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AR226-3008 Study Sponsor: Issue Date: Document Reference No.: ELF ATOCHEM 9-Jan-95 95/SAE6/0304/HT Acute Toxicity to Daphnia Author(s): H. Thiebaud English Translation of Report Summary for DuPont Chemical Solutions Enterprise 27-Jan-03 Company Sanitized. Does not contain TSGACSI TRANSLATION ELF ATOCHEM Levallois Applications Center 1. TECHNICAL SUMMARY by|HHU|ypver Determination of acute toxicity (inhibition of mobility) of Daphnia magna 48 hours was effected using, the operating procedure described in starHardlS06341 chemical substances, industrial and urban effluents, to surface and subterranean waters. 24 and applicable to Tsthuediemde. thoTdhecotonxsiicstseffienctexopbosseinrvgedtheis dthapehnimiamsotboiliza atriaonngeat otfhecoenncdenotrfat2io4nsanodf 4th8ehsouubrss.tanFcreombeitnhge dose/effect relation established with the initial concentrations, a median effective CE(l)5o is calculated, expressed as CE(l)so - 24 h and CE(l)so - 48 h. f^^^^^^J) Under the study conditions,jl^^B^^Bpresents a CE(l)so - 24 h and CE^so - 48 h above 100 t " J fttsn. - ... 2. SIGNATURE Director of the study: THIEBAUD Date Signature 1/6/95 , San'A^-w ELF ATOCHEM D.C.R.D. Centre d'Application de Levallois Service Analyse Environnement Levaflois Ie: 01/06/95 Ref. document: 95/SAE6/0304/HT N de Sequentiel: 814020 TITRE : TOXICITE AIGUE VIS-A-VIS DES DAPHNIES AUTEUR : H. THIEBAUD RESUME DOCUMENTAIRE : Determination de latoxicite aigue (inhibition de la mobilite) de Daphnia magna par ieiBlBUURJsur 24 et 48 heures, en suivant Ie mode operatoire deceit dans la norme ISO 6341 (seconde edition, 1989). MOTS CLES : Toxicite aigue daphnies, ISO 6341. DESTINATAIRE : M. DEVAUX (DCFS) Copies : Chef de Service, Responsable des Archives, Laboratoire d'ecotoxicologie Secretariat, Fichier TECH Service Ecotoxicite et Surete des Produits (DSE-P) Cpropa^X s.^."""'"^"TM^81 ^e aoKjmeni esS is Dropri;e d'ELF A.TOCHEh';. !i ne peu; etre n; sooie. ni sommuniqu" a des tiers sans autorisation formelle LE reoroducuon oe ce rspoorr ci'tude n'es; amorises aue sous rorme de fss-simils ohatographique [niegrs:. - . !=r"T'7R7C r-,n." Pans -i /Q .,..--.- ELFATOCHEM Centre cf'Application de Levailois TOXICITE Al DAPHNIES. SOMMAIRE 1. RESUME TECHNIQUE 2. SIGNATURE 3. IDENTIFICATIONS 3.1. Substance d'essai 3.2. Laboratoire d'essai 4 3.3. Demandeur de I'etude 4 3.4. Calendrier 4 3.5. Archivape 4 4. OBJECTIF DE L'ETUDE 5 5. METHODE D'ESSAI 5 5.1. Introduction 5 5.1.1. Principe 5 5.1.2. References 6 5.1.3. Deviations 6 5.2. Materiel et produits 6 5.2.1. Materiel 6 5.2.2. Produits et reactifs 6 5.3. Mode operatoire 6 5.3.1. Preparation des solutions 6 5.3.2. Essai preliminaire 6 5.3.3. Essai limite 7 5.3.4. Controle de sensibilite du reactif biologique 7 6. RESULTATS 7 6.1. Essai limite 7 6.2. Criteres de Validite de I'etude 8 6.2.1. Teneuren oxygene 8 6.2.2. immobilisation des temoins 8 6.2.3. Sensibilite du reactif biologique 8 7. CONCLUSIONS 8 8. ANNEXE : Milieu d'essai 9 ooesno^0^' i Saw1a1i'xe.d.^0'- ;e aoc'jmeni est iE propriete d'EL^ ATOCHEy.. II ns peut etre ni copie, n; communiaus s oss tiers sans autonsaiion iormelie. LE reoroductior. de ss raoport d'iude n'est autonsee aue sous forms de fss-sirnile photoaraohiaus intesra:. R;~.7'7P.7(= nnr'. nanc 7/0 ELF ATOCHEM Centre d'Application de Levallois 1. RESUME TECHNIQUE La detenTuoatiQr^etetpxicite aigue (inhibition de la mobilite) de Daphnia magna par Ie flJHHHHBnsur 24 et 48 heures a ete realisee en suivant Ie mode operatoireaecn^ansia norme ISO 6341 applicable aux substances chimiques, aux effluents industriels et urbains, aux eaux de surfaces et souterraines. La methode consiste a exposer les daphnies a une gamme de concentrations de la substance etudiee. L'effet toxique observe est I'immobilisation au bout de 24 heures et 48 heures. A partir de la relation dose/effet etabfie avec les concentrations initiates, on deduit une concentration mediane effective CE(l)5o, exprimee en CE(I)5o - 24 h et CE(l)go -48h. Dans les conditions de t'etude, ie^------UB^resenteune CE(l)so - 24 h et une CE(l)5o - 48 h superieures a id^mg/T^^^^ 2. SiGNATURE Le Directeur de ('etude : THIEBAUD Date Sic Sa*cd.^^conlalnTSC^rt Companx ; dosumeni set ! Droprite ^'EL^ ATOCHEM. !! ne Dsut eirs ni CODR, ni somTiuniau0 B des tis,-E ssns EUio"sanc-i T'ormelie. La repraciuction de cs rsDport d'aude n'ssi auiorise qua sous forms de fac-s'mile prioiographiaus integral. ??,--:"9F,7fi nor', nsnfi ^/o ELF ATOCHEM Centre d'Application de Levallois 3. IDENTIFICATIONS 3.1. Substance d'essai Denomination Ndulottef N d'enregistrement: 2876/95 Caracteristiques principales : - apparence - purete: - solubilite dans I'eau Precaution d'emploi et de conservation : voir FDS 3.2. Laboratoire d'essai ELF ATOCHEM CENTRE D'APPLICATION DE LEVALLOIS SERVICE ANALYSE ENVIRONNEMENT 95 rue Danton 92300 LEVALLOIS-PERRET Directeur d'etude M. THIEBAUD Personne! impligue dans t'etude ingenieur: Techniciennes: M. THiEBAUD Mile BROCHIER 3.3. Pemandeur de {'etude M.DEVAUX(DCFS) 3.4. Cajendner Debut de I'etude Fin de I'etude Rapport d'etude 10/05/95 19/05/95 01/06/95 3.5. ArchSvage Les substances 5tudies sont conservees dans te Service Anaiyse Environnemeni Company Sansiized, Doss not contain Ce dosurnen; est 12 proprite ri'SLF ATOCHEy.. !i ns DeL'i Sire ni sopie, P.! communique c des tiers sans aLrtorisstion formslie. Ls reoroduction ae ce ranporl c'etude n'est EUtorises que sous fonne os tac-simile phDtoaraphiqLis intenrai. S'"T7;;--C ~-i/~ir' ^^,00 / ISj ELF ATOCHEM Centre d'Appiication de Levallois pendant une duree de 5 ans au maximum. L'ensemble des documents d'etudes est conserve au moins 10 ans. 4. OBJECTIF DE L'ETUDE L'objectif de cette etude estde^jfitemyr^rJa toxicite aigue (inhibition de la mobilite) vis-a-vis des daphnies dLJJBlHJJren suivant Ie mode operatoire decrit dans la norme ISO 6341 (seconde edition, 1989). Cette norme s'applique aux substances chimiques, aux effluents industriels et urbains, aux eaux de surfaces et souterraines. 5. METHODE D'ESSAI 5L1. Introduction 5.1.1. Principe Les daphnies sont exposees a la substance d'essai ajoutee a I'eau, dans une serie de concentrations donnee, pendant une periode de 24 heures et eventuellement 48 heures, sans renouvellement des concentrations d'essai. Dans des conditions identiques et pour une gamme de concentrations adequate (definie au moyen d'un essai preliminaire), des concentrations differentes en substance d'essai ont des effets differents sur la capacite de nage des daphnies. En consequence, en fin d'essai, a chaque concentration correspond un pourcentage different d'immobiiisation des daphnies. Les concentrations initiates provoquant 0 et 100 % d'immobiiisation sont determinees directement par I'observation. La concentration initiale efficace inhibitrice immobilisant en 24 heures 50 % des daphnies mises en experimentation, designee CE(l)5o - 24 h, est determinee par calcul. La CE(l)5o - 48 h est eventuellement determinee par la meme methode. L'etude est conduite en deux etapes : - un essai preliminaire qui sert a determiner la gamme des concentrations pour I'essai definitif. - un essai definitif dont seu! Ie resultat est retenu : CE(I)5o - 24 h et eventuellement CE(i)so-48h. Si ['essai preiiminaire montre une absence de toxicite sur ia gamme de concentration testee, un essai limite a la concentration de 100 mg/l, ou a la limite de soiubiiite de la substance si celle-ci est inferieure a 100 mg/l, est realise. [etant un melange de piusieurs substances pouvant evoluer ultats sont exprimes par rapport aux concentrations nominales (mg/1) de ia preparation, considerees equivalentes aux concentrations initiates. Les pourcentages d'immoDiiisauon eri fonction des concentrations initiales, a 24 et eventuellement 48 heures, sont utilises pour caicuier, a ['aide d'un programme infonnatiqsje approprie, ia CEfI)^ (a 24 heures et ^ventjeiiement 48 hsLirss). Les intervaiies de connance a 95 % sont. si possible^ d^terrnin^s par ie caicu!. Ce aosumsnt es: Is proprite c"5LP A70CHEM. li ns peu; Sirs ni coDte. rii comtnuniaLi' E das tiers ssns autorisation fonnelie. . W ^ . Sarife^. ^ - .rffa LE renroaustion ae ce raooor: d'auae n'est aLitQrisse aue sous tarme ae fec-simil" ohoioaraohiaue inteara!. ^ ^^ ^- 3^ COn^211 CSS^ vlw" ELF ATOCHEM Centre d'Application de Levallois 5.1.2. References - Norme Internationale ISO 6341, Quaiite des eaux - Determination de ['inhibition de la mobilite de Daphnia magna Straus (Cladocera, Crustacea), seconde edition du 01/10/89. 5.1.3. Deviations 5.2. Materiel et produits 5.2.1. Materiel L'etude a ete realisee dans une salie thermostatee a une temperature comprise entre18et20C. Les parametres physico-cnimiques ont ete mesures au moyen d'un combine multifonctions JENWAY 3410 (oxymetre, conductimetre, pf-imetre). Les daphnies (Daphnia magna Straus) utilisees proviennent d'un elevage realise dans Ie laboratoire. La selection d'organismes ages de moins de 24 heures s'effectue par tamisage (toile a bluter a mailles de 0,56-mm). La composition du milieu d'essai est detaillee en annexe. Les recipients pour essai sont des flacons type penicilline de capacite nominate 120 ml bouches par des septa en Teflon sertis par des capsules en aluminium. 5.2.2. Produits et reactifs - Eau : pour ia preparation des solutions meres du milieu d'essai, il est fait usage d'eau uttrapure (ultrafiitration, charbon actif, echange d'ions, fiitre 0,22 um) ; de meme, pour la realisation du milieu d'essai (eau de dilution) les solutions meres sont diluees dans de I'eau ultrapure. - Les reactifs utilises pour ia preparation de f'eau de dilution (voir annexe) sont de qualite "pour analyse". 5.3. Mode operatoire 5.3.1. Preparation des solutions dUeneI'essoslauit.ion d^^^t--fH^H^I^II^B^j^d/ans le milieu d'essai a 1 g/l est preparee Ie jour 5.3.2. Essai preliminaire A partir d'une soiution mere deyUUm^dans ciu miiiSL; d'essaj 1 g/!. une Cs docLimeni est Is proorit d'SLF ATOC-fcM. li nE pau; 63- ru copia. ni communiauE a des iisrs sans EUlorisstion fo-meBs. Ls reoroausiion de ce repoon d euae n'est autorisfe aue sous rorrne ae iac-simiie phoioaraDniaus intearsi. ^ ' vyS^^ RC22S76.DOC Daae 6/9 e.^Y^-"0'"9' CoffP^.^ .y-.n ELF ATOCHEM Centre d'Application de Levallois dilution au 1/100 erne est realises dans I'eau de dilution. Des volumes adequats de cette solution, ou de la solution a 1 g;l, sont verses dans des fioies jaugees et completes a 250 ml par de I'eau de dilution pour obtenir la gamme de concentrations allantde0,1 a 100mg/I 5 daphnies agees de moins de 24 heures sont ajoutees dans chaque recipient d'essai puis ceux-ci sont places a I'obscurite dans la salle thermostatee. Au bout de 24 heures, les daphnies encore mobiles sont denombrees, les flacons sont replaces a I'obscurite puis un deuxieme denombrement est realise 48 heures apres Ie debut de I'essai. Les resultats obtenus servent a definir la gamme de concentration de I'essai definitif. 5.3,3. Essai limite On precede a une dilution de la solution mere dans de I'eau de dilution pour realiser la concentration de 100 mg/l necessaire a la realisation de I'essai limite. 4 flacons de 5 daphnies agees de moins de 24 heures sont prepares pour la concentration testee et pour Ie temoin. Au bout de 24 heures, les daphnies encore mobiles sont denombrees, les recipients sont replaces a I'obscurite puis un deuxieme denombrement est realise 48 heures apres Ie debut de I'essai. 5.3.4. Controle de sensibiiite du reactif biologique Periodiquement, et selon Ie meme mode operatoire, la CE(I)5Q - 24h du dichromate de potassium est determinee afin de controler la sensibiiite des organismes. 6. RESULTATS 6.1. Essai iimite En raison de ['absence de toxicite dupHJB|Hfl|pbservee a 100 mg/l a I'issus de Cessai preiiminaire, nous avons precede a un essai limite pour verifier que la CE(E)5o est bien superieure a 100 mg/l. Apres 24 et 48 heures d'exposition a la concentration de 100 mg/l, 19 daphnies sur 20 etaient mobiles soil une immobilisation observee de 5 %. Par consequent, aucune immobilisation significative des daphnies n'est observee apres 24 et 48 h d'exposition : les CE 53 - 24h et CE 53 - 48h sont toutes deux superieures a 120 mg/l. Company Ssa.^nrii-^.--^^- D"to/-:s' not contain TSCA CB1 ;e d3=unnsn' s; ie pr3arit d'ELF ATOC-iEh/:. I! ne pei-'t are ni copie. nl con-imuniqite s des tiers sans autarissaon fonnelie. La reD'oductiori de ce rapoor; c'eiuae n'esi autorises que sous fonne de iac-Simiie phDtoGraphiqus integrsi. Sr")-i{i~7K r;l~;r nsne 7/Q ELF ATOCHEM Centre d'Application de Levaliois Le pH initial a !a concentration 100 mg/l etait de 8,04 et Ie pH finai a cette concentration et dans le temoin etaient de 8,07 et 8,01, respectivement. La concentration finale en oxygene dissous etait de 8,3 dans le temoin et de 7,7 a 100 mg/l. 6.2. Criteres de Validite de I'etude 6.2.1. Teneuren oxvoene A chaque concentration, la teneur en oxygene dissous, mesuree en fin d'essai, est superieure ou egale a 2 mg/l. 6.2.2. Imitiobllisation des temoins L'immobilisation au bout de 48 heures dans la serie temoin est de 5 %. La clause requerant une mortalite inferieure ou egale a 10 % en fin d'essai a done ete respectee. 6.2.3. Sensibilite du reactif biologiQue Le dernier controle de la sensibilite des daphnies au dichromate de potassium a ete realise le 10/05/95. La CE(l)5o -24 h de cette substance de reference, evaluee a 1,2 mg/1, etait comprise entre 0,9 mg/l et 2,4 mg/l qui est la gamme acceptable ( 9.2 de la norme ISO 6341). 7. CONCLUSIONS |U|^mm|vjs-a-vis L'etude de la toxicite aigue f^----^^MM^H^Mj de la daphnie montre que cette substance presente une CE(l)5o - 24 h "It une CE(l)5o -48h superieures a 120 mg/l. (S(OTP^ San^ad. DGSS nol contain TSCACK 3e Gosumen; esS e pi'opriSte d'LF ATOCHEti/.. 1; ns psL't Stre ni copie, n! communique e dss tiers ssns auiorisancn TonneiiE. La reprodusDon ds ce rappsn d'etuas n'sst autonsSe que sous forms de rac-simiic photogrsDhigus intsgrsl. RC22B75.DOC Daae 8/9 ELF ATOCHEM Centre d'Application de Levallois 8. ANNEXE : MSISeu d'essai L'eau de dilution (ou milieu d'essai) est preparee de la facon decrite dans la norme ISO 6341 : - les solutions meres suivantes sont preparees : 11,76 9 de CaClz, 2H^Q par litre d'eau ultrapure, 4,93 g de MgS04, TH^O par litre d'eau ultrapure, 2,59 g de NaHCOs par litre d'eau ultrapure, 0,23 g de KCi par litre d'eau ultrapure. - I'eau de dilution est obtenue a partir de 25 ml de chacune de ces solutions par litre d'eau, puis aeration jusqu'a saturation en oxygene. Company San[taeS. Dess not contain TSCA CBI. Ce document as; Is propriet0 d'ELF ATOCHEI/,. i] ne psut are nl ccpis, n; communique s dss tiers sans auforisstion formelie. Ls reDroauction as cs rSDport d'etude n'est autorisee aua sous forme de fac-sifnile cnotoqrashiaus inteorai. RC:77B7fi noC nans S/B