pour avoir la meilleure Equi valence. L'unique fagon de pouvoir extrapoler consiste b explorer au niveau experimental et au niveau humain avec la mime methodologie et la mime rigueur, avec des rifirences pricises quant au niveau d'exposition, b la dimen sion de la population exposie, et i toute pathologie qu'on peut y trouver. 31 L'effet carcinogine du CVM : une 6tape cl6 dans I'itude de la canciroginise dans I'environnement giniral et professionnel. Donnies historiques et contributions. L'histoire de la carcinoginiciti du CVM IT.2) n'est pas seulement importante pour le produit lui-meme (sa produc tion, sa diffusion, I'usage qu'on en fait) et pour le pro gramme de privention qui en dicoule, mais d'apris nous, elle Test encore plus pour ce qu'elle a apporti sur le plan mithodologique et scientifique b I'itude du problime giniral de la canciroginise dans I'environnement giniral et professionnel, et plus particuliirement industriel. La decouverte de l'effet carcinogine du CVM a eu pour consequence directe de susciter le plus grand effort jamais accompli, pour maitriser I'exposition b un carcinogine industriel sur le lieu de travail. D'ailleurs, i la suite de cela, nous avons tous pu voir le changement radical et soudain de I'orientation des responsables de la Santi Publique au niveau de la surveillance de la carcinoginise dans I'environnement general et profes sionnel et combien de travaux, d'efforts et de reglementations ont suivi dans ce domaine. Toutefois, dans une perspective plus large, I'aboutissement principal de I'itude de la carcinoginiciti du CVM, c'est d'avoir apporte des informations essentielles pour I'itablissement des protocoles scientifiques, et des mithodologies d'identification et devaluation des risques IT.3) ainsi que d'etablir des bases aux diveloppements et aux orientations scientifiques i venir (T.4). II. PROJET BT : LE PROTOCOLE 1) Planification et facteurs expirimentaux Les experimentations avaient eti planifiees pour itudier les effets d'une administration de CVM par diffirentes voies, b diffirentes concentrations, pendant des durees variables, en traitement continu ou discontinu et sur des ammaux de diffirentes espices, souches, sexes et ages. Le produit provenait toujours de la meme source. II contenait un tris faible taux d'impuretes (T.5). (I a ite administri par 4 voies diffirentes (T.6). Par inha lation, 14 concentrations ont eti etudiies, dont plusieurs selon des schemas de traitement differents (T.7). La voie par ingestion a fait I'objet d'itudes avec 6 con centrations et la voie intra-piritoniale a ite itudiee avec 4 doses IT.8). Quatre types d'animaux ont ite utilises IT.9). Les animaux (mis b part le hamster) etaient issus de lignies d'animaux utilisies depuis des annies de fagon routiniere dans notre laboratoire. II faut remarquer b ce propos que, quelque soit I'usage qu'on en fait, tous les animaux de notre colonie subissent des examens periodiques e't une autopsie complete nous donnant le maximum d'informations sur leur pathologie. Dans le projet CVM, comme dans toutes les itudes prolongees, les animaux itaient gardes en vie jusqu'a leur mor^ spontanee. Aucun animal, quette que soit I'expiriment^^^ tion, n'est sacrifie. Du point de vue mithodologique, I'ex^^^ men des animaux reste toujours le mime. Tout cela nous permet d'avoir des donnies assez pricises sur I'incidence des tumeurs dans la pathologie generate ( le tumorigramme base ), et, sur une periode de 12 annies d'activite expirimentale, de faire n'importe quelle confrontation entre les animaux et de noter aussi les changements possi bles dans la colonie elle-meme, dans son Evolution biologique. Les tableaux 10 b 16 donnent les schemas des experi mentations. 2)Conduite de I'itude Pour I'experimentation sur le CVM, comme pour toutes les itudes prolongees rialisees dans notre Laboratoire, nous avons suivi la meme procedure hautement standardi se et contrdlee. Nous voulons tout particuliirement souligner dans notre procedure standard de laboratoire, les points suivants : A) Produit: Chaque approvisionnement du produit utilise a ete examine dans le but de verifier s'il repondait aux stan dards requis. 8) Concentration : Les concentrations, en particular lorsque le produit etait administri par inhalation, etaient controlees de fagon continue par chromatographie en phase gazeuse. C) Modalites de traitement : Le traitement etait toujours administri par la meme personne, C'est particuliirement important pour le gavage car les animaux s'habituent au mime opirateur, 01 Contrd/e des animaux : La surveillance de I'itat general des animaux itait effectuee au moins 3 fois par jour. Tous les 14 jours, les animaux etaient soumis b un examen visant b dipister tout changement macroscopique. Ej Poids des animaux \ Les animaux itaient pesis tous les 14 jours pendant la durie du traitement et toutes les 8 semaines apres la fin du traitement. F) Autopsie : Chaque animal a fait I'objet d'une autopsie complite, Toutes les diffirentes parties du corps itaient explorees y compris le systime nerveux central. Les echantillons pour les coupes histologiques comprenaient le cerveau, les glandes de Zymbal, la langue, les poumons, le foie, les reins, les surrenales, la rate, le pancrias, I'estomac, les intestins, la vessie, I'uterus, les gonades et tout autre organe porteur de lesions pathologiques. Gi Histo/ogie : Les ichantillons itaient prilevis de fagon standardisie. Les coupes itaient habituellement coloriees i I'himatoxyline-iosine et, si nicessaire, par des techniques spiciales. Hi Examen histo/ogique : Toutes les coupes etaient examinies par un jeune anatomo-pathologiste et ensuite revues par un pathologiste confirmi. Tous les anatomo-pathologistes utilisaient la meme classification des lisions. 3) Classification des donnies Toutes les observations microscopiques et macroscopiques itaient glassies et codies selon le code de notre labo ratoire (T, 17). A la fin, chaque animal a fait I'objet d'une carte individuelle sur laquelle itaient noties toutes les donnies concernant les facteurs expirimentaux, la survie, le poids b 6, 12, 18 et 24 mois, et toute lision microscopique 12 ou macroscopique. Le tableau 18 nous en donne un exempis. -i) Presentation des donnees pathologiques les resultats de ('experimentation du CVM, aussi bien rue ceux de toute autre experimentation realis6e dans .-o;re laboratoire, sont toujours presentes avec les memes , ses de tables et dans la meme sequence. Ce type de presentation a ete rendu possible par la con- usance de la pathologie de base de I'anirnal utilise qui jus permet d'estimer approximativement les lesions -sndues, `Jotre procedure permet de comparer rapidement les ultats des differentes experimentations du meme projet ,=s resultats des projets etudiant differents produits. I Interpretation des donnes Les donnees ont ete soumises k I'analyse statistique. -.'.adoration statistique est capable de nous donner des j jltats extremement importants pour ('interpretation et la unification des resultats dans les Etudes, Nous devons dire que les tumeurs en relation avec le trai'nent du chlorure de vinyle sont surtout des tumeurs nremement rares et qui, pour apparaitre, necessitent de Linds lots d'animaux (nos groupes varient de 60 & 300 aniiux par niveau de dose). Bien que I'analyse statistique t un instrument de la plus haute importance pour I'interctation de la signification des resultats e long terme . essais in vivo, il faut remarquer qu'il peut y avoir de peti, s cifferences entre le groupe expose et le groupe temoin , 4i n'atteignent pas un niveau statistiquement significatif qui, pourtant, peuvent avoir une signification du point :e vue oncologique (en particulier dans le cas de tumeurs ui sont rares dans les colonies de I'anirnal donne), C'est pour cette raison que les resultats les plus imporLints doivent etre commentes e la fois & la lumiere de i'analyse statistique, et selon une approche biologique. Le protocole methodologique adoptb repond aux entires de ('edition recente des Bonnes Pratiques de Labora toire . Son application k tous )es differents projets realises dans iOtre laboratoire au cours des 10 demises annfes nous a narmis d'obtenir un ensemble de resultats qui peut constituer une base en vue de revaluation d'un risque partir de donnees experimentales. III. PROJET BT : RESULTATS 1) Resultats d6jci acquis Les resultats deje acquis (Maltoni 1977) peuvent etre resumes de la faqon suivante : a) Le CVM, lorsqu'il est administre par inhalation, inges tion ou, eventuellement, injection, induit des tumeurs de differents types, en des sites variables. b) Des tumeurs liees au CVM ont ete retrouvees chez tous les types d'animaux etudies. c) Le type de reponse tumorale varie en fonction de I'espece, de la souche et du sexe des animaux utilises. Pour certaines de ces tumeurs, la correlation avec le CVM a ete etablie, pour d'autres, cette preuve definitive n'est pas etablie (T.19). d) L'intensite de la reponse tumorale est fonction de I'tige : elle est plus nette chez I'anirnal nouveau-ne. e) On a pu observer des relations tranches dose-reponse. f) Le schema du traitement est un facteur tres important. Lorsqu'on reduit la duree du traitement, on observe une nette diminution de I'incidence tumorale. 2) Resultats definitifs des 7 experiences de base Les 7 experiences ont ete achevees en 1977. Les deux demises annees ont ete consacrees k I'examen de tout le materiel histologique (qui comptait pr&s de 100,000 cou pes), & la preparation de cartes individuelles pour chaque animal etudie, k la mise sur ordinateur et I'analyse statisti que des donnees. Les resultats biologiques sont donnes dans les tableaux 20 a 103. Le models de presentation etant toujours le meme dans nos experiences. Nous avons d'abord calculi la distribution des lesions regressives. Puis, pour chaque animal, nous avons etudie la distribution des modifications inflammatoires (abc6s cephaliques, meningites, broncho-pneumonies, pleurites, etc...). On a consider^ aussi la frequence des hyperplasies et des adenomes hypophysaires. Mais, k ces niveaux, nous n'avons pas note de grands changements. Nous presentons ensuite les donnees cancerologiques : aprfes les tumeurs les plus fr^quentes, nous donnons la dis tribution des tumeurs plus rares, puis nous analysons les differents types de tumeurs mammaires (en les divisant par type et par malignite), ainsi que les tumeurs vasculaires extra-h6patiques,etc... Nous procedons encore & I'analyse, non seulement des tumeurs, mais aussi des lesions pretumorales comme la proliferation angioblastique au niveau du foie avec les differents degres de proliferation (moyenne, forte, avec dysplasie) et I'hyperplasie et dysplasie du parenchyme hepatique avant de passer aux tumeurs hepatomes. Le tableau 104 resume I'incidence et le temps de latence de I'angiosarcome du foie en fonction de la voie d'administration et de la dose. Les lesions neoplasiques dont on doit, e notre avis, considerer la relation avec le CVM, sont repertoriees sur le tableau 105. Elies sont identifiees sur la base d'un seul ou de plusieurs des parametres suivants : a. Incidence nettement accrue. b. Survenue rare, ou exceptionnelle, dans la colonie de I'anirnal choisi. c. Correlation nette avec le CVM dans les autres experi mentations du projet. d. Relation dose-effet. e. Association de lesions pre-cancereuses. L'attention doit non seulement se porter sur les tumeurs prises isoiement, mais aussi sur leurs associations. Les donnees suivantes ont 6te analysees statistiquement par rapport au traitement pour chaque groupe d'exposition et pour chaque sexe : a. Taux de survie. b. Poids e 6 mois d'intervalle. c. Nombre de rats porteurs de tumeurs. d. Incidence des differentes tumeurs benignes et malignes. A) Taux de survie Le CVM a un effet net de raccourcissement de la vie qui est lie k la dose. Une analyse preiiminaire, effectuke sur ('experimentation BT 1 montrait que le raccourcissement de la vie etait independant de la frequence accrue des tumeurs. Ceci suggere I'existence d'une toxicite syst6mique et d'une possible correlation entre toxicite et canc6rog6nese. R&S 108491 B) Poids Aucun effet n'a yty observe si ce n'est y la dose de 30.000 ppm par inhalation, ou il y avait une diminution de la prise de poids. C) Lisions autres que cancdreuses L'incidence des lesions inflammatoires, ou histopathologiques rdgressives, ne semble pas, en g6n6ral, dypendre du traitement par le CVM. Ce n'est que dans les experimenta tions 8T9 et BT15 qu'il semble y avoir, au niveau du foie, une augmentation des lesions rygressives liee y la dose. II ne semble pas y avoir de relation avec d'autres modifica tions, telles que des hyperplasies de I'epitheiium respiratoire ou I'hyperplasie ad6nomateuse de I'hypophyse. D) Tumeurs L'analyse statistique utilisant le test de probabilite de Fisher (p < 0,05) donne les resultats suivants : a) 6 des 8 tumeurs considers apparaissent en exces significatif, au moins h un niveau de dose et au moins dans un sexe (T.106). b) Le nombre total d'animaux porteurs de cancers par groupe est en exc6s aux doses indiqu6es au tableau 107. c) On n'a pas observy d'augmentation du nombre de rats porteurs de tumeurs bynignes. La relation entre I'angiosarcome du foie, le carcinome des glandes de Zymbal, le n6phroblastome, le neuroblastome et le papillome du pr6-estomac, et le CVM, est montry par l'analyse des correspondances. Le test de probability exacte de Fisher avec son taux de confiance de 95 % n'est pas assez sensible pour les rela tions ci-dessus dans nos conditions expyrimentales. Du point de vue biologique, d'aprds nous, il faut souligner les rysultats suivants, bien qu'ils n'aient pas de signifi cation statistique d'aprfes les tests utilises. Angiosarcomes extra-h6patiques De localisation variable, ces tumeurs s'observent avec une incidence trs faible chez les rats Sprague-Dawley de notre colonie. Les resultats de I'exp^rience BTI et plus particuliyrement BT9, suggferent toutefois fortement une rela tion entre ces tumeurs et I'exposition au CVM. Cette rela tion est confirmee par l'incidence accrue de tumeurs vasculaires extra-hypatiques chez les souris traityes au CVM IBT 4). H6patomes Quelques cas d'hypatomes ont yty observys dans les groupes traitys, en particulier BT1. Cette tumeur est exceptionnelle dans notre colonie. Elle n'a jamais observye dans les groupes controles des 7 experimentations, Cette relation est confirmye par le fait qu'on a observy une forte incidence d'hypatomes chez le rat Sprague-Dawley aprfes une forte exposition nyonatale pendant un temps trys court (BT14I. Pour les tumeurs qui suivent, et compte tenu de leur rarete ou de leur absence, dans les colonies choisies, I'attention doit etre attirye sur leur incidence meme y des doses infyrieures y celles qui donnent des rysultats statistiquement significatifs dans les tests employes. Carcinomes de la glande de Zymbal Un excfes de tumeurs a yty observy jusqu'y 50 et meme 25 ppm. Angiosarcomes du foie Cette tumeur est extrmement rare dans les colonies utilisees (4 cas sur plusieurs milliers d'animaux non traitys). C'est pourquoi l'incidence de ces tumeurs est importante, meme y des doses statistiquement non significatives, ea particulier infyrieures y 50 ppm (5 angiosarcomes du fofl sur 120 animaux y 25 ppm, 1 angiosarcome pour 120 anF maux y 10 ppm), y 1 mg/kg de poids corporel (3 angiosar comes sur 150 animaux) et y 0,3 mg/kg de poids corporel (1 angiosarcome pour 150 animaux). N&phroblastomes La survenue de quelques-unes de ces tumeurs, aprfes inhalation de concentrations inferieures y 100 ppm et aprfes ingestion de 50 et 16,65 mg/kg de poids corporel, n'est pas le fait du hasard, d'apres notre opinion, etant donnye I'extryme rarete de ces tumeurs chez le rat. Neuroblastomes De telles tumeurs n'avaient encore jamais ete observees par nous sur des rats Sprague-Dawley que nous utilisons dans notre laboratoire comme temoins ou dans d'autres ex perimentations. C'est la raison pour laquelle nous etablissons un lien entre leur apparition et le traitement, myme y des doses inferieures y 10.000 ppm, comme 6.000 et 2.500 ppm. Pour autant que I'on prenne en compte I'ensemble des tumeurs malignes, I'excys chez I'animal traity doit etre rapporte au nombre total de tumeurs malignes par groupe. Une telle approche montre une corryiation avec ('exposi tion au CVM, meme aux plus faibles doses. La signification en termes oncologiques de ces rysultats aux plus faibles doses est mieux ytablie en considyrant I'ensemble des tumeurs reconnues dypendant du CVM plutot que ces tumeurs prises separement (T. 108). Aux doses infyrieures y 10 ppm et 0,3 mg/kg de poids, on n'a observy ni apparition, ni augmentation de ces tumeurs spycifiquement dypendantes du CVM. IV. CONCLUSIONS L'expyrimentation in vivo est un instrument important pour ('identification et Evaluation du risque. Toutefois, il est difficile d'obtenir des donnyes expyrimentales adyquates et leur interprytation reste dyiicate. De plus, il y a encore beaucoup y faire dans ce domaine, en particulier pour la recherche de modyies animaux permettant au mieux Extrapolation y I'homme. L'extrapolation des donnyes h I'homme reste, en fait, I'objectif final. Ce qui ne peut ytre obtenu au mieux qu'y I'aide des modyies disponibles pour lesquels la comparaison des donnyes animales et humaines est possible. Pour en revenir au CVM, des ytudes ypidymiologiques sur des groupes professionnellement exposys ont yty faites et se poursuivent dans diffyrentes parties du monde, en particulier en Europe de I'Ouest et aux USA, par ryfyrence y la pathologie gynyrale et nyoplasique. Ces donnyes sont importantes pour obtenir des indica tions sur les effets du CVM chez I'homme et ytablir un paraliyie entre la pathologie animale et humaine. De plus, si ces ytudes ypidymiologiques apportent des donnyes prycises sur I'ensemble du groupe considyry, sur le taux et les duryes d'exposition (afin de dyfinir des groupes homogynes), et rassemblent toutes les donnyes disponibles sur la pathologie, on aura alors I'occasion exceptionnelle de pouvoir comparer les donnyes animales et cliniques en termes qualitatifs et quantitatifs, et ceci aidera y trouver une ryponse possible au probiyme de l'extrapolation de I'animal y i'homme. R&S 108492 14 R&S 108493 ). vinyl chloride carcinogenicity bioassays iBT project) as an experimental model for risk identification and assessment in environmental and occupational carcinogenesis Final results of the effects of long-term exposure to a range of 14 doses by inhalation (from 30,000 to 1 ppm) and of 6 doses by ingestion (from 50 mg to 0.03 mg/kg b.w.), on Sprague-Dawley rats (1). CESARE MALTOIMI, GIUSEPPE LEFEMIIME, ADRIAWO CILIBERTI, GIULIANO COTTI and DONATA CARRETTI (Institute of Oncology and Tumour Center, Bologna, Italy) M) This report was presented on November 10, 1979, at the meeting of Le Club de Canc6rognse Chimique, at the Institut Curie, Paris (France). 15 R&S 108494 Fart I : GENERAL REMARKS 1) Introduction First of all we wish to thank Professor OAUDEL and Pro misor LATARJET for the kind invitation to present an up.7-date report of our studies on Vinyl Chloride (VC) and , io to express our pleasure to be once again at the Institut June. \ few years ago, we already presented here an up-dating , jort of the results of our experimental project on the '.q-term effects of VC. ''his project was carried out in our Laboratory of Experintal Carcinogenesis in Bentivoglio (BT), near Bologna It encompasses 17 different experiments, started in cuence from 1971 to 1975, and lasted nearly seven years, torically, the early results of the first experiments repre, tad the start of a new approach to the problem of envimental and occupational carcinogenesis as they clearly med the value of experimental bioassays in identifying c assessing the carcinogenic risk for humans. ' is present report deals with the final data of the seven : c experiments of the BT project, which were planned ,:udy the effects of long-term treatment with the mono at different dose levels, both when given by inhalation experiments) and ingestion (two experiments). 'cis is the first official presentation of part of the final come of many years of work devoted to a study. doreover, what is obviously more important, we are . :ie of the meaning of the data presented here in deci1) the strategies for the control of the effects of VC and :erining the most proper measures of prevention. -urthermore this occasion provides the opportunity of renting the VC carcinogenicity project as an experimen1 model not only for identifying an environmental and ..cupational oncogenic agent, but also for assessing the vel of the risk it represents in relation to doses and in omparison with other agents. The latter goal is, in our aw, die future task of the scientific community involved l environmental and occupational carcinogenesis. 2) The strategy for identification and assess ment of environmental and occupational risk it is well known that the onset of cancer in humans lar gely depends on exposure to environmental and occupatio nal carcinogenic agents. It is also known that part of these agents are natural and part man-made. The latter may increase in the human envi ronment in number, since the growing progress in synthe tic chemistry may lead to the production of new ones. It is accepted that the major tool in cancer control is the control of environmental cancerogenic potential. To carry out this strategy the first step is to detect the carcinogenic risks and then to protect mankind. In general terms, the scientific strategy for detecting industrial risks is different for newly synthetized com pounds which, while available in laboratories, are not yet produced and diffused on a large scale, and for agents already widespread in the environment. Usually for the former early indication of carcinogenicity is enough to discourage their production, if such produc tion may lead to human exposure. 121 The project was /ointly supported by four European Companies IMontedison, Italy ; Rhdne-Poulenc, France; Sotvay, Belgium; ICI. U.K.I, and by the Institute of Oncology and Tumour Cen ter of Bologna, Italy. The measures of protection for already diffused agents, whatever their nature (acts, rules, technological improve ments, etc...), are the result, not only of the identification of the carcinogens, but also of other factors of a socio economic and political nature. The final outcome will be the product of the value of risk, benefit, and the possibility and feasibility of measures of technical prevention. The major task of the scientific community in this case will be to provide the bodies involved with all the data which may contribute to the characterization of risk in qualitative and quantitative terms. The responsibility for this task parallels the level of socio-economic impact of the agents studied. Consequently, the scientific approach -both experimental and epidemiological- should grow in level of sophistication and accuracy. The protocol for characterizing the carcinogenic risk of an agent as it may be visualized nowadays, both in theore tical and feasible terms, relies upon a sequence of different steps through which risk assessment for humans could sui tably be reached (Table 1). 3) VC carcinogenicity as a milestone in environ mental and occupational carcinogenesis : its history and contributions The history of VC carcinogenicity (Table 2) is not only important in relation to the compound itself (its produc tion, diffusion and uses), and for the consequent program of prevention, but in our own view, still more important are its contributions, particularly on methodological and scien tific grounds, to the general problem of environmental and occupational carcinogenesis, with particular reference to the industrial field. The direct consequence of the discovery of VC carcino genicity was probably the greatest effort ever made for controlling the exposure to an industrial carcinogen in the workplace. Furthermore, all of us are aware how drastically and sud denly the orientation of Public Health in the control of envi ronmental and occupational carcinogenesis has changed since then and how much the work, the efforts and the regulations have since expanded in the field. However, in a wider perspective, the major outcome of VC carcinogenicity is having provided crucial information for the scientific protocols and methodologies of risk iden tification and assessment (Table 3), and the basis for future scientific developments and orientations (Table 4). Part II : BT PROJECT : THE PROTOCOL 1) Planning and experimental factors The experiments were planned to study the effects of VC administered via different routes, at different concentra tions, for various periods of times, by continuous or inter mittent treatment, on animals of different species, strain, sex and age. The compound was always supplied by the same source, and it contained a very low amount impurities (Table 5). It was administered by four different routes (Table 6). Fourteen concentrations were studied by inhalation, several of which with different schedules of treatment (Table 7). Six concentrations were studied by ingestion, and four doses by intraperitoneal injection (Table 8). Four types of animals were used (Table 9). The animals (apart from the hamsters) were breeds routinely employed in our Laboratory for many years. It should be pointed out that, whatever their use, all the animals of our colony 17 R&S 108495 undergo periodic examination and complete autopsy, giving us extensive information concerning their pathology. In the VC project as in any other long-term bioassay, the animals are kept alive until spontaneous death. The plan of the experiments is shown in tables 10-16. 2) Conduct For the experiments on VC, as well as for any other long term experimental bioassays performed in our Laboratory, the procedure has been always the same highly standardi zed and controlled one. In particular, we wish to emphasize the following points in our laboratory standard procedures. A) Compound All the supplies of the compound used were examined in order to determine wether they meet the required stan dards. Bl Concentrations The concentrations, particularly when the compound was given by inhalation, were controlled by continuous gas chromatographic monitoring. Cl Modalities of treatment Treatment was always performed by the same people. This is particularly important for gavage, since the animals become accustomed to the same operator. Dl Control of the animals The control of animal status was performed at least 3 times daily. Every 2 weeks, the animals were submitted to an examination for the detection of any gross change. E) Weight of the animals The animals were weighed every 2 weeks during and every 8 weeks after the end of treatment. F) Autopsy Full autopsy was performed on each animal. All the dif ferent parts of the body were explored, encompassing the central nervous system. Specimens for histology included the brain, Zymbal glands, interscapular brown fat, salivary glands, tongue, lungs, liver, kidneys, adrenals, spleen, pancreas, stomach, intestine, bladder, uterus, gonads, and any other organ with pathological lesions. G) Histology Specimens were trimmed in the standard way. Sections were routinely stained with Flaematoxylin-Eosin and, when necessary, with special techniques. HI Histopatho/ogical examination All slides were screened by a junior pathologist and then reviewed by a senior pathologist. The same classification of the lesions was used by all pathologists. 3) Classification of data All the gross and microscopic observations were classi fied and coded following our laboratory code (Table 17). For each animal, an individual final card was finally pre pared, which included data on experimental factors, survi val, weight at 6, 12, 18 and 24 months, and any gross and microscopic lesion. An example is given in Table 18. 4) Presentation of pathological data The results of the VC experiments, as well as the ones of any other experiment performed in our laboratory, are always presented with the same types of tables, in the same sequence. This type of presentation has been made possible by the knowledge of the basic pathology of the animal dsed, which enabled us to make an approximate census of the expected lesions. Such a procedure permits a quick comparison among the results of different experiments of the same project and the results of projects studying different compounds. M 5) Interpretation of the data The data were submitted to statistical analysis. Although statistical analysis provides an extremely important tool for interpreting the meaning of the results of long-term bioassays, it should be stressed that there may be smaller dif ferences between exposed and control groups which do not reach statistical significance, while these differences could still have a meaning from an oncological point of view (particularly in the case of tumours which are infre quent in the animal colony). Therefore, the most important data should be commen ted both in the light of the statistical analysis performed and with a biological approach. The methodological protocol adopted meets the require ments of the recent Good Laboratory Practices Act. Its application to all the different projects performed in our laboratory in the last decade provides us with a set of results which may constitute the groundwork for risk assessment on experimental basis. Part III : BT PROJECT : RESULTS 1) Past results Past results (Maltoni 1977) may be summarized as fol lows : a) VC, when given by inhalation, ingestion and possible injection, produces tumours at different sites and of diffe rent types ; b) VC correlated tumours have been found in all the types of animals studied ; c) the type of tumour response varies, depending on the species, the strain and the sex of the animals used. For some tumours the correlation with VC is established, for others it lacks definite evidence (Table 19) ; d) the degree of tumour response is affected by age, and is greater in newborn animals ; e) a clear-cut dose-response is an extremely important fac tor. In reducing the lenght of treatment there is a sharp fall in tumour onset. 2) Final results of the seven basic experiments All seven experiments were terminated by the end of 1977. The last two years were devoted to processing and examining all the histological material (which amounted for nearly 100,000 slides), preparing the individual cards for the animals of the study and computing and statistically analy sing the data. The biological results are given in the following tables (Tables 20-103). In Table 104, the incidence and the latency time of liver angiosarcomas, in relation to route and doses, are summarized. The neoplastic lesions, whose relations with VC must, in our opinion, be considered, are listed in Table 105. They are identified on the basis of one or more of the fol lowing parameters : a) sharply enhanced incidence ; 18 !;) rare or exceptional occurence in the colony of the ani mal used ; t) clear correlation with VC treatment in other experiments of the project ; a) dose-response relationship ; e) association of precursor lesions. Attention should be given not only to the tumours singuirly considered, but also to their aggregation. The following data have been statistically analyzed in elation to the treatment in each exposure group and sex : i the survival rate ; ') the weight at 6-month intervals ; ;) the number of tumour-bearing rats ; !) the incidence of different benign and/or malignant . jmours. 4/ Survival rate VC has a clear-cut life shortening effect, which is dose elated. A preliminary analysis, performed on experiment 3T1, has shown that life shortening is independant of amour increase. This points to a systematic toxicity and to possible correlation between toxicity and carcinogenesis. 31 Weight No effect of dose was observed except at 30,000 ppm by nhalation, when there is a decrease in weight gain, 31 Non-onco/ogical pathological lesions The incidence of inflammatory and histopathological agressive changes does not seem, in general, to depend ;n VC treatment. Only in experiments BT9 and BT15 do nere seem to be a VC dependent dose-related enhance ment of liver regressive changes. Nor do there seem to be relationship with other changes, ;uch as respiratory epithelium hyperplasia and adenoma:ous hyperplasia of the pituitary gland. 01 Tumours Following statistical analysis using the Fisher exact pro bability test (p 0,05) : a) six of the eight tumours considered appear signifi cantly in excess, at least at one dose level at least in one sex (Table 106) ; b) total cancer-bearing animals per group were in excess at the doses indicated in Table 107 ; cl no excess was observed in the number of rats bearing benign tumours. The relation of liver angiosarcoma, Zymbal gland carci noma, nephroblastoma and neuroblastoma and foresto mach papilloma with VC is also shown by the correspondance analysis. The Fisher exact probability test at 95 % confidence is, in relation to the above, not sensitive enough in our experi mental conditions. Biologically in our opinion the following results, although not statistically significant according to the test used, should be given proper attention : Extra-hepatic angiosarcomas of different sites : these tumours are observed at a very low incidence dose in untreated Sprague-Dawley rats of our colony. Results of experiments BT1 and particularly BT9, however, strongly suggest a relationship between these tumours and VC exposure. This relationship is supported by the excessive incidence of extra-hepatic vascular tumours in mice treated with VC (BT4). Hepatomas : few cases of hepatomas have been obser ved in treated groups, particularly in BT1. This tumour is exceptionnaiy rare in our colony of animals, and none have been observed in the control groups of the seven experi ments. Moreover the relationship with treatment is suppor ted by the fact that a high incidence on hepatomas has been observed in Sprague-Dawley rats, following neo natal exposure to a high dose for a short period (BT14). In view of their rareness or non-observation in the colony of animals used, for the following tumours it should be stressed that attention should be paid at their onset, also at doses below the ones with significant results according to the statistical test used. Zymbal gland carcinomas : an excess of these tumours is observed down-to 50 and 25 ppm. Liver angiosarcomas : this tumour is extremely rare in the colony used (4 cases over several thousand untreated animals). Therefore, one must consider the onset of these tumours as important even at doses not shown by statisti cal analysis, and particularly below 50 ppm (5 liver angio sarcomas out of 120 animals at 25 ppm, and 1 liver angio sarcoma out of 120 animals at 10 ppm), and at 1 mg/kg b.w. (3 liver angiosarcomas out of 150 animals), and at 0.3 mg/kg b.w. (1 liver angiosarcoma out of 150 animals). Nephroblastomas : the onset of a few of these tumours, observed after inhalation treatment at concentrations below 100 ppm and in groups treated by ingestion with 50 and 16.65 mg/kg b.w., is not casual in our opinion, given the extreme rarity of these tumours in rats. Neuroblastomas : such a tumour has never been obser ved by us, up to present, in the Sprague-Dawley rats used in our Laboratory as control or otherwise treated. There fore we consider as dependent on treatment the onset of these tumours, even at doses below 10,000 ppm, i.e. 6,000 and 2,500 ppm. As far as the total malignant tumours are concerned, the excess in treated animals must also be evaluated on the basis of total malignant tumours per group. Such an approach shows a correlation with VC exposure, even at lower doses. The meaning in oncological terms of the results at the lowest doses may be better evaluated in considering, not singly, but together, the tumours found to be VC depen dent (Table 108). None (or no increase) of these specifically VC related tumours has been observed at doses below 10 ppm and 0.3 mg/kg b.w. Part IV : CONCLUSIONS The experimental bioassays are an important tool in risk identification and assessment. However it is not easy to obtain adequate experimental data, and their interpretation may be difficult. Moreover a great deal remains to be done in the experimental field along this line, particularly in loo king for animal models with optimum relevance to human extrapolation. The final goal in fact is still human extrapolation, which can be improved only through available models in which animal and human data can be compared. To return to VC, epidemiological investigations on occu pationally exposed population groups have been made and are being carried out in different parts of the world, particu larly in Western Europe and in the USA, with reference to general pathology and neoplasias. These data are important in order to obtain indications on the effect of VC in humans and to control the extent of R&S 108496 parallelism between animal and human pathology. Further more, if these epidemiological investigations provide pre cise figures on the whole group considered, include figures on the level and lenght of exposure (so as to define homo geneous exposed groups!, and collect all possible available data on pathology, this will provide an opportunity, unique at present, to compare animal and human data, both in qualitative and quantitative terms, and to help to find a possible key for extrapolating from animals to humans. REFERENCES CREECH J.L. and M.N. JOHNSOM. 1974. Angiosarcoma of liver in the manufacture of polyvinyl chloride. J. Occupational Med. 18 : 150. MALTONI C. 1974. Occupational carcinogenesis. II International symposium on cancer detection and prevention, Bologna 1973. In Advances in tumour prevention, detection and characterization led. C. Maltoni), vol. 2, p. 19. Excerpta Medica, Amsterdam. MALTONI C, 1977, Vinyl chloride carcinogenicity : an experimen tal model for carcinogenesis studies. In Origins of human cancer, p. 119. Cold Spring Harbor Laboratory. MALTONI C., CILIBERTI A., GIANNI L. and CHIECO P. 1975. Insorgenza di angiosarcomi in ratti in seguito a sommimstrazione per via orale di cloruro di vinile. Gli Ospedali della Vita, vol. 2, fasc. 1, p. 65. MALTONI C. and LEFEMINE G. 1975. Carcinogenicity bioassay^^ of vinyl chloride : current results. In Toxicity of vinyl chloria^^ polyvinyl chloride (ed. I.J. Selikoff and E.C. Hammond), p. li^P New York Academy of Sciences, New York. MALTONI C., LEFEMINE G., CHIECO P. and CARRETTI D. 1974. La cancerogenesi ambientale e professionals : nuove prospettive alia luce della cancerogenesi da cloruro di vinile. Gli Ospedali della Vita, vol. 1, fasc. 5-6, p. 4. MARSTELLER H.J., LELBACH W.K., MULLER R., JUNE S.. LANGE C.E., ROHNER H.G. and VELTAMN G. 1973. Chronic toxic liver damage in workers of PVC producing plants. Deut. Med. Wochschr. 98 : 2311. TORKELS0N T.R., OYEN F. and ROWE V.K. 1961. The toxicity of vinyl chloride as determined by repeated exposure of laboratory animals. Am. Ind. Hyg. Assoc. J. 22 : 354. VIOLA P.L., BIGOTTI A. and CAPUTO A. 1971. Oncogenic res ponse of rat skin, lungs and bones to vinyl chloride. Cancer Res. 31 : 516. WAGONER J.K. 1974. Statement before the Subcommittee on the Environment of the U.S. Senate Commerce Committee. *6PQ 0l 33 S CO 'I/"I R&S 108498 TABLE 1 The theoretical list of steps for identifying and characterizing the carcinogenic risk of an agent, in a sequence of increasing accuracy. 1) Any biological data, even though they do not refer to tumour production, may provide indication on mutagenic proliferative effects. 2) Data on carcinogenic effects on experimental animals, whatever the experimental systems and the type of neoplastic response (first level of identification of risk in animal system). 3) Data on carcinogenic effects in experimental systems reproducing the type of human exposure, whatever the neoplastic response, but especially if the response turns out to be of the same quality as the ones in humans (second level of identification of risk in animal systems). 4) Data on carcinogenic effects in experimental systems reproducing the type of human exposure, at different dose levels, encompas sing or approaching the ones of the humans environmental and/or occupational exposure (risk assessment on experimental basis). 5) Data on carcinogenic effects in humans, whatever the type of epidemiological investigations (identification of the risk in humans). 6) Data on carcinogenic effects in humans, with epidemiological investigations providing references to the dimension of the exposed population and to the level and length of exposure (risk assessment in humans). 7) Finally, to further improve our knowledge, the comparison between point 4 and point 6, in order to : A) obtain information on animal-human qualitative and quantitative equivalents and B) to improve animal systems in order to achieve better equivalents. TABLE 2 The history of Vinyl Chloride carcinogenicity. 1) 1961 : VC was found to produce liver enlargement and microscopic hepatic degenerative changes (Torkelson et al., 1961) 2) 1970 : Zymbal gland carcinomas were reported in rats exposed to 30,000 ppm of VC, by inhalation (Viola et al,, 1971) 3) 1970 : An increase in atypias in respiratory cells was observed among workers heavily exposed to VC (Maltoni et al,, 1974) 4) 1971 : A vast project of long-term carcinogenicity bioassays on VC was started in Bentivoglio, near Bologna, Italy (BT project) (July) 5) 1972 : Zymbal gland carcinomas, nephroblastomas and liver angiosarcomas were observed in rats exposed to VC by inhalation (August) (Maltoni, BT projectl 6) 1973 ; The first data of the BT project were released to the Scientific Community : the oncogenic effect was observed up to (April) 250 ppm (Maltoni, 1974) 7) 1973 ; Splenomegalic liver disease was found among polyvinyl chloride production workers (Marsteller et al., 1973) 8) 1973 : For the first time a case of liver angiosarcoma in a worker of polyvinyl chloride production was correlated to VC exposure (Oecember) (Creech and Johnson, 1974) 9) 1974 : On the basis of the BT project data indicating a carcinogenic effect at 250 ppm, OSH A proposed a TLV of 50 ppm (February) 10) 1974 : The BTsproject data showed that VC is a multipotential carcinogen, producing a variety of tumours, in different animal (February) species (Maltoni : testimony at OSHA Hearing, 1974) 11) 1974 : The BT project data indicated a carcinogenic effect at 50 ppm. OSHA proposed new stricter rules (Maltoni communica tion : Maltoni and Lefemine, 1975) 12) 1974 : Early epidemiological observation (paralleling the experimental information) indicated an increase in tumours other than liver angiosarcomas (of brain, lung, liver, haemolymphoreticular tissues) among workers of VC-PVC industries (Wagoner 1974) 13) 1974 : BT project data showed that VC had carcinogenic effects in rats also when given by ingestion (Maltoni et ai., 1975) 14) 1976 : In rats of the BT project exposed to VC by inhalation, angiosarcomas were observed down-to the level of 25 ppm, and Zymbal gland carcinomas down-to the level of 10 ppm (Maltoni. 19771 15) Since : The need for a more precise risk assessment in experimental systems is increasing together with the need for available tools in order to extrapolate animal data to humans. A systematic patholoqical and epidemiological investigation on all the expe rimental data of the BT project was started in 1977, aiming at providing better quantitative information on VC carcino genesis and testing the potentialities of the experimental carcinogenesis bioassays as a tool for risk assessment in environ mental and occupational carcinogenesis. 21 TABLE 3 Past contributions of the history of Vinyl Chloride carcinogenicity in order to identify and assess risk in environmental and occupational carcinogenesis. 1) The clear demonstration of the predictive value of long-term carcinogenicity bioassays in : A) identifying carcinogenic risk in general; B) indicating, in certain circumstances, the target organs and quality of neoplastic response. 2) The presentation of a prototype of an experimental project, as a model for planning and conducting experimental bioassays and for collecting the results (which is presently embodied in the recent GLP). 3) The basic information on the role of different biological and experimental factors affecting the neoplastic response in experimen tal bioassays, and of major importance in planning experiments for predicting risks in humans. 4) The early demonstration of the value of long-term experimental bioassays in assessing the level of risk, in relation to the concentra tion. duration, and route of exposure. TABLE 4 Present and possible future contributions of the history of Vinyl Chloride carcinogenicity in order to identify and assess risk in environmental and occupational carcinogenesis. 1) Further confirmation of the value of long-term experiments in assessing the risk, in relation to different parameters,with particular reference to dose-response relationship. 2) Availability of a set of homogeneous data for testing the possible contributions of statistical analysis in evaluating data of experi ments aimed at identifying and assessing carcinogenic risk, in providing useful indications for interpreting possible mechanisms, and in producing suggestions for improving experimental plans. 3) Demonstration of the need for a new model of epidemiological approach to evaluate the carcinogenic effects in exposed human populations. This model should, as much as possible, parallel the experimental methodology, to make confrontation between the experimental results and human data possible. 4) Identification of the biological factors and of experimental methodologies enabling an easier extrapolation of data from animal to humans in a qualitative and quantitative way, which is at present, in our view, the greatest contribution to cancer prevention. 5) Indication of the possibility to standardize experimental procedures, so as to compare, on an experimental level, the relative risk represented by the same agent under different conditions and by different agents under the same conditions. R&S 108499 TABLE 5 BT project on VCithe compound Maximum level of impurities in the VC used h2o................... Acetic aldehyde Acetylene . . . Allene............. Butane............. 1,3 - Butadiene Chlorophene. , Diacetylene , . Vinyl acetylene Propine............. Methyl chloride 10 ppm 5 ppm 2 ppm 5 ppm 8 ppm 10 ppm 10 ppm 4 ppm 10 ppm 3 ppm 100 ppm . 22 TABLES BT project on VC:routes of treatment Inhalation Ingestion (by stomach tube) Intraperitoneal injection Subcutaneous injection TABLE 7 BT project an VCxoncentrations and schedule Inhalation 30.000, 10,000, 6,000, 2.500, 500, 250. 200, 150, 100, 50, 25, 10, 5, 1 ppm 4 h. daily, 5 days weekly, 52 weeks 10.000, 6,000, 2,500, 500, 250, 50 ppm 4 h. daily. 5 days weekly, 17 weeks 10.000, 6,000 ppm 4 h. daily, 5 days weekly, 5 weeks 10.000, 6,000 ppm 4 h. daily, 1 day weekly, 25 weeks 10.000, 6,000 ppm 1 h. daily, 4 days weekly, 25 weeks 10,000, 6,000 ppm 4 h. daily, 7 days. TABLE 8 BT project on VCxoncentrations and schedule Ingestion 50, 16.65, 3.33, 1, 0.3, 0.03 mg/kg b.w. 5 times weekly, for 52 weeks 4.25 mg. Intraperitoneal injection 4, 3, 2, times at two months interval and once 4.25 mg. Subcutaneous injection once Species i Strain ; Sex : Age : TABLE 9 BT project on VC:animals Rat Mouse Hamster Sprague-Dawley rat Wistar rat Swiss mice Golden hamster M.and F. Adult (from 10 to 21 weeks old) New-born (1 day old) Embryos (12 days of pregnancy) 23 R&S 108500 L0S80L SSb TABLE 10 BT project on VC: plan of long-term experiments on Vinyl Chloride carcinogenicity EXPERIMENTS ON THE EFFECTS OF EXPOSURE BY INHALATION FOR 1 YEAR TO DIFFERENT DOSES OF VC ON ADULT SPRAGUE-DAWLEY RATS (BASIC EXPERIMENTS). No. OF THE EXPE FU ME NTS Route BT 1 Inhalation TREATMENT Doses of Vinyl Chloride 10,000, 6,000, 2,500, 500, 250, 50 ppm Untreated controls Treated controls : VA 2,500 ppm 8T 2 Inhalation 200, 150, 100 ppm. Untreated controls BT 6 Inhalation 30,000 ppm. BT 9 Inhalation 50 ppm. Untreated controls BT 15 Inhalation 25, 10, 5, 1 ppm. Untreated controls Duration 4 hrs. daily, 5 days weekly, 52 weeks. 4 hrs. daily, 5 days weekly, 52 weeks. 4 hrs. daily, 5 days weekly, 52 weeks. 4 hrs. daily, . 5 days weekly, 52 weeks. 4 hrs. daily, 5 days weekly, 52 weeks. Species Strain ANIMALS Age (weeks) 9 Rat Sprague-Dawley 13 268 No. d Total 309 577 Rat Sprague-Dawley 13 280 265 545 Rat Sprague-Dawley 17 30 30 60 Rat Sprague-Dawley 11 200 200 400 Hat Sprague-Dawley 13 300 300 600 Per group 64-96 120-185 60 100 (cl 300 (t) 120 TABLE 11 BT project on VC:plan of long-term experiments on Vinyl Chloride carcinogenicity EXPERIMENTS ON THE EFFECTS OF LENGTH OF EXPOSURE No. OF THE EXPERI MENTS Route BT3 Inhalation TREATMENT Doses of Vinyl Chloride 10,000, 6,000, 2,500, 500, 250, 50 ppm. Untreated controls BT 10 Inhalation 10,000, 6,000 ppm. Untreated controls ANIMALS Duration Species 4 hrs. daily, 5 days weekly, 17 weeks. 4 hrs. daily, 5 days weekly, 5 weeks; 4 hrs. daily, 1 day weekly, 25 weeks; 1 hr. daily, 4 days weekly, 25 weeks. Rat Rat Strain Sprague-Dawley Sprague-Dawley Age (weeks) 21 11 9 262 420 NO. d Total 288 550 Par group 60-190 420 840 120 r(oji TABLE 12 BT project on VC:plan of long-term experiments on Vinyl Chloride carcinogenicity EXPERIMENTS ON THE EFFECTS OF AGE No. OF THE EXPERI MENTS Route TREATMENT Doses of Vinyl Chloride 8T5 T ransplacental 10,000, 6,000 ppm. BT 14 Inhalation 10,000, 6,000 ppm. ANIMALS Duration Species 4 hrs. daily, 7 days (from 1 2 th to 18 th d3y of pregnancy) 4 hrs. daily, 5 days weekly, 5 weeks. Rat Rat Strain Sprague-Dawley Sprague-Dawley Age (weeks) 1 9 Breeders 12 days Embryos 1 day 9 110 45 No. 6 Total Per group 36 146 30-54 44 89 43-46 Z0S801- S^U 0S8(H SSd TABLE 13 BT project on VCrplan of long-term experiments on Vinyl Chloride carcinogenicity EXPERIMENTS ON THE EFFECTS OF STRAIN No. OF THE EXPERI MENTS 8T 7 Route Inhalation BT 17 Inhalation TREATMENT Doses of Vinyl Chloride 10,000, 6,000. 2,500, 500, 250, 50 ppm. Untreated controls 1 ppm. Untreated controls Duration 4 hrs. daily, 5 days weekly, 52 weeks 4 hrs. daily, 5 days weekly, 52 weeks Species Rat Rat Strain Wistar Wistar ANIMALS Age (weeks) 11 9 - 13 - No. cf Total 220 220 250 250 Per group 30-40 1 20-130 No. OF THE EXPERT MENTS BT 4 Route Inhalation BT 8 Inhalation TABLE 14 BT project on VCrplan of long-term experiments on Vinyl Chloride carcinogenicity EXPERIMENTS ON THE EFFECTS OF SPECIES TREATMENT Doses of Vinyl Chloride 10,000, 6,000, 2,500, 500, 250, 50 ppm. Untreated controls 10,000, 6,000, 2,500, 500, 250, 50 ppm. Untreated controls Duration 4 hrs. dally, 5 days weekly, 30 weeks 4 hrs. daily, 5 days weekly, 30 weeks ANIMALS Species Mouse Strain Swiss Age (weeks) 11 9 250 Hamster Golden 11 - No. 6 Total 260 510 268 268 Per group 60-150 32-70 . TABLE 15 BT project on VC: plan of long-term experiments on Vinyl Chloride carcinogenicity EXPERIMENTS BY DIFFERENT ROUTE (INGESTION) No. OF THE EXPERI MENTS Route TREATMENT Doses of Vinyf Chloride BT 11 BT 27 Ingestion Ingestion 50 mg., 16,65 mg., 3,33 mg./kg. body weight in olive oil Controls : olive oil 1 mg, 0,3 mg, 0,03 mg/kg body weight in olive oil Controls : olive oil Duration 5 times weekly, 52 weeks 5 times weekly, 52 weeks and 59 weeks U) ANIMALS Species Strain Age (weeks) 9 Rat Sprague-Dawley 13 160 Rat Sprague-Dawley 10 300 No. d Total Per group 160 320 80 300 600 150 (1) For 10 animals of each of the 3 exposed and control groups the treatment was planned to last 104 weeks, but it had to be stopped because of animal intolerance. No. OF THE EXPERI MENTS BT 12 BT 13 Route Endoperitoneal injection Subcu taneous injection TABLE 16 BT project on VC: plan of long-term experiments on Vinyl Chloride carcinogenicity EXPERIMENTS BY DIFFERENT ROUTE (INJECTION) TREATMENT Doses of Vinyl Chloride 4,25 mg. in 1,0 cc olive oil Controls : 1,0 cc ofive oil 4,25 mg. in 1,0 cc olive oil Controls : 1,0 cc olive oil Duration 4, 3, 2, times at two months interval and once t injection ANIMALS Species Strain Age (weeks) Rat Sprague-Dawley 13 9 150 Rat Sprague-Dawley 21 80 No. 6 Total 150 300 Per group 60 70 150 75 frOseot S3H TABLE 17 Code of the lesions APPARATUSES AND ORGANS TO BE CONSIDERED (sequence) (first part) 33 9P IP 1) Skin. 33) Cerebrum. 2) Annexes. 34) Cerebellum. 108505 3) Zymbal glands. 35) Spinal marrow. 41 Subcutaneous tissues. 36) Peripheral nervous system : ganglia. 5) Mammary glands. 37) Peripheral nervous system : nerves. 6) Parotid glands. 38) Eyes. 7) Submaxillary glands. 39) Harderian glands. 8) Nasal and paranasal cavities. 40) Skeletal muscles (diaphragm not included). 91 Oral cavity. 41) Diaphragm. 10) Tongue. 42) Bones. 11) Lung. 43) Articulations. 12) Pleura and pleural cavity. 44) Heart. 13) Esophagus. 45) Pericardium and pericardial cavity. 14) Forestomach. 46) Large vessels. 15) Glandular stomach. 47) Thymus. 16) Intestine. 48) Spleen. 17) Liver. 49) Axillary and inguinal lymphnodes. 18) Pancreas. 50) Head-neck lymphnodes. 19) Peritoneum and peritoneal cavity. 51) Intrathoracic and parathymic lymphnodes. 20) Kidneys. 52) Intrabdominal lymphnodes. 21) Pelves. 53) Lymphnodes of other sites. 22) Ureters. 54) Bone marrow. 23) Bladder. 55) Soft tissues of support. 24) Ovaries. 56) Interscapular fat pad. 25) Uterus. Addenda : 26) Seminal vesicles. 57) Trachea. 27) Prostate. 58) Ear. 28) Testicles. 59) Female external sex organs. 29) Epidydimis. 30) Hypophysis. 31) Thyroid. 60) Male external sex organs. 61) Odontogenic apparatus. 62) Gall bladder. 32) Adrenals. TABLE 17 Code of the lesions MACROSCOPIC CHANGES (second part) 1) No changes. 2) Alopecia. 3) Keratosis. 4) Degenerative pathosis. 5) Ulceration. 6) Hyperemia, oedema and haemorrhage. 7) Phlogosis (comprehensive of abscess). 8) Pulmonary hepatization. 9) Pulmonary emphysema. 10) Irregular surface. 11) Granulations and plaques. 12) Simple thickening. 13) Thickening of capsule. 14) Fibrosis. 15) In toto reduction. 16)/ Atrophy, 17) In toto enlargement. 18) Augmentation in consistency. 19) Dilatation of organ with cavity. 20) Protrusion of eyeball. 21) Simple cyst. 22) Haemorrhagic cyst. 23) Multiple simple cyst. 24) Multiple haemorrhagic cyst. 25) Polypoid formation. 26) Papillomatous formation and horn. 27) Solid nodule. 28) Haemorrhagic nodule. 29) Cystic mass. 30) Solid mass. 31) Solid-necrotic mass. 32) Haemorrhagic mass. 33) Ossifying mass. 34) Serous effusion. 35) Fibrinous-purulent effusion. 36) Haemorrhagic effusion. 28 R&S 108506 TABLE 17 Code of the lesions MICROSCOPIC CHANGES (third part) 1) No changes. 2) Regressive changes of mild entity. 3) Serious regressive changes. 4) Necrosis. 5) Ulcer. 6) Amyloidosis. 7) Hyalinosis. 8) Colloid-cystic degeneration. 9) Calcifications. 10) Emphysema. 11) Vascular changes (hyperemia, dilatation of sinusoids and other vessels, oedema and haemorrhage). 1 2) Haematic cyst. 13) Fibrinous coagulum in organization. 14) Haemorrhagic effusion. 1 5) Phlogistic acute changes (comprehensive of abscess). 16) Phlogistic chronic changes (also reactive). 1 7) Particular granulomatous changes. 18) Phlogistic effusion. 19) Thickening of capsule. 20) Thickening of submesothelial tissues. 21) Fibrosis. 22) Post necrotic fibrosis (comprehensive of cirrhosis). 23) Fibrous thickening of vessels. 24) Cystic ectasia of blood-vessels with fibrosis. 25) Cystic ectasia of blood-vessels with fibrosis and hyper plasia of perithelial cells. 26) Cystic ectasia of blood-vessels with fibrosis and dysplasia of perithelial cells. 27) Cellular depletion and atrophy (with or without fibrosis). 23) Simple cyst. 29) Haemorrhagic cyst. 30) Multiple simple cyst. 31) Multiple haemorrhagic cyst. 32) Dilatation of organs with cavity (comprehensive of hydronephrosis). 33) Hyperplasia and squamous metaplasia. 34) Glandular simple and cystic hyperplasia. 35) Diffused parenchymal hyperplasia. 36) Nodular parenchymal hyperplasia. 3 7) Cortical hyperplasia. 38) Medullary hyperplasia. 39) Hyperplasia of stroma. 40) Reactive hyperplasia. 41 (Simple proliferation of lymphoreticular cells with myelopoiesis. 42) Proliferation of angioblastic cells. 43) Fibroangioblastic proliferation. 44) Proliferation of lipocytes. 45) Proliferation of biliary ducts. 46) Proliferation of renal tubules and/or of nephroblastema. 4 7) Adenomatous hyperplasia. 48) Cholangiofibrosis. 49) Dysplasia (comprehensive of neoplastic parenchymal nodule of liverl, 50) Simple and cystic glandular dysplasia. 51) Cortical dysplasia. 52) Medullary dysplasia. 53) Dysplasia of angioblastic cells. 54) Papillomatosis. 55) Acanthomatosis. 56) Angiomatosis. 57) Fibroangiomatosis, 58) Simple polypus. 59) Polypus with cellular distypias. 60) Papilloma. 61) Fibropapilloma. 62) Acanthoma. 63) Trichoepithelioma. 64) Simple adenoma. 65) Muciparous adenoma. 66) Colloid-cystic adenoma. 67) Exocrine pancreas adenoma. 68) Endocrine pancreas adenoma (Islet cell adenoma). 69) Chromophobe adenoma. 70) Chromophilic adenoma. 71) Cortical adenoma. 72) Medullary adenoma. 73) Cholangioma. 74) Hepatocellular adenoma or hepatoma. 75) Tumour of granulosa and of theca. 76) Leydig cell tumour. 77) Other epithelial benign tumours. 78) Fibroma. 79) Mixoma. 80) Lipoma. 81) Leiomyoma. 82) Rhabdomyoma. 83) Chondroma. 84) Osteoma. 85) Angioma. 86) Fibroangioma. 87) Ossifying angioma. 88) Other benign tumours of connective tissue. 89) Fibroadenoma. 90) Adenomyoma. 91) Benign tumours of nervous ganglia (ganglioneuroma) and benign sympathetic tumours of adrenal medulla. 92) Benign tumours of peripheral nerves (neurilemoma). 93) Carcinoma. 94) Carcinoma with metastases. 95) Basocellular carcinoma. 96) Basocellular carcinoma with metastases. 97) Squamocellular carcinoma. 98) Squamocellular carcinoma with metastases. 99) Transitional cells carcinoma. 100) Transitional cells carcinoma with metastases. 101) Adenocarcinoma. 102) Adenocarcinoma with metastases103) Biliary ducts adenocarcinoma. 1041 Biliary ducts adenocarcinoma with metastases. 105) Hepatocellular carcinoma or hepatocarcinoma. /... 79 /-- 106) Hepatocarcinoma with metastases. 107) Exocrine pancreas adenocarcinoma. 108) Exocrine pancreas adenocarcinoma with metastases. 109) Cortical adenocarcinoma. 110) Cortical adenocarcinoma with metastases. 111) Pheochromoblastoma. 112) Pheochromoblastoma with metastases. 113) Nephroblastoma. 114) Nephroblastoma with metastases. 115) Seminoma. 116) Seminoma with metastases. 117) Melanoma. 118) Melanoma with metastases. 119) Other malignant epithelial tumours. 120) Other malignant epithelial tumours with metastases. 121) Mesothelioma. 122) Mesothelioma with metastases. 123) Fibrosarcoma. 124) Fibrosarcoma with metastases. 125) Mixosarcoma. 126) Mixosarcoma with metastases. 127) Liposarcoma. 128) Liposarcoma with metastases. 129) Leiomyosarcoma. 130) Leiomyosarcoma with metastases. 131) Rhabdomyosarcoma. 132) Rhabdomyosarcoma with metastases. 133) Chondrosarcoma. 134) Chondrosarcoma with metastases. 135) Osteosarcoma. 136) Osteosarcoma with metastases. 137) Angiosarcoma. 138) Angiosarcoma with metastases. 139) Ossifying angiosarcoma. 140) Ossifying angiosarcoma with metastases. 141) Angiopericytosarcoma. 142) Angiopericytosarcoma with metastases. 143) Other malignant tumours of connective tissue. 144) Other malignant tumours of connective' tissue with metastases. 145) Carcinosarcoma, 146) Carcinosarcoma with metastases. 147) Neuroblastoma. 148) Neuroblastoma with metastases. 149) Gliomas (astrocytoma,oligodendroglioma, microglioma). 150) Ependymoma. 151) Meningioma. 152) Malignant tumours of nervous ganglia and malignant sympathetic tumours of adrenal medulla. 153) Malignant tumours of nervous ganglia and malignant sym pathetic tumours of adrenal medulla with metastases. 154) Malignant tumours of peripheral nerves (malignant schwannoma). 155) Malignant tumours of peripheral nerves (malignant schwannoma) with metastases. 156) Characteristic tumours of eyes. 157) Lymphoreticular neoplastic localizations. 158) Secondary localizations of tumours from other anatomi cal districts. 159) Neoplastic effusions. Addenda 160) Odontoma, 161) Chondromatosis. 162) Histiocytosis and benign histiocytoma. 163) Mesothelial hyperplasia. R&S 108507 "0 TABLE 18 Example of individual epidemiological card Agent: Vinyl Chloride No. experiment: BT 2 No. group: 1 No. animal: 96 Type of exposure or treatment: Inhalation Concentration: 200 ppm Protocol of treatment: 4 hours daily/5 days weekly/52 weeks Species: Rat Strain: Sprague-Dawley Sex: Male Age at the start of the experiment (in weeks): 13 Total dose received: Age at death (in weeks): 84 Period from the start of the treatment (in weeks): 71 Weight (in g) 6 months: 445 12 months: 480 18 months: 470 24 months: -- (first part) CODE XVIII, 1 1, 1 II, 10 VI, 5 X, 1 XI, 1 XII, 2 XIII, 8 R&s 108508 31 Macroscopic changes: A) Site* -- Lung -- Liver -- Peritoneum and peritoneal cavity -- Kidneys -- Bladder -- Adrenals - Cerebrum -- Diaphragm -- Spleen -- Intrathoracic and parathymic lymphnodes TABLE 18 (second part) Type Side Haemorrhage Haemorrhage In toto enlargement No changes Haemorrhage Dilatation of organ with cavity No changes Haemorrhage Haemorrhage Oedema, haemorrhage Haemorrhage No. Sn, dx Sn Code 11,6 17,6 17, 17 19, 1 20, 6, C3 23, 19 32, 1, Cl 33, 6 41,6 48, 6 51, 6 R&S 108509 Microscopic changes: B) Site* -- Lung -- Liver -- Peritoneum and peritoneal cavity - Kidneys -- Bladder -- Adrenals -- Cerebrum -- Diaphragm -- Spleen -- Intrathoracic and parathymic lymphnodes * Site: apparatus, system, organ, tissue. Type Secondary localizations (hepatic angiosarcoma) Diffused parenchymal hyperplasia Angiosarcoma with metastasis Secondary localizations (hepatic angiosarcoma) No changes No changes Medullary hyperplasia No changes Secondary localizations (hepatic angiosarcoma) No changes Chronic reactive lymphadenitis Side No. Code Sn, dx Sn 11, 158 (17, 138) 17,35 17, 138 19, 158 (17, 138) 20, 1, C3 23, 1 32, 38, Cl 33, 1 41, 158 (17, 138) 48, 1 51,16 Species Angiosarcomas of liver Tumours of brain Rat Mouse Hemster + + + + BT project on VC : tumours presently correlated to VC exposure.on experimental rodents TUMOURS Tumours of lung Lymphomas and leukaemias Hepatomas Angiosarcomas and angiomas of other sites Nephro blastomas Sebaceous cutaneous carcinomas Other cutaneous epithelial tumours Mammary carcinomas Fore stomach papillomas and acanthomas Melanomas + 4- + + (+) (+) (+) + + (+) + + (+) (+) (+) + (+) 0LS801 LLS801. SSH GROUPS NO. CONCEN TRATION 1 30,000 ppm Total TABLE 20 Experiment (iT6 : Exposure by inhalation to Vinyl Chloride in air at 30,000 ppm, 4 hours daily, 5 days weekly, for 52 weeks. Results after 68 weeks (end of experiment}. DISTRIBUTION OF REGRESSIVE CHANGES ANIMALS [Sprague-Dawley rats, 17 weeks old at start) Sex No. at start 6 30 9 30 d and 9 60 60 Liver No. % 3 to.o 2 6.7 5 8.3 REGRESSIVE CHANGES Kidneys No. % 0- 0- O- Adrenal glands No. % 0- 0- 0- TABLE 21 Experiment BT6 : Exposure by inhalation to Vinyl Chloride in air at 30,000 ppm, 4 hours daily, 5 days weekly, for 52 weeks. Results after 68 weeks (end of experiment). DISTRIBUTION OF PHLOGISTIC CHANGES CON3ROUPS CEN NO. TRATION ANIMALS ISprague-Dawley rats, 1 7 weeks old at start) Sex No. at start 0 30 1 30,000 ppm 9 30 6 and 9 60 Encephalic abscesses No. % 000- Meningitis Bronchopneumonia PHLOGISTIC CHANGES P leu r it is Pericarditis No. % 1 3.3 0t 1.7 No. % No. % No. % 15 50.0 1 3.3 1 3.3 7 23.3 1 3.3 0 - 22 36.7 2 3.3 1 1.7 Liver abscesses and hepatitis Kidneys abscesses and nephritis Peritonitis No. % No. % No. % O - 1 3.3 1 3.3 0 - 0 - 1 3.3 0 - 1 1.7 2 3.3 Total 60 R&S 108512 TABLE 22 Experiment BT6 : Exposure by inhalation to Vinyl Chloride in air at 30,000 ppm, 4 hours daily, 5 days weekly, for 52 weeks. Results after 68 weeks (end of experiment) INCIDENCE OF ADENOMATOUS HYPERPLASIA OF RESPIRATORY EPITHELIA GROUPS NO. CONCEN TRATION ANIMALS (Sprague-Dawley rats, 17 weeks old at start) Sex No. at start ADENOMATOUS HYPERPLASIA OF RESPIRATORY EPITHELIA No. % 6 30 1 3.3 1 30,000 ppm 9 6 and 9 30 60 1 3.3 2 3.3 Total 60 TABLE 23 Experiment BT6 : Exposure by inhalation to Vinyl Chloride in air at 30,000 ppm, 4 hours daily, 5 days weekly, for 52 weeks. Results after 68 weeks (end of experiment) INCIDENCE OF PITUITARY ADENOMATOUS GROWTH GROUPS NO. CONCEN TRATION ANIMALS (Sprague-Dawley rats, 17 weeks old at start) Sex No. at start 6 30 1 1 Total 30,000 ppm 9 O and 9 30 60 60 NODULAR ADENOMATOUS HYPERPLASIA No. % 0- 0- 0- ADENOMAS No. % 01 3.3 1 1.7 TOTAL No. % 01 3.3 1 1.7 eissoi- s^u TABLE 24 Experiment BT6 : Exposure by inhalation to Vinyl Chloride in air at 30,000 ppm, 4 hours daily, 5 days weekly, for 52 weeks. Results after 68 weeks (end of experiment). DISTRIBUTION OF THE DIFFERENT TYPES OF TUMOURS (first part) GROUPS NO. C0NCENTRATION ANIMALS (Sprague-Oawley rats, 1 7 weeks old at start] Mammary tumours \b) Zymbal gland carcinomas ANIMALS WITH TUMOURS Leukaemias Nephroblastomas Sex Cor Average Average Average Average No at siari rected Total num No. tier % IcJ latency time (weeks) Total No % id latency time Iweek*) Total No % tc) latency time (weeks) T otal No. % tc) latency time (weeks) Total No. (a) Id) la] U) Cel Angiosarcomas Liver Other sites Angiomas and fibroangtomas Ltver Other sites Average Average Average Average % tc) latency time (weeks) Total No, % (c) latency time (weeks) Total No. % tc1 latency time (weeks) Total No. % (cl latency time (weeks) le) le) (a) la) d ' 30,000 ppm 9 30 30 0 - - 17 56 6 43.7 0 - - 0- - 5 106 52.0 0 - - -- - 1 3.3 500 30 30 5 16.7 58.2 18 600 43.8 0 - - 0- - 13 43 3 54.4 1 3.3 47,0 1 3.3 50.0 2 6.7 54.0 <S and 9 60 60 5 8.3 58 2 35 58 3 438 0- - 0- - ia 30 0 53.7 1 17 47,0 1.7 50.0 3 5.0 52.7 Total 60 60 (a) Alive animals after 24 weeks, when the first tumour la Zymbal gland carcinoma) was observed. (b) Two or more tumours of the same and/or different types (fibroadenomas, carcinomas, sarcomas, carcinosarcomas) may be present in the same animal. (c) The percentages are referred to the corrected number. (d) Average age at the onset of the first mammary tumour per animal detected at the periodic control or at autopsy. (e) Average time from the start of the experiment to the detection (at the periodic control or at autopsy). (f) Several animals with two or more tumours. TABLE 24 Experiment BT6 : Exposure by inhalation to Vinyl Chloride in air at 30,000 ppm, 4 hours daily, 5 days weekly, for 52 weeks. Results after 68 weeks {end of experiment). DISTRIBUTION OF THE DIFFERENT TYPES OF TUMOURS (second part) ANIMALS WITH TUMOURS GROUPS NO. CONCEN- Hepatomas Forestomach epithelial tumours Skin carcinomas Subcutaneous sarcomas Encephalic tumours Neuroblastomas Other types TRATION Total % No. (c) Average latency time (weeks 1 (a) Total No. % (c) Average late ncy time (weeks) ie) Total No. % (c) Average latency time (weeks) Ie) Total No. % (c) Average latency time (weeks) (e) Total No. % (c) Average latency time (weeks) (e) No. % (c) Others Total No. Benign No. Maignant No. No. Total (f) No. of different % tumours/ (c) tumours bearing animals 0- - 5 16.7 46.0 0 - - 0- - 1 3.3 63.0 0 - 6 6 0 23 76.7 1.5 1 30,000 ppm 1 3.3 68.0 6 20.0 56.5 1 3.3 47.0 0 - - 0- - 0 - 7 6 1 28 93.3 1.9 Total 1 1.7 68.0 11 18.3 51.7 1 1.7 47.0 0 - - 1 1.7 63.0 0 - 13 12 1 51 85.0 1.7 (a) Alive animals after 24 weeks, when the first tumour (a Zymbal gland carcinoma) was observed. lb) Two or more tumours of the same and/or different types (fibroadenomas, carcinomas, sarcomas, carcinosarcomas) may be present in the same animal, (cl The percentages are referred to the corrected number. (d) Average age at the onset of the first mammary tumour per animal detected at the periodic control or at autopsy. (e) Average time from the start of the experiment to the detection (at the periodic control or at autopsy). (f| Several animals with two or more tumours. t1980l S*H R&S 108515 TABLE 25 Experiment BT6 ; Exposure by inhalation to Vinyl Chloride in air at 30,000 ppm, 4 hours daily, 5 days weekly, for 52 weeks. Results after 68 weeks (end of experiment). DISTRIBUTION OF THE DIFFERENT TYPES OF MISCELLANEOUS (OTHERS) TUMOURS GROUPS SEX NO. No. Benign ANIMALS BEARING OTHER TUMOURS Malignant Distribution of histotypes No. Distribution of histotypes 1 subcutaneous fibroma 3 6 4 Zymbal gland adenomas 1 glandular stomach papilloma 1 3 Zymbal gland adenomas 9 6 1 cholangioma 2 adrdnal gland cortical adenomas 01 1 Harderian gland carcinoma Total 6 7 33 GROUPS NO. C O N C E N T R A T IO N TABLE 26 Experiment BT6 : Exposure by inhalation to Vinyl Chloride in air at 30,000 ppm, 4 hours daily, 5 days weekly, for 52 weeks. Results after 68 weeks (end of experiment). DISTRIBUTION OF THE DIFFERENT TYPES OF MAMMARY TUMOURS ANIMALS (Sprague-Oawley rats, 17 weeks old at start) Average No. of Sex No. at start Corrected number (a) Total No. % ic\ latency tumours/ time tumours Total (weeks) bearing No. % fe) (d) animals MAMMARY TUMOURS (b) Histologically examined Histotype Fibromas and fibroadenomas Carcinomas Sarcomas Carcinosarcomas Average Average Average Average No. % tf) latency time (weeksl No. % (f) latency time (weeks) No. % tf) latency time (weeksl No. % (f) latency time (weeks) (d) (d) (dl Id) d 1 30,000 ppm 9 30 30 d and 9 60 30 0 - - -0 - 0- - D- - 0- - 0- - 30 5, 16.7 58.2 1.4 5 100.0 3 60.0 64.3 2 40.0 49.0 0 - - 0- - 60 5 8.3 58.2 1.4 5 100.0 3 60.0 64.3 2 40.0 49.0 0 - - 0 - - Total 60 60 (a) Alive animals after 24 weeks, when the first tumour (a Zymbal gland carcinoma) was observed. (b) Two or more tumours of the same and/or different types (fibroadenomas, carcinomas, sarcomas, carcinosarcomas) may be present in the same animal. (c) The percentages are referred to the corrected number. Id) Average age at the onset of the first mammary tumour per animal detected at the periodic control or at autopsy. fe) The percentages are referred to total number of animals bearing mammary tumours. If) The percentages are referred to total number of animals bearing mammary tumours, histologically examined. 91-9801- S?d TABLE 27 Experiment BT6 . Exposure by inhalation to Vinyl Chloride in air at 30,000 ppm, 4 hours daily, 5 days weekly, for 52 weeks. Results after 68 weeks (end of experiment). DISTRIBUTION OF THE EXTRAHEPATIC ANGIOSARCOMAS FOLLOWING THE SITE GROUPS NO. 1 SEX 6 9 NO. 0 1 EXTRAHEPATIC ANGIOSARCOMAS 1 pulmonary angiosarcoma TABLE 28 Experiment BT6 : Exposure by inhalation to Vinyl Chloride in air at 30,000 ppm, 4 hours daily, 5 days weekly, for 52 weeks. Results after 68 weeks (end of experiment). DISTRIBUTION OF THE EXTRAHEPATIC ANGIOMAS AND FIBROANGIOMAS FOLLOWING THE SITE GROUPS NO. 1 SEX 6 9 NO. 1 2 EXTRAHEPATIC ANGIOMAS AND FIBROANGIOMAS 1 interscapular fat pad angioma 1 subcutaneous fibroangioma 1 ovary angioma R&S 108517 TABLE 29 Experiment BT6 : Exposure by inhalation to Vinyl Chloride in air at 30,000 ppm, 4 hours daily, 5 days weekly, for 52 weeks. Results after 68 weeks (end of experiment). DISTRIBUTION OF THE FORESTOMACH EPITHELIAL TUMOURS FOLLOWING THE SITE GROUPS NO. CONCEN TRATION ANIMALS (Sprague-Dawley rats, 17 weeks old at start) Sex No, at start Corrected number (a) d 1 30,000 ppm 9 dand 9 Total 30 30 60 60 30 30 60 60 FORESTOMACH EPITHELIAL TUMOURS Papillomas and acanthomas Carcinomas No. No. 50 60 11 0 (a) Alive animals after 24 weeks, when the first tumour (3 Zymbal gland carcinoma) was observed. R&S 108518 TABLE 30 Experiment BT6 : Exposure by inhalation to Vinyl Chloride in air at 30,000 ppm, 4 hours daily, 5 days weekly, for 52 weeks. Results after 68 weeks (end of experiment). DISTRIBUTION OF THE SUBCUTANEOUS SARCOMAS FOLLOWING THE HISTOTYPES GROUPS NO. CONCEN TRATION ANIMALS (Sprague-Dawley rats, 17 weeks old at start) Sax No. at start Corrected number (a) 6 30 30 SUBCUTANEOUS SARCOMAS Rhabdomyo sarcomas Fibrosarcomas Others No. No. No. 00 0 1 30,000 ppm 9 30 30 0 0 0 6 and 9 60 60 0 0 0 Total 60 60 (a) Alive animals after 24 weeks, when the first tumour (a Zymbal gland carcinoma) was observed. TABLE 31 Experiment BT6 : Exposure by inhalation to Vinyl Chloride in air at 30,000 ppm, 4 hours daily, 5 days weekly, for 52 weeks. Results after 68 weeks (end of experiment). DISTRIBUTION OF THE ENCEPHALIC TUMOURS (OTHER THAN NEUROBLASTOMAS) FOLLOWING THE HISTOTYPES GROUPS NO. CONCENTRATION 1 30,000 ppm ANIMALS (Sprague-Dawley rats, 17 weeks old at start) Sex No. at start Corrected number (a) ENCEPHALIC TUMOURS Ependymomas Meningiomas Ol igodendrogliomas No. No. No. 6 30 30 0 0 0 0 30 30 0 0 0 Total 6 and 9 60 60 0 0 0 60 60 (a) Alive animals after 24 weeks, when the first tumour (a Zymbal gland carcinoma) was observed. 41 TABLE 32 Experiment BT1 : Exposure by inhalation to Vinyl Chloride in air at 10,000, 6,000, 2,500, 500, 250, 50 ppm, 4 hours daily, 5 days weekly, for 52 weeks. Results after 135 weeks (end of experiment). DISTRIBUTION OF REGRESSIVE CHANGES. R&S 108519 GROUPS CONCEN NO. TRATION ANIMALS (Sprague-Dawley rats, 13 weeks old at start) Sex No. at start d 30 VA 1 2,500 9 30 ppm 6 and 9 60 d 30 VC tl 10,000 9 30 PPm d and 9 60 6 30 VC III 6,000 9 ppm 30 6 and 9 60 d 30 VC IV 2,500 9 30 ppm d and 9 60 d 30 VC V 500 9 30 ppm d and 9 60 VI VII VIII Total VC 250 PPm d 9 d and 9 VC 50 Ppm d 9 d and 9 No. treatment (Control) d 9 d and 9 30 30 - 60 30 30 60 30 30 60 480 Liyer REGRESSIVE CHANGES Kidneys Adrenal glands No. % No. % No. % 3 10.0 0 - 0 - 11 36.7 0 - 2 6.7 14 23.3 0 - 2 3.3 3 10.0 0 - 0 - 4 13.3 0 - 0 - 7 11.7 0 - 0 - 3 10.0 1 3.3 4 13.3 0- 05 16.7 4 6.7 4 6.7 5 8.3 3 10.0 1 3.3 1 3.3 0 - 1 3.3 3 10.0 3 5.0 2 3.3 4 6.7' 4 13.3 0 - -0 - 1 3.3 0 5 8.3 0 - 00- 3 10.0 0 - 0- 1 3.3 0 - 3 10.0 4 6.7 0 - 3 5.0 2 6.7 0 - 0- 1 3.3 o ~ 10 33.3 3 5.0 0 - 10 16.7 1 3.3 0 - 1 3.3 6 20.0 0 - 0- 7 11.7 0 - 1 1.7 TABLE 33 Experiment BT1 : Exposure by inhalation to Vinyl Chloride in air at 10,000, 6,000, 2,500, 500, 250, 50 ppm, 4 hours daily, 5 days weekly, for 52 weeks. Results after 135 weeks (end of experiment). DISTRIBUTION OF PHLOGISTIC CHANGES GROUPS NO. 1 ANIMALS CONCENTRATION (Sprague-Dawley rats, 13 weeks old at start) Encephalic abscesses Meningitis PHLOGISTIC CHANGES Broncho pneumonia Pleurms Pericarditis Liver ab scesses and hepatitis Kidneys abscesses and nephritis Peritonitis Sex No, at start No % No % No % No. % No. % No % No % No. s VA 2,500 6 ? ppm d and 9 30 30 60 4 13 3 6 20.0 20 66-7 2 67 3 10 0 2 6.7 5 16,7 3 10 0 3.3 3 10.0 24 80.0 3 10 0 33 4 13.3 4 13.3 1 33 5 8.3 9 15 0 44 73 3 5 8.3 4 6.7 6 10 0 9 15 0 4 67 6 30 0 -0 - 11 36-7 2 6.7 2 6.7 0 - 3 10.0 0 - VC II 10,000 V 30 2 6.7 3.3 8 26 7 3 10.0 33 0 - 0-0 - ppm d and 9 60 2 3,3 7 19 31 7 5 8.3 3 5.0 0 - 3 50 0 - 6 30 0 - 3.3 15 50.0 3.3 0 -0 - 0- 0 - VC in 6,000 9 30 3.3 0 - 10 33.3 3 10.0 2 6.7 0 - 0- 0 - ppm d and 9 60 1 17 1.7 25 41.7 4 6.7 2 3.3 0 - 0- 0 - 6 30 0 -0 - 14 46.7 33 0 -0 - 0- 0 - VC IV 2,500 g 30 0 - 3 3 17 56.7 2 6.7 3.3 0 - 0- 0 * ppm d and 9 60 0 - 1.7 31 51.7 3 5.0 1.7 0 - 0- 0 - VC d 30 1 3.3 0 - 17 56.7 3.3 0 -0 - 3 26.7 2 6,7 9V 500 30 0 -0 - 11 36 7 2 6.7 0 - 3,3 10 33.3 3,3 ppm d and 9 60 1 1.7 ' 0 - 28 46.7 3 5.0 0 -1 1.7 18 30.0 3 5.0 VI VII VIII ^ Total VC 250 ppm d 30 9 30 6 and 9 60 1 1 2 VC 50 ppm d 9 <5 and 9 30 30 60 0 2 2 6 No treat ment 9 (Control) d and 9 30 30 60 2 2 4 480 3.3 0 3.3 0 3.3 0 -1 6-7 1 3.3 2 6.7 0 6.7 0 6-7 0 - 21 70.0 3 10 0 0 - 14 46.7 1 3.3 0 - 35 52.3 4 6.7 0 3,3 20 66.7 2 6.7 1 3.3 16 53.3 2 6.7 1 3 3 36 60.0 4 6.7 2 - 17 56.7 3 10.0 1 - 10 33.3 2 6.7 0 - 27 45.0 5 8.3 1 -1 -1 -2 33 0 3.3 0 3,3 0 33 2 ~0 1.7 2 3.3 0 - 0 - 3.3 2 6.7 3 10,0 3.3 2 3.3 3 5.0 - 5 16.7 2 6,7 - 3 10.0 1 3,3 - 8 13.3 3 5.0 6.7 8 26.7 4 13.3 - 15 50.0 2 6.7 3.3 23 38.3 6 10.0 ZS80i 30 flo W R&S 108521 TABLE 34 Experiment BT1 : Exposure by inhalation to Vinyl Chloride in air at 10,000, 6,000, 2,500, 500, 250, 50 ppm, 4 hours daily, 5 days weekly, for 52 weeks. Results after 135 weeks (end of experiment). INCIDENCE OF ADENOMATOUS HYPERPLASIA OF RESPIRATORY EPITHELIA GROUPS NO. CONCEN TRATION ANIMALS (Sprague-Dawley rats, 13 weeks old at start) Sex No. at start ADENOMATOUS HYPERPLASIA OF RESPIRATORY EPITHELIA No. % 6 VA 1 2,500 9 ppm 6 and 9 d VC II 10,000 9 PPm d and 9 30 30 60 30 30 60 3 10.0 9 30.0 12 20.0 3 10.0 2 6.7 5 8.3 d VC III 6,000 9 ppm d and 9 d VC IV 2,500 Ppm 9 d and 9 30 30 60 30 30 60 4 13.8 1 3.3 5 8.5 8 26.6 5 16.7 13 21,7 6 VC V 500 ppm 9 6 and 9 30 30 60 6 20.0 7 23.3 13 21.7 6 VC VI 250 ppm 9 dand 9 30 30 60 3 10.0 3 10.0 6 10.0 VII VC 50 ppm 6 9 d and 9 30 30 60 9 30.0 6 20.0 15 25.0 VIII No. treatment 6 9 d and 9 30 30 60 3 10.0 2 6.7 5 8.3 Total 480 44 )1 GROUPS NO. TABLE 35 Experiment BT1 : Exposure by inhalation to Vinyl Chloride in air at 10,000, 6,000, 2,500, 500, 250, 50 ppm, 4 hours daily, 5 days weekly, for 52 weeks. Results after 135 weeks (end of experiment). INCIDENCE OF PITUYTARY ADENOMATOUS GROWTH CONCEN TRATION ANIMALS (Sprague-Dawley rats, 13 weeks old at start) Sex No. at start NODULAR ADENOMATOUS HYPERPLASIA No. % ADENOMAS No. % TOTAL No. % A 30 VA 1 2,500 9 30 ppm A and 9 60 A 30 VC II 10,000 9 ppm 30 6 and 9 60 A 30 VC III 6,000 9 ppm 30 <5 and 9 60 0 0 0 0 0 0 0 0 0 - - - - ) lv VC 2,500 PPm 6 9 cfand 9 30 30 60 0 0 0 - 6 30 0 - VC V 500 9 ppm 30 1 dand 9 60 1 3.3 1.7 6 30 0 VC VI 250 9 ppm 30 0 cf and 9 60 0 - ,, A VC VII 50 9 30 0 - 30 1 3.3 A and 9 60 1 1.7 VIII Total No treatment A 9 A and 9 30 30 60 480 0 0 0 - 0 -00-00 - '0 - 1 3.3 1 3.3 0 - 0- 1 1.7 1 1.7 0 -0 - 0-0- 0-00 -0- 1 3.3 1 3.3 1 1.7 1 1.7 0 -0- 0 - 1 3.3 0 - 1 1.7 0 -0 - 0-0- 02 6.7 02 6.7 1 3.3 2 6.7 3 5.0 4 6.7 0 -0 1 3.3 1 3.3 1 1.7 1 1.7 TABLE 36 Experiment BT1 : Exposure by inhalation to Vinyl Chloride in air at 10,000, 6,000, 2,500, 500, 250, 50 ppm, 4 hours daily, 5 days weekly, for 52 weeks. Results after 135 weeks (end of experiment). DISTRIBUTION OF THE DIFFERENT TYPES OF TUMOURS GROUPS NO. CON' CENTRATION ANIMALS (Sprague-Dawley rats, 13 weeks old at start) Mammary tumours lb) ANIMALS WITH TUMOURS Zymbal gland carcinomas Leukaemias Nephrooiastomas Average Average Average Average Sax No. at start Corrects number (a) Total No. % (c) latency time Total No (weeks) % (c) latency time Total No (weeks) % (c) latency time (weeks) Total No % (c) latency time (weeks) (d) (e) (e) (e) 4 VA 1 2,5>0 ppm 9 30 30 O and 9 60 6 30 VC II 10,000 9 30 ppm d and 9 60 4 30 VC lit 6,000 9 30 ppm d and 9 60 6 30 VC IV 2,500 ppm 9 30 d and 9 60 6 30 VC V 500 9 30 ppm d and 9 60 6 30 VC VI 250 9 30 ppm d and 9 60 VC VII SO 6 30 9 30 6 and 9 60 4 30 No VIII treat* mem 9 30 Control! d and 9 60 Total 480 26 27 53 30 30 60 29 30 59 30 30 60 30 30 60 29 30 59 30 30 60 29 29 58 469 0- - 0- - 0- - 0- - 4 14.8 79.0 0- - 0- - 0- - 4 7,5 79.0 0- - 0- - 0- - 1 , 3.3 73 0 10 33.3 52 0 0 - - 3 10.0 54,0 7 23.3 69.7 6 20.0 49 3 2 6 7 60 5 2 6 7 67.5 3 13 3 70 1 16 26,7 50 9 2 3 3 60 5 5 S 3 59 4 0- - 3 10.3 67 7 0 - - 4 13 8 67 0 6 20.0 80.7 4 13 3 59 2 0 - - 3 3 59.0 6 10.2 80 7 7 11 9 62,8 0 - - 5 8.5 65.4 0 - - 1 3 3 41.0 0 - - 5 16.7 69.2 5 16.7 96,6 1 33 26 0 1 3 3 102,0 1 3,3 99 0 5 a 3 96.6 2 33 33,5 1 1,7 102.0 6 10.0 74.2 0 - - 3 10.0 74 0 0 - - 2 6.7 32.0 5 16.7 103 2 1 3.3 97 0 2 6 7 71.0 4 13.3 83 0 5 8.3 103.2 4 6.7 79.7 2 3,3 71 0 6 10.0 82.7 0- - 0- - 1 34 107 0 ] 3.4 70 0 7 23 3 90,6 0 - - 0 - - 4 13 3 60.5 7 11.9 90.6 0 - - 1 1 7 1Q70 5 8,5 78 4 1 3,3 130.0 0 - - 0- - 0- - 11 36.7 97.2 0 - - 0 - - 1 3.3 135.0 12 20.0 99.9 0 - - 0 - - 1 1.7 135.0 2 6,9 S6.0 0- - 0- - 0- - 12 41 4 102.5 0 - - 1 3 4 1170 0 - - 14 24 ] 100 1 0 - - 1 1 7 1170 0 - - (a) Alive animals after 22 weeks, when the first tumour (a subcutaneous angiosarcoma) was observed. (b) Two or more tumours of the same and/or different types (fibroadenomas, carcinomas, sarcomas, carcinosarcomas) may be present in the same animal (c) The percentages are referred to the corrected number (d) Average age at the onset of the first mammary tumour per animal detected at the periodic control or at autopsy (e) Average time from the start of the experiment to the detection (at the periodic control or at autopsy). (f) Several animals with two or more tumours. R&S 108523 46 TABLE 36 Experiment BT1 : Exposure by inhalation to Vinyl Chloride in air at 10,000, 6,000, 2,500, 500, 250, 50 ppm, 4 hours daily, 5 days weekly, for 52 weeks. Results after 135 weeks (end of experiment). DISTRIBUTION OF THE DIFFERENT TYPES OF TUMOURS (second part) GROUPS NO. CON' CEN TRATION Total No. Angiosarcomas Liver Other sites Average Average % (cl latency time (weeks! Total No. % (cl latency time (weeks! Total No, (e) (el ANIMALS WITH TUMOURS Angiomas and fibroangiomas Liver Other i ites Average Average % (c) latency time (weeks) Total No. % (c! latency time (weeks) Total No. (el () % (c) Forestomach epithelial tumotjrs Average Average latency time (weeks! Total No, % (Cl latency time (weeks! (e) (e) 0- - 0 - - 0 - - 0 - - 0 - - 0 - - VA 1 2,500 0 - - 0- - 0- - 0- - 0- - 0- - ppm 0- - 0- - 0- - 0- - 0- - 0- - 3 10.0 59.0 2 6.7 61.5 0 - - 2 6.7 31.0 3,3 60.0 0 - - VC It 10,000 4 13-3 72.0 3.3 51.0 0 - - 1 3,3 65.0 0 - - 0- - ppm 7 11.7 66.4 3 5.0 58.0 0 - - 3 5 0 42.3 1 1.7 60.0 0 - - 3 10.3 63.3 34 34.0 0 - - 2 6.9 79.0 0 - - 0- - VC III 6.000 10 33.3 71.0 2 6.7 62.5 2 6.7 87.5 2 6.7 73.0 1 3.3 84.0 1 3.3 50.0 ppm 13 22.0 70.4 3 5.1 53.0 2 3.4 87.5 4 68 76.0 1 1.7 84.0 1 1.7 50.0 6 20.0 77.3 2 6.7 58,0 0 - - 1 3.3 86.0 0 - - 0- - VC IV 2,500 7 23 3 77.4 1 3.3 70.0 0- - 1 3,3 60,0 2 6.7 98.0 0 - - ppm 13 21.7 77.4 3 5.0 62.0 0 - - 2 3.3 73.0 2 3,3 98.0 0 - - 0- - 0- - 0- - 1 3.3 79.0 0 - - 0- - VC V 500 6 20.0 84.7 1 3.3 73.0 0 - - 0- - 5 16.7 90.6 0 - - ppm 6 10.0 84.7 1 1.7 73.0 0 - - 1 1.7 79.0 5 8.3 90.6 0 - - 1 3.4 116.0 1 3.4 101.0 0 - - 0- - 1 3.4 90.0 0 - - VC VI 250 2 6.7 56 0 1 3.3 82.0 1 3.3 104.0 0 - - 0- - 0- - ppm 3 5.1 76.0 2 3.4 91.5 1 1.7 104.0 0 - - - 1,7 90.0 0 - - 0- - 1 3.3 135,0 0 - - 0- - 0- - 1 3,3 73.0 VC VII 50 1 3.3 135.0 0 - - 0- - 2 6.7 91.5 0 - - 0- - ppm 1 1.7 135.0 1 1.7 135.0 0 - - 2 3.3 91.5 0 - - ' 1.7 73.0 VIII Total 0No treat ment 0 (Control) 0- - 000- - 000- - 0- - 0- 2 6.9 86.0 0 - 2 3.4 86,0 0 - " - 0 - - 0- - 0- - 00 So CO fr2S8(H 47 R&S 108525 TABLE 36 Experiment BT1 : Exposure by inhalation to Vinyl Chloride in air at 10,000, 6,000, 2,500, 500, 250, 50 ppm, 4 hours daily, 5 days weekly, for 52 weeks. Results after 135 weeks (end of experiment). GROUPS NO. 1 II DISTRIBUTION OF THE DIFFERENT TYPES OF TUMOURS CONCEN TRATION Skin carcinomas Subcutaneous sarcomas ANIMALS WITH TUMOURS Encephalic tumours Neuroblastomas Other types Others Total % No. (c) Average latency time (weeks) (e) Total No. % (e> Average latency time (weeks) Total No. (e) % (c) Average latency time (weeks) <e) No, % Total Benign (0 No. No. Mali gnant No. VA 2,500 ppm 000- - 0 00- - - 000- - 0 -0 1 3.7 1 1 1.9 1 0 1 0 0 0 VC 10,000 ppm 2 6.7 59.5 0 33 55.0 0 - 3 5.0 58.0 0 - - 2 6.7 52.0 0 - 6 5 16.7 54.2 0 - 3 7 11.7 53.6 0 -9 5 2 7 1 1 2 (third part) Total (f) No. of different No. % tumours/ (c) tumours bearing animals 0- - 6 22 2 1 0 6 11.3 1.0 21 70.0 1 5 20 66.7 1.6 41 63.3 1.5 VC III 6,000 ppm 0- - 0- 2 6.7 64.5 0 - 2 3.4 64.5 0 - - 2 6-9 62.0 1 3 3 50.0 3 5.1 58.0 0 -3 1 3.3 8 1 1.7 11 2 3 10 1 13 44 8 1.4 0 22 73.3 1.9 1 35 59.3 1 7 VC IV 2,500 ppm 0- - 0- 1 3.3 71.0 0 - 1 1.7 71.0 0 - - - 2 6,7 76.5 0 - 4 2 6.7 84.0 2 6.7 4 4 6.7 80.2 2 3.3 3 4 2 6 0 15 50.0 1.4 2 18 60.0 1 6 2 33 55.0 1.5 VC V 500 ppm 1 3.3 74.0 0 - 0- - 0- 1 1.7 74 0 0 - - 000- - 1 3.3 3 1 3.3 4 2 33 7 3 1 4 0 10 33.3 1.1 3 20 66.7 1.4 3 30 50.0 1.3 VC VI 250 ppm 1 3.4 86.0 0 1 3.3 89.0 0 2 3.4 87.5 0 - - - 000- - - 0 -8 0 -4 0 - 12 7 3 10 1 n 37.9 1.3 1 15 50.0 1.3 2 26 44 1 1.3 VC VII 50 ppm 1 3.3 89.0 0 - 0- - 0- 1 1.7 89.0 0 - - 000- - 0 -5 0- 8 0 - 13 5 5 10 0 8 26.7 1.1 3 16 53.3 1.4 3 24 40.0 1.3 0- - 0- - 0- - 0- 5 5 No VIII treatment (Control) 1 3.4 85.0 0 - - 0- - 0 - 11 5 1 1.7 85.0 0 - - 0- - 0 - 16 10 0 6 20.7 1.2 6 19 65.5 1.4 6 25 43.1 1.4 Total 48 R&S 108526 TABLE 37 Experiment BT1 : Exposure by inhalation to Vinyl Chloride in air at 10,000, 6,000, 2,500, 500, 250, 50 ppm, 4 hours daily, 5 days weekly, for 52 weeks. Results after 135 weeks (end of experiment), DISTRIBUTION OF THE DIFFERENT TYPES OF MISCELLANEOUS (OTHERS) TUMOURS GROUPS SEX NO. No. 1 d0 - ANIMALS BEARING OTHER TUMOURS Benign Malignant Distribution of histotypes No. Distribution of histotypes 0- 91 1 pheochromocytoma 0- III IV >v VI VII tf 5 92 d2 98 d4 92 d3 91 67 93 65 95 1 skin acanthoma 3 Zymbal gland adenomas 1 pheochromocytoma 1 Zymbal gland adenoma 1 neurilemoma 1 Zymbal gland acanthoma 1 Zymbal gland adenoma 2 Zymbal gland adenomas 1 cholangioma 1 adrenal gland cortical adenoma 3 pheochromocytomas 1 myoma of the uterus 1 Zymbal gland adenoma 1 kidney adenoma 1 adrenal gland cortical adenoma 1 pheochromocytoma 1 subcutaneous fibroma 1 pheochromocytoma 1 Zymbal gland adenoma 1 adrenal gland cortical adenoma 1 pheochromocytoma 1 adrenal gland cortical adenoma 1 dermatofibroma 1 cholangioma 1 kidney adenoma 3 pheochromocytomas 1 osteoma 1 dermatofibroma 1 adrenal gland cortical adenoma 1 pheochromocytoma 1 adrenal gland cortical adenoma 4 pheochromocytomas 1 skin angiopericytoma 2 Zymbal gland adenomas 1 adrenal gland cortical adenoma 1 pheochromocytoma 1 rhabdomyosarcoma of diaphragm 1 1 1 ovarian cystoadenocarcinoma 1 1 salivary gland adenocarcinoma 0- 0- 2 2 adenocarcinomas of the uterus 01 pulmonary fibrosarcoma 3 1 pheochromoblastoma 1 carcinoma of the uterus 1 osteosarcoma 1 1 salivary gland carcinoma 1 0- 3 3 adenocarcinomas of the uterus VIII c$ 5 95 5 pheochromocytomas 1 Zymbal gland acanthoma 1 adrenal gland cortical adenoma 3 pheochromocytomas 0- 1 dermal fibrosarcoma 1 pulmonary sarcoma 6 1 ovarian fibrosarcoma 2 adenocarcinomas of the uterus (1 with fibrosarcomatous component) 1 leiomyosarcoma of the uterus 0 1 6 3 3 8 4 4 3 4 8 4 5 8 5 11 49 TABLE 38 Experiment BT1 : Exposure by inhalation to Vinyl Chloride in air at 10,000 6,000, 2,500, 500, 250, 50 ppm, 4 hours daily, 5 days weekly, for 52 weeks. Results after 135 weeks (end of experiment). DISTRIBUTION OF THE DIFFERENT TYPES OF MAMMARY TUMOURS GROUPS NO. CONCEN TRATION ANIMALS (Sprague'Davdey rati, 13 old at start) Sex N at start Corrected number (a) MAMMARY TUMOURS (b) Total No. Average % (cl latency time (weeks) Id) (first p N. of tumour}/ tumours bearing animals 6 30 26 0 - - VA 1 2,500 9 30 27 4 14.8 79.0 1.0 ppm 6 and 9 60 53 4 7.5 79.0 1.0 8 30 30 1 3.3 73.0 1.0 VC n 10,000 9 30 30 7 23.3 69.7 1.1 ppm dand 9 6Q 60 3 13.3 70.1 1.1 d 30 29 0 - - - VC mi 6,000 9 30 30 6 20.0 80.7 1.5 ppm d and 9 60 59 6 10.2 ao.7 1.5 8 30 30 0 - - - VC IV 2,500 9 30 30 5 16.7 96.6 1.8 ppm dand 9 60 60 5 8.3 96.6 1.8 6 30 30 0- - - VC V 500 9 30 30 5 16.7 103.2 1.0 ppm d and 9 60 60 5 8.3 103.2 1.0 8 30 29 0 - - - vc VI 250 9 30 30 7 23.3 90.6 1.1 ppm d and 9 60 59 7 11.9 90.6 1.1 d 30 30 1 3.3 130.0 1.0 VC VII 50 9 30 30 11 36.7 97.2 1.4 ppm d and 9 60 60 12 20.0 99.9 1.3 8 30 29 2 6.9 86.0 1.0 VIII treatment 9 30 29 12 41.4 102.5 1.0 dand 9 60 56 14 24.1 100.1 1.0 Total 480 469 (a) Alive animals after 22 weeks, when the first tumour (a subcutaneous angiosarcoma) was observed. (b) Two or more tumours of the same and/or different types (fibroadenomas, carcinomas, sarcomas, carcinosarcomas) may be present in the same animal. (c) The percentages are referred to the corrected number. Id) Average age at the onset of thefirst mammary tumour per animal detected at the periodic control or at autopsy. (e) The percentages are referred to total number of animals bearing mammary tumours. (f) The percentages are referred to total number of animals bearing mammary tumours, histologically examined. R&S 108527 50 R&S 108528 TABLE 38 Experiment BT1: Exposure by inhalation to Vinyl Chloride in air at 10,000, 6,000, 2,500, 500, 250 50 ppm, 4 hours daily, 5 days weekly, for 52 weeks. Results after 135 weeks (end of experiment). DISTRIBUTION OF THE DIFFERENT TYPES OF MAMMARY TUMOURS (second part) GROUPS CONCEN* NO. TRATION Total No. % (a) Fibromas and fibroadenomas MAMMARY TUMOURS (bl Histologically examined Histotyoe Carcinomas Sarcomas Carcinosarcomas Average Average Average Average No. % (0 latency time (weeks) No. % Cfl latency time (weeks) No. % (f) latency time (weeks) No. % (f) latency time (weeks) (d) (d) (d) (d) 0- 0- - 0 - - 0 - - 0 - - VA I 2,500 3 75.0 3 100.0 89.0 0 - - 0- - 0- - ppm 3 75.0 3 100.0 89.0 0 - - 0- - 0- - 1 100.0 1 100.0 73.0 0 - - 0- - 0- - VC It 10,000 6 85.7 3 50.0 71.3 3 50.0 69.7 0 - - 0- - ppm 7 87.5 4 57.1 71.7 3 42.8 69.7 0 - - 0- - 0 - 0- - 0- - 0 - - 0- - VC III 0,000 6 100.0 6 100.0 80.7 0 - - 0- - 0- - ppm 6 100.0 6 100.0 80.7 0 - - 0- - 0- - 0- 0- - 0 - - 0 - - 0- - VC IV 2,500 5 100.0 4 80.0 92.2 2 40.0 94.0 0 - - 0- - ppm 5 100.0 4 80.0 92.2 2 40.0 94.0 0 - - 0- - 0- 0- - 0 - - 0 - - 0- - VC V 500 4 80.0 3 75.0 103.3 1 25.0 108.0 0 - - 0- - ppm 4 80.0 3 75.0 103.3 1 25.0 108.0 0 - - 0- - 0- 0- - 0- - 0- - 0- - VI 250 6 85,7 4 66.7 93,0 2 33.3 78.0 0 - - 0- - ppm 6 85.7 4 66.7 93.0 2 33.3 78.0 0 - - 0- - 1 100.0 1 100.0 130.0 0 - - 0- - 0- - VII 50 10 90.9 8 80.0 96.1 2 20.0 114.5 0 - - 0- - ppm 11 91.7 9 81.8 99.9 2 18.2 114.5 0 - - 0" - 2 100.0 2 100.0 86.0 0 - - 0- - 0- - VIII treatment 12 100.0 12 100.0 102.5 0 - - 0- - 0" - Total 14 100.0 14 100.0 100.1 0 - - 0 - - 0 - - R&S 108529 TABLE 39 Experiment BT1 : Exposure by inhalation to Vinyl Chloride in air at 10,000, 6,000, 2,500, 500, 250, 50 ppm, 4 hours daily, 5 days weekly, for 52 weeks. Results after 135 weeks (end of experiment). DISTRIBUTION OF THE EXTRAHEPATIC ANGIOSARCOMAS FOLLOWING THE SITE GROUPS NO. 1 II III IV V VI VII VIII SEX d 9 d 9 6 9 d 9 d 9 d 9 6 9 6 9 NO. 0 0 2 1 1 2 2 1 0 1 1 1 1 0 O 0 EXTRAHEPATIC ANGIOSARCOMAS 1 angiosarcoma of the lips 1 intra-abdominal angiosarcoma (next to liver) 1 angiosarcoma of the nose 1 angiosarcoma in subcutaneous fibrosing angioma 1 ossifying parauricular angiosarcoma 1 intra-abdominal angiosarcoma (next to liver) 1 ossifying angiosarcoma of the neck 1 intra-abdominal angiosarcoma (next to spleen) 1 ovarian angiosarcoma 1 pulmonary angiosarcoma 1 intra-abdominal angiosarcoma (next to spleen) 1 intra-thoracic oesifying angiosarcoma 1 intra-abdominal diffused angiosarcoma - _, 4 52 TABLE 40 Experiment BT1 : Exposure by inhalation to Vinyl Chloride in air at 10,000, 6,000, 2,500, 500, 250, 50 ppm, 4 hours daily, 5 days weekly, for 52 weeks. Results after 135 weeks (end of experiment). DISTRIBUTION OF THE EXTRAHEPATIC ANGIOMAS AND FIBROANGIQMAS FOLLOWING THE SITE GROUPS NO. SEX d NO. 0 EXTRAHEPATIC ANGIOMAS AND FIBROANGIOMAS - o 0- 6 2 2 subcutaneous fibrosing angiomas II 0 1 1 subcutaneous fibrosing and ossifying angioma 6 2 2 subcutaneous fibrosing angiomas III 9 1 subcutaneous fibrosing angioma 2 1 peritoneal angioma 6 1 1 Zymbal gland fibroangioma IV 9 1 1 subcutaneous fibroangioma 6 1 1 Zymbal gland fibrosing angioma 9 0- d 0VI 9 0- 6 0VII 9 1 subcutaneous fibrosing angioma 2 1 thymic angioma d 0- 9 2 2 peritoneal fibroangiomas R&S 108530 53 TA.'iLE 41 Experiment BT1 : Exposure by inhalation to Vinyl Chloride in air at 10,000 6,000, 2,500, 500, 250, 50 ppm, 4 hours daily, 5 days weekly, for 52 weeks. Results after 135 weeks (end of experiment). DISTRIBUTION OF THE FORESTOMACH EPITHELIAL TUMOURS FOLLOWING THE HISTOTYPES GROUPS NO. CONCENTRATlON VA 1 2,500 Ppm ANIMALS 1 3 weeks old at start) Sex No.at stan Corrected number (a) d 30 26 9 d and 9 30 60 27 53 FORESTOMACH EPITHELIAL TUMOURS Papillomas and acanthomas Carcinomas No. No. 00 00 00 d 30 VC II 10,000 9 ppm 30 d and 9 60 6 30 VC III 6,000 9 30 ppm dand 9 60 d 30 VC IV 2,500 9 30 ppm dand 9 60 d 30 VC V 500 9 30 ppm d and 9 60 d 30 VI 250 9 30 ppm d and 9 60 d 30 VII 50 ppm 9 30 d and 9 60 d 30 30 30 60 29 30 59 30 30 60 30 30 60 29 30 59 30 30 60 29 0 0 0 0 1 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 1 0 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 VIII treatment 9 (Control) dand 9 30 60 29 58 0 0 Total 480 469 (a) Alive animals after 22 weeks, when the first tumour (a subcutaneous angiosarcoma) was observed. 0 0 R&S 108531 54 TABLE 42 Experiment BT 1 : Exposure by inhalation to Vinyl Chloride in air at 10,000, 6,000, 2,500, 500, 250, 50 ppm, 4 hours daily, 5 days weekly, for 52 weeks. Results after 135 weeks (end of experiment). DISTRIBUTION OF THE SUBCUTANEOUS SARCOMAS FOLLOWING THE HISTOTYPES. R&S 108532 GROUPS NO. 1 II III 1" V VI VII VII Total CONCEN TRATION VA 2,500 ppm VC 10.000 ppm VC 6,000 . ppm VC 2.500 ppm VC 500 PPm VC 250 Ppm VC 50 ppm No treatment ANIMALS (Sprague-Dawley rats, 13 weeks old at start) Corrected Sex No. at start number (a) d' 30 26 9 30 27 d and 9 d 9 6 and 9 d 9 d and 9 d 9 dand 9 d 9 d and 9 6 9 60 30 30 60 30 30 60 30 30 60 30 30 60 30 30 53 30 30 60 29 30 59 30 30 60 30 30 60 29 30 d and 9 60 59 d 9 d and 9 d 30 30 60 30 30 30 60 29 9 d and 9 30 60 480 29 58 469 SUBCUTANEOUS SARCOMAS Rhabdomyo sarcomas Fibrosarcomas Others No. No, No 00 00 00 00 00 00 00 00 00 0. 0 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 00 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 ) Alive animals after 22 weeks, when the first tumour (a subcutaneous angiosarcoma) was observed. R&S 108533 TABLE 43 Experiment BT1 : Exposure by inhalation to Vinyl Chloride in air at 10,000, 6,000, 2,500, 500, 250, 50 ppm, 4 hours daily, 5 days weekly, for 52 weeks. Results after 135 weeks (end of experiment). DISTRIBUTION OF THE ENCEPHALIC TUMOURS (OTHER THAN NEUROBLASTOMAS) FOLLOWING THE HISTOTYPES GROUPS NO 1 II CONCEN TRATION VA 2,500 ppm VC 10,000 ppm ANIMALS (Sprague-Dawley rats. 13 weeks old at start) ENCEPHALIC TUMOURS Ependymomas Meningiomas Oligodendro- gl iomas Sex No. at start Corrected number (a) No. No. No. d 30 26 0 0 0 9 30 27 0 1 0 6 and 9 60 53 0 1 0 6 30 30 0 0 0 9 30 30 0 0 0 d and 9 60 60 0 0 0 6 30 29 0 0 0 VC III 6,000 9 30 30 0 0 1 ppm d and 9 60 59 0 0 1 6 30 30 0 0 0 VC IV 2,500 9 30 30 2 0 0 ppm d and 9 60 60 2 0 0 6 30 30 0 0 1 VC V 500 9 30 30 0 1 0 PPm d and 9 60 60 0 1 1 d 30 29 0 0 0 VC VI 250 9 30 30 0 0 0 ppm dand 9 60 59 0 0 0 d 30 30 0 0 0 VII 50 9 30 30 0 0 0 ppm d and 9 60 60 0 0 0 d 30 29 0 0 0 No VIII treatment 9 30 29 0 0 0 (Control) d and 9 60 58 0 0 0 Total 480 469 (a) Alive animals after 22 weeks, whan the first tumour (a subcutaneous angiosarcoma) was observed. 56 TABLE 44 Experiment BT2 : Exposure by inhalation to Vinyl Chloride in air at 200, 150, 100 ppm, 4 hours daily, 5 days weekly, for 52 weeks. Results after 143 weeks (end of experiment). DISTRIBUTION OF REGRESSIVE CHANGES GROUPS NO. CONCEN TRATION ANIMALS (Sprague-Dawley rats, 13 weeks old at start) Sex No. at start d 60 1 200 ppm 9 60 d and 9 120 d 60 II 150 ppm 9 60 dand 9 120 6 60 III 100 ppm 9 60 dand 9 120 d No IV treatment 9 (Control) d and 9 85 100 185 Total 545 Liver No. % 13 21.7 18 30.0 31 25.8 14 23.3 13 21.7 27 22.5 15 25.0 16 26.7 31 25.8 14 16.5 23 23.0 37 20.0 REGRESSIVE CHANGES Kidneys No. % 000000000000- Adrenal glands No. % 1 1.7 11 18.3 12 10.0 1 1.7 11 18.3 12 10.0 1 1.7 11 18.3 12 10.0 1 1.2 20 20.0 21 11.3 R&S 108534 R7 S8S80I- S'Sti TABLE 45 Experiment BT2 : Exposure by inhalation to Vinyl Chloride in air at 200, 150, 100 ppm, 4 hours daily, 5 days weekly, for 52 weeks. Results after 143 weeks (end of experiment). DISTRIBUTION OF PHLOGISTIC CHANGES GROUPS NO. CONCEN TRATION ANIMALS (Sprague - Dawley rats, 13 weeks old at start) Sex No. at start Encephalic abscesses No. % Meningitis No. % Bronchopneu monia PHLOGISTIC CHANGES Pleuritis Pericarditis No. % No. % No. % Liver abscesses Kidneys absces and hepatitis ses and nephritis No. % No. % Peritonitis No. % d 60 0 -- 5 8.3 32 53.3 18 30.0 12 20.0 1 1.7 7 11.7 11 18.3 1 200 ppm 9 60 1 1.7 2 3.3 30 50.0 23 38.3 16 26.7 1 1.7 15 25.0 3 5.0 6 and 9 120 1 0.8 7 5.8 62 51.7 41 34.2 28 23.3 2 1.7 22 18.3 14 11.7 d 60 2 3.3 5 8.3 42 70.0 15 25.0 4 6.7 0 - 7 11.7 9 15.0 II 150 ppm 9 60 1 1.7 1 1.7 25 41.7 12 20.0 5 8.3 3 5.0 10 16.7 8 13.3 d and 9 120 3 2.5 6 5.0 67 55.8 27 22.5 9 7.5 3 2.5 17 14.2 17 14.2 & ________ d 60 4 6.7 3 5.0 46 76.7 8 13.3 6 10.0 0 - 6 10.0 3 5.0 III 100 ppm 9 60 0 - 1 1.7 41 68.3 9 15.0 3 5.0 2 3.3 5 8.3 4 6.7 d and 9 120 4 3.3 4 3.3 87 72.5 17 14.2 9 7.5 2 1.7 11 9.2 7 5.8 d 86 2 2.3 10 11.8 51 60.0 14 16.5 8 9.4 1 1.2 7 8.2 2 2.3 No. IV treatment (Control) 9 100 2 2.0 8 8.0 45 45.0 16 16.0 9 9.0 0 - 7 7.0 9 9.0 d and 9 185 4 2.2 18 9.7 96 51.9 30 16.2 17 9.2 1 0.5 14 7.6 11 5.9 Total 545 : -M `rJIM rtli " * t -it'*''' *>>**** r>**'as*-- R&S 108536 TABLE 46 Experiment BT2 : Exposure by inhalation to Vinyl Chloride in air at 200, 150, 100 ppm, 4 hours daily, 5 days weekly, for 52 weeks. Results after 143 weeks (end of experiment). INCIDENCE OF ADENOMATOUS HYPERPLASIA OF RESPIRATORY EP1THELIA GROUPS NO. CONCENTRATION 1 200 ppm II III IV Total 150 ppm 100 ppm No treatment (Control) ANIMALS (Sprague-Dawley rats, 13 weeks old at start) Sex 6 9 . dand 9 d 9 <5 and 9 6 9 dand 9 d 9 . d and 9 No. at start 60 60 120 60 60 120 60 60 120 85 100 185 545 ADENOMATOUS HYPER PLASIA OF RESPIRATORY EPITHELIA No. % 4 6.7 2 3.3 6 5.0 8 13.3 8 13.3 16 13.3 15 25.0 6 10.0 21 17.5 3 3.5 7 7.0 10 5.4 TABLE 47 Experiment BT2 : Exposure by inhalation to Vinyl Chloride in air at 200, 150, 100 ppm, 4 hours daily, 5 days weekly, for 52 weeks. Results after 143 weeks (end of experiment). INCIDENCE OF PITUITARY ADENOMATOUS GROWTH GROUPS NO. CONCEN TRATION 1 200 ppm II 150 ppm III 100 ppm IV Total No treatment (Control) ANIMALS (Sprague-Dawley rats, 13 weeks old at start) Sex No. at start d 60 9 d and 9 60 120 d 60 9 60 d and 9 120 d 60 9 60 d and 9 120 6 85 9 100 d and 9 185 545 NODULAR ADENOMATOUS HYPERPLASIA No. % 00001 1.7 1 0.7 00004 4.0 4 2.2 ADENOMAS No. % 1 1.7 01 0.8 02 3.3 2 1.7 1 1.7 1 1.7 2 1.7 1 1.2 2 2.0 3 1.6 TOTAL No. % 1 1.7 01 0.8 0-- 3 5.0 3 2.5 1 1.7 1 1.7 2 1.7 1 1.2 6 6.0 7 3.8 59 2S9801 S9U i 8 TABLE 48 Experiment BT 2 : Exposure by inhalation to Vinyl Chloride in air at 200,150, 100 ppm, 4 hours daily, 5 days weekly, for 52 weeks. Results after 143 weeks (end of experiment!. GROUPS CONCEN NO. TRATION ' 200 ppm ANIMALS (Sprsgue-Oawle 13 weeki old at start) Sax No. at Corrected start number la) <f 9 6 and 9 60 GO 120 60 60 120 DISTRIBUTION OF THE DIFFERENT TYPES OF TUMOURS ANIMALS WITH TUMOURS Mammary tumours lb) Zymbal gland carcinomas Leukaemias Nephrobl istomas Angiosarcomas Liver Other sites Average Average Average To % latency To % latency To % latency To % tal Id time tal (cl time tal (cl time tal tc) No. (weeks! No. (weeks) No. (weeks! No. (d) (a) <d Average latency To % time tal Id (weeks! No Id Average latency time (weeks) (e) To tal No. Average % latency (cl time (weeks) (e) 3 5.0 73.0 3 50 73.7 1 1.7 82.0 5 83 85.4 7 11.7 920 1 1.7 890 20 333 23 19.2 89.5 S7 .4 1 1.7 720 4 3.3 73.2 0- - 1 0.8 820 2 3.3 7 5.8 69.5 80.8 5 8.3 12 10.0 95.+ 93.4 0- - 1 0.8 890 (first part) Angiomas and fibroangiomas Liver Other sues Average Average To % latency To % latency tal ic) time tal (d time No. (weeks) No. (weeks) (el (d 2 3.3 90.0 0- - 2 33 90.5 1 1.7 '840 4 33 90.2 1 0.8 840 <f 60 59 1 1.7 590 0 - - 2 3.4 68.5 8 13.5 83.1 1 1.7 100.0 0 - - 0_ _ 0_ _ II 150 ppm 9 GO 60 12 20.0 99.2 4 6.7 910 0 - - 3 50 83.7 5 83 87.4 0 - - 0- - 1 1.7 1250 6 and 9 120 tig 13 10.9 96.1 4 3.4 91.0 2 1.7 68.5 11 92 83 3 6 50 89.5 0 - - 0- - 1 0.8 125 0 <s 60 60 0- _ 0- - 1 1.7 107.0 B 133 83.5 0 _ _ 0 __ 1 1.7 102.0 0 _ _ lit 100 ppm 9 60 60 20 33.3 97.4 1 1.7 80.0 1 1.7 106.0 2 33 69.0 1.7 85.0 0 - - 0- - 0- - (J and 9 120 120 20' 16,7 97.4 0.8 800 2 1.7 106.5 10 83 60 6 0.8 85 0 0 - - 1 o.a 1020 0 - - <s 85 85 1.2 140.0 0 -- _ 5 5.9 95.6 0 _ No tv treatment 9 100 100 20 200 10B.I 2 2.0 76.0 2 20 91.0 0 - (Control! cJand 9 185 185 21 11,3 110.5 2 1.1 760 7 3.7 94.3 0 - 0_ 2 2.3 67.5 0_ _ 0_ - 0- - Q - - 0- - 0- - 0- - 2 1.1 67.5 0- - 0- - Total 545 544 (a! Alive animals after 12 weeks, when the first tumour (a mammary fibrosarcoma) was observed, (b) Two or more tumours of the same and/or different types (fibroadenomas, carcinomas, sarcomas, carcinosarcomas) may be present in the same animal.. (c) The percentages are referred to the corrected number. (d) Average age at tha onset of the f irst mammary tumour per animal detected at the periodic control or at autopsy. (e) Average time from the start of the experiment to the detection (at the periodic control or at autopsy). If) Several animats with two or more tumours. 1 * < * t **4"' * TABLE Experiment BT 2 : Exposure by inhalation to Vinyl Chloride in air at 200,150,100 ppm, 4 hours daily, 5 days weekly, for 52 weeks. Results after 143 weeks (end of experiment). DISTRIBUTION OF THE DIFFERENT TYPES OF TUMOURS (second part) ANIMALS WITH TUMOURS GROUPS NO. Encephalic tumours Forestomach Hepatomas epithelial Skin carcinomas Subcutarteous Neuroblastomas Other Others tumours sarconlas types CONCEN- TRATION To % Ave rage latency To % Average latency To % Average Average latency To % latency To % Average latency % To Be Malign tal (c) time tal <c) time tal (cl time tal (c) time tal Ic) time No. (c) tal nign ant No. No. (weeks) No. (wee ks) No. (wee ks) No. (weeks) No. (weeks) No. No. No. (e) (e) <e> (el (e) Total (f) No. of dif % ferent tu (c) mours/tu mours bear ing animats i 1.7 126.0 0 - - 4 6.7 94.7 0 - - 0 - - 0 -4 3 1 22 36.7 1.4 1 200 ppm 2 3,3 107.5 0 - - 1 1.7 76.0 0 - - 0- - 0-7 5 2 31 51.7 1.3 3 2.5 113.7 0 - - 5 4.2 91.0 0 - - 0 - - 0 - 11 8 3 53 44.2 1.3 0-- 2 3.4 73.5 2 3.4 63.0 0 _ _ 0-- -- 0 -- 10 10 0 23 39.0 1.1 " 1 50 ppm 0 - - 0- - 2 3.3 90.0 0 - - 0 - - 2 3.3 13 6 7 33 55.0 1.3 0- - 2 1.7 73.5 4 3.4 76.5 0 - 0- - 2 1.7 23 16 7 56 47.0 1.2 . IH 100 ppm 0 0 0 -- - _ 2 3.3 90.0 0 _ _ 0_ 0-- - 2 3.3 92.5 1 1.7 60.0 0 - - 0 - 4 3.3 91.2 1 0.8 60.0 0 - 0" _ 2 3.3 12 9 - 0 -6 4 - 2 1.7 18 13 3 19 31.7 1.4 2 27 45.0 1 2 5 46 38.3 1.3 IV Total No treatment (Control) 0 0 0 ~ - - 2 2.3 88.0 2 2.3 114.5 2 2.3 . 69.0 0 - - 1 1.0 97.0 0 - - 0- - 0- - 3 1.6 91.0 2 1.1 114.5 2 1.1 690 0 - - 1 1.2 16 15 1 26 30.6 1.2 - 1 1.0 16 7 9 34 34.0 1.2 - 2 1.1 32 22 10 60 32.4 1.2 8CS801- S9U TABLE 49 Experiment BT2 . Exposure by inhalation to Vinyl Chloride in air at 200, 150, 100 ppm, 4 hours daily, 5 days weekly, for 52 weeks. Results after 143 weeks (end of experiment). DISTRIBUTION OF THE DIFFERENT TYPES OF MISCELLANEOUS (OTHERS) TUMOURS GROUPS NO. 1 SEX 6 9 ANIMALS BEA RING OTHER TUMOURS Benign No. Distribution of histotypes 3 2 pheochromocytomas 1 kidney adenoma Malignant No. Distribution ol histotypes 1 1 pheochromoblastoma Total 4 2 cholangiomas 1 retroperitoneal lipoma 5 1 leiomyof ibroma of the uterus 1 neurilemoma 1 angiopericytosarcoma of the uterus 1 neurmosarcoma 27 6 10 1 dermatofibroma 9 pheochromocytomas II 1 pulmonary fibroma 2 cholangiomas 9 6 . 2 pheochromocytomas 1 fibroma of the uterus 0- 1 pulmonary fibrosarcoma 1 spleen f ibrosarcoma 7 3 adenocarcinomas of the uterus 1 fibrosarcoma of the uterus 1 osteosarcoma 10 13 1 kidney adenoma 6 pheochromocytomas 6 9 1 Leydtg cell tumour 1 ganglioneuroma 1 dermal (ibiosarcoma 2 liver rhabdomyosarcomas 3 12 III 1 adrenal gland cortical adenoma 9 4 2 pheochromocytomas 2 2 adenocarcinomas of the uterus 6 1 fibroma of the uterus 1 dermal fibroma 1 subcutaneous lipoma 6 15 1 cholangioma 1 1 pulmonary chondrosarcoma I adrenal gland cortical adenoma 16 II pheochromocytomas IV 2 adrenal gland cortical adenomas 1 forestomach fibrosarcoma 5 pheochromocytomas 1 adrenal gland cortical adeno 97 carcinoma 9 5 adenocarcinomas of the uterus 1 fibrosarcoma of the uterus 16 1 fibrosarcoma of soft tissues of support R&S 108539 TASK 50 Experiment BT2 : Exposure by inhalation to Vinyl Chloride in air at 200, 150,100 ppm, 4 hours daily, 5 days weekly, for 52 weeks. Results after 143 weeks {end of the experiment). DISTRIBUTION OF THE DIFFERENT TYPES OF MAMMARY TUMOURS ANIMALS (Sprague-Dawiey rats, 1 3 weeks old at start MAMMARY TUMOURS (bl Histoloyically examined Histoiype GROUPS CONCEN Average No of NO. TRATION Total % latency tumours/ Fibromas and Corrected No. (c) time tumours Total % fibroadenomas Carcinomas Sarcomas Carcinosarcomas Sex No. at numbej (weeks) bear mg No. (e) start la) Id) animats Average Average Average Average Total latency Total lai ency Total latency Total latency No. % t ime No % time No. % t ime No % t ime (fl (weeks) (fl (weeks) It) (weeks) (f) Iweeks) (d) (cl) Id) (d) 6 60 60 3 5.0 73.0 1.0 2 66.7 1 50.0 113.0 0 - - 1 50 0 25.0 0 - - 1 200 ppm 9 60 60 20 33 3 89.5 1 2 17 85.0 12 70.6 96 7 5 29.4 80.6 0 - - 0- - d and 9 120 120 23 19 2 87.4 12 19 82.6 13 68.4 98 0 5 26 3 80.6 1 5.3 25 0 0 - - d 60 59 1 1.7 59 0 1.0 1 100.0 100.0 59.0 0 - - 0 - - 0 - - II 1 50 ppm 9 60 60 12 20.0 99.2 2.6 12 100.0 10 83 3 99 2 6 50.0 96 2 0 - - 0 - - d and 9 120 119 13 10 9 96.1 2.5 13 100.0 11 84.6 95.5 6 46.1 96.2 0 -- - 0- - 6 60 60 0 _ -- _ 0 _0_ -- 0 _ 0_ _ 0_ _ III 100 ppm 9 60 60 20 33.3 97.4 1.3 1 7 85.0 15 88.2 100 7 3 1 7.6 95.7 1 5.9 85.0 0 - - d and 9 120 120 20 16.7 97.4 1.3 17 85.0 15 88.2 100 7 3 1 7.6 95 7 1 5.9 85.0 0 - - \ 6 85 85 1 1.2 140.0 1.0 1 100 0 1 100.0 140.0 0 - - 0-- -- 0-- _ No IV treatment 9 (Control) 100 100 20 20.0 108.1 1.2 15 75 0 14 93 3 108.8 6.7 119.0 1 6.7 113.0 0 - - d and 9 185 185 21 11.3 110.5 1.2 16 76.2 15 93.7 110.9 6.2 119.0 \ 6.2 113.0 0 - - Total 545 544 la! Alive animals after 12 weeks, when the first tumour (a mammary fibrosarcoma) was observed. (bl Two or more tumours of the same and/or different types (fibroadenomas, carcinomas, sarcomas, carcinosarcomasl may be present in the same animal. lc) The percentages are referred to the corrected number. ld) Average age at the onset of t he f irst mammary tumour per animal detected at the periodic control or at autopsy. le) The percentages are referred to total number of animals bearing mammary tumours. lf) The percentages are referred to total number of animals bearing mammary tumours, histologically examined. 0173801- SSU R&S 108541 TABLE 51 Experiment BT2: Exposure by inhalation to Vinyl Chloride in air at 200, 150, 100 ppm, 4 hours daily, 5 days weekly, for 52 weeks. Results after 143 weeks (end of experiment). DISTRIBUTION OF THE EXTRAHEPATIC ANGIOSARCOMAS FOLLOWING THE SITE TABLE 52 Experiment BT2: Exposure by inhalation to Vinyl Chloride in air at 200, 150, 100 ppm, 4 hours daily, 5 days weekly, for 52 weeks. Results after 143 weeks (end of experiment). DISTRIBUTION OF THE EXTRAHEPATIC ANGIOMAS AND FIBROANGIOMAS FOLLOWING THE SITE GROUPS NO. 1 II III IV SEX 6 9 6 9 6 9 6 9 NO. 0 1 0 1 0 0 0 0 EXTRAHEPATIC ANGIOMAS ANO FI6ROANGIOMAS 1 fibroangioma of the intra-abdominal lymphnodes 1 thymic fibroangioma - 64 R&S 108542 TABLE 53 Experiment BT2 : Exposure by inhalation to Vinyl Chloride in air at 200,150,100 ppm, 4 hours daily, 5 days weekly, for 52 weeks. Results after 143 weeks (end of experiment). DISTRIBUTION OF THE FORESTOMACH EPITHELIAL TUMOURS FOLLOWING THE HISTOTYPES "------------------------ GROUPS NO. CONCEN TRATION ANIMALS (Sprague-Dawley rats, 13 weeks old at start) Corrected Sex No, at start number (a) FORESTOMACH EPITHELIAL TUMOURS Papillomas and acanthomas Carcinomas No. No. 1 II III IV Total 200 ppm 150 ppm 110 ppm No treatment (Control) d 9 d and 9 6 9 6 and 9 d 9 6 and 9 d 9 d and 9 60 60 120 60 60 120 60 60 120 85 100 185 545 60 60 120 59 60 119 60 60 120 85 100 185 544 0 0 0 2 0 2 2 2 4 2 1 3 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 (a) Alive animals after 12 weeks, when the first tumour (a mammary fibrosarcoma) was observed. TABLE 54 Experiment BT 2 : Exposure by inhalation to Vinyl Chloride in air at 200, 150, 100 ppm, 4 hours daily, 5 days weekly, for 52 weeks. Results after 143 weeks (end of experiment). DISTRIBUTION OF THE SUBCUTANEOUS SARCOMAS FOLLOWING THE HISTOTYPES GROUPS NO. CONCEN TRATION ANIMALS (Sprague-Dawley rats, 13 weeks old at start) Corrected Sex No. at start number (a) SUBCUTANEOUS SARCOMAS Rhabdomyo sarcomas Fibrosarcomas Others No. No. No. 1 (( III IV Total 200.ppm 150 ppm 100 ppm No treatment (Control) 6 9 d and 9 6 9 d and 9 6 9 d and 9 6 9 d and 9 60 60 120 60 60 120 60 60 120 85 100 185 545 60 60 120 59 60 119 60 60 120 85 100 185 544 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 00 00 00 00 00 00 00 00 00 20 00 20 () Alive animals after 12 weeks, when the first tumour (a mammary fibrosarcoma) was observed. 65 TABLE 5p Experiment BT2; Exposure by inhalation to Vinyl Chloride in air at 200, 150, 100 ppm, 4 hours daily, 5 days weekly, for 52 weeks. Results after 143 weeks (end of experiment). DISTRIBUTION OF THE ENCEPHALIC TUMOURS (OTHER THAN NEUROBLASTOMAS) FOLLOWING THE HISTOTYPES GROUPS NO. CONCEN TRATION t 200 ppm ANIMALS (Sprague-Oawley rats, 13 weeks old at start) ENCEPHALIC TUMOURS Ependymomas Meningiomas Oligodendro gliomas Sex No, at start Corrected number (a) No. No. No. 6 60 60 0 0 0 9 60 60 0 0 0 6and 9 120 120 0 0 0 6 60 59 0 0 0 II 150 ppm 9 60 60 0 1 1 6 and 9 120 119 0 1 1 6 60 60 0 1 1 III 100 ppm 9 60 60 0 0 0 6 and 9 120 120 0 1 1 6 85 85 0 0 1 No IV treatment 9 100 100 0 1 0 (Control) d and 9 185 185 0 1 1 Total 545 544 (a) Alive animals after 12 weeks, when the first tumour (a mammary fibrosarcoma) was observed. R&S 108543 66 TABLE 56 Experiment BT9: Exposure by inhalation to Vinyl Chloride in air at 50 ppm, 4 hours daily, 5 days weekly, for 52 weeks. Results after 142 weeks (end of experiment). DISTRIBUTION OF REGRESSIVE CHANGES GROUPS IMO. CONCEN TRATION ANIMALS (Sprague-Dawley rats, 13 weeks old at start) Sex No. at start <S 150 1 50 ppm 9 150 d and 9 300 d 50 No II treatment 9 (Control 1 50 d and 9 100 Total 400 REGRESSIVE CHANGES Liver Kidneys No. % No. % 41 27.3 0 - 57 38.0 1 0.7 98 32.7 1 0.3 7 14.0 0 - 9 18.0 0 - 16 16.0 0 - Adrenal glands No. % 7 4.7 83 55.3 90 30.0 027 54.0 27 27.0 R&S 108544 67 St>S80l S$H TABLE 57 Experiment BT9: Exposure by inhalation to Vinyl Chloride in air at 50 ppm, 4 hours daily, 5 days weekly, for 52 weeks. Results after 142 weeks (end of experiment). DISTRIBUTION OF PHLOGISTIC CHANGES GROUPS NO. 1 II Total CONCEN TRATION 50 ppm No treatment (Control) ANIMALS (Sprague-Dawley rats, 13 weeks old at start) PHLOGISTIC CHANGES Encephalic abscesses Meningitis Broncho pneumonia Pleuritis Liver absces Kidneys ab Pericarditis ses and scesses and hepatitis nephritis Peritonitis Sex No* at No. % No. % No. % No. % No. % No. % No. % No. % start 6 150 1 0.7 3 2.0 95 63.3 30 20.0 11 7.3 4 2.7 8 5.3 7 4.7 9 cf and 9 150 300 0 - 1 0.7 48 32.0 15 10.0 6 4.0 1 0.7 9 6.0 3 2.0 1 0.3 4 1.3 143 47.7 45 15.0 17 5.7 5 1.7 17 5.7 10 3.3 6 50 1 2.0 2 4.0 28 56.0 13 26.0 7 14.0 0 - 0 - 5 10.0 9 cf and 9 50 100 0 - 0 - 24 48.0 5 10.0 0 - 0 1 1.0 2 2.0 52 52.0 18 18.0 7 7.0 0 - 4 8.0 0- 4 4.0 5 5.0 400 R&S 108546 TABLE 58 Experiment BT9 : Exposure by inhalation to Vinyl Chloride in air at 50 ppm, 4 hours daily, 5 days weekly, for 52 weeks. Results after 142 weeks (end of experiment). INCIDENCE OF ADENOMATOUS HYPERPLASIA OF RESPIRATORY EPITHELIA GROUPS NO. I CONCENTRATtON 50 ppm ANIMALS (Sprague-Dawley rats. 13 weeks old at start) Sex No. at start 6 150 9 150 6and 9 300 ADENOMATOUS HYPERPLASIA OF RESPIRATORY EPITHELIA No. % 25 16.7 g 6.0 34 11.3 6 50 1 2.0 No II treatment 9 50 0 - (Control) dand 9 100 1 1.0 Total 400 TABLE 59 Experiment BT9: Exposure by inhalation to Vinyl Chloride in air at 50 ppm, 4 hours daily, 5 days weekly, for 52 weeks. Results after 142 weeks (end of experiment). INCIDENCE OF PITUITARY ADENOMATOUS GROWTH GROUPS NO. CONCENTRATION ANIMALS (Sprague-Dawley rats, 13 weeks old at start) Sex No. at start 6 150 1 50 ppm 9 150 6 and 9 300 6 50 No II treatment 9 50 (Control) 6 and 9 100 Total 400 NODULAR ADENOMATOUS HYPERPLASIA No. % 1 0.7 5 3.3 6 2.0 1 2.0 5 10.0 6 6.0 ADENOMAS No. % 8 5.3 3 2.0 11 3.7 1 2.0 1 2.0 2 2.0 TOTAL No. 9 8 17 2 6 8' % 6.0 5.3 5.7 4.0 12.0 - 8.0 IPS801 SSU TABLE 60 Experiment BT9: Exposure by inhalation to Vinyl Chloride in air at 50 ppm, 4 hours daily, 5 days weekly, for 52 weeks. Results after 142 weeks (end of experiments GROUPS NO CONC6NTRATION DISTRIBUTION OF THE DIFFERENT TYPES OF TUMOURS (first parti ANIMALS ANIMALS WITH TUMOURS {Sprague-Cawley ran, 1 3 weeks old at start) Mammary rumours {b) Zymbal gland carcinomas Leukaemias Nephroblastomas Angiosarcomas Liver Qiher sites Angiomas and f ibroangiomas Liver Other sites Average Average Average Average Average Average Sex No at start Corrected number (a) Total No. % Id latency nme (weeks! Total No. % Id latency time (weeks! Total No % (c) latency nme (weeks! Total No % Id laiency time (weeks) Total No % (c) latency time (weeksl Total No. % {cl latency lime (weeks) td> le) le) (e) (el (el To tal No. Average % Id latency time (weeks) To la) No % (cl id Average latency tune (weeks! (e) j 150 144 14 9 7 B8 9 419) 2.8 59 7 7 4 9 108.5 0 - 2 1.4 90.0 3 2.1 74.0 2 1.4 99.5 8 5.5 89.6 l 50 ppm 9 150 150 11? 78 0 76 9 5 33 71.6 3 2.0 68 3 1 0 7 112 0 12 8 0 96 0 6 4 0 84 6 6 40 96.8 3 20 75.0 Jdntj V 300 294 131 44.5 70.2 9 3.1 66 3 10 3 4 96.5 0.3 1120 14 4 8 95.1 9 3.1 81.1 a 2.7 97.5 11 3.7 85 6 6 50 4S 2 4.2 87 0 0 - - 6 12 5 91.3 0 - No II treatment 9 50 50 2? 54 0 94.6 0 - - 2 4 0 99.0 0 o (Control! <5 and 9 100 98 29 29.6 94.t 0 - - S 8.2 93 2 0 - 0- - 0- - 0- - 0- - 0- - 0 - - 000- - 0- 0- 0- - Total 400 392 (a) Alive animats after 28 weeks, when the first tumour (a mammary fibroadenoma! was observed. |bl Two or more tumours of the same and/or different types (fibroadenomas, carcinomas, sarcomas, carcinosarcomas! may be present in the same animal. |c) The percentages are referred to the corrected number. (d| Average age at the onset of the first mammary tumour per animal detected at the periodic control or at autopsy, le) Average time from the start of the experiment to the detection (at the periodic control or at autopsy). (f) Several animats with two or more tumours. (gl 1 with sarcomatous component. . if ^ *_ ABLE 60 Experiment BT 9 : Exposure by inhalation to Vinyl Chloride in air at50 ppm, 4 hours daily, 5 days weekly, for 52 weeks. Results after 142 weeks (end of experiment). DISTRIBUTION OF THE DIFFERENT TYPES OF TUMOURS (second pan] ANIMALSWITH TUMOURS GROUPS NO. CONCENTRATION Hepatomas Forestomach epithelial tumours Skin carcinomas Subcutaneous sarcomas Encephalic tumours Neuroblastomas Other types Others To % tal (0 No. Average latency time (weeks) (e) To tal No. % tc) Average latency time (weeks) (e) To tal No. % (c) Average latency time (weeks) (e) To tal No. Average % latency To Id time tal (weeks) No. (e) % (c) Average latency % To Be time No. (c) tal nign (weeks) No. No. (e) Malign ant No. No. Total (f) No. of dif % ferent tu (c) mours/tu mours bear, ing animals 0- - 1 0.7 112.0 1 0.7 119.0 0 - - 0- - 4 2.8 21 14 7 52 36.1 1.3 ' 50 ppm 0 - - 0- - 2 1.3 60.0 2 1.3 56.0 0 - - 2 1.3 17 9 8 129 86.0 1.3 0- - l 0.4 112.0 3 1.0 79.7 2 0.8 56.0 0 - - 6 2.0 38 23 15 181 61.6 1.3 0_ No II treatment 0 - (Control) 0- _ 1 2.1 83.0 0 _ - 0- - 0- - 1 t.0 83.0 0 - 00 - 1 2.0 48.0 0 - 1 1.0 48.0 0 - 0 10 -- 0 -5 2 - 0 -6 2 1 10 20.8 1.0 3 29 58.0 1.2 4 39 39.8 1.1 Total 8fcS8(H S?U TABLE 61 Experiment BT9: Exposure by inhalation to Vinyl Chloride in air at 50 ppm, 4 hours daily, 5 days weekly, for 52 weeks. Results after 142 weeks (end of experiment). DISTRIBUTION OF THE DIFFERENT TYPES OF MISCELLANEOUS (OTHERS) TUMOURS GROUPS NO. SEX No. ANIMALS BEARING OTHER TUMOURS Benign Malignant Distribution of histotypes No Distribution of histotypes 4 dermatofibromas 1 subcutaneous fibroma 1 cholangioma 6 14 1 adenoma of islet of Langerhans 1 adrenal gland cortical adenoma 4 pheochromocytomas 2 Leydig cell tumours 1 1 Zymbal gland acanthoma 3 cholangiomas 1 adrenal gland cortical adenoma 9 9 1 ovary fibroma 1 polypus of the uterus 1 fibroma of the uterus 1 neurilemoma ) adenocarcinoma of thyroid 2 pulmonary carcinomas 1 liver sarcoma 7 1 retroperitoneal hposarcoma 1 seminoma 1 osteosarcoma 1 sarcoma of the kidney 6 adenocarcinomas of the uterus 1 osteoclastoma 8 6 0II 2 adrenal gland cortical adenomas 92 1 1 irttra'abdominal fibrosarcoma 1 adenocarcinoma of the uterus 3 1 carcinosarcoma of the uterus 1 fibrosarcoma of the uterus Total 21 17 1 5 R&S 108549 72 Experiment BT9 : Exposure by inhalation to Vinyl Chloride in air at 50 ppm, 4 hours daily, 5 days weekly, for 52 weeks. Results after 142 weeks {end of experiment). DISTRIBUTION OF THE DIFFERENT TYPES OF MAMMARY TUMOURS GROUPS NO. I CONCEN TRATION 50 ppm ANIMALS (Sprague-Dawley rats, 13 weeks old at start) Total Corrected No. Sex No. at number start lal 6 9 <5 and 9 150 150 300 144 14 150 11 7 294 131 % ic) 9.7 78.0 44.5 MAMMARY TUMOURS tb) Histologically examined Histotype Average latency time (weeks! <d| No. of tumours/ tumours bearing animats Total No. % (e) F ibromas and fibroadenomas Carcinomas Sarcomas {angiosarcomas are not included) Carcinosarco mas Average Average Average Average latency latency latency latency No. % time No. % time No. % time No. % time (1) (weeks! (fl (weeks) If) (weeksl (fl {weeks) <dl Id) (d) Id) 88.9 i.i 13 92.8 10 76.9 94.9 0 - - 2 15 3 93.0 1 76 61 0 76.9 1.7 110 94.0 72 65.4 83.4 59 53.6 78.1 2 1.8 73.0 0 - - 78.2 1.7 123 93.8 82 66.6 84.8 59 47.9 78 1 4 3.2 83 0 1 0.8 61.0 6 50 48 2 4.2 87.0 1.0 2 100.0 1 50.0 87 0 1 50.0 87.0 0 0 No II treatment 9 50 50 27 54.0 94.6 1.4 24 88.8 20 83 3 98.5 5 20.8 87.0 2 8.3 97.0 2 8.3 101 0 (Control! eland 9 100 98 29 29.6 94.1 1.4 26 89.6 21 80.7 97.9 6 23.0 87.0 2 10.0 97.0 2 7.7 101.0 Totai 400 392 (a) Alive animals after 28 weeks, when the first tumour (a mammary fibroadenoma! was observed. <bl Two or more tumours of the same and/or different types If ibroadenomas, carcinomas, sarcomas, carcinosarcomas) may be present in the same animal. Ic) The percentages are referred to the corrected number. (d) Average age at the onset of the first mammary tumour per animat detected at the periodic control or at autopsy, le) The percentages are referred to total number of animals bearing mammary tumours. (f) The percentages are referred to total number of animals bearing mammary tumours, histologically examined. 0S8801 R&S 108551 TABLE 63 Experiment BT9 : Exposure by inhalation to Vinyl Chloride in air at 50 ppm,4 hours daily, 5 days weekly, for 52 weeks Results after 142 weeks (end of the experiment). DISTRIBUTION OF THE EXTRAHEPATIC ANGIOSARCOMAS FOLLOWING THE SITE GROUPS NO 1 SEX <j 9 NO. EXTRAHEPATIC ANGIOSARCOMAS 1 thymus angiosarcoma 3 1 intra-abdominal angiosarcoma (next to spleen! 1 pulmonary angiosarcoma 2 mammary angiosarcomas 1 heart angiosarcoma 6 1 thymic angiosarcoma 1 spleen angiosarcoma 1 ovarian angtosreoma d 0_ It 9 0- TABLE 64 Experiment BT9 : Exposure by inhalation to Vinyl Chloride in air at 50 ppm, 4 hours daily, 5 days weekly, for 52 weeks. Results after 142 weeks (end of experiment). DISTRIBUTION OF THE EXTRAHEPATIC ANGIOMAS AND FIBROANGIOMAS FOLLOWING THE SITE GROUPS NO. 1 SEX 6 9 NO. EXTRAHEPATIC ANGIOMAS AND FIBROANGIOMAS 1 subcutaneous fibroangioma 1 thymic angioma 1 thymic fibroangioma S 2 parathymic nodes fibroangiomas 1 spleen fibroangioma 1 paratesticular angioma 7 interscapular tax pad angioma 3 2 subcutaneous fibroangiomas 1 fibroangioma of the uterus d0 - II 90 - TABLE 65 Experiment BT9 : Exposure by inhalation to Vinyl Chloride in air at 50 ppm, 4 hours daily,5 days weekly,for 52 weeks. Results after 142 weeks (end of experiment). DISTRIBUTION OF THE FORESTOMACH EPITHELIAL TUMOURS FOLLOWING THE HISTOTYPES groups NO. CONCENTRATION 1 50 ppm ANIMALS (Sprague-Oawley rats, 13 weeks old at start) Sex d 9 dand 9 No. at start 150 150 300 Corrected number (a) 144 150 294 FORESTOMACH EPITHELIAL TUMOURS Papillomas and acanthomas Carcinomas No. No. 10 0Q 10 d 50 48 No tl treatment 9 50 50 (Controll dand 9 100 98 1 0 1 0 0 0 Total 400 392 (a) Alive animals after 28 weeks, when the first tumour (a mammary fibroadenoma) was observed. 74 TABLE 66 Experiment BT9 : Exposure by inhalation to Vinyl Chloride in air at 50 ppm, 4 hours daily, 5 days weekly, for 52 weeks. Results after 142 weeks (end of experiment), DISTRIBUTION OF THE SUBCUTANEOUS SARCOMAS FOLLOWING THE HISTOTYPES GROUPS NO. CONCEN TRATION ANIMALS SUBCUTANEOUS SARCOMAS (Sprague-Dawley rats, 13 weeks old at start) Rabdomyosarcomas Fibrosarcomas Others Sex No. at start Corrected number (a) No. No. No. 6 150 144 0 0 0 1 50 ppm 6 150 150 cf and 9 300 294 1 1 10 10 6 50 48 0 0 0 No 9 II treatment 50 50 0 (Control) cf and 9 100 98 0 0 0 1 1 Total 400 392 (a) Alive animals after 28 weeks, when the first tumour (a mammary fibroadenoma) was observed. R&S 108552 TABLE 67 Experiment BT9 : Exposure by inhalation to Vinyl Chloride in air at 50 ppm, 4 hours daily, 5 days weekly, for 52 weeks. Results after 142 weeks (end of experiment). DISTRIBUTION OF THE ENCEPHALIC TUMOURS (OTHER THAN NEUROBLASTOMAS) FOLLOWING THE HISTOTYPES GROUPS NO. CONCENTRATION ANIMALS ENCEPHALIC TUMOURS (Sprague-Dawley rats, 13 weeks old at start) Ependynomas Meningiomas Oligodendro gliomas Sex No. at start Corrected number (a) No. No. No. cf 150 144 1 1 2 1 50 ppm 9 150 150 0 0 2 d and 9 300 294 1 1 4 6 50 48 0 0 0 No It treatment 9 50 50 0 0 0 (Control) d and 9 100 98 0 0 0 Total 400 392 (a) Alive animals after 28 weeks, when the first tumour (a mammary fibroadenoma) was observed. TABLE 68 Experiment BT15: Exposure by inhalation to Vinyl Chloride in air at 25, 10, 5, 1 ppm, 4 hours daily, 5 days weekly, for 52 weeks. Results after 147 weeks (end of experiment). DISTRIBUTION OF REGRESSIVE CHANGES GROUPS NO. CONCEN TRATION ANIMALS (Sprague-Dawley rats, 13 weeks old at start) Sex No. at start d 60 1 25 ppm 9 60 d and 9 120 6 60 II 10 ppm 0 60 6 and 9 120 6 60 III 5 ppm 9 60 d and 9 120 IV 1 ppm d 9 60 60 d and 9 120 V Total No treatment (Control) d 9 d and 9 60 60 120 600 REGRESSIVE CHANGES Liver Kidneys Adrenal glands No. % No. % No. % 13 21.7 0 - 2 3.3 30 50.0 0 - 39 65.0 43 35,8 0 - 41 34.2 11 18.3 28 46.7 0 0 - 5 8.3 - 39 65.0 39 32.5 0 - 44 36.7 12 20.0 0 - 4 6.7 26 43.3 0 - 47 78.3 38 31.7 0 - 51 42.5 12 20.0 0 - 3 5.0 19 31.7 0 - 41 68.3 31 25.8 0 - 44 36.7 3 5.0 0 - 1 1.7 16 26.7 0 - 36 60,0 19 15.8 0 - 37 30.8 R&S 108553 76 GROUPS NO. H2 OH 2< OtE Oh- ANIM ALS (Sprague Dawtey rats, 13 v\ eeks old at st art) Sex No. at start d 60 TAK9 Experiment BT15: Exposure by inhalatioffo Vinyl Chloride in air at 25, 10, 5, 1 ppm, 4 hours daily, 5 days weekly, for 52 weeks. Results after 147 weeks (end of experiment). DISTRIBUTION OF PHLOGISTIC CHANGES Encephalic abscesses No. % Meningitis No. % Bronchopneu monia No. % PHLOGISTIC CHANGES Pleuntis Pericarditis No. % No. % Livar abscesses and hepatitis No. % 0 - 2 3.3 36 60.0 12 20.0 3 5.0' 2 3.3 Kidneys abscesses end nephritis No. % 4 6.7 Peritonitis No. % 7 11.7 1 25 ppm 0 60 0 - 0 - 14 ' 23.3 5 8.3 1 1.7 0 - 6 10.0 1 1.7 6 and 9 120 0 - 2 1.7 50 41.7 17 14.2 4 3.3 2 1.7 10 8.3 8 6.7 6 60 2 3.3 4 6.7 44 73.3 12 20.0 5 8.3 1 1.7 6 10,0 4 6.7 II 10 ppm 9 60 d and 9 120 0 2 -0 1.7 4 - 22 36.7 7 11.7 1 3.3 66 55.0 19 15.8 6 1.7 0 5.0 1 0.8 2 3.3 6 10.0 8 6.7 10 8.3 d 60 0 - 0 - 30 50.0 1 1.7 1 1.7 1 1.7 2 3.3 3 5.0 ill 5 ppm 9 60 0 - 0 - 25 41.7 4 6.7 4 6.7 1 1.7 3 5.0 1 1.7 d and 9 120 0 - 0 - 55 45.8 5 4.2 5 4.2 2 1.7 5 4.2 4 3.3 IV 1 ppm 6 9 60 1 1.7 7 11.7 40 66.7 6 10.0 3 60 0 - 1 1.7 33 55.0 8 13.3 1 5.0 1 1.7 0 1.7 10 16.7 3 - 4 6.7 1 5.0 1.7 d and 9 120 1 0.8 8 6.7 73 60.8 14 11.7 4 3.3 1 0.8 14 11.7 4 3.3 d 60 4 6.7 7 11.7 41 68.3 16 26.7 6 10.0 0 - 6 10.0 3 5.0 No V treatment 9 (Control) 60 1 1.7 2 3.3 25 41.7 8 13.3 3 5.0 0 - 8 13.3 3 5.0 d and 9 120 5 4.2 9 7.5 66 55.0 24 20.0 9 7.5 0 - 14 11.7 6 5.0 Total 600 - frSS8(H SSU R&S 108555 TABLE 70 Experiment BT15; Exposure by inhalation to Vinyl Chloride in air at 25, 10, 5, 1 ppm, 4 hours daily, 5 days weekly, for 52 weeks. Results after 147 weeks (end of experiment). INCIDENCE OF ADENOMATOUS HYPERPLASIA OF RESPIRATORY EPITHELIA GROUPS NO. 1 II III IV V Total CONCEN TRATION 25 ppm 10 ppm 5 ppm 1 ppm No treatment (Control) ANIMALS (Sprague-Dawley rats, 13 weeks old at start) Sex No. at start d 60 9 dand 9 d 60 120 60 9 d and 9 60 120 d 60 9 60 d and 9 120 d 60 9 60 d and 9 120 d 60 9 60 6 and 9 120 600 ADENOMATOUS HYPERPLASIA OF RESPIRATORY EPITHELIA No. % 6 10.0 6 10.0 12 10.0 8 13.3 6 10.0 14 11.7 5 8.3 4 6.7 9 7.5 12 20.0 11 18.3 23 19.2 12 20.0 10 16.7 22 18.3 TABLE 71 Experiment BT15: Exposure by inhalation to Vinyl Chloride in air at 25, 10, 5, 1 ppm, 4 hours daily, 5 days weekly, for 52 weeks. Results after 147 weeks (end of experiment). INCIDENCE OF PITUITARY ADENOMATOUS GROWTH GROUPS NO. CONCEN TRATION ANIMALS (Sprague-Dawley rats, 13 weeks old at start) Sex No. at start 6 60 1 25 ppm 9 60 6 and 9 120 6 60 II 10 ppm 9 60 6 and 9 120 6 60 III 5 ppm 9 60 d and 9 120 6 60 IV 1 ppm 9 60 6 and 9 120 6 No V treatment 9 60 60 6 and 9 120 Total 600 NOD ULAR ADENO MATOUS HYPER PLASIA No. % 03 5.0 3 2.5 02 3.3 2 1.7 2 3.3 2 3.3 4 3.3 04 6.7 4 3.3 1 1.7 2 3.3 3 2.5 AOENOMAS No % i 1.7 2 3.3 S 3 2.5 0002 3.3 02 1.7 1 1.7 1 1.7 2 1.7 03 5.0 3 2.5 TOTAL No. % 1 1.7 5 8.3 6 5.0 02 3.3 2 1.7 4 6.7 2 3.3 6 5.0 1 1.7 5 8.3 6 5.0 1 1.7 5 8,3 6 5.0 R&S 108556 79 ^ss801 S$y TABLE 72 Experiment BT15: Exposure by inhalation to Vinyl Chloride in air at 25, 10, 5, 1 ppm, 4 hours daily, 5 days weekly, for 52 weeks. Results after 147 weeks (end of experiment). DISTRIBUTION OF THE DIFFERENT TYPES OF TUMOURS (first part) GROUPS CONCEN NO TRATION ANIMAL (Sprague Qawl sy fat*, 1 J weeks old at star [9 Mammary tumours ID! Zymbal gland carcinomas ANIMALS WITH TUMOUHS Leukaemias Nephrobfa Average Aver age Average Average Sex No at Stdrt Corrected number Total No (a! % tc) latency time (weeks! Total No % Icl laiency time (weeks! Total No. % icl laiency time (weeks! Total No % Ic) latency nme (weeks] Total No td) lei lei le! Angiosarcomas Liver Other sites Average Average % Icl latency lime (weeks! Total No % [0 laiency nme (weeks! lei lei Total No Angiomas and (ibruanyiomas Lrver Oilier sites Aveiage Average . (cl latency time Iwceksl Total No Icl laiency lirne 1 weeks) (el lei 60 60 11 18 3 103 4 3 5 0 73 0 4 6 7 122 2 1 1 7 100 0 1 1 7 122 0 0 - - 0- - 3 50 97 3 1 25 ppm 60 60 53 88 3 75 8 1 1 7 58 0 3 5 0 81 3 0 4 57 HI 2 0 - 1 1 7 82 0 l> U jnd V 120 120 64 53 3 80 0 4 33 73 0 7 58 104 7 1 0 8 100 0 5 4 2 89 4 0 - - 1 08 82 0 3 25 97 3 0 60 59 6 10 2 101 8 1 1 7 66 0 3 51 94 7 0 - - 0 - 2 3 3 105 5 0 - 2 34 76 5 II 10 ppm V 60 60 52 86.7 78 2 1 7 64 0 1 1 7 85 0 0 1 1 7 79 0 0 - - 0- - 1 1 7 92 0 and 'i 120 119 58 48,7 80.6 2 1 7 65 0 4 34 92 2 0 - 0 8 79 0 2 1 7 105 5 0 - - 3 25 81 7 J 60 59 10 16.9 m.s 0 - 3 51 770 0 - - 0- 0- m 5 ppm 60 60 57 95.0 73 8 1 7 64 0 2 33 85 0 0 - 0 - - 0- 0- - 00- - 0- J and Y 120 119 67 56 3 S3 7 0.8 64 0 5 42 80 2 0 - - 0 - 0- - 0- 0 d 60 58 8 138 99 2 1 7 82 0 3 52 74 3 0 - 0- - 0- 0- - 0 - IV 1 ppm V 60 60 46 76.7 77.8 0 - 0- 0- - 0- - 0- - 0- - 0 d and V 120 118 54 45 6 81.0 1 0 8 82 0 3 25 74 3 0 - 0 - - 0- - 0- 0- j 60 60 a 13 3 1 16 7 2 3 3 98 0 3 5 0 109 7 0 - No 0- - 0- u 1 1 7 mo V treatment V 60 60 34 56 7 86 4 0 - IControN 3 50 84 0 0 - - 0- - 0- - 0- - 0- d J1H) V 120 120 42 35 0 91.3 2 1.7 98 0 6 50 96 8 0 - - 0- - 0- - 0- - 1 08 1111) Toiaf 600 596 (a( Aliva animals after 12 weeks, when the first tumour (a subcutaneous fibrosarcoma) was observed. lb) Two or more tumours of the same and/or different types (fibroadenomas, carcinomas, sarcomas, carcinosarcomas) may be present in the same animal, (c) The percentages are referred to the corrected number. id) Average age at the onset of the first mammary tumour per animal detected at the periodic control or at autopsy. (el Average time from the start of the experiment to the detection (at the periodic control or at autopsy). If) Several animals with two or more tumours. GROUPS NO. TAB Experiment BT15: Exposure by inhalation to Vinyl Chloride in air at 25, 10, 5, 1 ppm, 4 hours daily, 5 days weekly, for 52 weeks. Results after 147 weeks (end of experiment). DISTRIBUTION OF THE DIFFERENT TYPES OF TUMOURS CONCEN TRATION Hepatomas Porastomach epithelial tumours ANIMALS WITH TUMOURS Skin carcinomas Subcutan eous sarcorr as Encephalic tumours Neuroblastomas Other types Others Total % No. (c) Average Average Average latency time (weeks) Total No, % (c) latency time (weeks) Total No. % (c) latency time (weeks) Total No. % (c) (el (e) (e) Average Average latency time (weeks) Total No. % (c) latency time (weeks) No. (e) (e) % (0 Total No. Be nign No. Malign ant No. Total (f) No. of different No. % tumours/ (cl tumours bearing animals 0- - 0- - 0- - 0- - 0- - 0- 8 6 2 23 3a3 1.3 1 25 ppm 0 - - 0- - 0- - 0- - 0- - 0 - 10 7 3 55 91.7 1.3 0- - 0- - 0- - 0- - 0- - 0 - 18 13 5 78 65.0 1.3 0- - 0- - 0- - 2 3.4 92.0 0 - - 0 - 13 10 3 21 35.6 1.3 II 10 ppm 0- - 0- - 0- - 0- - 0- - 1 1.7 8 6 2 54 90.0 1.2 0- - 0- - 0- - 2 1.7 92.0 0 - - 1 0.8 21 16 5 75 63.0 1.2 0- - 0- - 1 1.7 106.0 4 6.8 79.2 0 - - 1 1.7 13 7 6 22 37.3 1.4 III 5 ppm 0- - 0- - 0- - 0- - 0- - 0- 86 2 59 98.3 1.1 0- - 0- - 1 0.8 106.0 4 3.4 79.2 0 - - 1 0.8 21 13 8 81 68.1 1.2 0- - 0- - 1 1.7 106.0 1 1.7 32.0 0 - - 1 1.7 5 4 1 18 31.0 1.1 IV 1 ppm 0- - 0- - 0- - 1 1.7 68.0 0 - - 0- 52 3 46 76.7 1.1 0- - 0- - 1 0.8 106.0 2 1.7 50.0 0 - - 1 0.B 10 6 4 64 54.2 1.1 0- - 0- - 0- - 1 1.7 117.0 0 - - 2 3.3 6 4 2 17 28.3 1.3 No V treatment 0 - - 0- - 0- - 0- - 0- - 3 5.0 11 6 5 43 71.7 1.2 (Control) 0- - 0- - 0- - '1 0.8 117.0 0 - - 5 4.2 17 10 7 60 50.0 1.2 Total 8SS801 S'SU R&S 108559 I HDLC / J Experiment BT15: Exposure by inhalation to Vinyl Chloride in air at 25, 10, 5,1 ppm, 4 hours daily, 5 days weekly, for 52 weeks. Results after 147 weeks (end of experiment). DISTRIBUTION OF THE DIFFERENT TYPES OF MISCELLANEOUS U OTHERS ) TUMOURS GROUPS NO. SEX No. ANIMALS BEARING OTHER TUMOURS Benign Malignant Distribution of histotypes No. Distribution of histotypes Total 1 dermatofibroma 6 5 pheochromocytomas 1 tracheal adenocarcinoma 2 1 retroperitoneal liposarcoma 8 1 Zymbal gland adenoma 1 1 mammary lipoma 1 choiangioma 97 1 pheochromocytoma 1 ovary adenoma 2 polypi of the uterus 1 kidney leiomyosarcoma 1 fibrosarcoma of the uterus 1 leiomyosarcoma of the uterus 3 10 3 dermatofibromas 1 dermal histiocytoma 1 subcutaneous lipoma 6 10 2 pheochromocytomas II 1 peritoneal lipoma 2 Leydig cell tumours 1 seminal vesicles adenocarcinoma 1 prostate adenocarcinoma 1 chondrosarcoma 3 13 3 cholangiomas 9 6 3 pheochromocytomas 2 adenocarcinoma of the uterus 2 8 cf III 1 skin acanthoma 1 Zymbal gland adenoma 1 kidney adenoma 7 1 pheochromocytoma 2 spleen histiocytomas 1 peritoneal lipoma 1 fibrosarcoma of thymus 1 kidney adenocarcinoma 2 adenocarcinoma of pancreas 6 1 peritoneal mesothelioma 1 scrotal liposarcoma 13 1 Zymbal gland acanthoma 9 6 2 adrenal gland cortical adenomas 3 polypi of the uterus 1 kidney adenocarcinoma 2 1 adenocarcinoma of the uterus 8 1 Zymbal gland acanthoma 1 pheochromocytoma 64 1 peritoneal lipoma 1 Leydig cell tumour IV 1 adrenal gland cortical adenoma 9 2 1 theca-granulosa cells tumour 1 mesothelioma of testicle 1 1 kidney adenocarcinoma 3 1 peritoneal mesothelioma 1 adenocarcinoma of the uterus 5 5 1 choiangioma 6 4 2 pheochromocytomas 1 Leydig cell tumour V 1 dermatofibroma 1 mammary lipoma 9 6 1 choiangioma 1 adrenal gland cortical adenoma 2 polypi of the uterus 1 pheochromoblastoma 2 1 retroperitoneal fibrosarcoma 6 1 kidney liposarcoma 1 adrenal gland cortical adenocarcinoma 5 1 carcinosarcoma of the caecum 1 squamous carcinoma of the uterus . 1 adenocarcinoma of the uterus 11 82 LE 74 Experiment BT15: Exposure by inhalation to Vinyl Chloride in air at 25, 10, 5, 1 ppm, 4 hours daily, 5 days weekly, for 52 weeks. Results after 147 weeks {end of experiment). DISTRIBUTION OF THE DIFFERENT TYPES OF MAMMARY TUMOURS ANIMAL S {Sprague-DjwI ly rats. 1 3 weeks old at start) Average No of GROUPS CONCEN NO. TRATION Sex No. at start Corrected number la) Total No. % (c) latency time (weeks) (d) tumours/ tumours bearing animals Total No. % (e) MAMMARY TUMOURS |b) Histologically examined Histotype Fibromas and fibroadenomas Average No. % ifl latency time (weeks) (d) Carcinomas Average No, % If) latency time (weeks) Idl Sarcomas Average No. % If) latency tfme (weeksl (d) Carcinosarcomas Average No. % if) latency time (weeks) Id) 6 GO 60 11 18 3 103.4 1 1 11 100.0 10 90.9 104.3 1 9.1 95 0 0 - - 0 - - ' 25 ppm 9 GO 60 53 88.3 75.8 1.9 49 92 4 43 87,7 78.2 15 30.6 82 1 O- - 2 4 1 55.0 d and 9 120 120 64 53.3 80.0 1.8 GO 93 7 53 68 3 83 1 16 26.7 82.9 0 - - 2 3.3 55.0 6 GO 59 G 10.2 101.8 1.0 6 100.0 G 100.0 101.8 0 - - 0- - 0- - 11 10 ppm 9 60 60 52 86.7 78 2 1.8 49 94.2 39 79.6 84.6 21 42.8 74.0 0 - - 0- - <5 and 9 120 119 58 48.7 G0.6 1.7 55 94.3 45 81.8 86.9 21 38.2 74.0 0 - - 0- - d GO 59 10 16.9 111.5 1.2 10 100.0 10 100.0 111.5 0 - - 0 - - 0 - - - 5 ppm 9 60 60 57 95.0 78.8 2.1 53 93.0 43 81.1 82.4 22 41.5 81.0 <S and 9 120 119 67 56 3 83.7 1.9 G3 94.0 53 84.1 87.9 22 34.9 81.0 1.9 95.0 0- 1.G 95.0 0 - - d GO SB 8 13.8 99.2 1.1 8 100.0 7 87.5 99 3 0 - - 1 12.5 95.0 0 - - tv 1 ppm 9 60 60 46 76.7 77.8 1.7 4G 100.0 40 8G.9 82.0 12 26.1 75.6 0 - - 2 4,3 74.0 6 and 9 120 118 54 45.8 81.0 1.7 54 100 0 47 87.0 84.7 12 22.2 75.6 1 1.8 95.0 2 3.7 74 0 6 GO GO 8 13.3 116.7 1.2 8 100.0 7 87.5 121.3 1 12.5 85.0 0 - - 0- - No V treatment 9 GO 60 34 56.7 85.4 1.6 32 94.1 27 84.4 90.8 6 IB.7 72.0 0 - - 0- - (Control) d and 9 120 120 42 35.0 91.3 1.6 40 95.2 34 85.0 97.1 7 17.5 73 8 0- - 0- - Total 600 596 (a) Alive animals after 12 weeks, when the first tumourlla subcutaneous fibrosarcoma) was observed. lb) Two or more tumours of the same and/or different types (fibroadenomas, carcinomas, sarcomas, carcinosarcomas) may be present io the same animal. (c) The percentages are referred to the corrected number. (d) Average age at the onset of the first mammary tumour per animal detected at the periodic control or at autopsy. (e) The percentages are referred to total number of animals bearing mammary tumours. (f) The percentages are referred to total number of animals bearing mammary tumours , histologically examined. 09S801 S9U R&S 108561 TABLE 75 Experiment BT15 : Exposure by inhalation to Vinyl Chloride in air at 25, 10, 5, 1 ppm, 4 hours daily, 5 days weekly, for 52 weeks. Results after 147 weeks (end of experiment), DISTRIBUTION OF THE EXTRAHEPATIC ANGIOSARCOMAS FOLLOWING THE SITE GROUPS NO. 1 II III IV V SEX d 9 6 9 d 9 6 9 6 9 NO. 0 0 2 0 0 0 0 0 0 0 EXTRAHEPATIC ANGIOSARCOMAS 2 thymic angiosarcomas - TABLE 76 Experiment BT15 : Exposure by inhalation to Vinyl Chloride in air at 25, 10, 5, 1 ppm, 4 hours daily, 5 days weekly, for 52 weeks. Results after 147 weeks (end of experiment). DISTRIBUTION OF THE EXTRAHEPATIC ANGIOMAS AND FIBROANGIOMAS FOLLOWING THE SITE GROUPS NO 1 II III IV V SEX 6 9 6 9 d 9 6 9 6 9 NO 3 0 2 1 0 0 0 0 1 0 EXTRAHEPATIC ANGIOMAS AND FIBROANGIOMAS 3 thymic angiomas 1 subcutaneous angioma 1 thymic fibroangioma 1 peritoneal fibroangioma 1 spleen fibroangioma - 84 TABLE 77 Experiment BT15 : Exposure by inhalation to Vinyl Chloride in air at 25, 10, 5, 1 ppm, 4 hours daily, 5 days weekly, for 52 weeks. Results after 147 weeks (end of experiment). DISTRIBUTION OF THE FORESTOMACH EPITHELIAL TUMOURS FOLLOWING THE HISTOTYPES R&S 108562 GROUPS NO. CONCEN TRATION Sex d ANIMALS (Sprague-Dawley rats, 13 weeks old at start) No. at start Corrected number (a) 60 60 FORESTOMACH EPITHELIAL TUMOURS Papillomas and acanthomas Carcinomas No. No. 0 ,0 1 25 ppm 9 60 60 d and 9 120 120 0 0 0 0 6 60 59 0 0 II 10 ppm 9 60 60 cf and 9 120 119 0 0 0 0 d 60 59 III 5 ppm 9 60 60 o' and 9 120 119 0 0 0 0 0 0 d 60 58 0 0 IV 1 ppm 9 60 60 0 6 and 9 120 118 0 d 60 No V treatment 9 (Control) 60 dand 9 120 60 60 120 0 0 0 Total 600 596 3) Alive animals after 1 2 weeks, when the first tumour la subcutaneous fibrosarcoma) was observed. 0 0 0 0 0 TABLE 78 Experiment BT15 : Exposure by inhalation to Vinyl Chloride in air at 25, 10, 5, 1 ppm, 4 hours daily, 5 days weekly, for 52 weeks. Results after 147 weeks (end of experiment). DISTRIBUTION OF THE SUBCUTANEOUS SARCOMAS FOLLOWING THE HISTOTYPES GROUPS NO CONCENTRATION 25 ppm ANIMALS 13 weeks old at star t) SUBCUTANEOUS SARCOMAS Rhabdomyosarcomas Fibrosdr comas Olhet s Sex Corrected No at start number (a) No. No No. 6 9 d and 9 - 60 60 120 60 60 120 0 0 0 00 00 00 d 6Q 59 II tO ppm 9 60 60 d<ind 9 120 119 2 0 2 00 00 00 d 60 59 III 5 ppm 9 60 60 d and 9 120 119 0 0 0 3 1 (b) 00 31 d 60 58 IV 1 ppm 9 60 60 d and 9 120 118 0 0 0 10 0 1 Ic) 11 d 60 60 No treatment V (Controll 9 60 60 d and 9 120 120 0 0 0 10 00 10 Total 600 596 (a) Alive animals alter 12 weeks, when the first tumour (a subcutaneous fibrosarcoma) was observed. (b) Liposarcoma. (c) Leiomyosarcoma. R&S 108563 86 TABLE 79 Experiment BT15 : Exposure by inhalation to Vinyl Chloride in air at 25, 10, 5, 1 ppm, 4 hours daily, 5 days weekly, for 52 weeks. Results after 147 weeks (end of experiment). DISTRIBUTION OF THE ENCEPHALIC TUMOURS (OTHER THAN NEUROBLASTOMAS) FOLLOWING THE HISTOTYPES GROUPS 1 II CONCEN25 ppm 10 ppm ANIMALS (Sprague-Dawley rats, 13 weeks old at start) Corrected Sex No.at start number (a) ENCEPHALIC TUMOURS Ependymomas Meningiomas Oligodendrogliomas No. No. No. cJ 9 6 and 9 60 60 120 60 60 120 0 0 0 0 0 0 0 0 0 6 9 d and 9 60 60 120 59 60 119 0 0 0 0 1 1 0 0 0 d 60 59 III 5 ppm 9 60 60 d and 9 120 119 6 60 58 IV 1 ppm 9 60 60 6 and 9 120 118 6 60 60 No treatment V (Controll 9 60 60 d and 9 120 120 0 0 0 0 0 0 0 1 1 0 0 0 0 0 0 1 2 3 1 0 1 1 0 1 1 0 1 Total 600 596 (a) Alive animals after 1 2 weeks, when the first tumour (a subcutaneous fibrosarcoma) was observed.. R&S 108564 87 S99801 S$H GROUPS NO. 1 II III IV Total TABLE 80 Experiment BT11 : Exposure by ingestion (stomach tube) to Vinyl Chloride in olive oil at 50.00, 16.65, 3.33 mg/kg body weight, once daily, 4-5 days weekly, for 52 weeks. Results after 136 weeks (end of experiment). DISTRIBUTION OF REGRESSIVE CHANGES CONCENTRATION 50.00 mg/kg 16.65 mg/kg ANIMALS (Sprague-Dawiey rats, 13 weeks old at start) Sex No.at start d 40 9 40 d and V 80 d 9 d and 9 40 40 80 Liver No. % 5 12.5 5 12.5 10 12.5 8 20.0 10 25.0 18 22.5 REGRESSIVE CHANGES Kidneys No. % 000-- 0_ 00- 3.33 mg/kg d 9 d and 9 40 40 80 6 150 0 8 20.0 0 14 17.5 0 -- Olive oil (Control) 6 9 d and 9 40 40 80 6 150 0 10 25.0 0 - 16 20.0 0 - 320 Adrenal glands No. % 05 12.5 5 6.2 8 20.0 4 10.0 12 15.0 5 12.5 1 2.5 6 7.5 3 7,5 11 27.5 14 17.5 GROUPS NO. 1 II lit IV Total TABLE 81 Experiment BT11: Exposure by ingestion (stomach tube) to Vinyl Chloride in olive oil at 50.00, 16.65, 3.33 mg/kg body weight, once daily, 4-5 days weekly, for 52 weeks. Results after 136 weeks (end of experiment}. DISTRIBUTION OF PHLOGISTIC CHANGES CONCEN TRATION 50 -00 mg/ kg ANIMALS (Sprague Dawley rats, 1 3 weeks old at start} Sex d 9 d and 9 No. at start 40 40 80 Encephalic abscesses No. % 2 5.0 2 5.0 4 5.0 Meningitis Bro nchopneumoma No. % No. 5 12.5 18 3 7.5 15 8 10.0 33 % 45.0 37.5 41 2 PHLOGISTIC CHANGES Pleuritis Pericarditis Liver abscesses and hepatitis No. % No. % ii 27.5 6 15.0 18 45.0 11 27.5 29 36.2 17 21.2 No. 1 0 1 % 2.5 -- 1.2 Kidneys ab scesses and nephritis No. % 6 150 5 12.5 11 13.7 Peritonitis No. % 6 150 7 17.5 13 16.2 1 6.65 mg/kg d 9 d and 9 40 40 80 _0 _ 1 2.5 19 47.5 8 20.0 4 too 0 4 10.0 5 12.5 1 2.5 1 2 5 15 37.5 7 17.5 6 15.0 1 2.5 2 5.0 8 20.0 5 1.2 2 2 5 34 42.5 15 18.7 10 12.5 1 1.2 6 7.5 13 16.2 3.33 mg/kg d 9 dand 9 40 40 80 3 7.5 4 10.0 19 47.5 5 12.5 1 2.5 0 _ 4 10.0 9 22.5 1 2.5 5 12.5 12 30.0 9 22.5 3 7.5 1 25 6 15.0 6 15.0 4 5.0 9 11.2 31 38.7 14 17.5 4 5.0 1 1.2 10 25.0 15 18.7 Olive oil (Control) d 9 d and 9 40 40 80 320 0 -- 0 -- 21 52.5 7 17.5 4 10.0 0 4 10.0 7 17.5 20 50.0 15 37.5 7 17.5 0 4 5.0 7 8.7 41 51.2 22 27.5 11 13.7 0 _ 4 10.0 7 17.5 - 5 12.5 5 12.5 - 9 11.2 12 15.0 999801 S9U R&S 108567 TABLE 82 Experiment BT11 : Exposure by ingestion (stomach tube) to Vinyl Chloride in olive oil at 50.00,16.65, 3.33 mg/kg body weight, once daily, 4-5 days weekly, for 52 weeks. Results after 136 weeks (end of experiment) INCIDENCE OF ADENOMATOUS HYPERPLASIA OF RESPIRATORY EPITHELIA GROUPS NO. 1 CONCENTRATION 50.00 mg/ kg ANIMALS (Sprague-Qawley rats, 13 weeks old at start) Sex No. at start d 40 9 40 6 and 9 80 ADENOMATOUS HYPERPLASIA OF RESPIRATORY EPITHELIA No. % 5 12.5 2 5,0 7 8.7 d 40 1 2,5 II 16.65 mg/ kg 9 40 2 5.0 d and 9 80 3 3.7 d 40 1 2.5 III 3.33 mg/ kg 9 40 2 5.0 d and 9 80 3 3.7 d 40 3 7.5 IV Olive oil (Controll 9 40 8 20.0 <5 and 9 80 11 13.7 Total 320 VH * i-- 90 ; , TABLE 83 Experiment BT11 : Exposure by ingestion (stomach tube) to Vinyl Chloride in olive oil at 50.00, 16.65, 3.33 mg/kg body weight, once daily, 4-5 days weekly, for 52 weeks. Results after 136 weeks (end of experiment). INCIDENCE OF PITUITARY ADENOMATOUS GROWTH GROUPS NO. CONCENTRATION 50.00 mg/ kg ANIMALS (Sprague-Dawley rats. 13 weeks old at start) Sex No. at start NODULAR ADE NOMATOUS HYPERPLASIA No. % ADENOMAS No. % d 9 6 and 9 40 40 80 0-0 0 -00-0 - TOTAL No. % 000- s 40 0 0 --0 _ II 16 65 mg/ kg 9 40 0 - 0 - 0 - 6 and 9 80 0 -0 "0 - d 40 0 - 0 -- 0 III 3.33 mg/ kg 9 40 0 - 0 - 0 - d and 9 80 0 -0 -0 - IV > Total Olive oil (Control) 6 9 and 9 40 40 80 320 0 -0 _0 -- 0 -0 -0 0--0 -0 - 1 1 'i 1<, . !r i!i r li R&S 108568 / i 91 1 i :i i i i i ' 69S80J- SSd TABLE 84 Experiment BT11 -.Exposure by ingestion (stomach tube) to Vinyl Chloride in olive oil at 50.00, 16.65, 3.33 mg/kg body weight, once daily, 4-5 days weekly, for 52 weeks. Results after 136 weeks (end of experiment). DISTRIBUTION OF THE DIFFERENT TYPES OF TUMOURS (first part) GROUPS NO. J CONCEN TRATION 50.00 mg/kg ANIMALS (Sprague-Dawley ran, 13 week* old at start) Sex No. at Corrected start number la) 6 9 cf and 9 40 40 80 40 40 80 Mammary tumours ib) Average Total % latency No. Id lime (weeks! (d) 1 2.5 81.0 16 40.0 07.7 17 21.2 87.3 ANIMALS WITH TUMOURS Zymbal gland carcinomas Leu kaemias Nephroblastomas Average Average Average Totat % latency Total % latency Total % latency No. (0 time No. 1c) time No. Id time (weeks) (week si (weeks) (a) Id lei 1 2.5 82 0 1 2.5 83 0 1 2.5 76 0 0- - 1 1.2 82.0 0- - 1 1.2 83.0 1 2.5 97.0 2 2.5 86.5 Total No. 8 9 n Angiosarcomas Liver Other sites Average Average % latency Total % latency (d time No. (cl time (weeks) (weeks) (e| la) 20.0 83 1 0- - 22.5 74.8 2 50 71 5 21.2 78.7 2 2.5 71 5 Angiomas and fibroangiomat Lrver Other sites Average Average To % latency To % latency tal Id time tal Id l*me No. (weeksj No. (weeks) (e) tel 1 2.5 108.0 1 2.5 73.0 2 50 100.5 1 2.5 3 3.7 102.7 2 2.5 87.0 85.0 & 40 40 0- - 1 7.5 116.0 0 - - 2 5.0 88.5 4 10.0 64.0 0 - - 0- - 0 - 16.65 n mg/kg 9 40 40 14 350 91.2 1(9) 2.5 54.0 1 2 5 69.0 1 2.5 75.0 6 15.0 89.5 0 - - 0- - 0- - <D hJ <5 and 9 SO BO 14 57.5 91.2 2 2.5 85.0 1 1.2 69.0 3 3.7 84.0 10 12.5 79.3 0 - 0- - 0- - <s 40 40 1 2.5 101.0 0 - - 0- - 0- - 0 - - 0- - 0- - 0 - 3.33 m mg/kg 9 40 40 14 35 0 95.5 0- - 0- - 0- - 0 - - 2 5.0 93.5 0 - - 1 2.5 105.0 6 and 9 BO 80 15 T8.7 95.9 0 - 0- - 0- - 0- - 2 25 93.5 0- - 1.2 105.0 6 40 Olive IV oil 9 40 (Control) <$ and 9 80 40 0- - 0- - 2.5 91.0 0- - 0 - - 0- 40 11 27.5 91.6 1 2.5 1040 2.5 87.0 0- - 0 - - 0- BO 11 13.7 91.6 1 1.2 104.0 2 2.5 89.0 0 - - 0 - - 0- Total 320 320 (a) Alive animals after 2 weeks, when the first tumour (a forestomach) acanthoma) was observed, (bl Two or more tumours of the same and/or different types (fibroadenomas, carcinomas, sarcomas, carcinosarcomas) may be present in the same animal. (c) The percentages are referred to the corrected number. (d) Average age at the onset of the first mammary tumour per animaf detected at the periodic control or at autopsy. (e) Average time from the start of the experiment to the detection (at the periodic control or at autopsy). (f) Several animals with two or more tumours. (g) 1 with sarcomatous component. - - 0- - 0- -- 0- - 0- - 0- - 0- - U T 84 Experiment BTVl -.Exposure by ingestion (stomach tube) to Vinyl Chloride in olive oil at 50.00, 16.65, 3.33 mg/kg body weight, once daily, 4-5 days weekly, (or 52 weeks. Results after 136 weeks (end of experiment). DISTRIBUTION OF THE DIFFERENT TYPES OF TUMOURS (second parti ANIMALS WITH TUMOURS Encephalic tumours GROUPS CONCENNO. TRATION 50.00 1 mg/Kg Hepatomas epithelial tumours Skin carcinomas Su bcu taneous sarcomas Neu roblastomas Other types Others To % tal id No. Average latency time (weeks) (e) To tal No. % (c) Average latency To % time tal (0 (weeks! No. <e| Average latency To % time tal (c) {weeks) No. le) Average latency To % time tal tc) (weeks) No. lei Average latency No. % To Benign Malign No. time (c) tal No. ant (weeks) No. No. lei 0- - 2 5.0 34.0 i 2.5 84.0 0- - 0- - 0-5 3 2 17 0- - 0 - - 0- - 0- - 0- - 1 2.5 4 4 0- 2 2.5 34.0 1 1.2 84.0 0- - 0- - 1 1.2 9 7 0 25 2 42 Total <(l No. of dif % ferent lu(c) mours/tu- mours bea ring animals 42.5 1.3 62.5 1.4 52.5 1.3 0- - 0 16.65 - 0- - 0- - 0- -- 1 2.5 1 0 1 9 22.5 1.0 II mg/Kg 0- - 1 2.5 76.0 0- - 0- - 0- - 0 -4 4 0 18 45.0 1.6 0- - 1 1.2 76.0 0- - 0- - 0- - 1 1.2 5 4 1 27 33.7 1.4 0-- -- 0 _ _ _-- 0 __ _ 0 0-- 1 2.5 1 1 0 3 7.5 1.0 J. JJ III mg/Kg 0- - 0- - 0- - 0- - 0- - 0 - 11 9 2 19 47.5 1.5 0- - 0- - 0- - 0- - 0- - 1 1.2 12 10 2 22 27.5 1.4 0-- - 0 -- Olive IV oil 0- - 0- {Control) 0- - 0 - Total - 1 2.5 70.0 0 _ 0_ _ 1 2.5 6 4 - 0- - 0- - 0- - 0 -6 6 - 1 1.2 70.0 0- - 0- - 1 1.2 12 10 2 7 17.5 1.0 0 17 42,5 1.1 2 24 30.0 1.1 0Z.S801 SSH R&S 108571 TABLE 85 Experiment BT11 : Exposure by ingestion (stomach tube) to Vinyl Chloride in olive oil at 50.00, 16.65, 3.33 mg/kg body weight, once daily, 4-5 days weekly, for 52 weeks. Results after 136 weeks (end of experiment). DISTRIBUTION OF THE DIFFERENT TYPES OF MISCELLANEOUS (OTHERS) TUMOURS GROUPS NO. SEX d 1 9 No 3 4 ANIMALS bearing other tumours Ben ign Distribution of histotypes No. Malignant Distribution of histotypes 2adrenal gland cortical adenomas 1 pheochromocytoma 2 1 parotid gland carcinoma 1 pulmonary adenocarcinorha 2 cholangiomas 2 pheochromocytomas 0- Total 5 4 d 0- 1 1 pheochromoblastoma II - 1 skin acanthoma 9 4 1 cholangioma 0- 2 adrenal gland cortical adenomas 1 4 d 1 1 bladder papilloma 0- III 1 subcutaneous lipoma 1 dermal fibrosarcoma 9 9 3 adrenal gland cortical adenomas 4 pheochromocytomas 2 1 osteosarcoma 1 polypus of the uterus 1 11 d 4 4 pheochromocytomas 2 1 adrenal gland cortical adenocarcinoma 1 bladder carcinoma 6 IV 1 subcutaneous lipoma 9 6 1 papilloma of auditory duct 2adrenal gland cortical adenomas 0 - 2 pheochromocytomas G 94 TABLE 86 Experiment BT11 : Exposure by ingestion (stomach tube) to Vinyl Chloride in olive oil at 50.00, 16.65, 3.33 mg/kg body weight, once daily, 4-5 days weekly, for 52 weeks. Results after 136 weeks (end of experiment). DISTRIBUTION OF THE DIFFERENT TYPES OF MAMMARY TUMOURS ANIMALS (Sprague-Dawley rats, 13 weeks old at start) GROUPS CONCEN NO. TRATION Total No. Corrected Sex No.at number start la) , d <10 40 1 50.00 1 mg/ kg 9 40 40 16 d and 9 80 80 17 MAMMARY TUMOURS (b) Histologically examined % (cl 2.5 40.0 21.2 Average latency time (weeks) Id) No. of tumours/ tumours bearing animals Total No. % (el Histotype Fibromas and fibroadenomas Carcinomas Sarcomas Carcinosarcomas No. % (f) Average latency time (weeks! Id) No. % (f) Average Average Average latency time No. % latency time No. % latency time (weeks) (f) (weeksl (fl (weeksl (d) (d) (d) 81.0 1.0 1 100.0 1 100.0 81.0 0 -- - 0- - 0- - 87.7 1.1 15 93.7 13 86.7 88.5 4 26.7 98.0 0 - - 0- - 87.3 1.1 16 94.1 14 87.5 88.0 4 25.0 98.0 0 - - 0- - d 40 40 0- - - 0 -0 - - 0- - 0- - 0- - 16.65 It mg/kg 9 40 40 14 35.0 91.2 1.1 13 92.8 9 69.2 92.9 6 46.1 95.0 0 - - 0- - 6 and 9 80 80 14 17.5 91.2 1.1 13 92.8 9 69.2 92.9 6 46.1 95.0 0 - - 0- - d 40 40 1 2.5 101.0 1.0 1 100.0 0 - - 1 100.0 101.0 0 -- - 0- -- 3.33 III mg/kg 9 40 40 14 35.0 95.5 1.0 11 78.6 9 81.8 93.1 2 18.2 108.0 0 - - 0- - d and 9 80 80 15 18.7 95.9 1.0 12 80.0 9 75.0 93.1 3 25.0 105.7 0 - - 0- - d 40 40 IV Olive oil (Control) 9 40 40 d and 9 80 80 0- - - 0 -0 -- - 0-- - 0-- - 0-- - 11 27.5 91.6 1.2 10 90.9 8 80.0 93.6 4 40.0 98.0 0 - - 0- - 11 13.7 91.6 1.2 10 90.9 8 80.0 93.6 4 40.0 98.0 0 - - 0- - Total _ 320 320 (a) Alive animals after 2 weeks, when the first tumour (a forestomach acanthoma) was observed. (bl Twq or more tumours of the same and/or different types (fibroadenomas, carcinomas, sarcomas, carcinosarcomas) may be present in the same animal, (c) The percentages are referred to the corrected number. Id) Average age at the onset of the first mammary tumour per animal detected at the periodic control or at autopsy. (e) The percentages are referred to total number of animats bearing mammary tumours. If) The percentages are referred to total number of animals bearing mammary tumours, histologically examined. ZlSSQl SSH TABLE 87 Experiment BT11 : Exposure by ingestion (stomach tube) to Vinyl Chloride in olive oil at 50.00,16.65, 3.33 mg/kg body weight, once daily, 4-5 days weekly, for 52 weeks. Results after 136 weeks (end of experiment). DISTRIBUTION OF THE EXTRAHEPATIC ANGIOSARCOMAS FOLLOWING THE SITE GROUPS NO. 1 SEX d 9 NO. 0 2 EXTRAHEPATIC ANGIOSARCOMAS 1 thymic angiosarcoma 1 spleen angiosarcoma d0 II 90 d0 III 92 _ - 1 pulmonary angiosarcoma 1 pararenal angiosarcoma 60 IV 90 - R&S 108573 TABLE 88 Experiment BT11 : Exposure by ingestion (stomach tube) to Vinyl Chloride in olive oil at 50.00, 16.65, 3.33 mg/kg body weight, once daily, 4-5 days weekly, for 52 weeks. Results after 136 weeks (end of experiment). DISTRIBUTION OF THE EXTRAHEPATIC ANGIOMAS AND FIBROANGIOMAS FOLLOWING THE SITE GROUPS NO. 1 SEX 6 9 NO. 1 1 EXTRAHEPATIC ANGIOMAS AND F1BROANGIOMAS 1 angioma of kidney 1 peritoneal angioma 0 II 90 60 Ilf 9 d0 IV 90 - 1 parauterine fibroangioma _ - 96 R&S 108574 TABLE 89 Experiment BT11 : Exposure by ingestion (stomach tube) to Vinyl Chloride in olive oil at 50.00, 16.65, 3.33 mg/kg body weight, once daily, 4-5 days weekly, for 52 weeks. Results after 136 weeks (end of experiment). DISTRIBUTION OF THE FORESTOMACH EPITHELIAL TUMOURS FOLLOWING THE HISTOTYPES GROUPS NO. CONCEN TRATION 1 50.00 mg/kg II 16.65 mg/kg III 3.33 mg/kg IV Total Olive oil (Control! ANIMALS (Sprague-Oawley rats, 13 weeks old at start) Sex d 9 6 and 9 d 9 d and 9 d 9 d and 9 d 9 d and 9 No. at start 40 40 80 40 40 80 40 40 80 40 40 80 320 Corrected number (a) 40 40 80 40 40 80 40 40 80 40 40 80 320 FORESTOMACH EPITHELIAL TUMOURS Papillomas and acanthomas Carcinomas No. No. 20 00 20 00 10 10 00 00 00 00 00 00 (a) Alive animals after 2 weeks, when the first tumour (a forestomach acanthoma) was observed. TABLE 90 Experiment BT11 : Exposure by ingestion (stomach tube) to Vinyl Chloride in olive oil at 50.00, 16.65, 3.33 mg/kg body weight, once daily, 4-5 days weekly, for 52 weeks. Results after 136 weeks (end of experiment). DISTRIBUTION OF THE SUBCUTANEOUS SARCOMAS FOLLOWING THE HISTOTYPES GROUPS NO. 1 II ill IV Total CONCEN TRATION 50.00 mg/kg 16,65 mg/kg 3.33 mg/kg Olive oil (Control) ANIMALS (Sprague-Dawley rats, 13 weeks old at start) Sex No. at start Corrected number (a) <3 9 o' and 9 40 40 80 40 40 80 d 9 d and 9 40 40 80 40 40 80 6 9 6 and 9 40 40 80 40 40 80 6 40 40 9 40 40 6 and 9 80 80 320 320 SUBCUTANEOUS SARCOMAS Rhabdomyo sarcomas Fibrosarcomas Others No. No. No, 000 000 000 00 0 000 00 0 000 000 000 000 00 0 000 (a) Alive animals after 2 weeks, when the first tumour (a forestomach acanthoma) was observed. r &S 108575 98 TABLE 91 Experiment BT11 : Exposure by ingestion (stomach tube) to Vinyl Chloride in olive oil at 50.00, 16.65, 3,33 mg/kg body weight, once daily, 4-5 days weekly, for 52 weeks. Results after 136 weeks (end of experiment). DISTRIBUTION OF THE ENCEPHALIC TUMOURS (OTHER THAN NEUROBLASTOMAS) FOLLOWING THE HISTOTYPES GROUPS NO. CONCENTRATION 1 50.00 mg/kg ANIMALS (Sprague-Dawley rats, 13 weeks old at start) Sex 4 9 4 and 9 No, at start 40 40 80 Corrected number (a) 40 40 80 ENCEPHALIC TUMOURS Ependymomas Meningiomas Oligodendro* gliomas No. No. No. 0 00 0 10 0 10 4 40 40 0 II 16.65 mg/kg 9 40 40 0 cS and 9 80 80 0 10 00 10 4 40 40 1 III 3.33 mg/kg 9 40 40 0 4 and 9 80 80 1 00 00 00 6 40 40 1 IV Olive oil 9 40 40 0 (Control) 4 and 9 80 80 1 00 00 00 Total 320 320 (a) Alive animals after 2 weeks, when the first tumour (a forestomach acanthoma) was observed. R&S 108576 99 ZZS80L S9U GROUPS NO. t II m IV Total TABLE 92 Experiment BT27 : Exposure by ingestion (stomach tube) to Vinyl Chloride in olive oil at 1.0, 0.3, 0.03 mg/kg body weight, once daily, 4-5 days weekly, for 59 weeks. Results after 136 weeks (end of experiment). DISTRIBUTION OF REGRESSIVE CHANGES CONCEN TRATION 1.0 rrtg/kg ANIMALS ISprague-Dawley rats, 10 weeks old at start) Sex N at start 6 75 9 75 d and 9 150 Liver No. 19 40 59 REGRESSIVE CHANGES Kidneys % No. % 25.3 53.3 0 1 1.3 39.3 1 0.7 0.3 mg/kg d 9 d and 9 75 75 150 21 28.0 32 42.7 53 35.3 0 O 0 -- - 0.03 mg/kg d 9 d and 9 75 75 150 23 30.7 0 30 40.0 0 53 35.3 0 -- - Olive oil ICon troll d 9 d and 9 75 75 150 24 32.0 0 -- 36 48.0 1 1.3 60 40.0 1 0.7 600 Adrenal glands No. % 2 2.7 49 65.3 51 34.0 4 5.3 41 54.7 45 30.0 4 5.3 38 50.7 42 28.0 4 5.3 42 56.0 46 30.7 GROUPS NO. 1 U 111 IV Total TABLE 93 Experiment BT27 : Exposure by ingestion (stomach tube) to Vinyl Chloride in olive oil at 1.0, 0.3, 0.03 mg/kg body weight, once daily, 4-5 days weekly, for 59 weeks. Results after 136 weeks (end of experiment). DISTRIBUTION OF PHLOGISTIC CHANGES CONCEN TRATION 1.0 mg/kg 0.3 mg/kg (Sprague- Oawley rats, 10 weeks old at startl Sex d 9 d and 9 No.at start 75 75 150 Encephalic abscesses No. % 000" Meningitis Bronchopneu monia PHLOGISTIC CHANGES Pleuritts Liver abscesses Per icarditis and hepatitis No. % No. % 6 8.0 57 76.0 2 2.7 31 41.3 a 5.3 88 58.7 No, % No. % No. 11 14,7 6 8.0 0 12 16.0 4 5.3 0 23 15.3 10 6.7 0 % - Kidneys ab scesses and nephritis No. % 2 2.7 3 4.0 5 3.3 Peritonitis No. % 6 ao 5 6.7 11 7.3 cf 9 cf and 9 75 75 150 0 - 2 2.7 58 77.3 14 18.7 4 5.3 1 1.3 7 9.3 3 4.0 1 1.3 2 2.7 41 54.7 13 1 7.3 4. 5.3 2 2.7 1 1.3 6 8.0 1 0.7 4 2.7 99 66.0 27 18.0 8 5.3 3 2.0 8 5.3 9 6.0 0.03 mg/kg d 9 d and 9 75 75 150 1 1.3 5 6.7 45 60.0 13 17.3 4 5.3 0 13 17.3 13 17.3 3 4.0 6 8.0 41 54.7 24 32.0 11 14.7 3 4.0 10 13.3 8 10.7 4 2.7 11 7.3 86 57.3 37 24.7 15 10.0 3 2.0 23 15.3 21 14.0 Olive oil (Control) d 9 dand 9 75 75 150 600 0 - 6 8.0 45 60.0 16 21.3 5 6.7 1 1.3 13 17.3 8 10.7 3 4.0 1 1.3 39 52.0 13 17.3 6 8.0 1 1.3 7 9.3 5 6.7 3 2.0 7 4.7 84 56.0 29 19.3 11 7.3 2 1.3 20 13.3 13 8.7 8Z.S801- SSU TABLE 94 Experiment BT27 : Exposure by ingestion (stomach tube) to Vinyl Chloride in olive oil at 1.0, 0,3, 0.03 mg/kg body weight, once daily, 4-5 days weekly, for 59 weeks. Results after 136 weeks (end of experiment). INCIDENCE OF ADENOMATOUS HYPERPLASIA OF RESPIRATORY EPITHELIA GROUPS NO. 1 CONCEN TRATION 1,0 mg/kg ANIMALS (Sprague-Dawley rats, (10 weeks old at start) Sex No. at start d 75 9 75 d and 9 150 ADENOMATOUS HYPERPLASIA OF RESPIRATORY EPITHELIA No. % 16 21.3 10 13.3 26 17.3 6 75 17 22.7 II 0.3 mg/kg 9 75 9 12.0 6 and 9 150 26 17.3 6 75 12 16.0 III 0.03 mg/kg 9 75 10 13.3 d and 9 150 22 14.7 6 75 18 24.0 IV Olive oil (Control) 9 75 12 16.0 6 and 9 150 30 20.0 Total 600 R&S 108579 102 TABLE 95 Experiment BT27 : Exposure by ingestion (stomach tube) to Vinyl Chloride in olive oil at 1.0, 0.3, 0.03 mg/kg body weight, once daily, 4-5 days weekly, for 59 weeks. Results after 136 weeks (end of experiment). INCIDENCE OF PITUITARY ADENOMATOUS GROWTH GROUPS NO. 1 CONCEN TRATION 1.0 mg/kg ANIMALS (Sprague-Dawley rats, 10 weeks old at start) Sex No. at start d 75 9 75 d and 9 150 NODULAR ADENOMATOUS HYPERPLASIA No. % 01 1.3 1 0.7 ADENOMAS No. % 1 1.3 01 0.7 TOTAL No. % 1 1.3 1 1.3 2 1.3 6 75 0 2 2.7 2 2.7 II 0.3 mg/kg 9 75 1 1.3 0 - 1.3 d and 9 150 1 0.7 2 1.3 3 2.0 d 75 0 -- 0 -- 0 -- III 0.03 mg/kg 9 75 2 2.7 1 1.3 3 4.0 dand 9 150 2 1.3 1 0.7 3 2.0 _d 75 0 -- 0 -- 0 IV Olive oil (Control) 9 75 2 2.7 0 - 2 2.7 dand 9 150 2 1.3 0 - 2 1.3 Total 600 R&S 108580 103 18S801 ssa TABLE 96 Experiment BT27 : Exposure by ingestion (stomach tube) of Vinyl Chloride in olive oil at 1.0, 0.3, 0.03 mg/kg body weight, once daily, 4-5 days weekly, for 59 weeRs. Results after 136 weeks (end of experiment). DISTRIBUTION OF THE DIFFERENT TYPES OF TUMOURS GROUPS CONCEN NO. TRATION ANIMALS (Sprague-Dawiey rats, 10 weeks old at start! Mammary tumours tb) Zymbal gland carcinomas Leukaemias ANIMALS WITH TUMOURS Nephroblastomas Angiosarcomas Liver Other sites (first part) Angiomas and fibroangiomas Liver Other sites Average Average Average Average Average Average Average Average Sex No at Corrected To % latency To % latency To- % latency To % latency To % latency To % latency To % latency To % latency start number tal (c) time tal (c) time tal (c) time tal Ic) time tal ic) time tal (c) time tal (c) time tal (c) time la) No. (weeks) No. (weeks) No. (weeks! No. (weeks) No. (weeks) No. (weeks) No. (weeks) No. (weeks! (d) (el lei (e) (e) tel (e) (e) 6 75 74 5 6,7 91.2 2 2.7 96.0 i 1.3 111.0 0 - - 1 1.3 129.0 0 - - 0 - - 0- - 1.0 1 mg/kg 9 75 75 39 52.0 83.4 3 4.0 103.0 5 6.7 89.0 0- - 2 2.7 96.5 1 1.3 91.0 0- - 0- - 6 and 9 150 149 44 29.5 B4.3 5 3.3 100.2 6 4.0 92.7 0 - - 3 2.0 107.3 1 0.7 91.0 0- - 0- - 6 75 0.3 II mg/kg 9 75 d and 9 150 6 75 0.03 III mg/kg 9 75 6 and 9 150 6 75 Olive IV otl 9 75 (Control) d and 9 150 Total 600 75 3 4.0 108.3 0 -- _ 73 31 42.5 81.1 0- - 148 34 23.0 83.5 0 - - 4 6.3 107,2 0 0 - - 04 2.7 107.2 0 - _ - 75 1 1.3 138.0 0 -- _ 75 42 56.0 78.6 0- - 150 43 28.7 80.0 0 - - 3 4.0 92.0 0 _ 1 1.3 129.0 0 4 2.7 102.2 0 - - 75 2 2.7 75.0 0-- _ 4 5.3 59.7 0_ -- 75 35 46.7 84.8 1 1.3 90.0 3 4.0 96.0 0 - - 150 37 24.7 84.3 1 0.7 90.0 7 4.7 75.3 0- - 597 0-- _ 0 1 1.4 101.0 0 1 0.7 101.0 0 - _ - 0 --0 0- - 0- 0- - 0- - 0_ -- 0 _ 0- - 0- - 0- - 0- - 0_ 1 1.3 116.0 1 0.7 116.0 0_ 00- - 0 __ 0_ _ 0- - 0- - 0- - 0- - 0 _ _ 0_ _ 0- - 0- - 0- - 0- - lal Alive animals after 1 2 weeks, when the first tumour (a mammary carcinoma) was observed. (b) Two or more tumours of the same and/or different types (fibroadenomas, carcinomas, sarcomas, carcinosarcomas) may be present in the same animal. (c) The percentages are referred to the corrected number. (d) Average age at the onset of the first mammary tumour per animal detected at the periodic control or at autopsy. (e) Average time from the start of the experiment to the detection (at the periodic control or at autopsy). (f) Several animals with two or more tumours. TABLE 96 Experiment BT27 : Exposure by ingestion (stomach tube) to Vinyl Chloride in olive oil at 1.0, 0.3, 0.03 mg/kg body weight, once daily, 4-5 days weekly, for 59 weeks. Results after 136 weeks (end of experiment). DISTRIBUTION OF THE DIFFERENT TYPES OF TUMOURS (second part) ANIMALS WITH TUMOURS GROUPS NO. CONCENTR ATI ON Hepatomas Forestomach epi thelial tumours Skirt carcinomas Subcuta neous sarconrcas Encephalic tumours Neu roblastomas Other types Average To tal No. % (c) latency To time tal (weeks) No. % (c| (e) Average latency time (weeks) (e) To tal No. % (c) Average latency time (weeks) (e) To tal No. % (c) Average latency time (weeks) To tal No. % (c) (e) Average latency time (weeks) (e) To tal No. % (c) To tal No. Others Benign Mali No. gnant No. Total (f) No. of dif No. % (cl ferent tu mours/tu mours bear ing animals 1 1.3 97.0 1 1.3 104.0 0 - - 3 4.0 75.3 0- - 2 2.7 3 3 0 15 20.3 1.3 ' 1.0 mg/kg 0 - - 2 2.7 88.5 0 - - 0- - 0- - 1 1.3 12 9 3 53 70.7 1.2 1 0.7 97.0 3 2.0 93.7 0 - - 3 2.0 75.3 0- - 3 2.0 15 12 3 68 45.6 1.2 1 1.3 103.0 2 2.7 103.5 0 - -0 - 0- - 4 5.3 10 10 0 17 22.7 1.4 II 0,3 mg/kg 0 - - 0- - 1 1.4 62.0 0 - - 0- - 2 2.7 3 0 3 35 47.9 1.1 1 0.7 103.0 2 1.3 103.5 1 0.7 62.0 0 - - 0- - 6 4.0 13 10 3 52 35.1 1.2 0- III 0.03 mg/kg 0 - - 1 1.3 88.0 1 1.3 94.0 1 1.3 42.0 0- - 0 - 10 10 - 1 1.3 89.0 0 - - 0- - 0- - 2 2.7 8 5 0 15 20.6 1.1 3 46 61.3 1.2 0- - 2 1.3 88.5 1 0.7 94.0 1 0.7 42.0 0- - 2 1.3 18 15 3 61 40.7 1.2 0- - 2 2.7 85.0 0 - - 0- - 0- - 2 2.7 3 3 0 13 17.3 1.0 Olive oil IV (Control) 0 - - 0- - 0- - 0- - 0- - 4 5.3 8 5 3 39 52.0 1.3 0- - 2 1.3 85.0 ^ 0 - - 0- - 0 - - 6 4.0 11 8 3 52 34.7 1.2 Total 105 Z8S80L SSU R&S 108583 TABLE 97 Experiment BT 27 : Exposure by ingestion (stomach tube) to Vinyl Chloride in olive oil at 1.0, 0.3, 0,03 mg/kg body weight, once daily, 4-5 days weekly, for 59 weeks. Results after 136 weeks (end of experiment). DISTRIBUTION OF THE DIFFERENT TYPES OF MISCELLANEOUS (OTHERS) TUMOURS ANIMALS BEARING OTHER TUMOURS GROUPS SEX Benign Malignant No. Distribution of histotypes No. Distribution of histotypes d 3 3 dermatofibromas 0- 1 dermatofibroma 1 Zymbal gland adenoma i 2 cholangiomas ? 9 1 duodenal fibroma 1 caecum lipoma 1 pheochromocytoma 1 thecoma 1 odontoma 1 kidney fibrosarcoma 1 peritoneal fibrosarcoma 1 adenocarcinoma of the uterus 3 1 dermatofibroma 6 1 subcutaneous lipoma 10 1 adrenal gland cortical adenoma 7 pheochromocytomas H c 0- 0- 1 pelvis carcinoma 3 1 adenocarcinoma of the uterus 1 leiomyosarcoma of the uterus 4 dermatofibromas 1 Zymbal gland adenoma 0 10 1 subcutaneous fibroma 1 subcutaneous lipoma 3 pheochromocytomas in 1 skin acanthoma 1 adrenal gland cortical adenoma 9 5 1 pheochromocytoma 1 fibromatous polypus of the uterus 1 fibroma of the uterus 0- 1 fibrosarcoma of the uterus 1 leiomyosarcoma of the uterus 3 1 arrenoblastoma 1 adenoma of pancreas exocrine d 3 2 pheochromocytomas IV 1 glandular stomach polypus 9 1 cholangioma 5 1 adrenal gland cortical adenoma 2 pheochromocytomas 0- 1 kidney adenocarcinoma 1 adenocarcinoma of the uterus 3 1 fibrosarcoma of the uterus Total 3 12 10 3 10 8 3 8 106 1D7 TABLE 98 Experiment BT 27 : Exposure by ingestion (stomach tube) to Vinyl Chloride in olive oil at 1.0, 0.3, 0.03 mg/kg body weight, once daily, 4-5 days weekly, for 59 weeks. Results after 136 weeks (end of experiment). DISTRIBUTION OF THE DIFFERENT TYPES OF MAMMARY TUMOURS GROUPS NO. CONCEN TRATION 1 1 0 mg/kg II 0 3 mg/ kg III 0.03 mg/kg IV Total Olive oil (Control) ANIMALS (Sprague-Dawley rats, 10 weeks old at start} To tal % Sex No. at start Corrected bumber No. (c) (a) Average latency time (weeks} (d) No. of tumours/ tumours bearing animals To tal No. % (e) MAMMARY TUMOURS (b) Histologically examined Histotype Fibromas and fibroadenomas No. % (f) Average latency time (weeks) (d) Carcinomas No. % (f) Average latency time (weeksl (d) Sarcomas No. % (f) Average latency time (weeks) (d) Carcinosarcomas No. % If) Average latency time (weeks) (d) 75 74 5 6.7 91.2 1.0 5 100.0 5 100.0 91.2 0- - 0- - 0- - 9 dand 9 75 150 75 39 52.0 83.4 149 44 29.5 84.3 1.5 39 100.0 33 84.6 79.7 11 28.2 96.2 l 2.6 90.0 0- 1.4 44 100.0 38 86.4 81.2 11 25.0 96.2 1 2.3 90.0 0- - 6 9 dand 9 75 75 150 75 3 4.0 108.3 73 31 42.5 81.1 148 34 23.0 83.5 1.0 3 100.0 3 100.0 108.3 0- - 0- - 0- 1.3 29 93.5 26 89.6 83.1 3 10.3 88.7 1 3.4 42.0 0- 1.3 32 94.1 29 90.6 85.7 3 9.4 88.7 1 3.1 42.0 0- - 6 75 75 1 1.3 138.0 1.0 1 100.0 1 100.0 138.0 0- - 0- - 0- - 9 dand 9 75 150 75 42 56.0 78.6 150 43 28.7 80.0 1.4 42 100.0 30 71.4 81.9 14 33.3 73.6 1 2.4 82.0 0- 1.4 43 100.0 31 72.1 83.7 14 32.5 73.6 1 2.3 82.0 0- - 6 9 d and 9 75 75 150 600 75 75 150 597 2 2.7 35 46.7 37 24.7 75.0 84.8 84.3 1.0 2 100.0 2 100.0 75.0 0- - 0- - 0- - 1.1 35 100.0 31 88.6 86.0 7 20.0 78.3 0- - 0- - 1.1 37 100.0 33 89.2 85.3 7 18.9 78.3 0 - - 0- - la) Alive animals after 12 weeks, when the first tumour (a mammary carcinoma) was observed. (b) Two or more tumours of the same and/or different types (fibroadenomas, carcinomas, sarcomas, carcinosarcomas) may be present in the same animal. lc) The percentages are referred to the corrected number. ld) Average age at the onset of the first mammary tumour per animal detected at the periodic control or at autopsy. (e) The percentages are referred to total number of animals bearing mammary tumours. If) The percentages are referred to total number of animals bearing mammary tumours, histologically examined. t>8S8(H S'Sa TABLE 99 Experiment BT 27 : Exposure by ingestion (stomach tube) to Vinyl Chloride in olive oil at 1.0, 03, 0.03 mg/kg body weight, once daily, 4-5 days weekly, for 59 weeks. Results after 136 weeks (end of experiment). DISTRIBUTION OF THE EXTRAHEPAT1C ANGIOSARCOMAS FOLLOWING THE SITE GROUPS NO. 1 II III IV SEX c5 9 6 9 6 9 6 9 NO. 0 1 0 0 0 0 0 0 EXTRAHEPATIC ANGIOSARCOMAS 1 peritoneal angiosarcoma - - -- R&S 108585 TABLE 100 Experiment BT 27 : Exposure by ingestion (stomach tube) to Vinyl Chloride in olive oil at 1.0, 0.3, 0.03 mg/kg body weight, once daily, 4-5 days weekly, for 59 weeks. Results after 136 weeks (end of experiment). DISTRIBUTION OF THE EXTRAHEPATIC ANGIOMAS AND FIBROANGIOMAS FOLLOWING THE SITE 1 GROUPS NO, SEX <J 1 9 6 II 9 6 III 9 6 IV 9 NO. 0 0 0 0 0 0 0 0 EXTRAHEPATIC ANGIOMAS AND FIBROANGIOMAS - - - 108 R&S 108586 TABLE 101 Experiment BT 27 . Exposure by ingestion (stomach tube) to Vinyl Chloride in olive oil at 1.0, 0.3, 0.03 mg/kg body weight, once daily, 4-5 days weekly, for 59 weeks. Results after 136 weeks (end of experiment). DISTRIBUTION OF FORESTOMACH EPITHELIAL TUMOURS FOLLOWING THE HISTOTYPES GROUPS NO. CONCEN TRATION 1 1.0 mg/kg II 0.3 mg/kg III 0.03 mg/kg IV Total Olive oil (Control) ANIMALS (Sprague-Dawley rats, 10 weeks old at start) Sex No. at star,t 1j Couomrrebcetre(da) d 9 6 and 9 6 9 d and 9 6 9 d and 9 d 9 6 and 9 75 75 150 75 75 150 75 75 150 75 75 150 600 74 75 149 75 73 148 75 75 150 75 75 150 597 FORESTOMACH EPITHELIAL TUMOURS Papillomas and acanthomas No. Carcinomas No. 10 20 30 20 00 20 01 10 11 20 00 20 (a) Alive anirtials after 12 weeks, when the first tumour (a mammary carcinoma) was observed. TABLE 102 Experiment BT 27 : Exposure by ingestion (stomach tube) to Vinyl Chloride in olive oil at 1.0, 0.3, 0.03 mg/kg body weight, once daily, 4-5 days weekly, for 59 weeks. Results after 136 weeks (end of experiment). DISTRIBUTION OF THE SUBCUTANEOUS SARCOMAS FOLLOWING THE HISTOTYPES GROUPS NO. CONCEN TRATION 1 1.0 mg/kg II 0.3 mg/kg III 0 03 mg/kg IV Total Olive oil (Control! ANIMALS (Sprague-Dawley rats, 10 weeks old at start) Sex No. at start Corrected number (a) d 9 d and ? d 9 d and 9 d 9 d and 9 d 9 d and 9 75 75 150 75 75 150 75 75 150 75 75 150 600 74 75 149 75 73 148 75 75 150 75 75 150 597 SUBCUTANEOUS SARCOMAS Rhabdomyosarcomas Fibrosarcomas Others No. No. No. 0 30 0 00 0 30 0 00 0 00 0 00 0 10 0 00 0 10 0 00 0 00 0 00 (a) Alive animals after 12 weeks, when the first tumour (a mammary carcinoma) was observed. 109 TABLE 103 Experiment BT27 : Exposure by ingestion (stomach tube) to Vinyl Chloride in olive oil at 1.0, 0.3, 0.03 mg/kg body weight, once daily, 4-5 days weekly, for 59 weeks. Results after 136 weeks (end of experiment). DISTRIBUTION OF THE ENCEPHALIC TUMOURS (OTHER THAN NEUROBLASTOMAS) FOLLOWING THE HISTOTYPES GROUPS NO. 1 II III IV Total CONCEN TRATION ANIMALS (Sprague-Dawley rats,10 weeks old at start) Sex No. at start Corrected number (a) 1.0 mg/kg 0.3 mg/kg 0.03 mg/kg Olive oil (Control) d 9 d and 9 d 9 d and 9 6 9 d and 9 6 9 d and 9 75 75 150 75 75 150 75 75 150 75 75 150 600 74 75 149 75 73 148 75 75 150 75 75 150 597 ENCEPHALIC TUMOURS- Ependymomas No. 1 0 1 0 0 0 0 2 2 0 1 1 Meningiomas Oligodendrogliomas No. No, 0i 10 11 04 02 06 00 00 00 11 12 23 (a) Alive animals after 12 weeks, when the first tumour (a mammary carcinoma) was observed. r &S 108587 110 TABLE 104 BT project on VC:incidence and average latency time of liver angiosarcoma in relation to doses Experiment 8T 6 BT 1 BT 1 BT 1 BT 1 BT 1 BT 2 BT 2 BT 2 BT 1 BT 9 BT 15 BT 15 BT 15 BT 15 Controls (465) Historical controls (4.200) (a) INHALATION Concen tration Liver angiosarcomas No. % Average latency time (weeks) (b) 30,000 10,000 6.000 18 7 13 30.0 11.7 22.0 53.7 (70.7) 66.4 (79,4) 74.0 (87,0) 2,500 13 21.7 77.4 (90,4) 500 6 10.0 84.7 (97,7) 250 200 150 100 3 12 6 1 5.1 10.0 5.0 0.8 76.0 (89,0) 93.4 (106.4) 89.5 (102,5) 85.0 (98,0) 50 1 1.7 135.0 (148,0) 50 14 4.8 95.0 (108,0) 25 5 4.2 89.0 (102,0) 10 1 0.8 79.0 (92,0) 50 - - 10 - - 00 - - 0 4 0.09 114,5 (124,2) Experiment BT 11 BT 11 BT 11 BT 27 BT 27 BT 27 INGESTION Daily dose (in mg) Liver angiosarcomas No. % Average latency time (weeksMb) 50.00 17 21.0 73.7 (91,7) 16.65 10 12.0 79.3 (92,3) 3.33 0 - - 1.00 3 2.0 107.3 (117,3) 0.30 1 0.7 101.0 (111,0) 0.03 0 - - Controls (230) 00 - (a) Untreated. (b) Out of brackets as period from the start of the experiments, between brackets as age of bearing animals. R&S 108588 TABLE 105 BT project on VC :neoplastic lesions observed in experiments BT6,1, 2, 9, 15 and BT11,17, whose relation with VC must be considered. -- liver angiosarcoma, -- carcinoma of the Zymbal glands, -- nephroblastoma, -- neuroblastoma, -- mammary adenocarcinoma, -- forestomach papilloma and acanthoma, -- extra-hepatic angiosarcoma, -- hepatoma. Ill TABLE 106 BT project on VC : tumours significantly in excess [fisher EXACT PROBABILITY TEST (p^O.05)] Zymbal gland carcinoma ; Liver angiosarcoma : Nephroblastoma : Neuroblastoma : Mammary gland adenocarcinoma : Forestomach papilloma : 6 30,000: 10,000 ppm. 9 30,000; 10.000 ppm. 6 30,000; 2,500 ; 200 ppm. 50 mg/kg b.w. 9 30.000; 6,000: 2,500: 500: 200; 150; 50 ppm. 50; 16.65 mg/Kg b.w. 6 2,500; 200, 150, 100 ppm. 9 500; 250 ppm. 9 10.000 ppm. 9 150; 50; 25: 10; 5 ppm. 6 30,000 ppm. 9 30.000 ppm. TABLE 107 BT project on VC : total cancer bearing animals significantly in excess [FISHER EXACT PROBABILITY TEST (p<0.05)J Total cancer bearing animals : rf 30,000: 10,000; 6,000; 2,500; 500; 250; 200; 50 ppm. 50 mg/kg. 9 30,000; 10,000; 6,000; 2,500; 500; 200; 150; 50 ppm. 50 mg/kg R&S 108589 TABLE 108 BT project on VC : onset of tumours considered as VC correlated, at the lowest doses. at 25 ppm : over 120 animals 5 liver angiosarcomas. 4 Zymbal gland carcinomas and 1 nephroblastoma. at 10 ppm : over 120 animals 1 liver angiosarcoma, 2 extra-hepatic angiosarcomas and 2 Zymbal gland carcinomas. at 1 mg/kg : over 150 animals 3 liver angiosarcomas, 1 extra-hepatic angiosarcoma. 1 hepatoma and 5 Zymbal gland carcinomas. at 0.3 mg/kg over 150 animals 1 liver angiosarcoma and 1 hepatoma. 112 r &S 108590 Methodologie du traitement des donnees de I'Etude du Professeur MALTONI Docteur TASSIGNON /. PLAN DE L `ANAL YSE STATISTIQUE La statistique ne va pas donner une Interpretation differente de cells qu'a donnee le Pr Maltoni mais va permettre de chiffrer plus ou moins les incertitudes. L'effort staristique a surtout porte sur les etudes par inhalation et par ingestion chez le rat Sprague-Dawley. Je me limiterai aux etudes par inhalation (fig. 1). Les biostatisticiens travaillent sur papier, sur la montagne de donnees en provenance des cahiers de laboratoire, qui donnent I'etat des rats a I'autopsie, mais aussi le deroulement de I'expenence, c'est-a-dire le poids k diverses etapes, le comportement des animaux, certaines tumeurs palpables. La presente etude a comporte d'abord (fig. 2) une collecte de donnees a partir des cahiers de laboratoire, mais aussi a partir des coupes -lorsque necessaire- en fonction de ce code des tumeurs. Ceci a permis I'etablissement dune feuille standardises par rat. Les donnees de cette feuille ont ete transcrites sur des cartes perforees, I'ensemble des milliers de cartes perforees a pu donner comme sogs-produit, en clair, le listing des chiffres inscrits sur les cartes. Ces cartes ont ete ensuite validees et on a pu commencer un travail selon trois lignes d'analyse (fig. 3). a. Courbes de poids La plus simple, c'est une analyse du poids des rats, puisque c'etait un facteur qui pouvait etre influence par le chlorure de vinyle. On a vu evoluer les courbes de poids des ani maux avec les ecarts-type, et on a analyse I'ecart de la courbe de poids dans les differents groupes exposes y diverses doses par rapport a leur temoin propre. Nous n'avons pas observe d'effet du chlorure de vinyle admmistre a long terme sur le poids des rats. b. Analyse des ages au deeds et analyse du nombre de tumeurs. On a d'abord elabore des tableaux ou sont represents, en ligne, les differents rats, a commencer par le rat n 1 jusqu'au rat n 3.000 et quelque. Nous avons note, en colonne, les lesions que pouvaient presenter ces rats selon le code du Pr MALTONI, qui comporte plus de 160 lesions differentes. Sur ce tableau etait note I'age au deces des animaux. Oes tableaux mitiaux, on a tire des tableaux de deuxieme generation ayant, en ligne, les lesions, comme par exemple une colonne a 30.000 ppm/males. A partir de ces tableaux, on a pu comparer le nombre de rats attaints d'une lesion donnee apparue, a une dose donnee, avec le nombre des rats atteints de la meme lesion dons d'autres groupes. Lorsqu un effet positif apparaft statistiquement, on peut examiner alors des relations doseeffet eventuelles. Nous avons developpe cette ligne d'analyse en faisant une analyse des correspondences. L'analyse des ages au deces a permis d'etablir des cour bes de survie dans les differents groupes. On a observe qu'en fonction du temps, la survie des animaux a partir de 100 % diminue progressivement jusqu'au moment ou le dernier rat meurt, et nous avons observe qu'en fonction de la dose, le dernier rat mourrait de plus en plus tot. De telles courbes peuvent etre comparees. On compare fa courbe a une dose donnee a la courbe de survie chez les tmoins pour evaluer s'il y a sur-mortalite du fait de la dose ou pas. On peut examiner si la sur-mortality evolue parall&lement ou proportionneilement k la dose, et alors on peut dtablir des analyses de type actuariel qui tiennent compte d la fois de la frequence des tumeurs, et du moment auquel les rats meurent de tumeur lorsque c'est un cancer letal, ou sont atteints du premier signe de la tumeur (par exemple, pour les cancers mammaires, on pourrait savoir k quel moment le cancer est pour la premiere fois palpable). ETUDES ANALTSEES INHALATION BT I Rat SO 10000 ppm 0 000 Z 500 500 Z50 50 0 BT Z Id ZOO 1to5o0 0 A A J - 5 J sam , pdt 5Z iam Id BT S BT 9 BT IS Id Id 30000 50 0 25 to 5 t 0 Id Id Id FIGURE 1 : plan des etudes du Pr MALTONI sur le rat SpragueDawley par inhalation 2. LES ORGANES-CI8LES SELON LE TEST DE FISHER Quels sont les organes cibles ou quelles sont les tumeurs specifiquement induites par le chlorure de vinyle ? II y a eu plus de 90 cancers tant chez les temoins que chez les ani maux exposes et plus de 60 tumeurs benignes chez les temoins comme chez les rats exposes, certaines en exces chez les temoins. II fallait faire le partage, au moyen d'un test simple entre ce qui etait probablement du au chlorure de vinyle et ce qui etait probablement I'effet de la cancdrogenese spontanee dans la colonie des rats etudies. Nous avons utilisb le test de probability exacte de Fisher, qui ne retient que ce qui est statistiquement significatif k une seule dose, et dans un seul sexe. Ceci nous a permis de definir la limite de ce qui est acceptable pour les biologistes et significatif avec une probability d'erreur inferieure S 5 %. D'apres le test de Fisher (fig. 4), le carcinome de la glande de Zymbal, I'angiosarcome du foie, Tadknocarcinome mammaire paraissent extremement significatifs. Au seuil 113 de 5 %, seul !e neuroblastome et le papillome doivent etre retenus. On peut se demander jusqu'ou on peut aller dans cette echelle de probabilite ? La reponse appartient aux bio- est relativement rare car elle ne s'applique qu'a des effets cancerogenes puissants. Nous allons examiner le profil de differentes tumeurs : , logistes. Effectivement, le Pr MALTONI, ce matin, soulignait I'hepatocarcinome comme significativement lie au chlorure de vinyle, contrairement a ce que proposait d'admettre le test de Fisher. II y a en effet, a cote de la statistique qui ne fait que decrire d'une autre maniere, le raisonnement biolo- gique. Ce raisonnement prime, mais la statistique aide et permet de chiffrer I'incertitude. On pourrait retenir aussi les angiosarcomes extra-hepatiques d'un point de vue biologi- que, mais le test de Fisher indique ici une probabilite d'erreur si grande qu'aucun statistician ne pourrait I'accep- ter. Ce test de Fisher est applique dans les experiences^ chroniques, long-terme, de routine, du National Cancer Institute aux U.S.A., mais il bute deja sur un premier pro- bleme : c'est qu'il se peut fort bien que des tumeurs, qui atteignent un niveau statistiquement significatif, comme I'adenocarcinome mammaire, n'aient pas de signification pour un biologiste. D'autres, comme I'hepatocarcinome, qui n'atteignent pas un niveau significatif, peuvent, du DO point de vue du biologiste, avoir une signification. Nous ne ft pouvons done pas nous fier aveuglement & ce test simple CO de Fisher. 108591 3. RELATIONS DOSE-EFFET APPARENTES En avancant dans les techniques statistiques et en exa minant avec plus de precision chacune des tumeurs, eventuelles cibles du chlorure de vinyle, nous avons essaye d'elaborer des relations dose-effets. Quand on a un effet qui est croissant d'une maniere continue en fonction de la dose, il est clair que la substance etudiee agit, et I'effet cancerogene est propre a cette substance. Ce genre de courbe J FIGURE 2 : plan de /'analyse statistique (collects des donntes) analyse des complages 3 lignes d analyse T analyse des ages au deces analyse des golds + analyse des ecarts par rapport aux controles 1 analyse des correspondances entre doses et lesions + analyse des ecarts par rapport aux controles + exam?n de relations dose-ellet -fcourbes d'lncidence FIGURE 3 : plan de t'analyse statistique (analyse des donnSes) 114 ' - tout d'abord, I'angiosarcome du foie (fig. 5). Chez les temoms. I'incidence est nolle, puis, graduellement, I'effet devient de plus en plus prononce, la courbe va croissant de mamere continue avec la dose, ce qui nous renforce dans notre conviction que I'angiosarcome est bien lie au chlorure de vinyle ; il y a relation dose-effet. Un autre argument qui permet d'attribuer un effet a la substance etudiee, c'est que le temps de latence moyen du cancer diminue avec la dose. I'angiosarcome du foie est tine tumeur letale : on prend comme temps de latence le temps entre le debut de I'exposition et le moment du deces des ammaux. Si on inscrit en abscisse le logarithme de la dose, en ordonnee le logarithme de I'age au dec&s des animaux, on a des points experimentaux qui, grosso modo, evoluent lineairement (fig. 6). La regression lineaire illustre ce qui se passe. On trouve, fait classique en cancerogenese experimentale, un raccourcissement proportionnel de la survie des animaux en fonction de la dose. Ceci etait tres simple du fait de I'incidence spontanee extraordinairement rare de I'angiosarcome chez le rat. - Pour le cancer de la g/ande de Zymbal (fig 7). I'inci dence evolue en fonction de la dose. La courbe est tout a fait typique avec une proportionnalite entre I'effet et la dose qui va croissant |usqu'a 30.000 ppm Le nephroblastoma (fig. 8) a une courbe different!.1, on dos d'ane ; en effet, a 30.000 ppm. nous retoumons a un niveau d'effet qui est nul, c'est a dire comparable a a; qu'on observe chez les temoms. Malgre tout, du fait r|tie le nephroblastome est extremement rare chez les temoms, nous pouvons attribuer cotte tumeur a I'effet du chlorine do vinyle. La difference entre males ut femelles pent btre tudiee egalement. elle n est pas tres import,into - Le neurobtastome (fig. 9) est aussi une tumeur tres rare dans les differents groupes-temoin, elle ne survient pas au cours des doses intermediates et puis tout doucement commence a s'exprimer pour de nouveau s'evanouir aux tres fortes doses. Que penser de ce type de courbe doseeffet ? Comme la tumeur est extremement rare chez les temoins, on attribue neanmoins I'effet a la dose. 1 IN IDOlftS 1 dan, dm su moliij l tut resr oe rioMiiiin exjicte he fished P^O.Ot CAACtNOfltE DE LA 6LANDE DE ZYMBAL ANfilOSABCOME DD F CM NEPHItQBLASTDME ADEKQCAfttlNOME MAMMA1RE Pi0,05 NEUROBLASTOME PAMlLQME DU PRE-ESTOMAC 0.KP4Q.15 0.15 0,2 HEPATDCABCINDME AQENOME DE LA GLANDE DE ZYMBAL ANGIDSADCQIRE EXT ft a h e pati que FIGURE 4 : partir de Quel niveau de probability s'agit-il du chlo rure de vinyle ? ANGIOSAR COME DU FOIE BT 9 CO CO -e* R&S 108592 FIGURE S : proportion de rats attaints d'angiosarcome du foie en fonction de la dose 115 - L 'adenocarcinoma mamma/re (fig. 10) qui avail ete mis entre parentheses par le Pr MALTONI, est une tumeur d'une certaine frequence chez les temoins. On sait que c'est une tumeur qui fluctue enorm6ment dans les memes colonies. On observe une augmentation de I'effet aux doses trs faibles de I'ordre de 1 ppm, ce qui n'est pas significatif. A 5 ppm, c'est significatif, k 10 aussi, k 25 egalement. A 50 ppm, nous avons un controle possible, puisque 2 experiences ont explore la dose de 50 ppm : dans I'une, on a eu peu d'adnocarcinomes mammaires, dans I'autre, on en a eu beaucoup, et c'est significatif. La courbe dose-effet s'estompe et aux trs fortes doses, on ne voit plus apparaftre d'exc&s d'adenocarcinomes mammaires. Comment interpreter ce troisieme type de courbe avec un exces important aux trfes trds faibles doses ? En faisant appel au deuxime argument pour une relation avec la substance cancerogne, c'est-S-dire la diminution de la survie moyenne des rats. Dans ce cas precis (fig. 11), il ne va pas nous aider parce que le temps de latence entre la premiere exposition et le decte d'un animal avec adeno carcinome mammaire ne represente pas le veritable temps de latence de la tumeur puisqu'il ne s'agit pas d'une tumeur letale. - Prenons le cas d'un autre type de tumeur benigne qui, de temps k autre, apparaft chez les temoins, de temps en temps 6galement dans les groupes exposes, qui ne decolle pas de la ligne de base sauf k 30.000 ppm, le papillome du prS-estomac (fig. 12). Ik, nous ne pouvons meme pas pre senter de relation dose-effet, ni de raccourcissement du temps moyen de survie des animaux parce qu'il y a trop peu de resultats disponibles. Alors que penser d'une dose isolee & laquelle une tumeur paraTt en exces, sans relation dose-effet ? - L'hepatocarcinome (fig. 13) n'atteint pas, avec le test de Fisher, le niveau de probability courant accepte en biologie, mais on voit apparaftre ici une courbe tres vite emoussee et puis, plus d'effet k trds haute dose. Le fait que chez des animaux nouveaux-nes exposes pendant 5 semaines et puis observes pendant le restant de leur vie, on ait trouve des hepatocarcinomes en exces massif nous permet de penser que cet effet est du au chlorure de vinyle. FIGURE 6 : rats avec angiosarcome du foie, raccourcissement de la survie midiane CARCIHOME DE LA GLAHOE DE ZYMBAL BT 9 Control, h------------ BT 15 ------------- n BT 1 Ht-BT 2-++---------------- BT 1-------------------- -n 100 BT 6 80 cn 60 40 CO 33 20 0) CO cn 0 to w FIGURE 7 : proportion de rats atteints de cancer de la g/ande de Zymbal en fonction de la dose 116 RATS ATTE1HTS ( % ) RATS ATTEIHTS (% ) NEPHROB LASTOME Control. K" 100 BT 15 BT9 BT 1 h-BT BT 1- 80 60 40 20 0 23 DOSE INHALEE ( log ) FIGURE 8 : proportion de rats atteints de ndphrob/astome en fonction de la dose -H BT 6 =m NEUR0BLAST0ME Control. 100 BT.9 BT 15 ------------ m BT1n-BT2-hH---------------- BT 1-------------------- n BT 6 80 60 40 20 0 FIGURE 9 : proportion de rats atteints de neuroblastoma en fonction de la dose *6980 v s*** 1 ADEHOCARCINOME MAH MAI R E (Q) BT9 3J & t/> 0tn0 to Wl 01 2 34 DOSE INHALEE ( log ) B 10 FIGURE 10 : proportion de rats attaints da cancer mammaire an fonction da la dose 5 DOSE (tog10) FIGURE 11 rates avec adenocarcmome mammaire ; pas de raccourcissement de la vie Le test de Fisher avait montre que le papillome du preestomac etait en exces chez les animaux exposes, C'etait la seule tumeur benigne en exc^s. On pourrait se limiter dans I'analyse quantitative aux seules tumeurs malignes, dans cette experience-ci. L 'ensemble des tumeurs malignes augmente avec la dose (fig. 14). L'analyse actuarielle (fig, 15 et 16) de I'atteinte cancereuse des rats montre aussi que la dose induit beaucoup plus de cancers au fur et S mesure qu'elle augmente, pour les males et pour les femelles. On peut en conclure que la force tumorigene du chlorure de vinyle augmente avec la dose. 4. ANALYSE DE LA SURVIE DES RATS La survie mediane (fig. 17) des animaux en fonction de la dose donne, chez les temoins, et les males surtout. une tr6s grande dispersion ; au contraire, au fur et mesure que la dose augmente, on note un raccourcissement de la survie mediane des animaux. C'est un facteur tr6s impor tant & retenir pour ('interpretation globale du phenom&ne ; non seulement, d'une part, on a un accroissement des can cers, mais, d'autre part, une surmortalit de plus en plus forte. On peut se demander si cette surmortalit6 est due au fait qu'S dose croissante les animaux sont atteints de plus de cancers : plus il y aurait de cancers, plus il y aurait de mortality et par consequent, cette diminution de la survie m6diane en fonction de la dose en est le reflet. En realite, en examinant, en fonction de la dose, la survie moyenne, en tenant compte de toutes les tumeurs mali gnes et de toutes les tumeurs benignes (fig. 18), ou d'une tumeur precise (fig. 19), par exemple une tumeur. liee au chlorure de vinyle manifestement, I'angiosarcome du foie, eh bien, nous constatons une diminution de la survie moyenne proportionnelle la dose. Done, ce phenomfene de raccourcissement de la survie mediane des animaux est independant des tumeurs que presentent ces animaux au dec6s et doit etre attribue a la toxici.te systemique. II y a done deux phenomdnes qui agissent : des cancers qui surgissent dans differents tissus et une surmortalit6 d'ordre toxicologique generate chronique, non encore d^finie. 118 RATS ATTEIHTS ( % ) PAPILLOME DU PRE-ESTOMAC 100 BT 9 80 60 40 20 0 .0 1 2 3 4 DOSE INHALEE ( log ) s 10 FIGURE 12 : proportion de rats attaints de papilloma en fonction de la dose - m OHf 5 R&S 108596 RAIS ATTEINTS ( % ) HEPATOCARCINOME Control, m- 100 BT 15 80 60 40 20 BT 9 -H BT 1 H--BT Z-K+- BT 1. -H BT 6 0 DOSE INHALEE ( log 10 FIGURE 13 ; proportion de rats attaints d'hipatocarcinome en fonction de la dose =m o-f 119 TOUT CANCER BT 9 2 DOSE 1NHALEE ( log 10 FIGURE 14 : proportion de rats attaints de cancer!si en fonction de /a dose =m o*l 30 fio C/> age au deces (semaines) age au deces (semaines) 0 00 01 FIGURE 15 : Mkthode actuarielle ; survie sans cancer chez le rat FIGURE 16 : Mdthode actuarielle : survie sans cancer chezla rate (O Sprague-Dawley exposd par inhalation k dtverses doses de VC Sprague-Oaw/ey exposde par mhalataion a diverses doses de VC vj lexprimkes en Hp ppm, 4h//, 5 j/sem pendant 1 an) Donnees de lexpnmees en IQ) ppm, 4h/;, 5 j/sem pendant I an). Donnees de MAL TONI. MAL TONI. 120 R&S 108598 BT9 E Q) (/> t/1 C9 FIGURE 17 : reduction de la vie midiane des rats en fonction de la dose ISOr FIGURE 18 : diminution de la vie des rats Sprague-Dawley en fonction de la dose. L 'effet toxique systimatique est indipendant du type de tumeur(s) prisen! au dicis. A noter la plus courte durie de vie des an/maux morts mdemnes de toute tumeur fsignificatif seu/ement pour les femelles, 0,05p 0,01. one-way analysis of variance). 0___ ,, animaux morts sans tumeurs - animaux morts avec des tumeurs hinignes uniquement ____.a animaux morts avec des tumeurs binignes et malignes simultaniment prisentes *--i animaux morts avec des tumeurs malignes uniquement 30 2 3 4 5 log (dose) FIGURE 19 : Evolution, en fonction de la dose, de la survie moyenne des rats atteints de e.......o angiosarcome du foie a----- a tumeurs malignes non spicifiques du VC q.___ o cancer des glandes de Zymba! *------ * tumeurs binignes non spicifiques du VC L 'effet de la dose est tris significatif (one-way analysis of variance). 121 R&S 108599 On peut etablir la correlation (fig. 201 entre la surmortalite et la surcancerisation a partir du nombre moyen de tumeurs par animal expose a une dose bien definie. / survie exposes v survie t^moins FIGURE 20 '.correlation entra la surmortahte et I'accroissemenr des tumeurs dues au VC it = - 0,941 mdi est le nombre moyen de tumeurs par animal expose b la dose di ; m. est le nombre moyen de tumeurs chez les tbmoins. On a ajustd une droite pas sant par I'origine. 5. ANAL YSE DES CORRESPONDANCES ENJRE LESIONS ET DOSES Pour integrer tant de notions (plus de 90 tumeurs mali- gnes, plus de 60 tumeurs benignes, et des surmortalit^s intercurrentes), seules des methodes informatiques nous permettent de le faire, et c'est done ici qu'eist intervenue^ I'analyse des correspondances (fig. 21, 22, 23). fl Cette analyse factorielle nous a permis d'identifier des facteurs sous-jacents I'experience dont deux sont relativement importants et constitueraient pratiquement 75 % de I'information retenue dans le tableau des contingences. Le premier facteur est probablement lie a la dose et au pouvoir initiateur du chlorure de vinyle. Ainsi, le nephroblastome apparait aux doses relativement faibles : 200, 250, 500 et 2.500 ppm. L'angiosarcome est fortementJnduit a des doses plus importantes. On en trouve aux faibles doses, mais c'est aux fortes doses que le neuroblastome s'exprime le mieux, de meme que le carcinome de la glande de Zymbal. Le papillome du pre-estomac, du fait qu'il est Ii3 exclusivement a la dose de 30.000 ppm apparait egalement dans I'analyse tout prs de cette dose de 30.000 ppm. On pourrait pousser peut-etre plus loin ce genre d'analyse. Du cot de la cinetique biochimique, on a decouvert que les enzymes hepatiques responsables de la detoxification du chlorure de vinyle travaillent avec un seuil qui se trouve etre de I'ordre de 200 ppm ; les voies metaboliques secondaires sont induites a ce moment-ia (voir la grande distance entre TM et NpB sur la fig. 23). L'autre facteur, c'est la surmortalite. Lorsque la surmor talite est elevee, on ne voit pas beaucoup de nephroblastomes, qui ont un temps de latence long. Par contre, le carci nome de la glande de Zymbal continue s'exprimer de mieux en mieux avec des doses croissantes. 1,00 PE F2 0,75 Rats Sprague-Dawley males (BT 1+6) 0.05 0,50 0,25 30 CZ 0,0 -.................... -0,25 -0,50 -0,75 ------- 10 j 0,5 TB HC TM 0,25 FI ASH 6 NrB 2.5 NpB -1,00 -1,20 -0,90 -0,60 -0,30 0,0 0,30 0,60 0,90 1,20 FIGURE 21 : analyse factorielle des correspondances entre les pomts-images des doses et pomts-images des tumeurs. ASH - angiosarcome hipattque ; AZ - adinome de la glande de Zymbal ; CZ = carcinome des g/andes de Zymbal; HC = bbpatocarcinome ; NpB = nephrob/astome , NrB = neuroblastome : PE = papillome de I'estomac ; TB = ensemble des autres tumeurs bbnignes ; TM = ensemble des autres tumeurs malignes. Les doses sont exprimbes en 103 ppm, 4 h/j, 5 j/sem, pendant 7 an. 122 R&s 108600 G U RE 22 : analyse factorielle des correspondences entre /es points-images des doses et les points-images des tumeurs. laenocarcmome mammaire ; A SH = angiosarcome du foie ; AZ = adinome de la g/ande de Zymbal; CZ = carcinome de la glande Z.mpal; HC - hipatocarcmome ; PE = papillome de I'estomac; NpB = nephroblastoma ; NrB - neuroblastome ; TB = tumeurs bini- . TtA - tumeurs malignes. Les doses sont exprimdes en 103ppm, 4 h/j, 5j/sem, pendant 1 an. r mot ^ ' 3na^ss correspondences entre doses (representees par les concentrations en 103 ppm! et les tumeurs. Bats mdles. Lasdpa,, 1 ( s tumeurs bdmgnes et malignes !h drone} et des cancers (rspdcifiquesn du VC Id gauche} est peut-dtre te reflet du changement de L ne.moa biochtmique aux a/entours de 200 ppm. m R&S 108601 On peut en conclure que la dose touche des organes avec des seuils d'initiation de plus en plus eleves, et le seull d'initiation de la glande de Zymbal est plus eleve que celui du rein. Mais la surmortalite vient egalement de la toxicite systfemique. 6. CONCLUSION II faut done une analyse complete par diffferents moyens statistiques, dont certains peuvent etre trfes puissants, pour avoir des chiffres ou une quantification. DISCUSSION PR LATARJET : Je suis trfes intferessfe par ce qui vient d'etre dit et mfeme ce qui n'a pas fetfe dit. On touche IS un des problfemes fondamentaux, comme nelui du seuil et de la relation dose-effet -linfeaire ou pas. Grace fe cette analyse stat/stique, on a pu mettre fe profit I'exceptionnelle expe rience de MALTONI pour approcher des rfeponses fe ces questions fondamentales puisqu'elles touchent aux bases mfemes d'une legislation. II y a ici une notion qui m'est chfere, e'est la notion de dose, Les ppm n'ont jamais fetfe des doses, ce sont des concentrations. Les doses sont proportionnelles aux ppm quand le temps d'exposition est constant et que les condi tions d'inhalation sont constantes, mais si I'animal est exposfe pendant toute sa vie, et si la survie varie avec la concentration, la dose n'est plus parallfele fe la concentra tion. Done, ce que nous avons vu, ce sont des courbes concentration-effet, pas des doses-effets, et je vous prie de voir IS tout I'intferet que j'ai ports fe cette communication et la nfecessitfe absolue pour les cancferologues, chimistes et pour les toxicologues, de comprendre maintenant qu'il y a une rfgueur d'expression, qui n'est pas tou/ours observfee dans la littferature anglo-saxone, mais qui est devenue indispensable. II faut etre extrfemement strict parce que I'on joue avec des consequences considerables, philosophiques, sociales, Ifegales, etc... Mme HURST : Pour essayer de faire une comparaison avec d'autres substances caneferigfenes connues, je voudrais poser une question prfecise : dans les experiences par ingestion qui ont fetfe faites chez le rat, quelle est la dose qui a provoqufe le plus fort pourcentage de tumeurs malignes du foie, et, dans ces conditions, quel a fetfe le temps de latence le plus court ?. Pr MALTONI : La dose qui nous a donnfe la rfeponse la plus grande, e'est 50 mg par kg de po/ds corporel. On a obtenu, sur 80 animaux, 17 angiosarcomes du foie, soit une incidence de 21 %. On a observe aussi, sur des ani maux non porteurs d'angiosarcomes, 5 dysplasias et 7 hyperplasies des cellules sinusoi'dales. Le temps moyen de latence des angiosarcomes a fetfe de 78 semaines, mais bien sur des tumeurs sont apparues plus tdt. Mme HURST : 50 mg par kg de poids corporel fetait-ce la dose totale ? Pr MALTONI : Non, une fois par jour, 5 jours par semaine, pour 52 semaines. Pr VIOLA : Je voudrais ajouter que I'expferimentbtion de Maltoni est magnifique mais que ('extrapolation de I'animal fe I'homme reste, pour moi, difficile pour beaucoup de rai sons. A diffferentes concentrations, il y a des rfeponses cellulaires diffferentes. II y a tout le monde des enzymes que personne rfa encore bien 6tudi6. Si on parle d'extrapolation quantitative, 10 ou 50 ppm dans les fetudes de MALTONI, on obtient des rfeponses d'une experimentation sur I'animal qui n'a rien a voir avec I'homme. Si 50 ppm ont une importance pour I'homme, alors je me demande pourquoi il n'y a que 100 personnes qui sont mortes jusqu'fe aujourd'hui. Je connais trfes bien la situation d'exposition d'il y a 20 ou 30 ans avec 1.000 fe 3.000 ppm tous les jours. En dehors de ces concentrations, il y avait des milliers de personnes qui respiraient 100 ppm de chlorure de vinyle, et 300.000 personnes ont respirfe 3 ou 4 ppm. Alors, pour moi, une extrapolation quantitative fe partir de 1 ppm, de 1.000 ppm... C'est une expression de recherche limitfee aux ani maux, Quand, pour la premiere fois, en 1971, je suis allfe aux Etats-Unis pour discuter de tous les probifemes du chlo rure de vinyle, j'ai dit : il y a des principes fondamentaux que nous devons avant tout fetudier et rechercher : y a-t-il ou non un seuil de sfecuritfe ?. C'fetait il y a 10 ans et la recherche sur le chlorure de vinyle est devenue une mfethode de recherche en cancferologie aujourd'hui. Je dois dire que I'analyse de toutes les recherches de MALTONI soulfeve une sferie de problfemes trfes intferessants. Dr TASSIGNON : Je voudrais rfepondre au Pr VIOLA parce que les questions qu'il a posfees : relation dose-effet chez I'animal, extrapolation des donnees de I'animal fe I'homme, sont trfes imporrantes pour le debat de cette aprfes-midi. Le choix d'un modfele est dfejfe trfes difficile. II en existe des milliers (voir ex. dans la fig. 24). Lorsque vous avez cette petite relation dose-effet (fig. 25) dans la zone des doses examinees, et que vous voulez extrapoler fe des doses qui sont trfes faibles mais qui correspondent fe la manifere dont I'homme est expose de faqon permanente dans I'environnement ou dans son alimentation, vous fai tes un saut terrible, et toute regression se faisant avec des intervalles de confiance, votre intervalle de confiance devient extrfemement large dans la mesure ou vous quittez le d'omaine de ('experimentation. En outre, parmi plusieurs espfeces animales, quel est le bon modfele pour I'homme ? (fig. 261. FIGURE 24 : exemples de modules de relation dose-incidence applicables aux donates de I'itude BT 1 de MALTONI sur rats Sprague-Dawley. En grisaille, I'interval/e de confiance 195 %l de la proportion de rats sponrandment cancdreux. 124 n= 10 23 TD > TD C c o X =3 03 v_ -03 Uc ra u FIG UR E 25 : extrapolation partir d'une droite de regression den ote pour des incidences de 10 100 % d'animaux cancereux. En grisaille. I'mterval/e de confiance a 95 %. D'aprds SHUB/K et CLAYSON, 1976. Pr MALTONI : La reponse neoplasique depend du turnorigramme de base, du profil enzymatique et, cela va sans dire, de la dose. Nous savons qu'il existe, tant pour I'homme que pour I'animal, une relation entre la dose et la reponse neoplasi que. Cette relation dose-effet a bien 6t verifies sur I'animal dans le cas de la cancerogen^se par le chlorure de vinyle. % ancEHElU 100 r- OOSE l.NHALEE (log)0) FIGURE 26 : comparison mterespeces dans les Modes du Pr MAL TONI. Pour ce qui concerne ('extrapolation exacte des donnees quantitatives de I'animal a I'homme, il est n&tessaire de dis poser d'informations comparables sur la susceptibility de reponse (dont le tumorigramme de base est une expres sion), et le profil enzymatique pour I'animal et I'homme. Des recherches parall&es experimentales et ypidymiologiques sur I'homme pourraient apporter une contribution extraordinaire ('extrapolation des donnees de I'animal I'homme, pas seulement dans le cas de la cancerogense par le chlorure de vinyle, mais pour la cancerogenyse en general. M. Latarjet donna la parole a M. Bonnefoy (Solvay). R&S 108602 125 Epidemiologie humaine L'industrie du CVM et du PVC M. Michel BONNEFOY R&S 108603 Je voudrais, 3 I'occasion de cette reunion, soulever quelques idees qui me paraissent importantes sur le plan industriel et egalement sur le plan humain dans l'industrie du PVC, II peut etre utile, en premier lieu, de rappeler bribvement le schema de production du PVC (dia n 1), Deux matures premieres de base : - I'ethyl^ne d'origine petrochimique, - le chlore, obtenu par I'electrolyse du sel, operation industrielle qui produit, en parallfele, de la soude caustique, alcalin de base de l'industrie chimique, La synthase du chlorure de vinyle monomfere : proc6d6, sous pression et continu, qui impose des circuits etanches. Les installations construites en plein air sont du type petrochimie. Le personnel est peu nombreux. La polymerisation du chlorure de vinyle en polychlorure de vinyle : c'est une operation discontinue, comportant de nombreuses interventions manuelles. C'est IS que, autre fois, a existe le plus grand risque d'exposition au chlorure de vinyle'; en particular lorsque le nettoyage des cuves de polymerisation etait effectue manuellement. Enfin, en aval, la transformation de la rSsine de PVC en produits finis, soit directement, soit par I'intermediaire de melanges prets S I'emploi. Quelle est I'importance du PVC dans notre societe d'aujourd'hui, une societe qui est de nature technique, industrielle et qui est fondee sur I'emploi de materiaux artificiels, que ce soient I'acier, le ciment, le verre ou les matu res plastiques ? La consommation mondiale de PVC en 1976 a ete de 9,2 millions de tonnes, celle de I'Europe Occidental de 3,4 mil lions de tonnes (dia n 2). Pour illustrer ces chiffres, situons la consommation de PVC par rapport a celle d'autres materiaux, peut-etre plus communement connus. En CEE, le PVC represente : - le 'A de toutes les matures plastiques, - autant que tous les caoutchoucs, y compris les pneu- matiques pour I'automobile, - plus que la consommation d'aluminium primaire. En amont, il faut souligner que 30 % de la production de CI2 est fixee dans le PVC et que, de ce fait, de la soude caustique est mise, en meme proportion, & la disposition de l'industrie. Or, sur les marches, si le CI2 est en exc6s, la soude caustique fait defaut. Le PVC joue done un role indispensable & I'equilibre de plusieurs secteurs industriels consommateurs de soude caustique, certains d'importance strategique pour notre economie. En aval, le PVC se retrouve dans de multiples applica tions ou ses nombreuses proprietes : qualites mecaniques, non inflammabilite, inalterabilite, competitivite economique, en font un materiau apprecie, souvent irremplacable. Je citerai deux exemples h litre d'illustration : - dans le secteur du batiment : la moitie des materiaux plastiques mis en oeuvre sont du PVC, ainsi : . en France, 1 tuyau sur 2 est en PVC . en Allemagne, 1 chassis de fenetre sur 2 est en PVC ; - autre exemple, I'emballage alimentaire et plus particuliferement les flacons : . en France, 2 bouteilles de vin sur 25 20 bouteilles d'eau sur 25 17 bouteilles d'huile sur 25 20 bouteilles de vinaigre sur 25 sont en PVC. Ces quelques points de repere pour souligner que le PVC n'est pas un gadget mais un materiau de base. II n'est done pas envisageable, socialement, de I'ignorer, encore moins de I'interdire. Si la production presente des risques, il incombe aux agents sociaux : industriels, travailleurs, scientifiques, autorites, de s'employer a les maitriser et les eliminer. Quelle est la population directement impliquee dans la production du PVC ? II est bien evidemment difficile de la recenser avec precision - les conferenciers qui presenteront les enquetes epidemiologiques vous expliqueront les obstacles auxquels on se heurte dans ce domaine -, il est possible toutefois de I'estimer. Actuellement, en Europe occidentale, le personnel employe d la production du chlorure de vinyle monom^re et du polychlorure de vinyle est de I'ordre de 16.000 personnes. Au plan mondial, une extrapolation fondee sur la pro duction de PVC conduit au chiffre de 40.000 personnes. Pour representer la population totale employee ou ayant ete employee S la fabrication du PVC, il faut prendre en compte deux autres facteurs : - I'augmentation avec le temps du nombre de personnes employees a la production du PVC, - le renouvellement de ce personnel. - Ce graphique (dia n 3), resultat d'une enquSte effectufe en Grande Bretagne par I'Employment Medical Advisory Service, illustre bien ces deux aspects : 1. D6but de l'industrie du PVC dans les annees 1940-1950 ; croissance exponentielle du personnel employe jusqu'aux annees 1973-1974, et ce qui n'apparalt pas ici, une moindre progression des effectifs pendant les demises annees en relation avec la crise economique et le ralentissement qui en a r6sult6 pour la production de PVC. 2. Le nombre d'anciens employes est sensiblement 6gal au personnel en activite. Sur cette base, on peut, en grossi&re approximation, estimer que la population ayant travaille ou travaillant dans le domaine de la production du VC et du PVC est de I'ordre de 80,000 personnes pour le monde entier. Je voudrais, et c'est un aspect d^licat, 6voquer les cas de deefes par angiosarcome h^patique - affection dont la relation avec I'exposition a des doses elevtes de chlorure de vinyle est manifestement etablie. 127 Matieres de base Matieres premidres Production de VC Production de PVC Transformation du PVC Produits en PVC Dispositive n 1 ; Schema de production du PVC 1. CONSOMMATIONS DU PVC (1976) MONDE EUROPE CEE 9,2 Millions deTonnes 3,4 Millions deTonnes 2,9 Millions deTonnes 2. IMPORTANCE DU PVC (CEE- 1976 ) MATIERES P1ASTIQUES 12-13 Millions de Tonnes PVC 2,9 Millions deTonnes CAOUTCHOUC 2,9 Millions deTonnes ALUMINIUM 2,0 Millions deTonnes 3. INDUSTRIES EN AMONT PVC = 30 % DU CHLORE ET DU NaOH 4. INDUSTRIES EN AVAL EXEMPLES : 8ATIMENT 50 % des plastiques mis en oeuvre (CEE) 1 tube sur 2 ( France - Allemagne Hollande ) 1 chassis de fenetre sur 2 ( Allemagne ) FLACONNAGE VIN 2 bouteilles sur 25 (France) EAUX 20 bouteilles sur 25 (France) HUILES 17 bouteilles sur 25 (France) VINAIGRE 20 bouteilles sur 25 (France) Diapositive n2 : Consommation de PVC 128 R&S 108604 R&S 108605 Diapositive n" 3 : Nombre de personnes employees actuel/ernent et nombre total de personnes qui ont quitte cette Industrie cheque annee depuis 1940. Ce graphique (dia n 4) montre la courbe de Involution du nombre de cas identifies en fonction du temps. On observe une rapide progression & partir des annees 19671970 qui culmine en 1976, et ce qui semble etre une stabili sation en 1977 et 1978. Je voudrais sur ce sujet faire quelques remarques illustrees par cet autre graphique (dia n 5), strictement qualitatif : - la premiere courbe, est celle du graphique prdcbdent. Comment va-t-elle evoluer dans les annees futures ? - la deuxibme courbe essaie de repondre cette interro gation : c'est I'image de la frequence des cas reellement survenus, c'est-d-dire le nombre de cas effectifs chaque annee rapporte d la population exposee. Nous pouvons faire apparaitre ; - en 1, une sous-evaluation dans les annees 1940-1950 car la detection a ete certainement incomplete ; - en 2, une progression plus moddree dans les annees 1960, compte tenu de ('augmentation rapide des popula tions exposees ; Avymentat/on dtt nombre personae* expose** Qimtnotion aes ntreoox aexpos/t/on jjns trs annees /330 ft?t de to re/se en oeuvre tree noursaux Stanaards eXe Jafu&r/te Diapositive n 5 : Nombre de cas effectifs - en 3,1'effet espere de la reduction des niveaux d'exposition dans les annees 1960 et le ddbut des annees 1970, premiers rdsultats des efforts en relation avec la prevention de I'acro-ostdolyse dont le Dr BERROD nous a dit quelques mots ce matin ; - enfin, en 4, 15 & 20 ans aprds la mise en ceuvre des reductions drastiques d'exposition operees des 1974-1975 ; la rarefaction des cas. La stabilisation du nombre des cas observes en 1977 et 1978 permet-elle d'esperer que nous atteignons actuellement la zone 3 ? La question est posde. Je souhaite, en forme de conclusion, avancer quelques iddes : - ('experimentation animale - les decouvertes du Dr VIOLA et les travaux remarquables du Pr MALTONI en sont I'illustration - a joue un role fondamental dans I'histoire de la toxicite du chlorure de vinyle. Elle a permis de mettre en evidence son effet cancerogfene, d'identifier -chez I'animal- des organes cibles et de confirmer I'hypoth6se d'une relation entre la dose et I'effet. L'exp^rimentation animale porte, malheureusement, en elle-meme ses limites : - les populations animales exposees sont trop faibles numeriquement pour permettre une exploitation statistique des resultats aux faibles doses ; - et surtout, il n'y a pas actuellement d'extrapolation quantitative possible entre les differentes espfeces animales et, encore moins, de I'animal I'homme. L'6pidemiologie humaine - et je vous prie d'excuser cette anticipation sur le thfeme de cet aprfes-midi - pallie les faiblesses de ('experimentation animale. Dans le cas du chlorure de vinyle, la realite est que, malheureusement, les populations exposees ont 6te nombreuses. Mais surtout, l'6pid6miologie humaine analyse directement le comportement de I'homme - etre complexe dans un environnement complexe. Cette recherche est, mon sens, primordiale. Toutefois, experimentation animale et 6pidbmiologie humaine ne sont que des methodes d'6tude a posteriori, Dans les deux cas, on analyse des situations de fait, on constate des resultats. 129 R&S 108606 En tant qu'ancien ingenieur d'usine, je pose la question : ne convient-il pas Egalement d'orienter les efforts de la recherche scientifique vers une meilleure connaissance de la fonction cancErogEne du chlorure de vinyle, vers I'etude des diffErents stades de developpement des tumeurs : pourquoi, comment agit le chlorure de vinyle ? Nous manquons cruellement de connaissances dans la detection des signes precoces du developpement de la maladie chez ceux qui ont ete exposes dans le passe, ainsi que de moyens therapeutiques lorsque I'atteinte par angiosarcome est confirmee. Sous un aspect plus industriel, il est certain que les differentes formes d'exposition au chlorure de vinyle ont ete reduites E des niveaux trEs faibles par un effort considera ble de I'industrie. A ce stade, il devient important pour la collectivite de situer precisement la realitE du risque associe E I'exposition du chlorure de vinyle, par rapport aux autres risques sociaux, afin que les ressources de cette meme col lectivite soit utilisees IE ou Taction sera la plus efficace. Dans cette perspective egalement, la recherche fondamentale des mecanismes d'action du chlorure de vinyle doit contribuer E apporter une reponse, Ce sont IE des questions que je pose aux Eminents scientifiques de votre Club de Cancerogenese Chimique. Pr TRUHAUT : Vous avez, M, BONNEFOY, mis en paralleie les donnees de I'experimentation animale et les don nees qu'on peut obtenir par I'epidemiologie sur des groupes humains exposes. Vous avez dit que le facteur limitant, c'Etait I'incertitude. Je voudrais attirer votre attention et I'attention de nos auditeurs sur le fait qu'en ce qui concerne les faits E long terme, I'epidemiologie humaine comporte un facteur limitant qui est le temps d'observation. Dans le cas du chlorure de vinyle, nous avons un exemple ou I'experimentation animale et les enquetes epidemiologi- ques se sont trouvees melanges. En effet, on a dit ce matin qu'il y a eu 3 grands stades dans la detection des ris ques lies a I'exposition au chlorure de vinyle. Au depart, on savait qu'il s'agiss,ait d'une substance inflammable, neuro-toxique et, en consequence, les toxicologues avaient fixe des limites pour I'exposition professionnelle. Puis, brusquement, vers 1963, il y a eu la decouverte par I'epidemiologie humaine des effets vaso-moteurs, au niveau des extremites des membres superieurs avec des perforations au niveau des doigts : le syndrome d'acroostEolyse. C'est parce que le Pr VIOLA a voulu tenter par I'experimentation animale d'etablir les mecanismes de production de ce syndrome d'acro-osteolyse que, alors qu'il ne s'y attendait pas, il a mis en evidence, E des doses considera bles, des effets cancerogenes en diverses localisations. Ensuite, on est passe a une experimentation>en profondeur, et c'est ce que le Pr MALTONI nous a expose ce matin. Tout ceci s'est trouve melange, et il s'est trouve que, dans ce cas, les donnees de I'experimentation animale sur I'effet cancerogfene ont conduit les epidemiologistes b faire faire des enquetes retrospectives et & mettre en Evi dence la production, en particulier, de tumeurs trEs speciales, les hemangiosarcomes du foie. Voyez comme, dans le domaine cancerologique - et je ne saurais personnellement separer I'etude des risques cancErogEnes de celui des ris ques toxiques -, il y a une necessite d'Etroite liaison entre les deux disciplines, toxicologiques et cancerologiques, par I'experimentation et les enquetes epidEmiologiques. Le Professeur LATARJET donne la parole au Dr LAZARD de Rhone-Poulenc en prScisant qu'il est mbdecin du travail, rapporteur a la Commission Medicate Frangaise sur le chlorure de vinyle monomere et qu'il est le reprbsentant frangais E la Commission Eumpeenne des Federations des Industries Chimiques. 130 Enqueteseuropeennes Docteur Pierre LAZARD Epid^miologie humaine R&S 108607 Je serai bref. Je serai d'autant plus bref qu'aprs le tra vail considerable d'exp^rimentation animale, nous allons passer I'etude epidemiologique humaine, dont les conclu sions seront tirees par le Pr FLAMANT qui, en tant qu'epidmiologiste, pourra egalement critiquer les donnees des enquetes actuellement connues. Apr6s les premieres experimentations animales du Pr VIOLA montrant que le chlorure de vinyle etait susceptible d'induire des tumeurs cancereuses, il apparut necessaire, pour de nombreux chercheurs, de mener des enquetes epidemiologiques pour determiner dans quelles proportions le chlorure de vinyle pouvait etre responsable de I'accroissement du risque pathologique, en particular cancereux, chez les ouvriers exposes. Les travaux du Pr MALTONI, dans leurs premieres conclusions, precisaient les organescibles, et plus specialement, la survenue statistiquement significative d'angiosarcomes hepatiques chez les animaux observes. Ces resultats conduisirent rechercher encore plus precisement I'incidence de I'exposition au chlorure de vinyle sur le nombre d'angiosarcomes hepatiques et, d'autre part, confirrrterent la necessity dtetudes statistiques concernant les populations exposees. Ces etudes, menees en Europe Occidentale, ont rencontre de multiples difficul ty pour connaftre les durees d'exposition, les annees d'exposition, les degr6s d'exposition, Chacune d'elles a, ou peut encore faire I'objet de discussions passionnees. Dans le cadre de cette reunion, nous nous proposons tres simplement de faire le point des connaissances epidemtologiques qu'un medecin du travail praticien peut percevoir, en rapportant pour chacune des contrees europeen nes, les travaux essentiels publies, en nous attachant surtout aux conclusions des enquetes de mortality par cancer. II faut souligner au passage le role du comite medical charge de I'etude de la pathologie du chlorure de vinyle au sein du CEFIC qui, sous la presidence du Dr de BOER, a centralise la plupart des informations europeennes et en a tire des conclusions d'ordre general ; et celui du Centre International de Recherche sur le Cancer, sur le plan de la centralisation des recherches internationales. En effet, dans certains pays tels que la Hollande, la Norvege par exemple, la population totale exposee aux risques du chlo rure de vinyle est trop faible pour que Ton puisse raisonnablement en tirer des conclusions statistiquement valables. Selon les etudes, les conclusions peuvent etre tres differentes. Les auteurs suedois BYREN et Coll, ont publie, en 1976, une etude qui portait sur I'ensemble des ouvriers d'une seule usme de polymerisation au cours des annees 40. Sur un total de 771 personnes, 21 avaient ete perdues pour I'enquete. Les degres d'exposition n'ont pu, comme c'est souvent le cas, etre determines d'une facon precise, en I'absence de mesures systematiques des teneurs atmospheriques en CV, relies qu'elles sont connues actuellement dans nos usines. En effet, les teneurs des atmospheres etaient, d I'epoque, appreciees grosso modo et non pas comme maintenont au moyen de chromographes en phase gazeuse qui permettent de connaitre sur le mois, la semaine, la journee, I'annee, les moyennes des taux d'exposition. Dans le groupe examine, il a ete note 4 a 5 fois plus de tumeurs pancreatiques que dans la population generate, avec deux cas d'angiosarcomes hepatiques en 1967. Le nombre des tumeurs cerebrates et des suicides ne differait pas de ce que Ton constatait dans la population generate. Par contre, les maladies cardio-vasculaires et cerebrovasculaires etaient significativement plus elevees. Les auteurs remarquent que dans le groupe concern^ aucune recherche precise n'a ete faite concernant les modes de vie et les facteurs favorisant les maladies chroniques, degeneratives ou cardio-vasculaires. II faut signaler en correspondance avec cette etude le travail entrepris par ELINDER et CEDERLOF, axe sur la recherche de I'influence possible du CV sur I'environnement. Une etude de mortalite par cancer concernant la periode de 1961 d 1974 a ete effectuee dans la population suedoise proche d'une usine de fabrication de PVC, par corbparaison avec une population de meme importance situee en dehors des risques de I'exposition. Cette etude aboutit a la constatation d'une augmentation de 50 % du taux de mortalite standardise (TMS) pour les cancers du pancreas, par rapport a la population temoin et par rapport & la population nationale. Aucune autre aug mentation n'est constatee pour les ^utres affections cancereuses et il n'y a pas eu, & I'epoque, de cas d'angiosarcome hepatique. Aucune explication etiologique valable ne peut etre donnee concernant cette augmentation des tumeurs pancreatiques. En 1979, HOLMBERG et Coll,, toujours en Su6de, font etat d'une enquete concernant les employes de 4 usines de transformation du PVC, ayant ete exposes au moins 3 mois aux monomeres pendant une periode allant de 1945 a 1974. Sur 2.073 ouvriers, 1.970 ont pu etre suivis et ce groupe a ete compare & la population suedoise en regard de la mor talite pour les differentes causes de maladies et pour la morbidite cancereuse. La mortalite par thrombose coronnaire a ete sup^rieure dans le groupe consider^ et plus specialement dans un sous-groupe d'ouvriers exposes au moins 2 ans au produit (11 cas contre 5 dans la population temoin). On note en outre une tendance & ('augmentation de la morbidite et de la mortalite par tumeurs du tractus digestif (bien que cette constatation ne soit pas significative statistiquement). Cette 6tude doit faire I'objet, de la part des auteurs, d'un suivi pour appr^cier exactement sur les anndes venir devolution de ces pourcentages. En Grande Bretagne, DUCK et ses collaborateurs publient, en 1975, une etude de mortalite concernant les travailleurs d'une seule usine de polymerisation : sur une population de 2.100 ouvriers males exposes pendant une periode atteignant parfois 27 ans, Itetude ne montre aucun exc6s dans les causes spdcifiques de mortality, et les auteurs concluent que I'enquete ne permet pas de noter un accroissement de la frequence des d^cfes dus aux maladies canc^reuses les plus communes. Mais, en reprenant les 6tements fournis par cette publication, on doit noter que WAGONER, INFANTE et SARACCI aboutissent, d l'6poque, en 1976, des conclusions tr6s differentes. II existe pour eux un excs de mortalite par cancers, en particulier du tractus digestif et du poumon, en relation etroite avec ['augmentation de la durSe de I'exposition. BAXTER et FOX publient, au dSbut de I'annSe 1976, une enquete concernant des ouvriers de transformation du PVC. Cette etude, qui porte sur la mortality lies k toute cause consta ble entre 1970 et 1972, fait apparaftre que les cancers de 1'estomac et les maladies du tractus uro-genital sont statistiquement responsables d'un plus grand nombre de dScSs. Le nombre total de dScSs observe par cancers de toutes localisations est ISgSrement plus elevS que le nombre attendu. II faut attendre 1977 pour une Stude trSs importante britannique qui est faite par FOX et COLLIER et qui concerne plus de 7.000 ouvriers reprSsentant la totality du person nel expose en Grande Bretagne, entre 1940 et 1975, pour des durSes plus ou moins longues. Cette enquete reste actuellement, k notre connaissance, la plus importante d'Europe en fonction du nombre de personnes concernSes. Environ 99 % des ouvriers ont pu Stre suivis et les conclu sions de ce travail font apparaitre une diminution significa tive du taux standard de mortalite par comparaison au pourcentage national de dScSs par cancer en gSnSral. L'enquSte ne permet pas de mettre en Evidence une aug mentation significative du nombre total des cancers, exception faite pour les cancers du foie et les angiosarcomes. Cependant, les auteurs insistent sur le fait que I'impact total de I'effet du chlorure de vinyle monomSre ne pourra etre probablement pleinement apprecie que grace k la poursuite d'enquetes Spidemiologiques pendant plusieurs annSes. En Octobre 1978, FRENTZEL-BEYME, SCHUTZ et THIESS en RSpublique Federate d'Allemagne publient leurs observations k propos d'une etude de mortalite concernant 1.618 ouvriers exposes au chlorure de vinyle monomere et au PVC dans un Stablissement de BASF k LUDWlGSHAFEN. La methodologie et I'analyse de cette Stude sont bashes sur les mSthodes usuelles internationales permettant la comparaison, L'Stude ne pouvant apporter de precisions suffisantes sur le degrS d'exposition, la mortality du groupe etudiS a done StS dSterminSe par rSfSrence k des durSes d'exposition do 5, 10, 15 et plus de 15 ans. Deux groupes ont StS constituSs, I'un comportant des ouvriers exposes avant 1960, I'autre comprenant les ouvriers ayant eu leur premiere exposition aprSs 1960 jusqu'S la fin de I'Stude ; ceci rejoint ce que nous a montrS tout k I'heure M. Bonnefoy,'1960 Stant Fannie des progrSs dans la fabrica tion et correspondant done k des durSes d'exposition moindres, alors que les annSes antSrieures k 1960 pouvaient corresponds k des durSes d'exposition beaucoup plus SlevSes. Des groupes de rSfSrence ont aussi StS Stu dies, comportant, premiSrement la population de la ville de Ludwigshafen (180.000 hab.), deuxiSmement la population d'une region complete qui groupait 3 millions 1/2 d'habitants. Enfin, un troisibme groupe de tSmoins internes k I'Stablissement : 1.960 ouvriers d'une fabrication de styrSne. Au terme de cette Stude, il a StS constatS moins de cirrhose du foie et moins d'infarctus myocardiques que ce que I'on attendait. II n'avait pas StS constatS d'angiosarcomes hSpatiques dans cette usine. Le nombre de cas de dScSs par cause naturelle (definition internationale : ICD 0796) est aussi moins important. Le nombre de dScSs par cause non naturelle (ICD 800 999) est trSs proche du nom bre attendu. On a notS 3 affections avec une plus grande frequence : tuberculose pulmonaire, tumeurs malignes du colon et de 1'estomac, hypertrophie prostatique. La duree de I'exposition ne semble pas avoir eu une influence signifi cative sur une augmentation du pourcentage de mortality aprSs de longues pSriodes d'exposition. Les auteurs remarquent d'ailleurs que les observations faites dans d'autres Etudes ne sont pas confirmees par leur enquete en ce qui concerne une augmentation significative des tumeurs cancSreuses du cerveau, du poumon ou du foie. Ils soulSvent I'hypothese que ces differences sont peut-etre dues k un effet dose-reponse considSrant que le niveau d'exposition au chlorure de vinyle monomSre dans leur Stablissement a toujours StS relativement bas par comparaison aux Stablissements ou ont StS menses des enquStes similaires. REINL et ses collaborateurs ont terminS, en 1977, une Stude concernant tous les Stablissements du LAND NORD RHEIN WESTFALEN, qui a StS publics la mime annSe et prSsentSe, en particulier au 19Sme CongrSs International de Dubrovnik, en Septembre 1978. Cette Stude comprenait 3 groupes : un groupe d'ouvriers exposes, un groupe controle, un groupe d'ouvriers des industries de transforma tion. La durSe d'exposition et les classes d'Sge ont StS pri ses en consideration. Les rSsultats de cette Stude font apparaftre des conclusions assez diffSrentes des enquStes, en particulier en regard de I'enquete britannique de FOX et COLLIER. En mars 1979, cependant, les Drs REINL et GRESSER, auteurs de cette publication, au cours d'une rencontre avec les Drs De BOER du CEFIC et ADAMS, ainsi que le Dr PADDLE, ont apportS des modifications aux tableaux publics, ces changements doivent d'ailleurs faire I'objet d'une nouvelle diffusion. A la suite de ces rectifica tions, les conclusions de I'enquSte apparaissent de la fagon suivante ; premiSrement, le taux standard de mortality pour les tumeurs en totality n'est pas augments de fagon significative dans le groupe I des exposes ; deuxiSmement, il n'y a pas non plus d'accroissement significatif du nombre des cancers par comparaison avec la population mSle d'Allemagne ; troisiSmement, le taux standard de mortality pour les tumeurs du systSme lymphopoiStique est aug ments de fagon assez significative ; enfin, le TSM pour les tumeurs du tractus digestif est globalement plus SlevS et plus spScialement en ce qui concerne les tumeurs gastriques. Pour les tumeurs hSpatiques, il apparaft trSs nettement augments, angiosarcome inclus. On note une nette augmentation d'accidents cardio-vasculaires, mais cette augmentation se retrouve de maniSre k peu prSs identique dans les trois groupes compares. Pour le groupe controle, on note par ailleurs une augmentation significative du TSM par tumeur maligne du foie ainsi que par affections cardiovasculaires. Le TSM, pour I'ensemble des tumeurs d'un organe n'est pas augments ; il n'a pas non plus StS cons tats d'accroissement significatif du nombre de tumeurs du cerveau et du systSme respiratoire dans le groupe des ouvriers de production, C'est aussi au 19Sme CongrSs International de MSdecine du Travail que BERTAZZI, VILLA, FOA et collaborateurs prSsentent une enquSte SpidSmiologique italienne publiSe auparavant et concernant 4.777 ouvriers rSpartis dans 9 usines de production situSes dans des rSgions diffSrentes d'ltalie. Ce groupe reprSsente environ 86 % du personnel ayant StS exposS au chlorure de vinyle : la population StudiSe comprenait les ouvriers. en activitS au moment de I'enquete (1975-1977), les ouvriers ayant StS exposSs dans le passS et mutSs dans d'autres secteurs, et les ouvriers antSrieurement exposSs et retraitSs ayant cessS toute acti vitS professionnelle. 3 niveaux d'exposition ont StS dSfinis : faible, moyen et SlevS. Une partie de I'enquSte concerne des rSsultats cliniques et biologiques pour 4,713 ouvriers. En ce qui concerne I'Stude de mortalitS, la pSriode de rSfSrence considSrSe est donnSe par la date de dSbut de pro duction dans les diffSrentes usines. En I'absence de registres officiels adSquats en Italic, les donnSes ne peuvent etre qu'indicatives. Chez les ouvriers dScSdSs (64, soit un peu plus de 1,3 % du total), les tumeurs malignes apparaissent comme responsables du dScSs dans 48,3 % des cas, 30 % Stant des tumeurs du foie et des voies biliaires dont 3 angiosarcomas. Ce pourcen tage de 48 % reprSsente approximativement le double du pourcentage attendu. R&S 108608 13? R&S 108609 A I'occasion d'une reunion du Comity Medical du CEFIC & Milan (29 Mai 1979), le Dr FOA a bien voulu nous donner quelques commentaires sur cette enquete. En ce qui concerne particuli^rement I'etude de morbidity clinique et biologique, il a indique que les donnfees retenues doivent etre considerees avec prudence compte tenu de I'absence de groupe de controle approprie et de differences possibles dans les methodes d'examen et de diagnostic. Pour I'etude de mortalite, plus specialement en ce qui concerne les tumeurs cancereuses, il apparait une augmentation du TMS dans certaines usines, bien qu'en general les ecarts soient relativement faibles. En France, rien n'a ete publie jusqu'S ce jour, mais c'est une lacune qui va etre combiee. Les medecins du travail des usines franpaises pour les productions chlorure de vinyle / PVC, constitues en un groupe d'etudes, ne se sont pas desinteresses de la question, recueillant patiemment, et avec beaucoup de difficultes parfois, les documents qui permettent de faire un releve des decs survenus chez les ouvriers du chlorure de vinyle pour en tirer une apprecia tion d'incidence. Ils ont publie, au Congrfes de Dubrovnik, en Septembre 78,1'ensemble des informations cliniques sur les 10 cas franpais d'angiosarcomes connus e I'epoque ; ils ont apporte une contribution au materiel d'etude dont le Pr FLAMANT et Mme TIRMARCFIE nous entretiendront tout e I'heure : I'enquete de mortalite conduite par mon ami le Dr PIERRE et le Dr TASSIGNON e I'usine de Tavaux illus- trera bien cet effort. ' 133 Epiddmiologie humaine Enquetes Solvay (Tavaux, France) Docteur Claude PIERRE 108610 A I'usine de Tavaux dans le Jura ou le groupe Solvay polymerise le chlorure de vinyle depuis 1953, une enqudte epiddmiologique de mortalite a dtd realisde sur 1.482 travailleurs exposes aux monomdres pendant leurs fonctions dans I'usine entre le ddbut de la production en 1963 et le 31 Ddcembre 1976. La collecte des donndes a dtd rdalisde b I'usine par le service du personnel et le service de fabrica tion ainsi que le service medical, Le but de notre dtude dtait d'dtablir I'effet que pouvait avoir une exposition professionnelle au chlorure de vinyle sur la santd du personnel expose tout au long de 24 anndes de production de VC, PVC dans cette usine, Le nombre de ddcds apparaissant au cours de la periode considdrde est compard d celui qui serait attendu dans une population contrdle qui aurait meme sexe, meme repartition des classes d'age et qui aurait vdcu pendant la meme dpoque historique, et dont le taux de mortality est jugd normal. L'approche la plus fiddle eut dtd de choisir pour chaque suj'et expose au CV un sujet de reference ayant meme sexe, meme age, meme charge tie travail, memes habitudes tabagiques et alimentaires, meme niveau socio-professionnel et rdsidant dans le voisinage du premier, Cependant, pour faire avancer I'enqudte et la produire avant la fin de I'annde 1976, il a dtd fait appel, comme dans les enqudtes analogues, au taux de mortality de la population franpaise publid dans I'annuaire de statistiques sanitaires mondiales de I'Organisation Mondiale de la Santd. L'enquete a englobd tous les travailleurs masculins : ouvriers, agents de maitrise, employes et cadres, qui ont dtd expos&s aux monomdres au cours de leurs fonctions dans les unites de synthase du chlorure de vinyle, de poly merisation et de compoundage jusqu'd I'emballage et au magasinage. Le laboratoire et le hall d'essai des mdthodes de polymerisation sont inclus dgalement. Les dquipes d'entretien des installations et le personnel intervenant dans la fabrication de co-polymdres du chlorure de vinyle et du chlorure de vinyliddne ont aussi dtd ajoutds. Le service du personnel de I'usine est en possession des fiches permettant un relevd precis des personnes exposes. 1.482 personnes ont ainsi dtd recensdes. Une fiche individuelle a dtd dtablie comportant nom, prdnom, date de naissance, date du ddcds dventuel, date et pdriode d'emploi dans les diffdrents services de la division mature plastique, fonctions occupies et, le cas dchdant, diagnostic de ddcds. 6 personnes dont I'activitd dtait insuffisamment connue ont dtd dcartdes ; aucun ddcds n'y avait d'ailleurs dtd observe. 5 femmes, parmi lesquelles on notait un ddcds ont dtd exclues des calculs statistiques parce que trop peu nombreuses. Enfin, 160 individus ont du dtre refoulds parce qu'il n'a pas dtd possible de savoir s'ils dtaient vivants ou morts b la fin de I'enqudte (nous en reparlerons plus loin). Le ddcompte laisse done 1.311 fiches exploits, L'exposition a dtd caractdrisde par son intensity. En I'absence de donndes precises sur le niveau d'exposition individuel de CV dans le passd, ces niveaux d'exposition ont dtd estimds d partir des fonctions occupies pendant le travail en milieu pollud. Une historique de carridre ddtaillde au mois prds a pu etre obtenue du Service du Personnel de I'usine. Une dtude de revolution des definitions de fonctions aboutit b isoler 6 fonctions-type de la plus b la moins expo se : 1. ouvrier nettoyeur et vidangeur d'autoclaves et prdposd b la filtration latex-slurry, 2. assimilee b la prdeddente, sur installations moins anciennes, 3. ouvrier d'entretien des autoclaves 4. agents de maitrise et autres ouvriers que ceux spderfids ci-dessus, travaillant b I'intdrieur des salles d'autoclaves, 5. tous agents de maitrise et ouvriers travaillant b I'int4- rieur des halls de synthese et liquefaction du CV b par tir de I'acdtyldne ou au chargement-ddchargement des wagons-citernes de chlorure de vinyle et les ou vriers d'autoclaves du secteur IXANS (copolymdres). 6. Enfin, toutes les autres fonctions non spdeifides cidessus. En fabrication, un travail de reconstitution des niveaux d'exposition ayant existd dans le passe fut entrepris de 1953 d 1976, revolution technique des diffdrents chantiers fut retraede avec les dates marquantes des changements de modes opdratoires ou de technologie (soufflage dans les autoclaves, lavage hydraulique automatique, aspiration sur les autoclaves, etc...), ddfinissant ainsi 5 pdriodes diffdrentes. Compte tenu de ces elements et de dosages sporadiquement effectuds, il dtait permis d'dtablir des grilles donnant, par service et par fonction, revolution probable des teneurs moyennes en CV au cours du temps. Les teneurs moyennes ont dtd rdparties en 3 degrds d'intensite : le degre 1 correspond b une exposition faible, le degrd 2 b une exposition moyenne et le degre 3 b une exposition forte. Pour une mdme fonction, le degrd de risque a dvolud au cours du temps (dans les 5 pdriodes ddfinies), sous I'influence des assainissements resultant des mesures tech niques de prevention. L TNDICE D'EXPOSITION L'exposition de chaque travaiileur a 6td caractdrisde par un indice tel que celui ddfini dans I'dtude de TABERSHAW et coll. (1974). Cet indice a les dimensions d'une moyenne pond6rde par le temps qui ne serait pas exprimde en unitd de concentration, mais en degrd d'intensitd sur une dchelle qui va de 1, niveau le plus bas, b 3, niveau le plus dlevd. Cet indice -appeld plus loin indice d'expositionest calculd en multipliant le nombre de mois passds dans une fonction donnde par le degrd d'intensitd attribud b cette fonction b une dpoque donnee, en faisant la somme de ces produits et en divisant le total par le nombre de mois d'exposition au VC au cours de la carridre du sujet. DUPEE DE L `EXPOSITION L'exposition de chaque travaiileur a dtd caractdrisde dgalement par sa durde totale, ddfinie comme dtant la somme des durdes partielles de travail en milieu contamind b I'interieur de la division. Le temps de la carridre d'un individu qui se serait ddrould en dehors de ces fabrications a dtd systdmatiquement ddcomptd. Le relevd de I'dtat de vie et de mort a exigd un effort de go (/) nn depistage important pour le groupe des licenci^s et des demissionnaires, parfois expatries. II a etb n^anmoins rea lise avec une efficacit^ remarquable par le service medical et le service du personnel de I'usine. Environ 8 % des individus ont btb contactes par voie postale, au moyen d'un questionnaire. La condition vitale de 160 hommes d6missionnaires ou licencife (10,8 % des 1.482 individus expo ses) n'a pas pu etre obtenue. Ces non-repondants sont ventiles de la mani&re suivante : Indies urto d'exposition d'exposition < 5 ans 5<i<l5 ans IS ans < 2 114 21 2 10 8 2 0 Une analyse a montr6 qu'ils avaient 6tb, en moyenne, exposes moins longtemps (3,1 ans contre 9,5 ans pour I'effectif etudie). Ce groupe a 6t6 exclu des calculs, comme dans les enquetes epidmiologiques deja publics, Le probldme des non-repondants dans une enquete 6pid6miologique se trouve ainsi pos6. Constituent-ils un 6chantillon al^atoire indissociable de I'effectif global -et pouvant ainsi lui etre assimil^- ou bien, ce groupe est-il caract6ris6 par une mortalite anormalement elev^e, du fait que les indivi dus sensibles se seraient soustraits spontandment au ris que -eventuellement en vain ? Dans ce cas, il pourrait y avoir segregation des dcs dans le groupe des d^missionnaires et licencies non retrouves. La question reste sans r^ponse dans toute enquete 6pid6miologique. LISTE DES DONNEES Pour chacun des individus faisant partie de I'enquete, les renseignements successes suivants etaient connus : nom, pr^nom, condition vitale au 31.12.1976, date de naissance, date du ddcfes 6ventuel, date de la premiere exposition, date de la demise exposition connue au 31.12.1976, dur6e d'observation (en annSes et mois), dur^e d'exposition (en ann6es et mois) et I'indice representant le niveau d'exposi tion moyen au cours de la carrifere de I'int6resse. TRAITEMENT DES DONNEES ANNEES-HOMMES D'OBSERVATION ET STANDARDT SA TION SELONL A GE, L E SEXE ET L 'ANNEE La presentation des statistiques nationales de mortalite a conditionne les transformations qu'ont du subir les donn6es brutes recueillies Tavaux. Ces statistiques indiquent le nombre de d6c6s survenant chaque ann6e dans la popu lation masculine (ou feminine) franqaise, prise globalement ou fractionnee en classes d'ages de 10 annees chacune, Chaque annee-homme apportee par le mme individu est independante des autres annees-hommes qu'il a apportees b I'enquete, et est ainsi consideree comme I'experience d'une annee de vie d'un homme -le meme bien sur- dont I'exposition au toxique en dehors de I'annee consideree est simplement ignoree. Cette hypothese selon laquelle, chez le meme individu, les annees d'exposition constituent un risque cumulatif pour la sant6, est i'hypothese nulle que I'enquete epidemiologique est cens6e rejeter ou accepter. Jusqu'au 31.12.1976, chaque travailleur de Tavaux soumis b I'enquete a contribue chaque annee 8 I'enquete epi demiologique en y ajoutant une annee de vie, soit une annee-homme. Chaque annee, ces annees-hommes ont ete ventiiees par tranches d'ages afin de pouvoir comparer la mortalite dans la population observee et dans la population contrdle pour des tranches equivalentes. En effet, la repartition des tran ches d'Sges dans une population au travail est tres diffe * rente de celle qui existe dans la population nationale. Afin de ne pas reduire trop les nombres, nous avons consider6 des classes d'Sges de 10 annees d'intervalle. ANNEES-HOMMES D'EXPOSITION Le total des annees d'exposition reelle au chlorure de vinyle est inferieur b celui des annees-hommes d'observa tion. Au 31 ddcembre 1976, un homme pouvait fort bien avoir 6te observe en vie et avoir cessd depuis plusieurs anndes d'etre expose au chlorure de vinyle (licenciement, demission, mutation hors du secteur VC/PVC). Pendant cette periode, tout en contribuant aux annees-hommes d'observation, il n'aurait plus contribue aux anneeshommes d'exposition, OECES OBSERVES, DECES ATTENDUS ET TAUX DE MORTALITE STANDARDISES Tous les ans, les d6c6s dans la population nationale sont comptabilises et compares aux annees-hommes de vie apportees par les differentes classes d'ages de la popula tion. Ces taux de mortalite standardises selon I'Sge et le sexe sont consideres comme normaux dans cette etude. Les annees-hommes d'observation amenees par la cohorte de Tavaux ont 6te ventiiees dans des tableaux dont les colonnes representent des intervalles d'Sges (classes d'Sges) de dix en dix ans. Si, par exemple, un travailleur entre dans I'enquete en 1968 b 32 ans et est toujours en vie au 31.12.1976, il aura apporte environ 8 annees-hommes b I'enquete, dont 3 se sont ecoul6es dans la classe d'Sge de 25 b 34 ans et la colonne des annees de naissance de 1935 b 1944, et le restant dans la classe d'3ge tout juste superieure de la meme colonne. Des tableaux de taux de mortalite, generate et specifique, consideres comme normaux, ont ete etablis de la meme fapon sur la base des statistiques nationales. Les taux sont sp6cifiques du sexe, de la classe d'Sge, et de I'epoque historique definie par la conjonction des intervalles d'annees de naissance et d'ages. Les statis tiques de 1956, 1961 et 1974 ont 6t6 choisies. La multiplica tion, case par case, des deux types de tableaux, fournit le nombre de d6c6s attendus, c'est-S-dire celui qui existerait dans le groupe de travailleurs Studies si les facteurs de ris que qui les menacent ne diff^raient en rien de ceux qui touchent la population gn6rale. Le rapport, multiple par 100, entre les d6cs attendus, constitue le taux de mortality standardise. SOUS-GROUPES Afin de mieux interpreter les r^sultats en fonction des risques professionnels, la cohorte a 6t6 subdivis^e en sousgroupes : - d'une part, en consid6rant les groupes d'individus b indice d'exposition infdrieur ou sup6rieur (voir 6gal) b 2 ; - d'autre part, en consid6rant les groupes d'individus offrant des dur^es d'exposition soit inf6rieures ou sup6rieures b 5 ans, soit inf^fieures ou sup^rieures 15 ans. ANAL YSE STA TIST/QUE La comparaison entre les valeurs observes et attendees a 6t6 faite en supposant une distribution de Poisson dont la moyenne est 6gale au nombre de d6c6s attendus (Tables scientifiques GEIGV). RESULTATS CARACTER/STIQUES DEL `EXPOSITION AU CHLORURE DE VINYLE A TAVAUX Les r^sultats de I'enquete portent sur 1.311 hommes, totalisant 15.458 annees-hommes d'observation et 12.470 R&S 108611 136 R&S 108612 annees-hommes d'exposition au VC, k des degres d'inten site divers (soit 81 % des a-h. d'observation). Les fonctions les plus exposees (fonctions de 1 b 3) ont contribue pour 11 % des annees-hommes d'exposition, et les fonctions les moins exposes (fonctions de 4 k 6) ont contribue pour 89 %. A elle seule, la fonction 6, qui n'a jamais implique qu'une exposition minime au VC, contribue pour 69 % des annees-hommes d'exposition. La duree moyenne d'exposi tion etait de 9,5 ans, et on a calculi pour chaque fonctiontype la repartition de ces annees d'exposition pour un travailleur moyen hypothetique. II en ressort encore une fois que la cohorte examinee k I'usine de Tavaux etait, dans son ensemble, essentiellement constituee d'individus occupant des fonctions risque faible ou moyen. Selon I'intensite de I'exposition, on constate que 7 % seulement des annees-hommes d'exposition se sont passees en ambiance fortement contaminee (degre d'intensite 3), contre 18 % en ambiance moyennement polluee et 75 % k un niveau d'exposition faible (degre d'intensite 1). Le degre 3 correspond vraisemblablement k une teneur moyenne ponderee par le temps, situee entre 200 et 500 ppm dans I'air ; le degre 2 k des concentrations situees entre 50 et 200 ppm ; le degre 1 k des teneurs inferieures b 50 ppm et, le plus souvent, inferieures b 10 ppm. Ces chiffres sont proposes comme ordre de grandeur des teneurs moyennes representatives des 3 degres d'intensite arbitraires qui avaient ete choisis pour estimer I'intensite de I'exposition. Comme le risque pour la sante depend a la fois de la duree de I'exposition et de son intensite moyenne, on a ventile la cohorte selon ces deux parametres. On constate une nouvelle fois que les indices d'exposition (i.e.) faibles sont preponderants (81 % de I'effectif presentent un i.e. plus petit que 1,5). Lors de I'analyse de la mortalite observee, il sera done absolument necessaire d'isoler specifiquement la mortalite de sous-groupes distincts, de maniere k ce que la mortalite propre aux individus fortement exposes puisse etre jugee isolement. CAUSES DE DECES ET ANAL YSE DE LA MORTALITE 25 deces ont ete observes parmi lesquels 8 cancers, dont un angiosarcome du foie. Le tableau rassemble les causes de deces classees selon le numero correspondent de la Classification Internationale des Maladies (CIM), rbvisee en 1965. Parmi les causes specifiques, 2 diagnostics n'ont pas etb analyses : septicemie et intoxication alimentaire aigue. La raison en est que la rubnque correspondante de la CIM, qui porte le numero 8 18 dans la version de 1965, a etb definie differemment avant 1965, ce qui ne permet pas de reconstituer des statistiques comparables dans le temps. II est touta-fait improbable que les maladies de la rubrique B 18, toutes autres maladies infectieuses et parasitaires, aient un quelconque point commun avec le CV. Le taux de mortalite standardise pour I'effectif complet n'est egal qu'b 51 (25 deebs observes contre 49 attendus) ; ceci est tres significativement moins que prevu. La morta lite par cancer est globalement, dans les limites de la normale : 8 cas observes contre 9 attendus, mais I'un des cas est un angiosarcome du foie. Le nombre de suicides est, dans I'effectif complet, legerement superieur, mais la diffe rence n'est pas significative. L'entbrite necrosante est une cause de deces tenement rare que le cas apparu k Tavaux sort nettement de la normale ; il est sans rapport avec le CV. Si Ton tient compte des sous-groupes, subdivises selon I'indice d'exposition et la duree de I'exposition, on voit que I'angiosarcome du foie est apparu dans le groupe le plus expose (indice ^ 2) pendant le plus de temps (> 15 ans). II y a un leger exebs de suicides dans le groupe expose faiblement pendant moins de 5 ans, mais la difference reste statistiquement non significative au seuil de 0,05. Premierement, I'effectif est relativement jeune avec sa moyenne d'bge de 34 ans. II ne comporte que 25 dbces parmi plus de 100 personnes. Dans I'enquete de BIREN et de ses collaborateurs, que mon ami LAZARD a citee en 1976, il y avait 58 deces dans un groupe expose de 771 per sonnes. OTT et ses collaborateurs, en 1975, ont constate 88 deces parmi 594 personnes exposbes au PVC. La struc ture d'age de ces populations etait plus vieille et offrait un nombre de deebs plus grand. Deuxiemement, il y a une faible mortalite globale. Le taux de mortalite standardise de 51 pour la cohorte de Tavaux est couramment observe en epidbmiologie industrielle. Et plusieurs faits concourent k ce resultat : le travail industriel est select'd : en exigeant une sante plus robuste, rejetant a priori les handicapes et les malades, le travail en milieu potentiellement toxique suppose en plus une selec tion medicale k I'embauche. Le deficit de mortalite ainsi creb artificiellement a ete appele par les anglo-saxons healthy-worker-effect en 1976. II faut remarquer que le deces par angiosarcome du foie est survenu chez un ouvrier de I'usine k I'age de 42 ans, cet ouvrier etait affecte directement aux autoclaves de polymbrisation k partir de 1957. En ce qui concerne les autres causes de dbces, dans I'un des deux cas de cancer cerebral observe, I'exposition au chlorure de vinyle etait caracterisee par un indice = 1, soit le plus bas possible, et dans I'autre cas, I'exposition avait ete, au contraire, forte. Les deux cas de maladie de Hodgkin ne se montrent pas non plus libs k I'intensitb de I'exposition (indice d'exposition voisin de 1). Finalement, dans la cohorte de Tavaux, rien ne vient confirmer I'idee fort discutee selon laquelle le CV determinerait un exces de cancers autres que I'angiosarcome du foie. Cette conclu sion doit etre tempbrbe par le fait que la population btudiee btait relativement jeune, II est maintenant evident, tant grace aux enquetes epidemiologiques realisees dans le monde que grace k ceiles effectuees dans notre groupe, que I'angiosarcome du foie ne menace pas uniformbment I'ensemble du personnel travaillant b la synthbse du mono mbre ou a sa polymerisation. Le risque est bleve pour le personnel expose longtemps, aux fortes doses, dans le passe. DISCUSSION Pr TRUHAUT : Ma question prolonge la question que j'ai posee k M. Bonnefoy : Je voudrais savoir ce que vous entendez par "indice moyen d'exposition" ? Dr PIERRE : L'indice moyen d'exposition a bte fixe arbitrairement entre 20 et 200 ppm etant donnb que nous ne faisions pas de mesures d'atmosphbre k I'bpoque. Pr TRUHAUT : S'agit-il d'une moyenne integree par rapport au temps ? Dr PIERRE : II s'agit d'une moyenne integree par rap port au temps. Pr TRUHAUT : Les fluctuations sont-elles susceptibles d'btre importantes par rapport k cette moyenne ou non ? Dr PIERRE : Les fluctuations, malheureusement, n'ont pas pu du tout etre btudibes k I'bpoque. Pr TRUHAUT : Ce matin, nous avons entendu M. MALTONI nous fixer les degres d'exposition d'une manibre trbs precise. II est bvidemment trbs important d'essayer de fixer, et e'est (e but principal des etudes epidbmiologiques. 1 T7 des relations entre les doses et les effets dans un contexte quantitatif. Dr PIERRE : En mati&re d'enquetes historiques, cela n'etait pas possible et les indices d'exposition n'ont pu etre 6tablis que d'apr&s I'etude des fonctions occupies selon I'epoque. Dr CHALVAY : Je n'ai pas d'experience en mature de chlorure de vinyle, mais je peux vous donner une expe rience personnelle dans le cas des goudrons : vous prenez des gens qui sont au meme poste de travail, ils ont les memes souillures sur les pieds, sur les mains et sur la figure. Certains se nettoient les mains avec de la terre humide comme le font les paysans et d'autres, qui connaissent plus de choses, se lavent les mains a I'essence ; pa c'est la technique de badigeonnage qu'on emploie pour provoquer exp^rimentalement des tumeurs cutan^es, Les resultats sont fausses. Le chlorure de vinyle se presente sous forme liquide quand on le stocke, mais comme il bout S - 13, il est extremement volatile et on peut estimer que les gens qui vont aux vestiaires en sont totalement depourvus. Quelqu'un a parld tout k I'heure du nettoyage des autocla ves. Est-ce qu'on les ventile et comment ? Ou envoie-t-on ce qui sort ? Dr PIERRE ; Les autoclaves, avant d'etre ouverts, sont mis sous depression pour que soient balay^es, aussi enti'6rement que possible, les traces de chlorure de vinyle resi due!. D'autre part, depuis que nous connaissons la cance- rog^nicite du chlorure de vinyle, les gens, par precaution supplemental^, penfetrent beaucoup moins longtemps puisque le nettoyage a 6t6 automatise et ils ne penfetrent plus qu'avec un masque autonome. ** Question : M. Pierre, vous avez, en une phrase, glisse sur le probleme des habitudes tabagiques. Etant donne dose de produit cancerigene absorb^ annuellement pa^^P celui qui fume en inhalant un paquet par jour, je vous pose la question : est-ce que, dans vos statistiques, vous faites une distinction entre les fumeurs et les non-fumeurs ? Dr PIERRE : Nous ne I'avons pas fait lors de nos pre mieres statistiques, mais c'est vraiment necessaire maintenant, etant donne ies precautions prises pour les faibles doses face aux doses enormes qui sont consecutives la fumee de cigarette. Je pense qu'i! faudrait tenir compte des habitudes alcooliques et des differents stress du travail industriel. Dr LAZARD : En ce qui concerne la France, tous les cas d'angiosarcomes hepatiques sont colliges au fur et k mesure au niveau du Comite Francais. Ils sont ensuite signales par I'intermediaire de M. J.C. THOMAS k I'APME et au niveau europ^en dans leur detail en ce qui concerne les durees d'exposition, l'ge et la nature, les causes et les circonstances du diagnostic. L'APME, c'est I'Association des Producteurs de Matieres Plastiques en Europe, qui est affiliee k la Federation des Industries Chimiques Europdennes dont nous avons parle. Le Dr STAFFORD, ici present, tient un registre trfes precis de tous les cas d'angiosarcomes mondiaux. 11 est en contact avec des correspondants dans toutes les parties du monde. R&S 108613 138 Epid6mio!ogie humaine Enquete nationale fran$aise - protocole Professeur Robert FLAMANT R&S 108614 En tant qu'Spidemiologiste de longue date, je me suis r^joui d'entendre I'epid^miologie citee comme devant apporter la solution k toute une serie de problemes, mais en meme temps, je redoute de nombreuses difficulty. Notre participation a ce domaine de recherche, k Mme TIRMARCHE et moi-meme, est assez recente : elle remonte a un peu plus d'un an. C'est vous dire que notre contribution actuelle est extremement modeste, se limitant aux resultats d'une investigation historique, mais elle est faite de projets et d'espoirs en ce qui concerne le futur. Je voudrais d'abord rappeler quelques principes des etu des epidemiologiques. Quelle que soit la technique d'etude, le rsultat peut toujours se resumer d'apr^s le tableau suivant : Malades Non malades Exposes 3 C a+c Non exposes b a+b d c+d bd N = 3 + b + c t-d II est compose de quatre cases avec quatre groupes d'individus : 1. des gens qui ont 6te exposes au risque iici le chlorure de vinyle), 2. des gens'non exposes, 3. des gens appelfe malades, 4. des gens appeles non malades, qui n'ont pas la patho- logie etudiee. C'est sur des tableaux de ce genre que, finalement, por ters I'analyse statistique, quelle qu'ait etk la tactique utilisee pour recueillir les informations. Ces informations vont s'efforcer de mesurer I'exposition au risque avec toutes les difficult^ dkjk soulev^es et communes k toutes les enquetes iquand on fait des enquetes sur le tabac, il est difficile de savoir combien les gens fument, mais il est encore plus difficile de savoir combien les gens boivent). Une certaine imprecision est tolerable k condition qu'il n'y ait pas de rela tion entre cette approximation et la pathologie qu'on va mesurer. Si on mesure I'exposition au risque par le fait que les gens sent malades ou non, ou si on dit qu'ils sont mala des parce qu'ils ont ete exposes, on va avoir le resultat avant meme de commencer I'etude. Done, c'est IS qu'intervient cette grande notion de biais ; le biais n'est rien d'autre qu'une erreur systematique qui associe a priori I'exposition au risque et la pathologie que Ton mesure, ce qui fausse evidemment les resultats. II y a plusieurs facons de classer les enquetes : - La premiere concerne I'aspect chronologique : I'enquete est retrospective si elle se place k un moment oil la pathologie est apparue (c'est le cas des gens qui ont une pathologie hepatique que I'on compare k des temoins); elle est prospective si elle se place avant I'apparition de la maladie (on prend alors des gens dont on ne sait pas s'ils seront malades ou non, on mesure leur exposition au risque et, dans la suite, ils se separeront d'eux-memes entre malades et non malades). - L'autre facon de caracteriser les enquetes prend en compte les modalites de constitution des groupes que I'on va etudier. . II y a d'abord I'^chantillon representatif d'une popula tion. Par exemple, dans les enquetes sur le tabac, on a pris I'ensemble du corps medical anglais, en admettant que, si I'on trouve une relation entre tabac et cancer chez les medecins, cette liaison reste valable pour le reste de la population. Dans une enquete americaine, on a pris un mil lion de personnes qu'on a distingue en fumeurs et non fumeurs, et qu'on a suivi pendant plusieurs annees pour savoir s'ils etaient malades ou non. Dans le cas particulier d'une enquete sur le chlorure de vinyle, I'ennui est qu'il y aura probablement tr6s peu d'exposes au risque. . II y a une autre fagon d'aborder le probleme, c'est de prendre des gens exposes, k la condition de pouvoir d^finir ce qu'on appelle expos6, non expose et soit de regarder retrospectivement, soit de recueillir prospectivement la pathologie. . Le dernier type bien connu est le type d'enquete castemoin oil on prend des gens qui, ont par exemple, une pathologie hepatique, qu'ils soient hospitalises ou non, et on cherche des temoins avec toutes les difficult^ que cela comporte. Mme TIRMARCHE va parler dans un instant des investi gations sur documents de type historique. Ce ne sont pas des enquetes k proprement parler. Les sujets etant dejd morts, on ne peut qu'essayer de reconstituer tant bien que mal leur histoire. Mais dTi ne sait jamais pourquoi telle ou telle personne a etk perdue de vue, II est trs difficile de faire des recherches sur des evenements passes et de plus, une information notee dans le dossier peut n'avoir jamais kte tout-^-fait independante de I'evenement que nous 6tudions. II peut y avoir eu association entre I'exposition au risque et la pathologie, Ce sont done des travaux pieg^s au depart qui peuvent donner des indications, mais qu'il faut examiner avec beaucoup de circonspection. Nous allons done commencer par \k et Mme TIRMARCHE va nous don ner quelques indications sur I'analyse des dossiers qu'elle a pu faire. Mme TIRMARCHE : Nous nous sommes trouves en presence des causes de deefes, recueillies par les medecins du travail des differentes usines, Ces personnes decedfes avaient toutes ete, dans le passti, exposees au vinyle. Nous avions leur duree et leur degr6 d'exposition, mais il etait impossible de ponderer I'exposition en fonction du nombre d'annees : en effet, il arrive souvent qu'une personne ait occupe un poste k forte exposition pendant une dur6e tr&s faible, elle est done codee 3 + (exposition maximum), alors que, pendant le reste du temps, elle a et6 exposee plus faiblement. i on J'ai essaye de faire deux etudes separees tenant compte, soit du degre d'exposition, soit de la duree d'exposition. Nous nous trouvions done en presence de deux groupes : decedes de cancer et decedees d'autres causes. J'ai classe les 2 groupes par tranche d'age, et j'ai tir au sort b I'interieur du groupe d6c6de de causes non cancereuses une personne de meme tranche d'age ( + ou - 5 ans) que la personne presentant un cancer de localisation connue. ETUDE DE LA LIAISON DECES PAR CANCER ET EXPOSITION AU CVM-PVC Chaque sujet decedS de cancer est apparfe selon I'age avec un sujet d6c&fe d'une autre cause. Cancers du foie : Angiosarcomes du foie : Cancers du poumon : Cancers digestifs (estomac, inrestirr, rectum) : Cancers des voies aerodigestives suprieures (larynx, cesophage) : difference significative p < 0,05 difference significative p < 0,05 difference significative p < 0,05 difference non significative difference non significative (test de Wilcoxon sur series appariees) Sur les 6 cancers du foie, j'ai pu observer une difference significative dans la duree d'exposition ; les cancers du foie etaient significativement plus longtemps exposes que le groupe qui leur servait de temoin. Les memes resultats ont ete obtenus pour les angiosarcomes du foie (IIS I'epoque) et, chose assez yonnante, nous avons observe egalement une difference significative pour les cancers du poumon. Par contre, pour les cancers digestifs regroupant cancers de I'estomac, de I'intestin et du rectum, je n'ai pu mettre en evidence de difference significative avec les femoins, tout comme pour les cancers du larynx et cesophage r6unis. Les autres localisations cancereuses n'ont pas pu etre etudiees en raison d'un nombre trop faible de cas. Ces resultats n'ont, bien sur, qu'une valeur indicative qui doit etre discut6e parce que nous ne connaissons rien sur les autres facteurs etiologiques de ces cancers. Nous ignorons si la repartition des fumeurs etait la meme entre les femoins et les cancers, quelle etait la quantite de cigarettes fumees, la consommation d'alcoo!,... De plus, toutes ces personnes etant d'un milieu industriel, elles etaient certainement exposees b d'autres produits qui ont peut-etre egalement une action cancerigene que Ton ignore. Je voudrais preciser qu'il s'agit ici d'un type d'investigation retrospective ultime, 6tant donne que Ton essaie de retrouver rStrospectivement la dur6e et le degre d'exposition. Pour ce qui est du degfe d'exposition, je n'ai observe aucune difference significative entre les cancers et les femoins, quelle que soit la localisation. Je fepete que cette 6tude ne peut avoir qu'une valeur indicative et nous donner des voies de recherche pour une enquete ulterieure. Les biais d'une investigation retrospec tive peuvent etre tr6s importants : face b un dcs par angiosarcome du foie, on est forc&nent motive pour rechercher b fond la duree et le degrb d'exposition de cette personne. Est-ce qu'il en est de meme pour la personne decedee d'un accident de la route ou d'une autre cause ? Je pense que ce genre d'etude ne repondra jamais exactement aux questions qu'on peut se poser et qu'il conviendrait de lancer maintenant une enquete prospective, dont Monsieur FLAMANT va vous parler. Professeur FLAMANT : Notre projet est d'entreprendre une enquete dont le protocole, en cours de redaction, doit faire I'objet de discussions la fin de ce mois, le but etant de commencer Ifetude au debut de I'annee 1980. Cette etude se deroulera en principe dans une dizaine d'usines qui manipulent actuellement le chlorure de vinyle, sous forme monomere ou polyrrfere, en collaboration try etroite avec tous les medecins du travail de ces usines, Le premier gros probfeme discute a te le choix de la population sur laquelle faire porter I'etude. II fallait trouver une population qui est ou avait ete exposee d'une fagon relativement importante (alors que maintenant, on reduit les doses d'exposition b des taux try faibles), pour ne pas avoir a attendre les resultats de tres nombreuses annees. II fallait essayer de profiter de cette circonstance malheureuse qui a fait que des gens ont ete exposes de fagon relativement importante, done prendre une tranche d'age un peu avancee, ce qui avait pour avantage de se rapprocher des tran ches d'ages pour lesquelles I'incidence du cancer est plus importante. Pour I'instant, nous avons choisi de travailler sur une population d'hommes ages de 40 b 55 ans, pas trop pry de la retraite pour eviter les difficulty de suivi des gens qui auront quitte I'usine ou qui quitteront la region. Parmi les 3 nfethodes d'enquete, nous nous sommes orienty vers une etude du type expose-non exposes Ce que I'on voudrait, e'est trouver comme femoins des personnes saines de meme tranche d'age qui seraient interrogees et examinees dans les memes conditions, par le meme m&iecin. II faudrait aussi que ces personnes travaillent dans la meme usine que les personnes exposees. Nous pensons que ces temoins seraient meilleurs que des personnes pri ses au hasard dans la population generale. II y a toute une serie de gros facteurs qui, en dehors de ceux que I'on etudie, differencient a priori une population d'usine, souvent try localisee dans une region determinee, de I'ensemble de la population generale. II y aura le problSme des expositions b d'autres substan ces chimiques que le chlorure de vinyle, qu'il vaut mieux essayer d'eviter dans la mesure ou I'on veut trouver une population temoin non exposee, mais il ne faut pas trop se faire d'illusions ; je crois que le plus simple sera de noter soigneusement cette exposition si elle existe, et d'en tenir compte dans I'analyse statistique. Voici dans ses grandes lignes, le probfeme du choix de la population d'etude. En ce qui concerne le recueil de la pathologie, il y aura bien sur les 6ventuels d6c6s et leurs causes, mais I'enquete voudrait s'attacher b pfeciser un certain nombre de donnees de morbidity grace b la coope ration et b I'activife des medecins du travail. Les examens seront faits, comme e'est dej& le cas, par les medecins du travail avec une attitude tout & fait identique et paralfele, qu'il s'agisse de gens exposes ou de gens non exposes. Un questionnaire sera rempli b chaque examen avec : 1. des renseignements generaux du type : age, 6tat civil, lieu de residence, 2. la mesure de I'exposition aux risques, e'est-d-dire les differentes etapes de la vie professionnelle, en s'efforgant de tenir compte de la chronologie, de la duree et de I'importance de ce type d'exposition et en esperant qu'on pourra, avec quand meme un maximum de precision pour des expositions passees, arriver S codifier d'une fagon valable cette exposition au chlorure de vinyle ; 3. un questionnaire standard sur I'usage du tabac et la consommation d'alcool ; IS encore, nous attendons de voir comment les choses pourront se passer, ce n'est pas toujours facile ; 4. les differents evenements pathologiques susceptibles de subvenir chez chacun de ces individus. Au total, il faudra continuer malgre les difficulty que cela risque de soulever b suivre les gens meme s'ils quittent I'usine et pour quelque raison que ce soit, Seule une periode d'essai pourra nous dire si, finalement, on peut repondre b ces objectifs ou non. II me sembie, pour conclure, que des travaux dejS faits sur ce sujet, seuls des resultats de type indicatif peuvent etre pris. En dehors du cas particulier de I'angiosarcome, rien n'est encore regie, ni dans un sens ni dans I'autre. Si R&S 108615 140 Ton veut apporter maintenant une contribution importante, qui marque une etape decisive, il faudra forcement passer par ce type d'enquete tres difficile & realiser, et c'est probablement pour cela qu'il n'y en a pas eu beaucoup de faites selon ce type. DISCUSSION Question : Je crois pouvoir dire que la grosse difficult^ des enquetes epidemiologiques, c'est de saisir tous les facteurs qui peuvent intervenir, ne fut-ce que pour la question de I'exposition, Vous allez peut-etre avoir des renseignements sur la teneur eventuelle de I'air respire, mais je crois que cela ne suffit pas, et ce matin, on a fort bien attire I'attention sur la difference entre dose et concentration. Nous en etions arrives a la notion de dose-effet et il aurait ete interessant de calculer, & panir de I'inhalation, quelle etait la dose sans effet correspondante par semaine. En tenant compte de I'air consomme par les animaux, on aurait peut-Stre calcule cela. Dans le cas de I'homme, on sait qu'il consomme a peu prds 15 & 20 m3 d'air par jour, mais lorsque I'homme est au travail, et pour un travail intensif, il depasse trfes largement cette quantity, d'oii une consommation beaucoup plus grande dont il faut tenir compte. Pr LATARJET : Lorsque j'ai presente, devant le Conseil Superieur d'Hygiene, des propositions pour limiter les doses d'ethylene, j'ai distingu^ une fourchette allant de I'individu travaillant dans un bureau S celui qui effectue un travail physique et dont la ventilation pulmonaire est augmentee. C'est ainsi que les doses proposees ont admis un intervalle de 2fois 1/2 pour couvrir d'une manure raisonnable les conditions dans lesquelles on se trouve. C'est un facteur a prendre en consideration. R&S 108616 V Discussion generate et conclusions sous la direction du Professeur Raymond LATARJET R&S 108617 Pr LATARJET : Je crois qu'il appartient au President d'ouvrir cette discussion : si vous me !e permettez, et pour amorcer les questions, je veux evoquer une phrase que Monsieur MALTONI a prononcee ce matin, et que je considEre comme trEs importante. II a dit que, dans ces problemes de cancerogenEse chimique, I'aspect qualitatif devient de moms en moins important et que c'est I'aspect quantitatif qui doit nous retenir. |! est certain que I'aspect qualitatif conserve un certain interEt, par exemple lorsqu'on produit de nouvelles substances et qu'on doit savoir si elles sont ou non cancerigenes. Vous connaissez le foisonnement des methodes fondees sur des tests microbiologiques simples qui sont destinees a donner rapidement une presomption sur le pouvoir cancerigEne eventuel, mais il est bien evident que ce qui importe n'est pas tenement de savoir si une pol lution est cancerigEne, c'est de savoir la quantite qui se trouve dejE presente et, surtout, quelles sont les quantites additionnelles qu'on peut admettre lorsqu'il s'agit d'une pollution indispensable, c'est-E-dire d'une pollution dont les benefices semblent I'emporter sur les risques. Une des raisons pour lesquelles cet aspect quantitatif I'emporte de plus en plus, reside dans la precision de plus en plus grande des moyens de detection des cancerigenes. Ces moyens deviennent tellement sensibles que presque tout devient cancerigene. Nous savons aujogrd'hgi dEtecter la presence de benzopyrene dans une bouffee de cigarette. Je ne pense pas que, si toute la population etait astreinte e tirer une seule bouffee de cigarette au cours de sa vie, on aurait des cancers du poumon. De meme, on trouve le benzopy rene dans le pain ; on ne va pas supprimer le pain, Cette accentuation de I'importance du quantitatif a ete donnee ce soir encore par Monsieur BONNEFOY, qui a insiste sur I'interet et meme la necessite qu'il y a de comparer un ris que considere E d'autres risques. Une comparaison quanti tative devient indispensable de maniEre, d'une part E obtenir le maximum de protection pour un effort donne et, d'autre part, etre E meme d'Etudier les risques totaux consecutifs E des expositions conjuguees E plusieurs substan ces geno-toxiques, c'est-E-dire les expositions mixtes. A cet egard, je voudrais apporter, trEs rapidement, E la dis cussion, une donnee qui resulte d'une voie d'approche differente et qui souleve, elle aussi, des problEmes d'extrapolation. Vous savez que, dans certains laboratoires, et notamment chez nous I Dr AVERBECK), on essaie de determiner, sur la base des lesions produites, des equivalences entre une dose de radiation ionisante exprimee en rads et une dose d'un compose chimique geno-toxique. En ce qui concerne le chlorure de vinyle monomEre, des etudes importantes ont ete faites. II est evident que I'equivalence que I'on trouve est fondee sur des tests differents qui sont toujours des tests gEnetiques, notamment sur I'induction de mutations chez des bacteries, des levures et des cellules humaines in vitro. L'equivalence trouvee depend beaucoup du systEme considere, mais en comparant les valeurs tmuvees sur ces differents systEmes, on arrive b une valeur moyenne, b une sorte de centre de gravity. Si I'on adopte comme ordre de grandeur cette Equiva lence, on arrive b cette conclusion qu'un travailleur expose 8 heures par jour pendant 40 heures par semaine et pen dant 40 semaines par an b une atmosphere limitEe 5 ppm (ce qui est une rEgle admise actuellement), soit 5 ppm pen dant 1.600 heures, repoit I'equivalent de 40 rads. Je vous rappelle que la legislation admet 30 rads/an, pour des travailleurs exposes partiellement, et 5 rads lorsqu'ils sont exposes en totality. Vous voyez que la dose annuelle admise de 40 rads-equivalents pour le CVM est proche de celie qui est actuellement admise pour les radia tions, Done, on peut dire que la limite de 5 ppm admise pour les travailleurs apparaft pratiquement raisonnable, peu critiquable. Si on descendant b 1 ppm, soit 8 radsequivalents par an, on pourrait se considerer en parfaite securite sur la base de ce qui est admis pour les radiations. Rappelons que les doses admises pour les radiations ont fait I'objet de discussions approfondies depuis 25 ans, st qu'elles repondent actuellement b une philosophie que I'on peut appeler conservatrice, b savoir que chaque fois qu'il y a un doute, on se place du cotE de la securitE. Les limites actuellement admises pour les radiations sont trEs sures ; pour un composE chimique, prendre des doses Equivalentes est une philosophie de suretE. Je fais une reserve toutefois, c'est que toutes ces philosophies ont Ete admises avec I'idee d'une exposition aux radiations seules. Mais il est bien evident que, lorsqu'on a affaire b des expositions mix tes, il faut considErer les additions ou les potentialisations, quelquefois les antagonismes car il y en a, mais cela est un tout autre problEme. Messieurs, la discussion vous est ouverte... Pr LATARJET : Et bien, si personne n'attaque, moi je vais continuer sur un autre secteur. J'ai etE trEs interesse par les courbes que M. TASSIGNON a prEsentees ce matin, notamment une courbe presentant un seuil manifeste, ce qui est trEs important, puis aux trEs fortes doses, une baisse. Cette baisse est un phenomEne que les genEticiens connaissent et qui a beaucoup surpris au debut. C'est en 1945 qu'on a trouvE une courbe en cloche, pour la premiEre fois, lorsqu'on a fait des cour bes d'induction de mutations par les rayons ultra-violets sur Neurospora, Je me souviens avoir obtenu Egalement une courbe en cloche pour la premiEre mutation de Virus effectuee en 1949, avec les rayons ultra-violets. Depuis, ces courbes sont bien connues. Deux phEnomEnes peuvent intervenir : le mutant peut etre plus sensible E I'agent que le type d'origine et done etre EliminE b partir du moment ou il est formE. D'autre part, il peut y avoir des phEnomEnes enzymatiques inductibles, soit que le produit chimique induise des enzymes de mEtabolisation qui le transforment en une forme active, soit que la lEsion pro duce sur I'acide nuclEique induise la synthEse d'enzymes de rEparation qui commettent des erreurs E I'origine de la mutation. Les courbes en cloche trouvees avec le chlorure de vinyle indiquent sans doute que ce compose intervient au niveau d'un systEme enzymatique inductible. II apparaft aujourd'hui que I'on approche d'une legisla tion qui semble donner des garanties d'innocuitE, peut-etre pas totale, mais satisfaisante en regard des benEfices que I'on attend de cette Industrie. II ne faut pas chercher des risques nuls, il faut chercher la securite. La sEcuritE n'est 143 R&S 108618 jamais qu'un risque accepte. J'ai vu des courbes se stabili ser, sinon diminuer b partir de 1976. Pensez-vous que ces reductions qui, maintenant, aboutissent S des concentra tions de I'ordre de quelques ppm devraient btre considerees comme satisfaisantes ou au contraire plus convaincantes ? Pr TRUHAUT : C'est ce que Ton appelle des risques socialement acceptables qui ne sont pas des risques majeurs dans le contexte du concept general beneficerisque les benefices sont, bien entendu, les benefices pour la collectivite et non pour une partie de cette collectivite. Dr TASSIGNON : Nous avons /'experience ^pidemiologique d'une autre industrie, c'est I'industrie de la transfor mation du polym^re dans des applications tr&s pratiques (cables electriques isoles en polymre PVC, objets en polymere, etc...), cette industrie emploie des dizaines de milliers de personnes dans le monde. Ainsi, des centaines de milliers de personnes ont ete, en fait, exposes au chlorure de vinyle parce que, dans le passe, le chlorure de vinyle acheve contenait une concentration beaucoup plus elevee que maintenant de chlorure de vinyle monomdre nSsiduel, Ce chlorure de vinyle contaminait les ateliers de transfor mation, les endroits ou Ton entrepose le polymfere en vrac ou deja prepare pour le faconnage, ce qui fait qu'il y avait des concentrations faibles de I'ordre de 10 ppm dans de tels ateliers, malgre tout, actuellement, aucun angiosarcome n'est apparu chez le personnel expose de cette fagon. Estce dejd une preuve ? On salt que le temps de latence est plus court quand les expositions sont fortes, mais, malgre tout, il y a ce fait positif que nous n'avons pas encore vu d'angiosarcome chez des transformateurs. Pr TRUHAUT : Ce matin, si nous avions eu le temps, j'aurais pose des questions b M. TASSIGNON et b M. MAITONI et j'aurais mis I'accent sur les aspects biochimiques. Je crois, M. TASSIGNON, que vous avez souligne I'importance qui s'attachait au phenom6ne de toxification et vous aviez dans I'esprit, bien sur, la formation de I'^poxyde. Mais, a cdte de cette formation, qui correspond done d un phenom^ne de toxification du chlorure de vinyle, il y a des phenomenes de de-toxification puisque les epoxydes eux-memes sont, vous le savez, ensuite d&ruits, A ce propos, M. MAITONI doit certainement se souvenir qu'il y a eu, aux USA, des travaux qui ont btb effectues qui tendaient b montrer que le chlorure de vinyle ne commengait eventuellement agir sur les r&tepteurs qu'S partir du moment ou les scavangers agissant en quelque sorte comme les nettoyeurs du chlorure tie vinyle, avaient epuise leurs moyens d'action et que le chlorure de vinyle pouvait agir de nouveau. Un point important a ete souleve ce matin : celui du choix d'esp^ces adequates pour soumettre un compose chimique determine b des experiences en vue d'une extra polation & I'homme, surtout pour les substances qui ont un effet b long terme. On est limits pour les observations sur I'homme par le fait qu'il faut un certain temps d'observation, ce qui veut dire que, parmi les param^tres que Ton prend en consideration, les paramfetres biochimiques sont d'une importance primordiale, lls sont primordiaux en ce qui concerne le sort metabolique et ils sont primordiaux aussi en ce qui concerne les mecanismes d'action car il est des cas ou des especes animales m&abolisent un compose exactement comme le fait I'homme et cependant ne s<!ht pas sensibles b Taction du toxique ; c'est le cas, par exemple, du tri-orthocresine phosphate qui, chez le rat, est m6tabolis comme chez I'homme et cependant le rat n'est pas sensible son action paralysante, et il faut faire appel, vous le savez bien, b la poule qui etait I'espece adequate. Nous n'avons pas fini d'etre surpris par les decouvertes des especes adequates, mais un jour, il faut bien I'esperer, on aura les paramfetres pour choisir I'espece adequate et, au lieu de faire des experiences sur 6 ou 7 especes, on commencera des le debut par choisirsur la base de paramfrtres biochimiques I'espece la plus adequate pour extrapoler b I'homme dans des conditions qui ne seront plus des condi tions d'incertitude aussi grandes que maintenant. Pr M ALTON! : Comme il a ete dej& dit, il est indispensa ble pour la planification des Etudes experimentales de canc^rogenese, de prendre en consideration le parametre metabolique, mais il est necessaire 6galement d'evaluer la susceptibilite de I'animal in toto, exprimee d'une fagon generate par le tumorigramme de base. Pr TRUHAUT : Rien n'interdit tie penser, cher ami, que le tumorigramme de base est lui-meme conditionne par des facteurs biochimiques, Pr FLAMANT : J'ai ete frapp6 ce matin par I'insistance avec laquelle le Pr MALTONI a parl de lesions non cancereuses qu'il a recherchees systematiquement, disant qu'elles pouvaient etre des lesions pre-canc6reuses. Y a-t-il une correspondance avec la pathologie humaine ? Est-ce que, sur un plan epidemiologique, on pourrait rechercher des signes infra cliniques, si j'ose dire, en tout cas bien avant I'apparition d'un cancer ? Pr MALTONI :Je crois que la recherche systematique des precurseurs dans les tests de cancerogenicite est une donnee importante, qui devrait etre toujours determinee et 6va)ue. Ce type de recherche depend de notre connaissance des precurseurs des neoplasies (lesions precancereuses). Beaucoup de ces precurseurs sont connus soit chez I'animal, soit chez I'homme. A mon avis, la recherche fondamentale doit s'engager prochainement dans ce secteur. Dans le cas de I'angiosarcome par le chlorure de vinyle, on a identifie des precurseurs qui sont, d'une facon surprenante, similaires pour I'animal et pour I'homme, et du meme type que celles que Ton peut observer dans le foie humain apres I'exposition d d'autres agents (pesticides arsenicaux et thorotrast) susceptibles de provoquer des angiosarcomes hepatiques. Pr LATARJET ; Nous avons ete exposes, pendant plus de 6 heures, 3 une tres forte concentration de VCM, je ne sais pas combien de ppm il y a eu dans cette salle, mais cer tainement une trbs forte concentration. Je ne pense pas que le risque que nous avons encouru soit trbs elevb, mais je suis certain que le rapport benefice-risque est largement positif. Je remercie tous ceux qui ont contribue par leurs expo ses et par leurs interventions dans les discussions, et je remercie les organisateurs de nous avoir fourni I'occasion de participer b cette tres interessante reunion. Achevd d'imprimgr le 28,5.1980 Printed in France 144