Document 2NdrLqD6QEZ5wDBNJ1xa8jLyr

Final Report 2266--WWeeeekk CCaappssuullee TTooxxiicciittyy SSttuuddyy wwiitthh AAmmmmoonniiuumm PPeerriffnlluuCooyrrnooooomccttoaalnngoouaastteeM((oAAnPPkFFeOyO)s) in Cynomolgus Monkeys PREPARED FOR: PREPARED FOR: APMEAd io AFO Toning Working Group APME Ad-Hoc APFO Toxicology Working Group . COVANCESTUDY NUMBER COVANCE STUDY NUMBER: pe 6329-231 , sto181nr2e W_MND2343342 3M MN02343342 11881122..00000011 COVANCE THE DEVELOPMENT SERVICES COMPANY SSppoonnssoorrss:: 'AAPPMMEE AAdd--HHoocc AAPPFFOO TTooxxiiccoollooggyy W Woorrkkiinngg GGrroouupp FINAL REPORT FINAL REPORT SSttuuddyy TTiittllee:: 26 Weck Caps Toxicity Study with Ammonium Perlucrcocancat (APFO) 26-Week Capsule Toxicity Study with Ammonium Perfluorooctanoate (APFO) In Conomolgin Monkers in Cynomolgus Monkeys Author: Pee. Thomond, PID Peter Jo Thomford, PhD Study Completion Date: Study Completion Date: DDeecceemmbbeerr 1188,, 22000011 TTeessttiinngg FFaacciilliittyy:: Cuaron Covance Laboratories Inc. S501 Kinsman Bouvard 3301 Kinsman Boulevard [SP -- MMaaddiissoonn,, W Wiissccoonnssiinn 5533770044--22559955 Laboratory Study Identlrication: CCoovvaannccee 66332299--223311 MTs `SSppoonnssoorr SSttuuddyy IIddeennttiiffiiccaattiioonn:: 3M T-6889.3 PPaaggee 110off 446633 11881122..00000022 sw_mozsisss 3M MN02343343 COMPLIANCE STATEMENT COMPLIANCE STATEMENT CCoovvaannIcceNe 66T3322s99-2233311 3M T-6889.3 in Cynomolgus Monkeys 2266--WWeeeekk CCaappssuullee TTooxxiicciittyy SSttuuddyy wwiitthh AAmmmmoonniiuumm PPeerrfflluuoorrooooccttaanncoaattee ((AAPPFFOO)) in Cynomolgus Monkeys AGAlollloaadssppLeeaccbttossroaoftfottrhhyiissPssrttauucddtyyicwweeeSrrteeaniidnnaaarccdcsc,oorr4dd0aannCccFeeRwwi7itt9hh2,tthheeexEEcnnevvpiirrtoohnnatmmebenintltaalalcPPirdrooatteenccdttiipooannlmAAigtgeoeynnlccyy GCcCoooomAoApdlooiLxiaaidndbcaaoessreewaitddoteerhttyeeGrrPLmmrPiaincnsataittaciineoodnnSsswtaiddlnooldnnabeeredbbsryy,ep4tthoh0reetCUUendFniRsivvee7perar9ssri2iat,ttyyeelxooycffebDDpyutuntnthhddeaeeteeUbrwwiileveeerrareescninidototytandodfdoonDpreuanliimndneieto.yl compliance with GLPs and will be repol~ed separately by the University of Dundee. Study DTihroepdgfria. CCSotouvvda3annccee LLaabboorrsattoorriieess IInncc.. Pal d(eDorcPtDlf Lect PDDSitaipuupldllooyLmmMiaeaotdtneeei,,rt,AAoPrBBhTTi) MStudy 3M Monitor pe Joo, Bae Dat2e 0 Precemton 2001 Date 22 11881122..00000033 33M UMN0NZ03234433334444 --gr--is Covance 6329-231 3M T-6889.3 ' QQUUAALLIITTYY AASSSSUURRAANNCCEE SSTTAATTEEMMEENNTT TThhiiss rreeppoorrtt,, wwiitthh eexxcceeppttiioonn ooff aappppeennddiicceess 66,, 77,, aanndd 88,, hhaass bbeeeenn rreevviieewweedd bbyy tthhee QQuuaalliittyy a wis Eee) Assurance Unit of Covance Laboratories Inc., in accordance with the Environmental Prov Ato By oo LatPreSt 40CRT To ' PffoorlollltoeowcwtiiinnoggniiAnnssgppeeencccttyiioon(nEssPwwAeer)reeGccoooonnddduuLccattbeeoddraaatnnoddryffiiPnnrddaiincntggisscerreeSpptooarnrttdeeaddtrdtoost,thh4ee0sstCtuuFddRyy7dd9iir2ree.ccttToohrreaanndd. ssttuuddyy ddiirreeccttoorr mmaannaaggeemmenetn.t. ------ CT Inspection ey ee mat Dates Date Reported to Study Director and . FFrroomm TToo PhPhaassee SSttuuddyyDDirhe'eccttoorr MMaannaaggeemmeenntt 0099//2244//9988 0099//2244//9988 PrPortootoccooll RReevviieeww 0099//2244//9988 011100///000577///999898 01/05/99 0044//0011//9999 CTui ts 05/03/99 0066//1188//9999 07/29/99 08/11/99 011100///000577///999898 01/05/99 0044//0011//9999 a 05/03/99 0066//1188//9999 a 07/29/99 Bri 08/11/99 ABAnonadalylyyttWiicecaaillgLhLatabboorarattoorryy IInnssppeeccttiioonn Body Weight PPrroottooccooll AAmmeennddmmeenntt RReevviieeww Br Clinical Laboratory Inspection DDaattaa RReevviieeww Damemnt eRenview Protocol Amendment Review Perec mentRovo Protocol Amendment Review 011100///000577///999898 01/05/99 0044//0011/9999 pris 05/03/99 0066//2233//9999 ome 07/29/99 Garo 08/11/99 000999///010232///999999 09/13/99 sy ae a Esti 11/15/99 OUiSen OURS Dameeo mente Rove 01/15/01 aor SH Beton 02/26/01 111000///000111///999999 RDeDaptaotaarRtReeRvveiiveewiwew 10/01/99 Report Review 11/15/99 Protocol Amendment Review 01/15/01 Protocol Amendment Review 02/27/01 Report Review 1100//0011//9999 1100//0011//9999 sind 11/18/99 ---- 01/15/01 Somer 03/01/01 1122//0044//0011 1122//0044//0011 RReeppoorrtt RReevviieeww 1122//0055//0011 103 Mn ReRperperseesnetnatattiivvee `QQuuaalliittyy AAssssuurraannccee UUnniitt 0, 100 DDaattee s 11881122..00000044 aunozzions 3M MN02343345 CCoovvaannMccee66633822999--2233311 3M T-6889.3 SSTTUUDDYY IIDDEENNTTIIFFIICCAATTIIOONN 2266--WWeeeekk CCaappssuullee TTooxxiicciittyy iSSnttuCuddyyynowwmiitothhlgAAummsmmMooonnnikiuuemmysPPeerrfflluuoorrooooccttaannooaattee ((AAPPFFOO)) in Cynomolgus Monkeys Test Material Test Material AAmmmmoonniiuumm PPeerrfflluuoorrooooccttaannooaattee ((AAPPFFOO)) SpSopnosnosorrss AAWPPoMMrkEEiAnAgdd--GHHroooccupAAPPFFOO TTooxxiiccoollooggyy Working Group SSttuuddyy MMoonniittoorr Paul Lieder, PHD, DABT PMT3oMaxuilcLoileodgeyr,SPehrvDi,ceDsABT BBSTtuou.ixilPliddacuiionlnl,ggogM22yi02n0-Sn-2ee26rsEv-oi-0tc02ae2,s, 5335MM14CC4e-en1nt0tee0rr0 6S1t.2P.7a3u7l,.M 26i7n8nesota 55144-1000 612.737.2678 AAlltteerrnnaattee SSttuuddyy MMoonnititoorr JJaooMhhnn BBuutteennhhooffff,, PPhhDD,, DDAABBTT TTB3ouMoxixliidccioonllgoogg2yy20SS-ee2rrEvv-ii0cce2ess, 3M Center BStu.iPladuinl,g M2i2n0n-e2sEo-t0a2,535M14C4-e1n0te0r0 66S11t.22P..77a33u33l,..1M199i66n22nesota 55144-1000 SSppoonnssoorr''ss RReeppreresesnetnattaitivvee. DDICaaIvviCiddheFFaiarrcrraaarlr,,sPP&hhDDPolymers Limited IO"OCTcchcIecuCupHpaheataetitmiohoin,ncaaaRlllusHHne&ceaoalrPlttnohh,lyPmOerBsoLxim13ited 0CTCh1hhe9ees2shH8hi.irer5eae,1t,h3WW,9RA5A3uT7nc44oQQrnFF, PO Box 13 01928.513953 SSttuuddyy LLooccaattiioonn C3C3oo0vv1aannKccieenLLsamabbaoonrraaBttooourrilieeessvaIIrn.dc. MM3a3ad0di1issKoonni,n,sW WmiaissnccooBnnossiuinnlev55a33r77d0044--22559955 SSttuuddyy DDiirreeccttoorr CPPoeevtteaernrJJc..eTThLhoaobmmofrofaortrdod,r,iPPehsADDIc. CPPMaOOodviBBasnooocxxne,77L55Wa44ibs55ocroantsoirinesSI3n7c0. 7-7545 6M600a88d..2i2s44o11n..,77W 2200i77sconsin 53707-7545 4 11881122..00000055 I3MM_MMNN0022334433334466 CCoovvaannIccee 66M332299T--223311 3M T-6889.3 SSTTUUDDYY IIDDEENNTTIIFFIICCAATTIIOONN ((CCoonnttiinnuueedd)) 2266--WWeeeekk CCaappssuullee TTooxxiicciittyy iSSnttuCudydyynowwmiiotthlhgAAummsmmMooonnnkiieuuymms.PPeerrfflluuoorrooooccttaannooaattee ((AAPPFFOO)) in Cynomolgus Monkeys SSttuuSddtyyudTTyiimmIenteiattabibaltelie.on Date ISnt-uLdiyfeIn(iEtxiapteiroinmDenattael) Start Date: IInn--LLiiffee T(EerxmpienraimtieonntaDl)atSetart Date EIEnxx-ppLeeirfrieimmTeenentrtmaallinTTaeetrrimmoininnDaatatiitooenn DDaattee SSSeeepppttteeemmmbbbeeerrr 222393,,, 111999999888 JSDJuueellpcyytee22mm,,bb11ee99rr99991289,, 21090918 December 18, 2001 5 11881122..00000066 I3MM_MMNND022334433334477 CCoovvaannIccMee 66T33e229s9--822933311 3M T-6889.3 KKEEYY PPEERRSSOONNNNEELL 2266-:WWeeeekk CCaappssuullee TTooxxiicciittyy iSSnttuCuddyyynowwmiitothhlgAAummsmmMooonrnikiuuemmysPPeerrfflluuoorrooooccttaannooaattee ((AAPPFFOO)) in Cynomolgus Monkeys SSttuuddyy DDiirreeccttoorr PPeetteerJrJ.. TThhoommffoorrdd,, PPhhDD. SSttuuddyy TTooxxiiccoollooggiisstt DDaallee AAllddrriiddggee,, BBSS SSttuuddyy CCoooorrddiinnaattoorr PPaartrricciiaa KK.. MMccKKeeee PPeessiikk,, BBSS,, LLAATT SSuuppeerrvviissoorr,, Large Large Animal Animal Toxicology Toxicology. ~~ MMeeeecchheellllee BBoorrddeeaauuxx,, LLAATT SSuuppeerrvviissoorr,, DDoossee FFoorrmmuullaattiioonn DDiixxiiee BBuusshheeee,, BBSS,, LLAATTGG AAssssoocciiaattee DDiirreeccttoorr,, LLaabboorraattoorryy AAnniimmaall Medicine DDDioopnnlnnoaamaJJt..eCC,lleeAmmCooLnnsAs,,MDDVVMM,, MMSS Medicine Diplomate, ACLAM CClliinniiccaall PPaatthhoollooggiisstt RRDioopbbleeorrmttaLLt.e. ,HHaaAlllCl,,VDDPVVM(MC,l,iPPnihhcDDal Pathology) Diplom~Xe, ACVP (Clinical Pathology) SSuuppeerrvviissoorr,, CClliinniiccaall PPaatthhoollooggyy RRoonnaalldd MMaarrkkeevviittcchh,, BBSS,, MMTT ((AASSCCPP)) AAnnaattoommiicc PPaatthhoollooggiisstt JJDoiohphnlnonnmiieaJetJ.e.,EEAiiggChhVmmyPy,, DDVVMM,, MMSS DDDiiippplllooommmaaattteee,,, AAABBCTTVP SSuuppeerrvviissoorr,, AAnnaattoommiicc PPaatthhoollooggyy KKiimmbbeerrllyy WW.. DDuurrllaanndd,, BBSS,, HHTT SSuuppeerrvviissoorr,, AAnnaattoommiicc PPaatthhoollooggyy LLaauurriieeJJ.. SScchhuulllleerr,, BBAA,, LLAATT 66 11881122..00000077 I3MM_MMNND022334433334488 CCOONNTTEENNTTSS CoCvoavnanc3ceMe 66T33622998-22933311 3M T-6889.3 PPaaggee ABSTRACT .................................................................................................................. 11 PURPOSE... cosmic 1S PURPOSE ..................................................................................................................... 15 REGULATORY COMPLIANCE. 1S REGULATORY COMPLIANCE .................................................................................. 15 TTEESSTT MATERIAL. wss------1D MATERIAL ........................................................................................................ 15 Test Material .............................................................................................................. 15 SR -------- Reserve (Archive) Samples ........................................................................................ 15 Disposition... m------------------8 Disposition ................................................................................................................. 15 TEST ANIMALSANDHUSBANDRY... ml TEST ANIMALS AND HUSBANDRY ........................................................................ 16 Animals ...................................................................................................................... 16 SS ------ Identification .............................................................................................................. 16 J -- ---- Justification ................................................................................................................ 16 HUSDAIY mm--------"18 Husbandry .................................................................................................................. 16 AGCHIBO. nro esrsssnsssssieissssissmesrnsrssnee{ Acclimation................................................................................................................ 17 PROCEDURES............ ssl PROCEDURES ............................................................................................................. 17 `Group Designatioansd DOSE LEVEL... AT Group Designations and Dose Level........................................................................... 17 DOSING PROGEUUIES vrs snes 8 Dosing Procedures ..................................................................................................... 18 DOSEABBISES......oo.corrs renee 19 Dose Analyses............................................................................................................ 19 OBSCIVOAFLATIIOISN........rnrrs ns 19 Observation of Animals .............................................................................................. 19 Blood Hormone Delermination ........... TY Blood Hormone Determination .................................................................................. 19 SerumAPFOLevelDEtermiation..........ssnnnss: 20 Serum APFO Level Determination .............................................................................20 UrineandFeces APFOLevel Detention... 20 Urine and Feces APFO Level Determination .............................................................. 20 Clinical Pathology. swenm-------- mmmm-- Clinical Pathology ...................................................................................................... 21 `AdditionalBloodCollection nimmnm--------k Additional Blood Collection ....................................................................................... 22 J A -- sma Anatomic Pathology ................................................................................................... 23 Palmitoy] COA OXI56 DEETMAONS cress 23 Palmitoyl CoA Oxidase Determinations ..................................................................... 23 CellPrOFETatiO EVANALION.....cevcsn 23 Cell Proliferation Evaluation ...................................................................................... 23 BileAcid Delermination........... pr ermine 24 Bile Acid Determination............................................................................................. 24 Receptor Level Determination........... rm rene Receptor Level Determination .................................................................................... 24 Liver APFODECTIMBHON rrr nrc TY Liver APFO Determination ........................................................................................ 24 SUBISUCA ABBIYSES rrr 26 Statistical Analyses .................................................................................................... 26 RECO REAERION...er rrr 21 Record Retention........................................................................................................ 27 RESULTS ..................................................................................................................... 27 ObservOaf AtBIiMAoISn..........covcv wms----1 Observation of Animals.............................................................................................. 27 I ---- 30 Blood Hormone Determination .................................................................................. 30 Clinical PAthOIOgY........vc. snm--------y Clinical Pathology ...................................................................................................... 30 Coll PrOFEration EVANRIION .....vvrve noes) Cell Proliferation Evaluation ...................................................................................... 31 AnatomicPathology... s-------------- Anatomic Pathology ................................................................................................... 31 7 11881122..00000088 I3MM_MMNND022334433334499 CCoovvaannIecMseT66.33622899--822933311 3M T-6889.3 CCOONNTTEENNTTSS ((CCoonnttiinnuueedd)) Page Page DDIISSCCUUSSSSIIOONNAANNDD CONCLUSIONS... snes 32 CONCLUSIONS .......................................................................... 32 SSIIGGNNAATTUURREES.S A -------- I .............................................................................................................. 33 REFERENCES. -------- 3 REFERENCES .............................................................................................................. 34 OPHTHALMOLOGY OPHTHALMOLOGY REPORT REPORT cr ssn ................................................................................... 35 PATHOLOGY REPORT.......... conn 36 PATHOLOGY REPORT............................................................................................... 36 COMMENTS COMMENTS ONTHEDATA...... ommm--------E ON THE DATA ..................................................................................... 43 CODES, ABBREVIATIONS, AND COGeDnEerSa,lACBodBeRsEaVndIAATbIbOreNviSa,tiAoNnsD. UNITS... mm----_45 UNITS .................................................................. 45 Codes for Clinical PathoIO......c...c -- General Codes and Abbreviations ............................................................................... 46 Codes for Clinical Pathology ...................................................................................... 47 `AAbAbbbrbreebvviriaatetiivoonnissaaaantnndddiUUUonnintinstssfffooiorrrCCCltliliinnniisicccaaalll CHMAMOISOY.c.c.c Hematology ......................................................555200 ACAAObbdbbberrseebvvfiiOaarrttiiAooennBssIvaaanOnndiMddUCUUnainnPtiitAttsssBfiffOoooIrrroCOCClZillnYiinnniiicsccaaalllcCUUrhriiencnamallyiyssstiri.ys...............................................................................-- ...........................-- ................. 555245 Codes for Anatomic Pathology ................................................................................... 55 TTAABB1 LLSEEuSSmmary ofClinical OBSEIVALIOS cee 6 2231 SSSSuuummmummmamaarrryyymooooffffaOCCClpillrhiinnntiiihcyccaaaalllltOOOibbcBssOeeSrrbvvSaaEEttIiirooVnnAVssL-I.-.aOR.R.NE.t.eSC.c.O.oi.v V.v.E.eo.T.r.Yy.n.....s...v .........v ................e ................e ..............s ....r ..............o ..s ................d ......3.. 855.86 4453 SSSSuuummummmmmaaarrrmyyyooooaffffBOOOrpophpdyhthyththhaaWallehmminigiiccchtOOODbbbassteeSarrvvC(aaKrttiigoo)vnncssa-.-t.cR.R.E.ie...Cc.o.oO..vn.V..e.sr..y....................................................................s ....................n ..................l ........ 566119 6756 SSSSuuuummmmmmaarrmmyyooooaaffffBBBBrrooooddyyddyyyy W WWWeeeeiiiigggghhhhttttDCDDahaatattaaang(((kkekgggD)))A-.-t..aRR.e.e.(c.c.og.ov..ve)..er..yr..y......................................v............c.....v......v....o..m....n......e....on......s......nr ..............) ....666972 87 98 SSSSuuummummmmaarrmyymooooaffffaCBBBrloioordnyddiyyycyaW WWleeeiHiigegghmhhtatttCCCohhhlaaaonnnggggyeeeDDDDaaaattttaaaa-(((kkDkggga)))y.---.1.RR.1.E..e..C.c..Oo...Vv....eE...rT..y.Y...........e ..............r ................r ..............r ............e..........1t67339 1111900 SSSSuummuummmmaarryymmooooffffaaCCCClliillrriinnnniiiiccyyccaaaallll HHHHeeeemmmmaaaattttoooollllooooggggyyyy DDDDaattaaaa----DDDDattaaayyyy36aa-33111.1........................................o......o......v......e.....n.....e.....v..o...r.o....no....or..r..n..r..e..r..n..e....r....r........1.. 771957 1112 1123 SSSSuuuummmmmmmmaaaarrrryyyyooooffffCClCCliillniinnniiiiccccaaaallll Hematology Data - Day 63 .................................................. 79 HHemeatmoloagyDtDat0aa--lDDtaaoyya9g1 y 182. --83 Hematology Data - Day 91 .................................................. 81 11113445 SSSSuuummmummmamaarrryyymooooffffaCCCClliillriinnnniiiiccyccaaaallll HHHHeeememmaaatmttooolllaooogggyyytDDDDaoaatttaaala---- DDoDDtaaaayygyy22a214y1185772 ................................................ 83 ((RRecEoCveOryV)). ... 8387 (Recovery) .............................. 85 1156 1167 SSuummmmaarryyofofClCilniniiccaall SSuummmmaarryyooffCClilinniiccaall HHeemmaattoollooggyy DDaatta-a- DDaayy 224755 ((RReeccoovvereyry).) CHheemmiastotlroygyDaDtaat-aD-aDya-y1217.5..(.R.e.c.o.very) .............................. .............................. 98881799 1178 1198. SSuummmmararyyooffCClilinniiccaall SSuummmmaarryyooffCClilinniiccaall CChheemmisisttrryy DDaattaa CChheemmisisttrryy DDaattaa - - - DDaayy DDaayy -11 .................................................... 91 31. 63.....I ..o.ovroovrrrvroer9T 31 ..................................................... 94 22211O09" S SSSuummumu mmaarryymm ooooffffaCCCCllmiillriinnnniiiicyccca aaaallllCCCChhr hheeeemmmmiissy iissttttrrrryyyy Data - Day 63 ..................................................... 97 DDaa-+tDDtaaayya182...91... 110030 Data - Day 91 ................................................... 100 2212 22 SSumummarymooffaCClilrinniicycaall Summary of Clinical CChheemmisisttrryy Chemistry DDaattaa-- Data - DDaayy Day 211872 217 (Recovery) ................................................. (Recovery) ............................... 111000366 8 11881122..00000099 I3MM_MMNND022334433335500 CoCvoavnancIcMeTe 866326299.9-2233311 3M T-6889.3 CCOONNTTEENNTTSS ((CCoonnttiinnuueedd)) PPaaggee TTAA2BB3LLSEEuSSmmaryofClinical Chemistry Da-tDaay 245 (RECOVET).....cvrn: 109 22223454 SSSSuuuummmmmmmmaaaarrrryyyyooooffffCCllCCiillnniinniiiiccccaaaallll CCUCrhhhieeenmmmailsiiysststtrirryysy D DDDaaattaaa ----tDDDDaaaaat yyyy2-2271475a 55L.(((RRR.eeec.ccooov.vvesreeyrru)yy.))r.....e....e......r......s....n......mr......n..m....c....n......e......:.... 3109 112 115 222566 27 SSSSuuuummmmmmmmaaaarrrryyyyooooffffCCCClliilliinnnniiiiccccaaaallllUUUUrrirriiinnnnaaaallllyyyyssssiiiissss DDDDaaattaaa----tDDDDtaaaaayyyy36-3a11131.........c..........c..........c............c.......c..c.........c..n..v....v..s..e....v..v....r....c..c..e....n..n................ 1111116756. 22228789 SSSSuuummmummmamaarrryyymoooofffCfaClCCliillrniinnniiiiccyccaaaallll UUUUrrrriiiinnnnaaaallllyyyyssssiiiissss Data - Day 63 ................................................... 117 DDaa--tDDtaaayy9a1182... src]1918 Data - Day 91 ................................................... 118 23331900 SSSSuuuummmmmmmmaaaarrrryyyyooooffffCCCCllililiinnnniiiiccccaaaallllUUUUrrirriiinnnnaaaallllyyyyssssiiiissssDDDDaaatttaaaa----DDDDtaaaayyyy2a22141185772 .(((.R.RR..eEE.c.OG.o.V.Ov.r.eV.yr.e.y)..)I....)...........r.....v.....r..c....v......v....e....v..r....ve....vv....ee..........111121221900 3312 3323 SSuummmmaarryyooffCClilninicicaallUUrirninaallyyssiiss DDataa--DDtaayy2a27455 ((RReeccoovvereyry).) SSumumarmyoofmfOCrlgianaincWarleUigryihntalyDsisaD-taWteaae-kDa2y7 2S7a5CH(fRiceecovery) ............................... 121 vc sol1l23 ............................... 122 33333445 SSISuuummmnmmmacaarrryyyiooooffdffOMOOarerrcgggraaanonnnscW WWcoepeeieiiigggchhhtttODDDbaasttaaea---rWWWvteeeaeeektkk-a4i42W070oeneRSReaksecccroo2ivfv7ieecrSreAyyc..SrS.i.Aa.f.cC.i.rcr.i.eff.i.ic..ec..e..............................................................................111123343669 33335766 IIIInnncccniiidddeeecnnnccceieeooooffdffMMMMiaeccaarrccnororoosssscccccooooppeppiiiicccc OOOObbbbsssseerreevvraarttviivooannasst--t--iWWW Wioeeenoeeceekksnkk2s4247070 SRSRaeaeCcccTrooiivfvfieecirreycy.e.SS...aa..G.c.r..ri.i..ff..ii.c.c..ee..................v.....u......r.........1..1..5115542119 333788 IIInnccniiddeecnnccieeooofdffMMMieciiccrnrrooosssccccooopppeiiiccc OOObbssbeerrvvaasttiioonness--- WrW Weeeeeevkkk4240a70RSReatecccorovifvieiecrreyy.So.aS..ca.r.c.ni.rf.i.if..ci.sce.e.................................1....61165112 ACEIDIE Lussminmmmsmmnmsint enn 168 APPENDIX 1 .............................................................................................................. 168 PLOLOGOI DEVIIONS ee nnn 109 Protocol Deviations .................................................................................................. 169 Protocol ................................................................................................................... 172 PROLOG] ATMERIEN NO. Levers 190 Protocol Amendment No. 1 ...................................................................................... 190 Protocol Amendment No. 2. " erred Protocol Amendment No. 2 ...................................................................................... 200 Material SafetyData Shee. mm--------------0 Material Safety Data Sheet ....................................................................................... 202 CeifiOfcADaGItYSei.......... -- Certificate of Analysis .............................................................................................. 209 AAPPIPPndEEiTNviIDdTuIaXEl BA2n..i.u.m..a..ls...F.a.s.t..e.s.D..A..tn..a....s........s........m........m......s......m.....m.....m.w ....m...s ..m.....ms ....n....-- .m.....m.-- ....m..." ..m.....o.a .... I21TU1Y IIIE nnndddiiivvviiiddduuuaaalllCAClilninniimiccaaallle A FOOabbtseseerDrvvaaattatiioo..nn..ss.....................................................................-- ..........................................................."............A ................................> .......... 221132 Individual Ophthalmic Observations ........................................................................ 226 APPENDIX 3. ssn 300 APPENDIX 3 .............................................................................................................. 230 Fg ------| Individual Body Weight Data (kg) ........................................................................... 231 Individual Body Weight ChangeData (KE)... 231 Individual Body Weight Change Data (kg) ............................................................... 237 APPENDIX 4 .............................................................................................................. 243 Individual Clinical HematologyData... smern2ih Individual Clinical Hematology Data ....................................................................... 244 Individual Clinical CHOISY DAA cc... cer e218 Individual Clinical Chemistry Data .......................................................................... 278 Ep TA EA -- Individual Clinical Urinalysis Data........................................................................... 317 APPENDI5.X.. insta I. APPENDIX 5 .............................................................................................................. 346 J HT A ------ smn Individual Anatomic Patho!ogy Data ........................................................................ 347 9 11881122..00001100 I3MM_MMNN0022334433335511 CCovevaanncIceMTe6633622992-323311 3M T-6889.3 CCOONNTTEENNTTSS ((CCoonnttiinnuueedd)) Page Page APPENDIX6. snsmm------------3 APPENDIX 6 .............................................................................................................. 405 Quality ASSUTANGE SCIEN... erenerrreroerrrve A08 Quality Assurance Statements .................................................................................. 406 Sum ofHm ormoaneArnalyyses Data... 410 Summary o f Hormone Analyses Data....................................................................... 410 SummaryofTestoserone ARAIYSES Dd (WL) von 420 Summary of Testosterone Analyses Data (ng/mL) .................................................... 420 Individual Hormone Analyses Dad... m----1 Individual Hormone Analyses Data .......................................................................... 421 IndividualTestosterone AnaDlatay(TsLe)s ......v.rr 1 Individual Testosterone Analyses Data (ng/mL) ....................................................... 431 a ---- : APPENDIX 7 .......................................... .................................................................... 433 Quality AssuranceDOGUMRIAton ............................ 3 Quality Assurance Documentation ........................................................................... 434 Hormonal Measurements Report (cholecystOkiin analyses daa)... 435 Hormonal Measurements Report (cholecystokinin analyses data) ............................. 435 ARVEIIIE Dunsuwssmsmanmansmmsmmmmnssnsmimssnssssss bi APPENDIX 8 .............................................................................................................. 442 CellProliferation EVAlGtion............. ammm--_-- Cell Proliferation Evaluation .................................................................................... 443 10 10 11881122..00001111 33MM_MMNN0022334433335522 AABBSSTTRRAACCTT CCoovvaannMcceTe 66633522989-22933311 3M T-6889.3 "The purposeofthis study was to assess the effect ofthe test material, ammonium pTehreflpuuorrpoooscetaonfotahties (sAtuPdFyO)w,aosntocraistsiecaslsethnezyemffeecltevoeflst,hehotersmtomneaste,riaanl,daomthmerosneiulemcted bpieorfclhueomriocoacltapnaoraatmeet(AerPsFwOh)e, nonadcmriitniicsatleernezdydmaiellyevbeylsc,aphsourlmeo0necs,ynaonmdooltghuesr smeolenckteeyds for batiolecahsetm2i6cawlepeakrsa.meters when administered daily by capsule to cynomolgus monkeys for at least 26 weeks. Male cynomolgus monkeys were assignetod four groups (sx animals/group in Groups 1, 3M,.aalnedc4y,noanmdoflgouurs amniomnaklesysinwGerroeuapss2i)g. neAdnitomaflosuringrGoruopusp(s1ixreacneiimveadlse/gmrpotuyp gienlaGtironups 1, c3a,pasnudle4s,. aAndnifmoaulrsaninimGralosuipnsG2r.oaundp 32)r. ecAenivimedalgselinatGinrocauppsuilerescceoivnteadienimnpgt3y andgelatin 10 mg A capsules.PAFnOimgoalfs iwneiGgrhotuipdsay2 (amngd/k3gr/edcaeyi)v,edregspeelcattiinveclay.psuAlneismcaolnstaiinnGinrgou3pan4rdeceived 10 mg APFO/kg of weight/day (mg/kg/day), respectively. Animals in Group 4 received a`ggdeemllaianttiiinnstccraaapptssiuuollneesswaccosonndttiaasiincnoiinnnggti33n00uemmdggfoAArPPDFFaOyO/sk/kg1g/2/ddtaahyyrooounnghDDa2ay1yssdu11 etthhtrrooosuuiggghhnso1111f;; tddoooxssieecity. aBdemgiinnnisitnrgatoionnDwaays2d2isacnodntcionnuteidnufionrgDtahyrsou1g2hothurtotuhgehr2e1madiunedetro osfigtnhseosftutodyx,icGitryo.up 4 BmaelgeisnnwienrgeoandmDianyis2t2eraendd2c0onmtginAuPinFgO/thkrgo/udgahyouwtitthhetrheemexacinedpteiroonftthhet sdtousdiyn,gGfroorup 4 tmhareleesawniemraelasdwmaisnidsitesrceodnt2i0numedgbAePtwFeOe/nkgD/adyasy 4w3itahntdhe81e;xhceerpetaiofenrt,hathtedohisginhgdfoosre will be trherfeeerraednitmoaalss 3w0a/s20dimsgc/okngt/induaye.d bAentwimeaelnsDwaeyrse4a3dmainndis8t1e;rhederAeaPftFeOr, dthaelyhifgohradtosleeawstill be r2e6fweerreekdst;otawso30an/2i0mamlsg/ikngG/draoyu.psA1niamndals3 wweerree atdrematiendisfteorre2d6AwPeeFkOs,datihleyn ftorreaatt mleenatst was 2di6swcoenetkisn;uetwd oanadnitmheaalnsiimnaGlsrwoueprse1oabnsder3vewderfeortrreeavetersdibfiolrit2y6, pweeresiksst,etnhceen, torreadtemlaeynetdwas docisccuornrteinncueedofatnodxitcheefafnecimtsalfsorw1e3rewoebeskesrvpoesdtifroerartemvenetr,sibility, persistence, or delayed occurrence of toxic effects for 13 weeks posttreatment. FFoooodd wwaass pprroovviiddeedd oonnccee oorr ttwwiiccee ddaaiillyy.. W Waatteerr wwaass pprroovviiddeedd aadd lliibbiittuumm.. TThhee aanniimmaallss wweerree oobbsseerrvveedd ttwwiiccee ddaaiillyy ((aa..mm.. aanndd pp..mm.)) ffoorr mmoortrtaalliittyy aanndd mmoorriibbuunnddiittyy.. AAttlleeaasstt oonnccee ddaaiillyy,, aanniimmaallss wweerree eexxaammiinneedd ffoorr sabbnnoorrmmaailtitiieess aanndd ssiiggnnssoofftotoxxiicciityy,, aanndd ffoooodd ccoonnssuummppttiioonn wwaass aasssseesssseedd qquuaalilittaattiivveellyy.. OOpphhtthhaallmmiicc eexxaammiinnaattiioonnss wweerree ddoonnee bbeeffoorree iinniittiiaattiioonnooffttrreeaattmmeenntt aanndd dduurriinngg WWeeeekkss 2277 aanndd 4400.. BBooddyy wweeiigghhtt ddaattaa wweerree ccoolllleecctteedd `weskly before initiationoftreatment,on the first dayoftreatment, and weekly thereafter. wBleoeokdlysbaemfpolreesifnoirtiahtoiornmoonfetraenaatmlyesnets, woenrtehecoflilrsetctdeadyaot fsetrleeacttmedenint,tearnvdalws edeukrilyngthterreeaatfmteenr.t aBnldoordecsoavmerpyl.esBfloorohdo,rmurionnee, aanndalyfseecaslwsearmeplceosllewcetreed caotlsleelcetcetdedduirnitnegrvWalesedkur2inagndtreeavtemryent 2anwdereekcsovtehreyr.eaBfeloroddu,riunrignetr, eaantdmefnetcaalnsdamrepcloevserwyerfeorcAolPleFcOtedcodnucerinntgraWtieoenkan2alaynsdese.very 2Blwooedekasntdheurreianfetesramdpulriensgwtereraetmcoelnltecatnedd rfeocrocvlienriycaflorheAmPatFoOlocgoyn,ceconatrgautliaotnioann,alcylsineisc.al cBhleomoidstarnyd, uarnidneursianmalpysliesswteesrtes actolsleelcetcetdedfoirntcelrinvailcsaldhureimnagtotlroegaytm,ecnotaagnudlartieocnov,ecrlyi.nicAaflter c2h6ewmeiesktrsyo,fatnrdeautrmineanlty,sifsotuersatsniamt aslesl/egcrteodupinitnerGvraolsupdsur1intghrtoreuagthm3e,natnadndallrescuorvvievryin. g After 2aann6iimwmaaellessksiinnoGGf rtrroeouaupt4mp4ewwnete,rrefeoaaunnreesastnthhiemettiaizzlesed/d,g,rowwueeipiggihhneedGd,,roeeuxxpssaasnng1guutihinnraoatuteegddh,, 3a,nadnndecarlolpssuirevdi.vinAgfter and necropsied. After 2266 wweeeekkssoofftrtreeaattmmeenntt aanndd 1133 wweeeekkss wwiitthhoouutt ttrreeaattmmeenntt,, ttwwoo aanniimmaallss//ggrroouupp iinn GGrroouuppss 1| aanndd 33 wweerree aanneesstthheettiizzeedd,, wweeiigghheedd,, eexxssaanngguuinianteadt,aeandn.dd nneeccrrooppssiicedd.. AAtt nneeccrrooppssyy., m`maaccrroossccooppiicc oobbsseerrvvaattiioonnss wweerree rreeccoorrddeedd,, sseelleecctteedd oorrggaannss wweerree wweeiigghheedd,, aanndd sseelleecctteedd u11 11881122..00001122 I3MM_MMNN0022334433335533 ConaSn 6T29.s231 Covance 6329-231 3M T-6889.3 ttiissssuueess wweerree ccoolllleecctteedd aanndd pprreesseerrvveed.. IInn aaddddiittiioonn, tthhee rriigghhtt llaatteerraall lloobbee ooff lliivveerr wwaass ccoolllleecctteeddffrroommeeaacchh aanniimmaall ffoorr ppaalmmititooyyll CCooAA ooxxiiddaassee aaccttiivviittyy aannaallyysseess.. RReepprreesseennttaattiivvee ssaammpplleess ooff lfiivveerr,, rriigghhtt aanndd lleefft teessttess,, aanndd ppaannccrreeaass wweerree ccoolllleecctteedd ffrroomm eeaacchh aanniimmaall ffoorr cel proliferation evaluation using proliferation cell nuclear antigen (PCNA). Bile was ccoellllepcrtoeldifferraotmioenaecvhaalnuiamtiaolnfuosribnig praocliidfedreatteiromnincaetlilonnu.cleAarsaanmtpilgeeonf(PiCveNrAw)a. sBciollelewcatsed cforlolmeccteadchfraonmimeaacfhoranAiPmFalOfocornbcielnetarcaitdiodnetaenramlyisneast.ionM.icArossacmoppilec eoxfalmivienratwiaosnscowlelerceted dfroonme eoancthisasnuiems aflrfoomr eAaPchFOancimoanlc.entration analyses. Microscopic examinations were done on tissues from each animal. `OOnnee mmaallee ggiivveenn 3300/2200 mmgg//kkgg//ddaayy aanndd oonnee mmaallee ggiivveenn 33 mmgg//kkgg//ddaayy wweerree ssaaccrriiffiicceedd iinn mmoorriibbuunndd ccoonnddiittiioonn oonn DDaayyss 2299 aanndd 113377,, rreessppeeccttiivveellyy.. TTeesstt mmuatteerriiaabl-rreellaatteedd oobbsseerrvvaattiioonnss nnootteedd ffoor tthhee mmaallee ggiivveenn 3300/2200 mmgg//kkgg//ddaayy iinncclluuddeedd hhyyppooaaccttiivvee bbeehhaavviioorr,, eennttiirree bbooddyy ccoolldd 10the touch, few orno feces, low or no food consumption, and weigh los. Clinical tooobbstsheerervvtaaottuiioconhnss, fnneoowtteeoddr ffnooorr ttfhheeecemmsa,allleeowggiiovvreennno33 fmmogog/d/kkgcg/o/ddnaasyyumiinnpcctliluoudnde,eddanlldiimmwiitteeeiddghuutsseeloaasnns.dd Cpalrianliycsails paralysis ooff tthhee hhiinndd lliimmbbss,, aattaaxxiicc aanndd hhyyppooaaccttiivvee bbeehhaavviioorr,, ffeeww ffeecceess,, aanndd nnoo foooodd ccoonnssuummptpitioonn.. DDuurriinngg WWeeeekk 11,, mmaalleess ggiivveenn 3300 mmgg//kkgg//ddaayy hhaadd observations observations of of ew few feces, feces, ow low food food consumption, and lost weight. Based on decreased food consumpion and bod weight ocsosn,sutmhepdtioosne, laenvdellowsatswleoigwhert.edBtaose2d0 omng/dkegc/redaasyebdefgoiondnicnognosunmDpatyio2n2.andAfbordythwe ediogshet lloesvse,l twhaesdolosweelreevde,l ownalsy ltowwoeraendimtaols20olmegra/ktge/ddtahyebdeogsiennleinvegl ofnorDraeyma2i2n.inAgf2te3r wtheeekdsosoef dleovseel awdamsinlioswterraetdi,ononolnyeotwfothaensiemaalnsimtoallesractoendtithneueddotsoe hleavveeltfeotr rmeamteariinailngel2a3tewdeeks of odbosseervaadtmioinnisstorfatfioenw;foenceesoafntdhelsoewanfiomodalcsocnosunmtipntuieodn.to Dhoasvee taedsmtimniastterraitail-ornelwaatesd doibssceornvtaitniouneds ofofrfetwhrefeecmeasleansdgilovwen f3o0o/d20comngs/ukmg/pdtiaoyn.beDtwoeseenadDmayinsis4t3ra(tiWoenewka7s) and 81 (d(WiWseceeoeknkti11n22)u).e. dTTfeeossrttmtmhartaeeteerrimiaaall-lrereesllgaattieveddenoobb3ss0ee/r2rvv0aatmtiioognn/kssgnn/oodttaeeyddbffeootrrwttheheeensseeDaaannyiimsma4all3ss (iWnceleukde7d) included tahnidn thin 81 appearance, feworno feces, low or n0 food consumption, and weightloss (a1p7p.e5ar1a0n2c3e.,19fe)w. oTrhneosefeacneism,alloswaopprenaorefodotdocroencosuvemrpftiroonm, tahnedtwesteimgahtterloiassl elated effects (w1i7th.5int'o3 2w3e.e1k%s).afTthredsoesaenaimdmailnsisatprpaetairoendwtaosrdeicsocvoenrtifrnoumed.the test material-related effects within 3 weeks after dose administration was discontinued. TThheerree wweerreennooeeffffeeccttss oonn eessttrroonnee,, eessttrraaddiiooll,, eessttrriiooll,, tthhyyrrooiidd ssttiimmuullaattiinngg hhoorrmmoonnee,, oorr tteessttoosstteerroonnee tthhaatt wweerree cclleeaarrllyy ddoossee--rreellaatteedd oorr ccoonnssiisstteenntt iinn tthheeiirr eeffffeeccttssoovveerrttiimmee.. "Thyroid hormones in general were decreased beginning on Day 35 in annals Tadhmyirnoiisdtehroerdm1o0neosr i2n0gmengerAaPlFwOe/rkegdeacnrdeaisnegdenbeergailnnexinhigboitnedDareyc3o5veirny ainnitmhaelslast a3dmmoinntihstseorfeddo1s0iongr 2o0r mdugrAinPFthOeikregcaonvderiynpgheansee.ralNeoxhailbtietreadtiroencsoivnecrhyoilnecthysetloaksitnin cc3oomnnccoeennntthtrrsaattoiiofonndssoswwienergreeooorbbdssaeerrrivvneegddthaatteaarnneyycooovfftethrhyeeptthiimamseee.ppooiNinnottss.a. lterations in cholecystokinin AAddmminiinsitstrraattiioonnooff AAPPFFOO aatt ddoossee lleevveellss ooff 3 3 oorr 1100 mmgg//kkgg//ddaayy hhaadd nnoo aappppaarreenntt eeffffeeccttss on on hheemmaattoollooggyy,, ccooaagguullaattiioonn,, cclliinniiccaall cchheemmisisttrryy,,oorr uurriinnaallyyssiiss rreessuulltts.. OOffuunncceerrttaaiinn rreellaattiioonnsshhiipp ttoo aaddmmininisisttrraattiioonnooff AAPPFFOO aatt 3300/2200 mmgg//kkgg//ddaayy wweerree mmiillddllyy iinnccrreeaasseedd 212 11881122..00001133 33MM_MMNNo022334433335544 CCovoavnanccee66T332629932-2933311 3M T-6889.3 twriiggllyycceerriiddee ccoonncceennttrraattiioonn aanndd mmiillddllyy ttoo mmooddeerraatteellyy ddeeccrreeaasseedd aabbssoolluuttee nneeuuttrroopphhiill ccoouunntt,, otal protein concentration, and albumin concentration. Tn addition, two animals given tAoPtaFl Opraotte3i0n/c2o0nmcge/nktrga/tdioany,eaxnhdibailtbeudmmiondecroantceelnytrtaotimoanr.keIndlayddiintciornea,stewdosearnuimmeanlszgyimveen. aActPiFviOtiaest 3(0i/2,13asmpgar/ktagt/edaaymienxohtirbaintsefdermasoed,eraaltaenliynetoammianrokterdanlysfienrcarseea,sesdorsbeitroulm enzyme dadecehthiyvydidtrrioeogsgee(nnia.aess.e,e,,asaapnnaddrtccarrteeeaaattiimnneienkkoiitnnraaasnsees))feaarnandsdemm, iaillldalnlyyiniiennccarrmeeaainsseeoddtrassenersrufuemmrabbsiiell,ee saaoccriibdditccooolnncceennttrraattiioonn pprriioorr ttoo tthhee uunnsscchheedduulleedd ssaaccrriiffiicceeooff oonnceoofftthhee aanniimmaallss and and the the cessationof cessation of treatment treatment for for tthhee ootthheerr aanniimmaall bbeeccaauusseeooffppoooorr hheeaatlhth.. These findings, although not observed for most These findings, although not observed for most oofftthhee aanniimmaallss ggiivveenn 3300//2200 mmgg//kkgg//ddaayy,, mmaayy aallssoo hhaavveebbeeeenn ccaauusseedd bbyy tthhee tteesstt mmaateterriiaall.. DDuurriinngg rreeccoovveerryy,, tthheerree wwaass nnoo eevviiddeennccee ooff ppeerrssiisstteenntt oorr ddeellaayyeedd ttooxxiicc eeffffeeccttss on on clinical clinical ppaatthhoollooggyy tteesstt rreessuullttss.. `AAfftteerr uupp 0to.2266 wweeeekkss oonn ssttuuddyy,, eennhhaanncceedd cceellll pprroolliiffeerraattiioonn wwaass nnoott eevviiddeenntt iin tthhee ppaannccrreeaass oorr tteessttess ooff mmaallee mmoonnkkeeyyss,, wwhheerreeaass iinn tthhee lfiivveerr tthhee ffiinnddiinnggss wweerree eeqquuiivvooccaall. TTeesstt mmaateterriiaall-rreellaatteedd aanndd ssttaattiissttiiccaallllyy significant significant increases increases were were seen seen in in mean mean absolute absolute liver weights and mean lver-to-body weigh percentages in animals in al dose groups at tlihveertewrmeiignahltssaacnrdifmicee.anIlnivaedrd-ittoi-obno,dmyewaneiglvhetrp-etroc-ebnrtiangewseiingahnismiganlisfiincaantlllydoisnecrgeraosuepdsinat athneimtearlms iinnatlhseac1r0ifmicge/.kgI/ndaadydgitrioounp,;mtheiasnwlaivsera-ltsoo-bcroanisnidweeriegdhttessitgmnaiftiecrainatllyreilnucerde.ased in aHnoiwmevalesri,n nthoete1s0t mmagt/ekrgi/daalyelgtreodupm;atchriosswcoapsiaclsoorcmoincsriodsecroepditcecsthamnagteesriawle-rreelasteeedn. in any. Horogwanesveatr,tnhoe tteesrtmimnaaltesraicarli-rfeiclae,tedinmclaucdriongscloipveicr,oardrmenicarlo,sscpolpeiecn,chpaanncgreesasw,earendseteesntiisn. any organs at the terminal sacrifice, including liver, adrenal, spleen, pancreas, and testis. AAtttthhee rreeccoovveerryy ssaaccrriiffiiccee,, tthheerree wweerree nnoo tteesstt mmaatteerriiaabl--reellaatteedd effects effects on on terminal terminal body body wweeiigghhttss oorr oonn aabbssoolluuttee oorr rreellaattiivvee oorrggaann wweeiigghhttss,, iinnddiiccaattiinngg tha that the the liver liver weight weight increases increases Seen at the termination of dosing were reversible. There Were no macroscopic of mseiecnroastctohpeictefrminidniantgisonatotrfidboutseindgtowteesret mreatveerrisailblaed.miTnhiesrterawtieoren aniotmhearcerocoscvoerpyicsoacrrifice. microscopic findings attributed to test material administration at the recovery sacrifice. Two animals were sacrificed ina moribund condition during the courseofthe study, a Tmawloe agniivmenals30w72e0remsga/ckrgi/fidcaeyd(iDnaaym2o9r)ibaunndadcmoanldeitigoinvednur3inmgg/tkhge/cdoauyrs(eDaoyf th13e7)s.tuTdhye, a mmaallee ggiivveenn 33007/2200 mmgg//kkgg//ddaayy h(Dadayes2o9p)haangedaal manadleggaisvteinc 3lemsigo/nksgi/dndaiyca(tDivaeyo13fa7)d.oTsihneg minjaulreyg,iavnedn l3i0v1e2r0lemsigoinksgp/draeysuhmaeddestoopbheadgueealtaontdhegatessttrimcatleersiiaoln.s iTnhdeiccaatiuvseeooff tahdeosing i`nmjourriyb,uannddcofinvdeirtileosnioofnsthperemsaulmeegdivtoenbe3 dmuge/ktog/tdhaeytewsatsmuantcelreiaarl.. The cause of the moribund condition of the male given 3 mg/kg/day was unclear. Based onthe results ofthis study in which ammonium perfluorooctanoate (APFO) was administered Based on the administered orally by capsule to results of this study orally by capsule to cynomolgus monkeys a dosesof0, 3, 10, or in which ammonium perfiuorooctanoate (APFO) cynomolgus monkeys at doses of 0, 3, 10, or was 30120 my/kgdayfor26 weeks, the no-obsersable-adverse-offect level (NOAEL) was 30/20 mg/kg/day for 26 weeks, the no-observable-adverse-effect level (NOAEL) was 133 11881122..00001144 33MMMMN0N203234433335555 CCoovvannMcceeT6663322E90-92233311 3M T-6889.3 ' 1100 mmgg//kkgg//ddaayy.. EEffffeeccttss sseeeenn iinn aanniimmaallss aaddmmininiisstteerreedd 1100 mmgg//kkgg//ddaayy wweerree nnoott eevviiddeenntt aafftteerr 1133 wweeeekkssooffrereccoovveerryy.. 11"4 11881122..00001155 I3MM_MMNN0022334433335566 PURPOSE PURPOSE ConTeo32m9-a31 Covance 6329-231 3M T-6889.3 "The purpose ofthis studywas o asstheesffesct ofthe test material, ammonium The purpose of this study was to assess the effect of the test material, ammonium ppeerrfflluuoorrooooccttaannooaattee,, oonn ccrriittiiccaall eennzzyymmee lleevveellss,, hhoorrmmoonneess,, aanndd ootthheerr sseelleecctteedd bbiioocchheemmiiccaall 26 weeks. ppaarraammeetteerrss wwhheenn aaddmmininiisstteerreedd ddaaiillyy bbyy ccaappssuullee ttoo ccyynnoommoollgguuss mmoonnkkeeyyssfoforraatt lleeaasstt 26 weeks. REGULATORY COMPLIANCE REGULATORY COMPLIANCE AAllll aaspsepctesoocffttthhisiss ssttuuddyy wweerree ddoonnee iinn aaccccoorrddaannccee wwiitthh tthhee EEnnvviirroonnmmeennttaall PPrrootteeccttiioonn A`Aggeennccyy GGoooodd LLaabboorraattoorryy PPrraaccttiiccee SSttaannddaarrddss,, 4400 CCFFRR 779922,, eexxcceepptt tthhaatt bbiillee aacciidd aanndd in compliance with GLPs and wibe rleporlted separately by the Univesityof Dundee. palmmiittooyyll CooAA ooxxiiddasee ddeetteerrmmiinnaattiioonnss ddoonnee bbyy tthhee UUnniivveerrssiittyyooffDDuunnddeeee wweerree nnoott ddoonnee: in compliance with GLPs and will be reported separately by the University of Dundee. TTEESSTT MMAATTEERRIIAALL "Test Material "TTehsettMestamteartiearlia, ammonium perfluorooctancste (APFO), Lot No. 332 (expiration dre: The test material, ammonium perfluorooctanoate (APFO), Lot No. 332 (expiration date: DDeecceemmbbeerr 1155,, 22000011)),, iiss aa wwhhiittee ppoowwddeerr aannddiiss 9955..22%% ppuurree.. IItt wwaass rreecceeiivveedd aatt CCoovvaannccee oonn JJuunnee 1100,, aanndd OOccttoobbeerr 2222,, 11999988.. TThhee tteesstt mmaateterriiaall wwaass ssttoorreedd aatt rroooomm tteemmppeerraattuurree.. tIIennsfftoormrmamtaaettriiiooannl ooi nnossnyynnfttlhheeesswiiisstmmheteththheooSddpsso,,nccsooomrmp.posoTishtiteiiooCnne,,rtooirrfioocttahhteeerroccfhhaAarnraaacclttyeesrriiisssttiiiccsssitnthhAaatptpddeeenffiidnnieextth|hee test material is on file with the Sponsor. The Certificate of Analysis is in Appendix 1. RReesseerrvvee ((AArrcchhiivvee)) SSaammpplleess Stored at room temperature. This sample was transfered to th Sponsor on May 2, 2001. AA rreesseerrvvee ssaammppllee ((11 )g)oofftthhee tteesstt mmaatteerriiaall wwaass ttaakkeenn bbeeffoorree iinniittiiaattiioonnooff ttrreeaattmmeenntt aanndd. stored at room temperature. This sample was transferred to the Sponsor on May 2, 2001. DDTihissepporosesimittaiiioonnning test material was returned on May 2, 2001. The remaining test material was returned on May 2, 2001. 15 15 11881122..00001166 33M UMN0NZ03234433335577 TTEESSTT AANNIIMMAALLSS AANNDD HHUUSSBBAANNDDRRYY CCoonvanneIceMe 66T3229E92-23I311 3M T-6889.3 AAnniimmaallss YYoouunngg aadduulltt ttoo aadduulltt ccyynnoommoollgguuss mmoornkkeeyyss wweerree oobbttaaiinneedd ffrroomm CCoovvaannccee RReesseeaarrcchh PPrroodduuccttss IInncc.. ((DDeennvveerr,, PPeennnnssyyllvvaanniiaa)) oonn AAuugguusstt 2255,, 11999988.. TThhee aanniimmaallss wweerree aapppprrooxxiimmaatteellyy 33 ttoo 77 yyeeaarrssoollddaanndd wweeiigghheedd 33.2.2ttoo44..55 kkgg aatt iinniittiiaattiioonn ooff ttrreeaattmmeennt.t. IIddeennttiiffiiccaattiioonn EEaacchh aanniimmaall wwaass aassssiiggnneedd aa ppeerrmmaanneenntt nnmumnbbeerr uuppoonn aarrriivvaall aanndd iiddeennttiiffiieedd wwiitthhaa ccoollllaarr ttaagg bbeeffoorree iinniittiiaattiioonn ooff ttrreeaattmmeennt.t. AAllllddaattaaffoorraannaanniimmaallaarree rreeccoorrddeedd uunnddeerr tthhiiss nnuummbbere.r. JJuussttiiffiiccaattiioonn AAPPFFOO iiss aa kknnoowwnn hheeppaattiicc ppeerrooxxiissoommee pprroolliiffeerraattoorr ((PPPP)) iinn tthhee rraatt.. W Whheenn eexxppoosseedd ttoo PPPP,, nnoonnhhuummaann pprriimmaatteess ((ssuucchhaass tthhee ecyynnoommoollgguuss mmoonnkkeeyy)) rreessppoonndd ssiimmiillaarrllyy ttoo hhuummaanns.s ((ii.e.., lIooww t1o0.n1o0 hheeppaattiicc rreessppoonnssee)) aanndd tthheerreeffoorree aarree aann aapppprroopprriiaattee hhuummaann ssuurrrrooggaattee ssppeecciieess.. HHuussbbaannddrryy A`Anniimmaall RRoooommss 225533 aanndd 222277 wweerree uusseedd ffoorr tthhiiss ssttuuddyy.. RReeccoovveerryy aanniimmaallss wweerree ttrraannssffeerrrreedd ttooAAnniimmaall RRoooomm 222277 oonn AApprriill 1155,, 11999999 ((DDaayy 1155 ooff rreeccoovveerryy).). EEnnvviirroonnmmeennttaall ccoonnttrroollss ffoorr tthhee aanniimmaall rroooommss wweerree sseett ttoo mmaaiinnttaaiinn 1188 ttoo 2299CC,, aa rreellaattiivvee hhuummiiddiittyy ooff 3300 ttoo 7700%%,, aanndd aa 1122--hhoouurr lliigghhtt//1122--hhoouurr ddaarrkk ccyyccllee.. VVaarriiaattiioonnss ffrroomm tthheessee ccoonnddiittiioonnss aarree ddooccuummeenntteedd iinntthhee ddaattaaaannddaarreeccoonnssiiddeerreedd ttoo hhaavvee hhaaddnnooeeffffeecctt oonn tthhee oouuttccoommeeoofftthhee ssttuuddyy.. T"Thhee aanniimmaallss wweerree hhoouusseedd iinnddiivviidduuaallllyy iinn ssuussppeennddeedd,, ssttaaiinnlleessss--sstteeeell ccaaggeess.. CCeerrttiiffiieedd pprriimmaattee ddiieett ((##88772266CC,, HHaarrllaann TTeekkllaadd)) wwaass pprroovviiddeedd oonnccee oorr ttwwiiccee ddaaliyly.. TThhee Tloott nnuummbbeerrss aarree rreeccoorrddeedd iinn tthhee ddaattaa.. TThhee ddiieett iiss rroouuttiinneellyy aannaallyyzzeedd bbyy tthhee mmaannuufafaccttuurreerr ffoorr nnuuttrriittiioonnaall ccoommppoonneennttss aanndd eennvviirroonnmmeennttaall ccoonnttaammininaantnsts.. RReessuullttss ooffssppeecciiffiieedd nnuuttrriieenntt `aanndd ccoonnttaammiinnaanntt aannaallyysseessaarreeoonn ffiillee wwiitthh CCoovvaannccee--MMaaddiissoonn.. FFrruuiittssoorraaddddititiioonnaall ssuupppplleemmeennttss wweerree pprroovviiddeedd,, bbuutt ddiidd nnoott rreeqquuiirree aannaallyyssisis.. DDuurriinngg tthhee ssttuuddyy,, aanniimmaallss iinn tthhee hhiigghh--ddoossee ggrroouupp wweerree ooffffeerreedd GGaattoorraaddee aass wweellll aass ootthheerr ssuupppplleemmeennttss ttoo rreehhyyddrraattee aanndd ttoo ssttiimmuullaattee ffoooodd ccoonnssuummptpitoionn.. TThhee lloott nnuummbebrsoeoffrtthhsee GGaattoorradaede aarree rreeccoorrddeedd iinn tthhee ddaattaa.. 1166 11881122..00001177 I3MM_MMNND022334433335588 CCoovvaannMccee T663322e99-2233311 3M T-6889.3 `WWaatteerr wwaass pprroovviiddeedd aadd Iliibbiittuumm.. SSaammpplleessoofftthheewwataeterraarree aannaallyyzzeedd ffoorr ssppeecciiffiieedd `mmiiccrroooorrggaanniissmmss aanndd eennvviirroonnmmeennttaall ccoonnttaammininaantnsts.. T"Thheerreessuullttssaarreeoonn ffillee wwiitthh CCoovvaannccee--MMaaddiissoonn.. `TThheerree wweerree nno0 kknnoowwnn ccoonnttaammiinnaannttss iinn tthhee ddiieett oorr wwaatteerraatt lleevveellss tthhaatt wwoouulldd hhaavvee iinntteerrffeerreedd wwiitthh tthhiiss ssttuuddyy.. AAcccclliimmaattiioonn TTwweennttyy--ffoouurr mmaalleess wweerree rreecceeiivveedd oonn AAuugguusstt 2255,, 11999988,, aanndd aacccclliimmaatteedd iinn AAnniimmaall RRoooomm 225533 ffoorr 3355 ddaayyss bbeeffoorree iinniittiiaattiioonnooff ttrreeaattmmeenntt.. IInn ggeenneerraall,, aanniimmaallss iinn tthhiiss sshhiippmmeenntt aappppeeaarreedd hheeaalltthhyy.. DDuurriinngg aacccclliimmaattiioonn,, tthhee aanniimmaallss wweerree eexxaammiinneedd ffoorr aabbnnoorrmmalailtitiieess iinnddiiccaattiivvee ooff hheeaalltthh pprroobblleemmss.. IInn aaddddiittiioonn,, tthhrreeee ttuubbeerrccuulloossiiss teessttss,, aa pphhyyssiiccaall eexxaammiinnaattiioonn,, aanndd aa ffeeccaall fflloottaattiioonn tteestt ffoorr ppaarraassiitteess wweerree ppeerrffoorrmmeedd oonn eeaacchh aanniimmaall.. PPRROOCCEEDDUURREESS "TThhiiss ssttuuddyy wwaass ccoonndduucctteedd iinn aaccccoorrddaannccee wwiitthh tthhee PPrroottooccooll ddaatteedd SSeepptteemmbbeerr 2233,, 11999988,, aanndd PPrroottooccooll AAmmeennddmmeenntt NNooss.. 11 aanndd 22.. TThhee pprroottooccooll,, pprroottooccooll aammeennddmmenetnsts,, aanndd pprroottooccooll ddeevviiaattiioonnss aarree iinn AAppppeennddiixx 11.. GGrroouupp DDeessiiggnnaattiioonnss aanndd DDoossee LLeevveell SSeelleeccttiioonnooffaanniimmaallss ffoorrtthhee ssttuuddyy wwaass bbaasseedd oonn ddaattaa ccoolllleecctteedd dduurriinngg aacccclliimmaattiioonn.. AAnniimmaallss wweerree aassssiiggnneedd ttoo ttrreeaattmmeenntt ggrroouuppss uussiinngg aa ccoommppuutteerriizzeedd bblloocckkiinngg pprroocceedduurere. ddeessiiggnneedd ttoo aacchhiieevvee bbooddyy wweeiigghhtt bbaallaannccee wwiitthh rreessppeecctt tfoo ttrreeaattmmeenntt ggrroouupp.. "17 11881122..00001188 33MM_MMNN0022334433335599 CCoovannMece 66T32209.-)22331 3M T-6889.3 Group DDmogos/seke gLL/eedvvaeyel)l No. of Males G21T (r((oLCCuooopnwnt)trrooll) (mg/kg/day) 030a No. of Males a6b 233 (((MLMioidwd))) 11003 46b c d4a (e HiT~hhy e)dcontrol group (Group 10 )3r0e/0 c2e0ived empt6 y gelain caps6ules. ba b TtTTrwwheeaootaceanodninifmtmoraroall2lss6griiwnoneuGGeprkros(oG,uupprtosshue11npaat1nr)nderade33tcmdedeeienvssteiigdgwnnaeaasmtteedpdditsyaacssognrreetelciacnotoiuvvneeedcrr,yaypaaasnnnudiilmemtasha.lelss wweerree taoarnnceiciammutarealrdlsesfnowwcreeeor2reef6toowobbxessieeeckrrvsve,eeftddfheeffcoontrsrtrrrfeeeovvareterm1rs3sieibbwniiletlieiwttkyya,s,spppdeeorirssssctiirosstetneeatnnitnccmeuee,e,ndtoo,.rr addneedllaatyyheeedd fAoAoncnrciiuAmmrnarailelmnNNacoleo..oN11of00.t55o771x220ic3537eww2fa1faessbcrrteseegppafllonaarccoee1ndd3 Dwwwiaietytehhk1AAs7nnp(iioOmmscatattllroeNNbaoeto.rm. e1II05n0,55t.771229191.8.).DDoossiinngg d DafDoonorsdsAiirnnenggiinmffiootairrlaGGNterrodoo.auut1pp0254407ww2ma1gas/sbkessgugu/ssadppnaeeyonnnddoeenDddDaooyanny1DD72aa2(yyO(1cO122tcot((boOOebcrcettr1oo52bb,0ee,r1r911199008,9,8).1)1.999988)) and reinitiated at 20 mg/kg/day on Day 22 (October 20, 1998). DDoossiinngg PPrroocceedduurreess GGeellaattiinn ccaappssuulleess ((TToorrppaacc,, IInnc..,, FFaaiirrffiieelldd,, NNeeww JJeerrsseeyy)),, SSiizzee NNoo.. 22,, LLoott NNoo.. 112222993322 wweerree uusseedd ffoorr ddoossee aaddmmininisisttrraattiioonn.. EExxppiirraattiioonn ddaatteess ffoorr tthhee eemmppttyy ggeellaattiinn ccaappssuulleess aarree m`maaiinnttaaiinneedd iinn tthhee rraaww ddaattaa.. T"Thhee tteesstt mmaatteerriiaall wwaass ddiissppeennsseedd iinnttoo ccaappssuulleess aatt leeaasstt wweeeekklyly.. TThhee ddoossee lleevveellss wweerree bbaasseedd oonn tthhee tteesstt mmaateterriiaall aass ssuupppplilieedd.. FFoorr GGrroouuppss 22 tthhrroouugghh 44,, tthhee ssppeecciiffiieedd aammoouunntt ooff tteesstt mmaatteerriiaall wwaass wweeiigghheedd aanndd ttrraannssffeerrrreedd iinnttoo tthhee ggeellaattiinn ccaappssuulleess.. TThhee toopp aanndd bboottttoomm hhaallvveessooffceaacchh ccaappssuullee wweerree jjooiinneedd,,aanndd tthhee ccaappssuulleess wweerree ppllaacceedd iinnttoo tthhee aapppprroopprriiaatteellyy llaabbeelleedd ccoonnttaaiinneerr.. TThhee pprreeppaarreedd ccaappssuulleess wweerree ssttoorreedd aalt rroooomm tteemmppeerraattuurree.. M Meetthhoodd ooff AAddmminiinsitsrtraattiioonn.. GGeellaattiinn ccaappssuulleess wweerree aaddmmiinniisstteerreedd oorraallllyy ttoo ccoommppaarree wwiitthh pprreevviioouussllyy ccoonndduucctteedd ttooxxiiccoollooggyy ssttuuddiieess uussiinngg tthheeoorraallrroouutete.. T"Thhee ddoossee pprreeppaarraattiioonnss wweerree aaddmmininiisstteerreedd oorraallllyy iinn ggeellaattiinn ccaappssuulleess oonnccee ddaaiillyy,, 77 ddaayyss//wweeeekk,, ffoorr aatt lleeaasstt 2266 wweeeekkss ((118833 ddaayyss)) eexxcceepptt tthhaatt AAnniimmaall NNoo.. 110055772211 ((GGrroouupp 22 rreeppllaacceemmeenntt aanniimmaall)) iinniittiiaatteedd ddoossee aaddmmininisisttrraattiioonn oonn DDaayy 1177 aanndd tthhee aanniimmaallss iinn GGrroouupp 44 wweerree nnoott ddoosseedd oonn DDaayyss 1122 tthrhourgho221u1;;dgdooshsee aaddmmininisisttrraattiioonnwwaassalaslsoo ddiissccoonnttiinnuueedd ffoorr AAnniimmaall NNooss.. 110055771111,, 110055772222,, aanndd 110055770033 ((GGrroouupp 44)) oonn DDaayyss 4433 ((WWeeeekk 77)),, 6666 ((WWeeeekk 1100)),, aanndd 8811 ((WWeeeekk 1100)),, rreessppeeccttiivveellyy ((sseeee PPrroottooccooll DDeevviiaattiioonnss ffoorr eexxcceeppttiioonnss)).. IInnddiivviidduuaall ddaaiillyy ddoosseesswweerreecaclaclcuullaatteedd bbaasseedd oonn tthhee mmoosstt rreecceennttllyy rreeccoorrddeedd bbooddyy wweeiigghhttss,, wwiitthh tthhee eexxcceeppttiioonnooffbbooddyy wweeiigghhtt ccoolllleeccttiioonn ddaayyss wwhheenn tthhee pprreevviioouuss bbooddyy wweeiigghhtt wwaass uusseedd.. 18 11881122..00001199 33MM_MMNN0022334433336600 CCoovvaann3cceMe 66T33622998.-22933311 3M T-6889.3 DDoossee AAnnaallyysseess BBeeccaauussee tthhee tteesstt mmaateterriiaall wwaass nnoott mmiixxeedd wwiitthh aa vveehhiiccllee,, ddoossee aannaallyysseess wweerree nnoott rreeqquuiirreedd.. OObbsseerrvvaattiioonnooffAAnniimmaallss CClliinniiccaall OObbseserrvvataitioonnss..TThheeaanniimmaallss wweerreeoobbsseerrvveedd ttwwiiccee ddaaiillyy ((aa..mm.. aanndd pp..mm.)) ffoorr m`moorrttaalliittyy aanndd mmooriribbuunndidtiyty.. AAnniimmaallss wweerree oobbsseerrvveedd aatt lleeaasstt oonnccee ddaaiillyy ((aa..mm.))ffoorrssiiggnnss ooff ppoooorr hheeaalltthh oorr aabbnnoorrmmaallbbeehhaavivoiorraanndd ffoooodd ccoonnssuummppttiioonn wwaass aasssseesssseedd qquuaalliittaattiivveellyy;; oonnllyy aabbnnoorrmmaall ffiinnddiinnggss wweerree rreeccoorrddeedd.. AAnniimmaallss wweerree oobbsseerrvveedd oonnccee wweeeekkllyy;; aabbnnoorrmmaall ffiinnddiinnggss oorr aann iinnddiiccaattiioonnooff nnoorrmmaall wwaass rreeccoorrddeedd ((sseeee PPrroottooccooll DDeevviiaattiioonnss ffoorr eexxcceeppttiioonnss)). OOpphhtthhaallmmoollooggyy.. OOpphhtthhaallmmiicc eexxaammiinnaattiioonnss wweerree ddoonnee oonn eeaacchh aanniimmaall bbeeffoorree iinniittiiaattiioonn ooffttrreeaattmmeenntt aanndd dduurriinngg WWeeeekkss 2277 aanndd 4400 ((rreeccoovveerryy)).. TThhee ppuuppiillss wweerree ddiillaatteedd wwiitthh 11%9% MMyyddrriiaaccyyl aanndd tthhee aanntteerriioorr ppootrtiioonnooff tthhee eeyyee,, ooppttiicc mmeeddiiaa,, aanndd ooccuullaarr ffuunndduuss wweerere. eexxaammiinneedd wwiitthh aan iinnddiirreecctt oopphhtthhaallmmoossccooppee.. Body Weights. Individual body weight data were recorded weekly before iitation of tBroeadtymeWnte,igohntst.heIfnidrsitviddauyaolfbtordeyatwmeenigt,htadnadtaweweekrleyrtehceorredafetderw. eeAknlyadbdeiftoiroenailnibtioadtiyon of twreeiagtmhtenwta,sonretchoerdfierdstodnayDaoyf t-r1efaotmrtehnet,Daanyd w1 deoeksleyctahlecruelaatftieorn.s.An additional body weight was recorded on Day - 1 for the Day 1 dose calculations. BBlloooodd HHoorrmmoonnee DDeetteerrmmiinnaattiioonn BBlloooodd wwaass ccoolllleecctteeddffrroomm aa ffeemmoorraall vveeiinn oofef eaacchh aanniimmaall tthhreeee ttiimmeess bbeeffoorre iinniittiiaattiioonn of of ttrreeaattmmeenntt ((DDaayyss -+1188,, -88,, aanndd 4-4))aanndd oonn DDaayyss 3355,, 6666,, 9944,, aanndd 118833 ooff ttrreeaattmmeenntt aanndd oonn DDaayyss 222200,, 224488,, aanndd 227766 dduurriinngg rreeccoovveerryy.. AAnniimmaallss wweerree nnoott ffaasstteedd bbeeffoorree ccoolllleeccttiioonnss.. AApppprrooxxiimmaatteellyy 66 mmLLooffbblloooodd ffoorr ppllaassmmaa ssaammpplleess wwaass ccoolllleecctteedd iinnttoo ttuubbeess wwiitthh ppoottaassssiiuumm EEDDTTAA aass tthhee aannttiiccooaagguulalantn.t. BBlloooodd ssaammpplleess ffoorr ppllaassmmaa wweerree mmaaiinnttaaiinneedd cchhiilllleedd uunnttiill ppllaassmmaa wwaass hhaarrvveesstteedd ((sseeee PPrroottooccooll DDeevviiaattiioonnss ffoorr eexxcceeppttiioonnss)). AApppprrooxxiimmaatteellyy 66 mmLL ooffbblloooodd ffoorr sseerruumm ssaammpplleess wwass ccoolllleecctteedd wwiitthhoouutt aannttiiccooaagguullaanntt aanndd aalllloowweedd ttoo cclloot.t. BBlloooodd ssaammpplleess ffoorr sseerruumm wweerree mmaaiinnttaaiinneedd aatt rroooomm tteemmppeerraattuurree uunntlil sseerruumm wwaass hhaarrvveesstteedd.. SSaammpplleess ffoor sseerruumm wweerree cceennttrriiffuuggeedd wwiitthhiinn 11 hhoouurr aaffteerr ccoolllleeccttiioonn,, aanndd sseerruumm wwaass hhaarrvveesstteedd.. S`Seerruumm wwaass ddiivviiddeedd iinnttoo ttwwoo aapppprrooxxiimmaatteellyy eeqquuaall aalliiqquuoottss aanndd Ssttoorreedd iinnaa ffrreeeezzeerr,, sseett ttoo mmaaiinnttaaiinn --6600 ttoo --8800CC,, uunnttiill ppaacckkeedd oonn ddrryy iiccee aanndd sshhiippppeedd ttoo AAnnii LLyyttiicss IInncc..,.ffoorr aannaallyysseess.. TThhee sseerruumm ssaammpplleess wweerree aannaallyyzzeedd ffoorr eessttrraaddiiooll ((EE22))., eessttrroonnee ((EEIl)),, eessttrriiooll ((EE33)),, tthhyyrrooiidd ssttiimmuullaattiinngg hhoorrmmoonnee ((TTSSHH)),, ttoottaall aanndd ffrreeee: 1199 11881122..00002200 I3MM_MMNN0022334433335611 CCoovvnacnhceie 6T33262993.-22933131 3M T-6889.3 twrriiioioddootthhyyrroonniinnee ((TT33 aanndd FFTT3,, rreessppeeccttiivveellyy)),, ttoottaall respectively). Ress ofthese analyses provided baanynddAnffrrieeeeLyttthhiyycrrsooxxIiinncn. (T4 (Tar4e and FT4, ainndAp17pIe"4n,dix 5. respectively). Results of these analyses provided by Ani Lytics Inc. are in Appendix 6. SSaammpplleess ffoorr ppllaassmmaa wveerree harvestedand stored ian centrifuged within 1 hour afer collection. rceentsrizfuesgeerdt,owimtahiinnt1aihno-u6r0aft0er80colCle,cutionnl. Plasia was pPaclaksemdaown adsry ice and shhairvppeestdedtoaDnudPsotnotredfoirnaanaflryeseezs.er,Tshetetoplmasaminatasianmp-6le0stowe-r8e0aCn,aulynztieldpbayckDeudPoonntdroyrice and cschhhoiopllepecceyydsstttoookkDiinnuiiPnn.o. nRRtefesosurulkatnssaoolyfftsthehese.sseeTaahnneaallpyylssaeesssmpparrosoavvmiiddpeelddesbbyyweDDruuePPaoonnnattlyaazrreeediinnbyAApDpppueePnndodinixxt f77o..r Because the decision to analyze bloodfo testosterone (TESTOS) was made afer the tBtceeoerrlmclmaeiiucnntasaiellontsshaaicecnrrtdiiefferiiccvcieaes,l,isoawannnataasolliitaqqrnuuaaoontltsyfoozefpferlprbelaladossofmmdraaofmoffrrrDootumemPsptopornrseettssetttruuooddnAyyeanain(nTdLdEyDDStaiTaysyOssISn33)c55.,w, o6a66sr6,,ma99n4a4a,dl,eyaasnnaiddfsteo11rf88t33he cteosltloesctteioronnei.nteIrvnaaldsdiwtiaosnt,rasnesrfuemrresdamfprloems DcoulPleocnttedtodAurniinLg yrteiccosvIenrcy. (foDrayasna2l2y0s,is2o48f, taensdto2s7te6r)onwee.reInalasdodaintiaolny,zseedrufmor steasmtopslteesrocnoe.llecRteesduldtusorinfgthreesceovaenrayly(sDeasypsr2ov2i0d,e2d4b8y, AAannndii 2LL7yy6iti)ccsws eIInnrcec.. arealso are iiannnaAAlpyppzpeeendnddfiioxxr 6.testosterone. 6. Results of these analyses provided by `Serum APFO Level Determination SA`AepprppurrmooxxiiAmmPaatFteeOllyyL22emmveLLl Dofetwehromleinbaltoioodn of whole blood were were collected collected froma from a femoral femoral veinofeach vein of each animal animal ddaunurdriinrngegcWWoveeeereykk.22I((naafaftdeedrrit77idodnaa,yyssbolofofotrdrcewaaattmmseecnnotlt))leaacnntddedeevfvererroyym22Anwwieemeeakklss Ntthhoee.rree1aa0ff5ttee7rr24dduu(rrGiinrnogguttprree4aa)ttmtmheeannttt awnadsrseaccorvifeircye.d Iinn amdodriitbiounn,dbcloonodditwioans.coAlnliemctaeldsfwroemreAnontimfaisltNedo.be1f0o5r7e2c4ol(lGecrtoiuopns.4) tAhlalt wsaamspslaecsriwfeicreedcionllmecotreibd uwnidthcoountdaintitoinc.oaAgunliamn:a,lsmwaeirenntotaafaitstnoedoembdeftoermepecroallteucrteio, nasn.d All asaalllmloowpwleeedds twoecrleot.colSleacmtpeldews iwtheroeutcaennttiicofuaggeudlanwit,thminai1nthaoinuerdaafttrrocoomlletcetmiopne,rasteurrue,m to clot. Samples were centrifuged within 1 hour after collection, serum awnad s was hhaarrvveesstteedd aanndd ssttoorreedd iinnaa ffrreeeezzeerr,, shipped to 3M for analyses. The ssseaettmpttoloemmsaaiwinnetrtaaeiinnan--1a1l00yttzooed--33f00orCCA,,PuuFnnOtti,ill packed on dry pRaecskueldtsoonfdtrhye ce ice and and asnhaiplpyseedstowil3lMbeforreaponratlyedsesse.paTrhateeslaymbpyle3sM.were analyzed for APFO. Results of the analyses will be reported separately by 3M. Urine and Feces APFO Level Determination U`SraimnpeleasondfuFreicnees (AaPlFeOasL2temvLel)Daentderfmeciensa(tiaonleast grams,see Protocol Deviations for eSxacmepptlieosnos)f uwreinree (caotllleeactsetd2fmroLm) eaancdhfaecneisma(latdlueraisntg5Wgeraemks2, s(eaefePrro7todcaoylsoDfevtieaatitomnesntfo)r aexncdeepvteiorny2s) wweeerekscotlhleercetaefdtefrrodmurienagchtraenaitmmeanltduarnidngreWcoeveekry2((caofntceurr7rednatyswiotfhtrseeartmument) AaPnFdOevsearymp2lweeceokllsetchtieorne)a.fteArndiumrailnsg twreeraetmneotntfaanstdedrebceofvoerreyco(clloencctiuornrse.nt Uwriitnhes(ecroulmlected oAnPwFeOt siacme)palnedcfoelcleecstwioenr)e. cAonlilmctaelsdwoveerreningohtt.fasUterdinbeefaonrde fceoclallecstaiompnls.esUwreinree (sctoolrleedctienda ofrneewzeert,icseet) taondmafiencteasinwe-re1ct0ooll-e3c0teCd,ouvnteirlnipgahctk.eUd roinnerayndicfeecaanldssahmipppleesd w10e3reMstoforred in a freezer, set to maintain -10 to -30C, until packed on dry ice and shipped to 3M for 220 11881122..00002211 33MM_MMNNo022334433336622 CCoovvaannIecMse 66T33622998--22933311 3M T-6889.3 aannaallyysseess.. TThhee ssaammpplleess wweerree aannaallyyzzeedd ffoorr AAPPFFOO,. RReessuullttssoofftthhee aannaallyysseess wwiillll bbee rreeppoorrtteedd sseeppaarraatteellyy bbyy 33MM.. CClliinniiccaall PPaatthhoollooggyy BBlloooodd aanndd uurriinnee ssaammpplleess wweerree ccoolllleecctteedd ffrroomm eeaacchh aanniimmaall bbeeffoorree iinniittiiaattiioonn ooff ttrreeaattmmeenntt;; bbeeffoorreetthheeddaaiillyyddoossee oonnDDaayyss3311,, 6633,, 9911,, aanndd 118822;;aanndd oonn DDaayyss 221177,, 224455,, aanndd 227755 dduurriinngg rreeccoovveerryy.. AAnniimmaallss wweerree ffaesstteedd oovveerrnniigghhtt,, aanndd uurriinnee wwaass ccoolllleecctteedd oonn wweettiicceeoovveerrnniigghhtt ((aapppprrooxxiimmaatteellyy 1166 hhoouurrss)) bbeeffoorree bblloooodd ssaammpplliinngg:; wwaatteerr wwaass pprroovviiddeedd aadd lliibbiittuumm.. BBlloooodd wwaass ccoolllleecctteedd ffrroomm aa ffeemmoorraall vveeiinn.. AAnnttiiccooaagguullaannttss wweerree ssooddiiuumm cciittrraattee ffoorr ccooaagguullaattiioonn tteessttss aanndd ppoottaassssiiuumm EEDDTTAA ffoorr hheemmaattoollooggyy tteessttss.. Samples for clinical chemistry were: Samples for clinical chemistry were ccoolllleecctteedd wwiitthhoouutt aannttiiccooaagguullaanntt.. BBlloooodd ssaammpplleess wweerree ccoolllleecctteedd ffrroomm aanniimmaallss ssaaccrriiffiicceedd aatt aann uunnsscchheedduulleedd iinntteerrvvaal.l. AAnniimmaallss wweerree bbileedd iinn rraannddoomm oorrddeerr.. TThhee ffoolllloowwiinngg wweerree: eevvaalluuaatteedd.. red blood cell (erythrocyte) count HHeemmaattoolloodggifyyferential blood coll count hheerhemmedamotgboollgcoolroobidbiticnnell (erythrocyte) count disIfsfeeyeggmrmmpeehnenotnitcateeslddtbelnnoeceououdtutrrncootepphlhliilcloccuoonuutnntt hmeemanatcoocrrpituscular volume lmyomnopchyotceytceocuonutnt mmmmeeeeaaaannnn ccccoooorrrrppppuuuussssccccuuuullllaaaarrrr hhvheeeemmmluooomgggllelooobbbiiinnn omesooisninnooocppyhhiteillcccooouuunnnttt basophil count mceoanncecnotrrpautsicounlar hemoglobin blboaosdocpehlill mcoorupnht ology pwplhlacaitotteenellecebtetlnccotoooruuadntnitctoenll (leukocyte) count reticulocyte count blood cell morphology reticulocyte count white blood cell (leukocyte) count prothrombin time CCooaagguullaattiifooinnbrinogen apaccrtotiitvhvaarttoeemddbppiaanrrtttiiiaamll etthhrroommbboopplalassttiinn ttiimmee fibrinogen 221 11881122..00002222 I3MM_MMNND022334433336633 CCoovvaanMnceTe 66633822989-2933311 3M T-6889.3 glucose guucrrlrueeeacaatoinnsniieittrnroeoggeenn tcorteaaltipnrionteein agltaloblobtubauulmmlpiiirnnontein tgoltoablubliilnirubin trtccoihhgtooallllyeecsbsteitlereirirrooudlelbsin atrsipgalrytcaetreidaemsinotransferase aaaallslakapannaliirnintnaeeeteaapmmahimoinnsoioptnhtroraaattnrnaassnsffeeserfreaarssaeese alkaline phosphatase CClliinniiccaall CChheemgmiasismttmrryya gloamyransferase scgsoroarermbabitmititoonallegddklieeunhhatyyasdemd.rryoolggtereannnaasssfeeerase ccarelactiinuem kinase ciisnnaoooldcrrigiguuaammnniicc pphhoosspphhoorruuss cpsphoooldttoaairussismsdiiueomm bcabimhillyleeolaraasiccdeiie:ddss lapliiamppnaacyssreleae:asteic-specific amylase: pancreatic-specific amylase vsvpooellcuuimfmieec ((gaarppapvpirrtooyxxiimmaatteellyy 1166 hhoouurrss)) specific gravity prpmoMHtein gpgklerluuotccotoeonisesnese ketones UUrriinnaallyyssbiiisslirubin blood bilirubin blood uumriroocbbrioillsiicnnooopggieecnnexaminationofsediment maappippceeraoarsracanonccpeeic examination of sediment `Additional Blood Collection `AWdhdoliteiobnlaool dB(loaopdprCoxoilmleactteiloyn19 mL) was collected from the vena cavaof eachanimalat W thehotliemebolfooedxs(aanpgpurionxaimtiaotnel(ysc1h9edmuLle)dwaansdcuonllsecchteedduflreodmsatchreifviceensa).caAvpaporfoxeaicmhataenliymeaqluaatl sthiezetdimsaemopfleexssoafngseurinuamti[oanpp(srcohxeidmautleedlya7ndmuLns(cchoelldeuclteedd swaictrhiofiuctesa)n.tiAcopapgruolxainmt)a.tewlyhoelqeual bsilzoeodds(aamppprloexsiomfatseelruym5m[Lap)p,raonxdimpaltealsym7a (maLpp(rcooxlliemcatetdelwy7itmhoLu)t uasnitnicgopaogtualsasnit)u]m, wEhDoTleA balsotohde (aanptpicrooaxgiumlaantetlywe5remtLr)a,nasnfedrrpeldasimtao(caopnptaroinxeimrsaatenldys7tomreLd)iusianfgrepeozetar,sssieutm10EDTA amsaitnhteaainnt-ic6o0atgou-la8n0tCw,eurnetitrlanpasfcekrerdedonindtorycoicnetaainndersshainpdpesdtotroe3d Min faorfrpeoeszseirb,lseetfuttoure. manaaliynstiasi.n -6In0atdodi-t8i0onCo, utnhteilrpeaqcukireeddobnlodordy sicaempalneds,shaidpdpiteidontoal3wMhofloer pbolossoidble future a(napaplyrsoixsi.maItnealdyd4it0iotno t8o0thmeLJreaqnuiimread)bwlaosodcoslalmecptleeds,faidodmtithioenaanliwmahlosleibnltohoecdontrol group a(taptphreotxeirmmainteallys4ac0ritofic8e0umsiLn/gansiomdialu)mwhaespacroilnleacsteadnfarnotmicothageualannitm.alOsnien-hthaelfcoofntrtohilsgroup satamthpeletewrmasintarlasnascferirfriecdenutsoingcrsyoodtuiubmes haenpdarpionolaesd.anTahneticroeamgauilnainntg. hOalnfeo-fhtahlef osfatmhpisle was csaenmtprilefuwgeads atrnadnstfheerrpeldasinmtaoacnrdyorteudbbesloaonddcpeloloslweedr. eTthreanrsefmerariendinignthoaclrfyoofttuhteessaamndple was pcoeonlteridf.ugTehdeanpdootlheedpslaamspmlaesanwderreedsbtoloreoddicneallsfrweeezreer,trsantsfe0rmreadinitnationc-r6y0ot1u0b-e8s0anCd, until ppaocokleedd. oTnhderypoioceleadnsdasmhpilpepsedwe0re3sMtofreord pinosasifbrleeezfeurt,usreetatnoalmysaiisntain -60 to -80C, until packed on dry ice and shipped to 3M for possible future analysis. 222 11881122..00002233 I3MM_MMNN0022334433335644 CCoovvaannccee 66T33622980-22933311 3M T-6889.3 AAnnaattoommiicc PPaatthhoollooggyy Necropsy. Anecropsy was done on each animal that was sacrificed at an unscheduled Ninetecrrvoapl.syA.ftAern2ec6rowpeosykswofatsrdeoantemeonnt,eafcohuranainmimaalltsh/agtrwouaps sinacGrrifoiucepds 1at tahnrouungshch3eadnudledall isnutrevrivvailn.gAanftiemra2ls6 iwneGerkosuopf t4rewaetrmeefnats,tfeoduorvaenrnimigahlts,/gtrhoeunpainnesGthroetuipzsed1 wthirtohukgehta3mainnde aalnld sxuylravziivnine,g waeniimghaelds,inexGsaronguupin4awteedr,e afnadstendecorvoeprsniiegdh(t,setheePnroatnoecsotlheDteizvieadtwioinths forketamine and xexycleapztinioen,sw).eigAfhteedr, 2ex6swaenegkusinoaftterde,aatnmdenntecarnodps1ie3dw(eseekesPwriottohocuotl Dtreevaitamteinotn,s for etxwcoeapntiiomnasl)s./gArfotuepr 2in6Gwroeeukpss 1ofatrnedat3mweenrteanfdast1e3dwoveeerknsigwhtit,hothuetntraenaetsmtheentti,zed with tKwetoaamninime aalnsd/gxroyluapziinneG, rwoeuipgshe1d,anedxs3anwgeurienaftaesdte,daonvdenrencirgohpts,itehde.n aAnneismtahlestizweedrewith kneectarmopisnieedanidn rxyalnadzoinmeo, rwdeeri.ghed, exsanguinated, and necropsied. Animals were necropsied in random order. `TThhee nneeccrrooppssyy iinncclluuddeedd aa mmaaccrroossccooppiicc eexxaammiinnaattiioonnoofftthhee eexxtteerrnnaall ssuurrffaacceeoofftthhee bbooddyy:; lalll oorriiffiicceess;; ccrraanniiaall ccaavviittyy;; tthhee bbrraaiinn aanndd ssppiinnaall ccoorrdd;; tthhee nnaassaall ccaavviittyy aanndd ppaarraannaassaall ssiinnuusseess;; cceerrvviiccaall ttiissssuueess aanndd oorrggaannss;; aanndd tthhe tthhoorraacciicc,, aabbddoommininaall,, aanndd ppeellvviicccacvaivtitiieessaanndd vviisscceerraa. `OOrrggaann WWeiegighthsts.. AAtt eeaacchh sscchheedduulleedd aanndd uunnsscchheedduulleedd ssaaccrriiffiiccee,, tthhee ffoolllloowwiinngg oorrggaannss ((wwhheenn pprreesseenntt)) wweerree wweeiigghheedd;; ppaaiirreedd oorrggaannss wweerree wweeiigghheedd sseeppaarraatteellyy.. adrenal 2) brebaapdraiiriednnniadlym(2i)s (2) keKpiiddidnnieedyyym((22)i)s (2) llpiiavvneecrrreas tpeasnticsre2a)s ttthehsyytrriosoiid(d2)((22)) wwiitthh ppaarraatthhyyrrooiidd OOrrggaann--ttoo--bbooddyy wweeiigghhtt ppeerrcceennttaaggeess aanndd oorrggaann--ttoo--bbrraaiinn wweeiigghhtt rraattiiooss wweerree ccaallccuullaatteedd.. PPaallmmiittooyyli CCooAA OOxxiiddaassee DDeetteerrmmiinnaattiioonnss "TThhee rriigghhtt llaatteerraall lloobbee ooflfilivveerr wwaass ccoolllleecctteedd ffrroomm eeaacchh aanniimmaall aatt tthhee sscchheedduulleedd aanndd uunnsscchheedduulleedd ssaaccrriiffiicceess.. TThhee ssaammppllee wwaass wweeiigghheedd,, ffllaasshh--ffrroozzeenn iinn lliiqquuiidd nniittrrooggeenn,, aanndd ssttoorreedd iinnaa ffrreeeezzeerr sseett ttoo mmaaiinnttaaiinn --6600 ttoo --8800CC tthheessee ssaammpplleess wwiillll bbee ppaacckkeedd oonn ddrryy cicee aanndd sshhiippppeedd ttoo tthhee UUnniviervsiteyoroffsDDuiunntddeyeee ffoorr ppaallmmiittooyyll CCooAA ooxxiiddaasseeaaccttiivviittyyaannalaylyssees.s. RReessuullttss ooff ppaallmmiittooyy]l CCooAA ooxxiiddaassee aaccttiivviittyy aannaallyysseess wwiillll bbee rreeppoorrtteedd sseeppaarraatteellyy bbyy tthhee UUnniivveerrssiittyy ooff DDuunnddeeee.. CCeellll PPrroolliiffeerraattiioonn EEvvaalluuaattiioonn RReepprreesseennttaattiivvee ssaammpplleess oofftthhee lleeftt llaatteerraall lloobbee ooff tthhee ilivveerr,, lJeeftt aanndd rriigghhtt tteesstteess,, aanndd ppaannccrreeaass wweerree ccoolllleecctteedd ffrroomm eeaacchh aanniimmaall aat tthhee sscchheedduulleedd aanndd uunnsscchheedduulleedd ssaaccrriiffiicceess 223 11881122..00002244 I3MM_MMNN0022334433336655 CCoevvaannSecsMe 66T33622989--822933311 3M T-6889.3 aanndd pprreesseerrvveedd iinn zziinncc ffoorrmmaalliinn (unscheduled (unscheduled sacrifices sacrifices and and for for animals animals sacrificed sacrificed during during W `Weeeekk 2277)) oorr ffoorrmmaalliinn ([aanniimmaallss ssaaccrriiffiicceedd during during Week Week 40 40 (sce (see Protocol Protocol Deviations Deviations for for exceptions). Afer fixation, samples for proliferation cell nuclear antigen (PCNA) eevxacleupattioionns)w].erAefetemrbfe'tdxdaetidoni,nspaamrapflfeisnfaonrdprmoaliifnetraaitnioend catelalmnbuicelnetarteamnptiegreantu(rPeC(NwAit)h slides estvaailnueadtiowinthwehreemaetmoxbyeldidnedanind peoasrianff)inunatinldsmhiapipnetadinteodPaatthaomlobgieynAtstseomcipaetreast,urAe C(whaitrhlesslides RistvaeinredCowmipthahneymfaotroxPyCliNnAanadnaeloysseins). uRnetsilulsthsiopfpetdhetoePvaalthuaotlioognypArosvsiodceiadtebsy, APatChhoalrolgeys RAsisvoecriaCtoems,pAanCyhfaorrlePsCRNiAveranCaolymspeasn. yRaerseulitns oApfptheendeivxal8u. ation provided by Pathology Associates, A Charles River Company are in Appendix 8. BBiillee AAcciidd DDeetteerrmmiinnaattiioonn All available bile (up to 5 mL) was collected from each animal at the scheduled and. uAnlslcahveadiulalbeldesbaiclreif(iucpest,of5lamshL-)frwozaesncionllleicqtueidd fnriotmrogeeanc,haanndimstaolreadt tihnea sfcrheeedzuerlesdetantod umanisncthaeidnul-e6d0 staoc-ri8f0iceCs:,tfhleasseh-sfaromzpelnesinwelirqeuipdanckiterodgoenn,daryndicsetoarneddsinhiappferedetzoerthse:et to mUnaiivnetrasiint-y6o0ftoDu-n8d0eCe;ftohrebsielesaamcipdldeestweremrienaptaicokn.ed oRensudlrtysiocfe tahnedbsihleipapceidd tdoettheremination UwinlilvbeersriteypoorfteDdusnedpeaeraftoerlybibley atchiedUdnievteerrmsiitnyaotifonD.unRdeees.ults of the bile acid determination will be reported separately by the University of Dundee. RReecceeppttoorr LLeevveell DDeetteerrmmiinnaattiioonn `Samples (approximately 2 & each)ofthe liver (let median lobe) and pancreas were. cSoalmlepclteesd(farpopmroexaicmhaatenliyma2lga etahcehs)cohfetdhuelleidvearn(dleuftnsmcehdeidaunlelodbsea)crainfdicepsa,nfclreasahs-wfreorzeen in clioqluleidctneidtrforogemn,eaanchd satnoirmeadliant thfereseczhere,duselted0anmadiuntnasicnhe-d6u0letod -s8a0criCfiucnetsi,lfplaaschk-efdrooznendriny ilicqeuaidndnsihtiropgpeend,taondDustPoornetd ifnorapfo~seseizbelre, asneatltyosims.ainRteasiunlt-s6o0ftroec-8e0ptCorulnetviellpdaectkeerdmionnatdiroyn, ificaenayn,dwsihllipbpeedretpoorDtuedPosneptafroatreplyo.ssible analysis. Results of receptor level determination, if any, will be reported separately. LLiivveerr AAPPFFOO DDeetteerrmmiinnaattiioonn A section of iver (a nor-formalin treated liver sample) was collected from cach animal at Athesesccthioednuolefdlivsaecrr(iafinceone-nfdorumnsaclihnedtruelaetdedsalcivriefricseasm, pwleei)gwheads,coflllaescht-efdrofzreonminealicqhuiadnimal at tnhietrsocghene,dualnedd sstaocrreidficine aanfdreueznesrc,hseedtutloedmasianctraifiince-s6,0wte0ig-8h0edC,,fluanstihl-fpraoczkeendinonliqduriydice and snhitirpopgeedn,toan3dMstfoorredAPinFaOfarenaelzyesr,ess.etRteosmulatisnotfainth-e60antaoly-s8e0sCwi, lunbteilrpeapcokretdedosnepdarryaticeleyabnyd 3M.shipped to 3M for APFO analyses. Results of the analyses will be reported separately by 3M. TTiissssuuee PPrreesseerrvvaattiioonn.. TThhee ffoolllloowwiinngg ttiissssuueess ((wwhheenn pprreesseenntt)) or or representative representative samples samples wweerree ccoolllleecctteedd aanndd pprreesseerrvveedd in in 10% 10% neutral-buffered neutral-buffered formalin, formalin, unless unless otherwise otherwise ssppeecciiffiieedd.. 22u4 ) I3MM_MMNND022334433336666 11881122..00002255 aoaarddrtreeannaall 2) (2) bcbareoraacriitunnam dcuccooeolcldoounnemnum eseedoppuiipoddhdiidaednygyummumisiss 2(2)) eeeysyoeepssh[[appgrreuessseerrvveedd iinn DDaavviiddssoonn''ss feffmiixuxaarttiwivvieethJ(2b])]one marrow (articular fesmurufrawceitohfbtohneedilnstaarlroewnd)(articular hgegaaalsllrulbbtrlflaaacddeddeeorrf the distal end) ijlhieeleejuauumrmnt um ljekKesiijdidunonneneuysym((22)) llillueivvnseeigror ns llIuyynmmgpphh nnooddee ((mmeesseenntteerriicc)) Covance 6329231 Covance 6329-231 M63 3M T-6889.3 `mpmaanamcmrmmeaaarsryy ggllaanndd ppppriaiottnusuctiiatrtateaerary.ys rrpseearclocitstuvtuamamrtey gland [mandibular (2)] ssssccaeiilmaaiivttniiaccarlynneevgrrelvvsaeeincdle[m(2a)ndibular (2)] sssskekkemielnleienttaaalll mvmueusssicccllleee (((2tth)hiigghh)) ssspkpiliinnnuaamllbaccroo)rrdd ((cceerrvviiccaall,, tthhoorraacciicc,, aanndd ssspptlllueeemmeennubmarw)ith bone marrow stssetttsoeotrmimnsaua[ccm(hh2)wpitrhesbeornveedmianrBroowuin'ssolution] ttttehhhsyyytrmimsouui[sds(2()2)prweistehrvpeadraitnhyBrooiudin's solution] tttuhrrrayaiccrnhohaeeridaay (2) bla with dder parathyroid urinary bladder TThhrreeee ssaammpplleess ((aapppprrooxxiimmaatteellyy 55 gg eeaacchh))ooff tthhee lliivveerr aanndd aallll rreemmaaiinniinngg ppaannccrreeaass aanndd lleefftt and right testes issue divided into three approximately equal samples) were collected farnodmreigahcthteasnteismtaisasueth(edisvcihdeeddulinetdoatnhdreuenaspcpherodxuilmedatsealcyriefqiuceasl,swaemipghleesd).wlearseh-cforlloezcetnedin flrioqumidenaicthroagneinm, aalnadt sthtoerescdhiendaulferdeeaznerd,usnetscthoemdauilnetdaisnac-r6if0icteos,-8w0eiCg,hfeodr, pfolsassihb-lfreofzuetnurien lainqauliydsins.itroIngeandd, iatnidons,toarfeedr ianllaoftrheeerzerre,qusiertetdo smaamipnlteasinw-e6r0ettoak-e8n0,Cre,mfaoirnpionsgsikbildenfeuytutriessue awnaaslycsoilsl.ecItnedadfdriotimonth, eafctoenrtarlolloatnhiemrarlesquatirtehde staemrmpilneaslwsaecrreitfaikceen(,Wreeemkai2n7)i.ngTkhiedsneeytitsisssuuese wwweaersreecwwoelelieiggchhteeeddd,,frffollamasshht-h-fferrooczzoeennntriionnl llaiiqnquuimiiddanlnsiittarrotogtgheeenn,,teaarnnmddinssttaoolrreseaddciirnniafaiceffrre(eWeczzeeerer kssee2tt7tt)oo. mTaihnetsaeitnissues maintain 60 10 80C. Testes and kidney tissue samples collected fiom control aninals were p-6a0cktoed-8o0nCdr.y Ticeestaensdasnhdikppidendetyot3isMsuefosrapmospsliebslceofluletcutreedanfarolymsics.ontrol animals were packed on dry ice and shipped to 3M for possible future analysis. Bone marrow smears from the stemumofeach animala the unscheduled and scheduled Bssaaoccnrriieffiimcceeassrrwwoewerreesmpprreeeappraasrreefrddo,,msstttaahiineneesddtewwrinittuhhmWWrorifiggehhattc'ssh satnaiimn,aal nadt stain, and trheetauinnesdchfeodruploesdsiabnlde retained for possible scheduled eexxaammininataitioonn.. IH-iIsisttooppaatthhoollooggyy.. Tissues (as appropriate) were embedded in paraffin, sectioned, stained Tissues (as appropriate) were embedded in paraffin, sectioned, stained with hematoxylin and eosin, and examined microscopically from each animal including ttwhhieethGGrhroeomuuppat22oxmmyaallilene ttahhnaadtt ewwoaasssinrr,eeppalnlaadcceeeddx,,amAAnniinimmedaallmNNioco.r.o11sc00o5577p22ic33al((lssyeeeefrPPorrmootteoocacocolhl Daenviimaatlioinnsclufodring Deviations for eexxcceepptitioonns)s.). PPaatthhoollooggyy ffiinnddiinnggss aanndd hhiissttooppaatthhoollooggyy ttiissssuuee slides slides from from specified specified animals animals 225% 11881122..00002266 I3MM_MMNN0022334433336677 CCoovvaannTccee66633822099--2233311 3M T-6889.3 iinntthhee ccoonnttrrooll,, llooww-, aanndd hhiigghh--ddoossee ggrroouuppss wweerree ttrraannssffeerrreedd too SSiierara BBiioommeeddicicaall,, IInncc for for a a ppaatthhoollooggyy ppeeeerr rreevviieeww.. SSttaattiissttiiccaall AAnnaallyysseess Levene's test (Levene, 1960) was done 10 test for variance homogeneity. Inthe case of Lhheeettveeerronoggeee'snneteeiisttytyo(ofLfevvvaaerrniieaa,nncc1ee96aat0t p)p w<a0s.d05o,netrtaonstefsotrmfoatrivoanrsiawnecreehuosmedogteonsetiatbyi.liIzne < 0.05, transformations were used to stabilize tthhee the vcaarsieanocfe. variance. OOnnee--wwaayy aannaallyyssiiss ooff vvaarriiaannccee [[AANNOOVVAA ((WWiinneerr,, 11997711z2))] wwaass uusseedd t1o0 aannaallyyzzee iinniittiiaall bbooddyy wweeiigghhttss,, bbooddyy wweeiigghhtt cchhaannggeess,, ccoonnttiinnuuoouuss cclliinniiccaall ppaatthhoollooggyy vvaalluueess,, aanndd oorrggaann wweeiigghhtt ddaattaa. AANNOOVVAA wwaass ddoonnee oonn tthhee hhoommooggeennzeoouuss oorr ttrraannssffoorrmmeedd ddaattaa.. IIfftthhee AANNOOVVAA was was ssiiggnniiffiiccaanntt,, DDuunnnentettt''ss tt-etesstt ((DDuunnnnetettt,, 11996644)) wwaass uusseedd ffoorr ccoonnttrrooll versus versus treated treated group group ccoommppaaririssoonnss.. One-way analysis ofcovariance [ANCOVA (Winer, 1971] was used to analyze body Owweneiiegg-hhwttssa,,ywwainittahhlyinnsiiistaiaollfbbcoooddvyyarwwiaeeniigcghehtt[ssAaasNs CtthhOee VccooAvvaar(irWaiatitene.e. r,AAl1ltt9hh7oo1uubgg)]hh wLLeaevsveeunnseee'd'sstttoeessattnffaoolryr zvveaarrbiiaoandnccyee hHoommooggeenneeiittyy wwaass ddoonnee ((sseeee aabboovvee)),, nnoo ttrraannssffoorrmmaattiioonnss wweerree uusseedd bbeeccaauussee covariance covariance aaddjjuussttmmeenntt rreemmoovveedd eexxttrraanneeoouuss hheetteerrooggeenneeitityy.. IIfftthhee AANNCCOOVVAA was was significant, significant, ccoovvaarriiaattee--aaddjjuusstteedd mmeeaannss wweerree uusseedd ffoorr ccoonnttrrooll vveerrssuuss ttrreeaatteedd ggrroouupp ccoommpparairissoonnss.. GGrroouuppss22 tthhrroouugghh 44wweerreeccoommppaarreeddwwitithh GGrroouupp 11 ((CCoontnrtorol)l).. GGrroouupp ccoommppaarriissoonnss were. were eevvaalluuaatteedd aatt tthhee 55..00%%,, ttwwoo--ttaaiilleedd pprroobbaabbiilliittyy lleevveel.l. OOnnllyy ddaattaa ccoolllleecctteedd oonn or or after after the the ffiirrsstt ddaayyooffttrreeaattmmeenntt wweerree aannaallyyzzeedd ssttaattiissttiiccaallllyy.. Data collected before the first day of Data collected before the first day of . ttrreeaattmmeenntt oorr dduurriinngg rreeccoovveerryy ((eexxcceepptt ffoorr blood blood hormone hormone analyses analyses data) data) were were not not analyzed analyzed statistically. statistically. BBlloooodd hhoorrmmoonnee lleevveellss,, eexxcclluuddiinngg eessttrriiooll aanndd cchhoolleeccyyssttookkiinniinn,, wweerree aannaallyyzzeedd bbyy repeated repeated mmeeaassuurreess aannaallyyssiiss measurements for ooff ccoovvaarriiaannccee ((AANNCCOOVVAA)) pprroocceedduurree with with average average pretreatment pretreatment the parameters as covariates. Treatment effects under ANOVA or mANeaCsuOrVemAepnrtsocfeodrutrheespwaerarme eetvearlsuaatsecdoavtapria=te0s..05Trleevaetlm. eAnltlepffoescttshoucnder ANOVA or AcoNntCroOlV-vAerpsuros-cterdeuarteesd-wgreoruepemvealaunatceodmaptarpi=so0n.s05(ilnecvleul.dinAgllvaplousetshdoucring resovers) were. ccoonndtruoclt-vederususisn-tgreDautnende-tgtr'osumpamnyea-nonc-oomnpe{arpisrooncesd(uirnec.ludAninaglyvsaelsuewsedreurcinargrireedcoovuetrwyi)twh ere ScSoAAnSSduppcrrtooeccdeedduuusrirneegPPDRRuOOnCCneMMttI'IsXXmEEaDDny((-SSoAAnSS-.o,n11e999t966p))rooocrreBBduVMrIeDD. PPA((nBBaMMlyDDsPePs,,w11e99r99e22)c),,aororrriebbdoottohhu..t with 2% 26 11881122..00002277 I3MM_MMNN0022334433335688 CCoevvaannIcceMe 66T33i22998-.2933311 3M T-6889.3 Record Retention RAlelcroarwd dRateat,endtoicounmentation, records, protocol, and specimens generated as a result of tAhlilsrsatwuddyawtail,ldboecuamrcehnitvaetidonin, trheecosrtdosr,agperoftocciollt,easnodfsCpoevciamncenes-Mgaedniesraotnedfoarsaapreersiuoldt ooffat tlheaisstsotundeyyweairl.l bOenaerycehiavredafinerthtehesstourbamgiessfaicoinliotifetshoffCinoavlarnecpoer-tM, athdeisSopnofnosroar pwielrliod of at dleeatsetromnieneytehaer.fiOnnaedyiesarpaoftseirotthfietohsnuebmmatisesriioanlso. f Athlle rfianwaldraetpaosrtto, rtehde oSnpomnagsonertwiicllmedia, tdheeteprrmotinoceolth,estfiundayl cdoirspreosspitoiondneoncfeth,eanmdattehreiaolrsi.giAnalll rcaowpydoaftatshteorfeindalonrempoargtnweitlilc bemedia, rtheetapirnoedtobcyoCl,osvtuadnycecoMraredsipsoonndence, and the original copy of the final report will be retained by Covance-Madison. WWiitthhiinn 11 yyeeaarr aafftteerr ssuubbmmiissssiioonnooffththe ffiinnaall rreeppoorrtt., aallll ooff tthhee aaffoorreemmeennttiioonneedd mmaatteerriiaallss from the Sponsor's designees (Ani Lytics Inc. DuPont, 3M ET. & S, and the University foorffoDDmuuntnhddeeeeSe))powwinilslllobbr'eesssdeeennsttigttonoettehhsee (SSAppnooinnsLsooyrrti((cPPsaaIuunllcLL.,iieeDddeuerPr,,oPPnHth,DD3,,MDDAEAB.BTTT.,,&33MSM),.)a.ndPPaattthhheooUlloonggiyyversity AAssssoocciiaatteess,, A A CChhaarrlleess RRiivveerr CCoommppaannyy ((PPAAII)) iiss rreessppoonnssiibbllee for for the the maintenanceofany. maintenance of any rraaww ddaattaa oorr ssppeecciimmeennss pprroodduucceedd bbyy PPAALI. RREESSUULLTTSS OObbsseerrvvaattiioonn ooff AAnniimmaallss Clinical Observations. Clinical observatioarnes summarized in Tables 1 and 2; iCnldiinviicdaulalOdbastearvaaretioinnAs.ppCenlidniicxal2.obIsnedrivvaitdiuoanlsaanriemsaulmfmateadraizteadarine Taalbsoleisn1Aapnpden2d;ix 2. individual data are in Appendix 2. Individual animal fate data are also in Appendix 2. OOnnee mmaallee ((AAnniimmaall NNoo.. 110055772244)) ggiivveenn 33001/2200 mmgg//kkgg//ddaayy wwaass ssaaccrriiffiicceedd in in moribund moribund ccoonnddiittiioonn oonnDDaayy2299 ((WWeecekk 55)).. TTeesstt mmaatteerriiaall--rreellaatteedd oobbsseerrvvaattiioonnss noted noted for for Animal Animal NNoo.. and 110055772244 low or iinncclluuddeedd hhyyppooaaccttiivvee bbeehhaavviioorr,, eennttiirree bbooddyy ccoolldd ttoo tthhee no food consumption; this animal lost 12.5% (0.5 kg) ttoouucchh,, ffeeww of its body wooerrinngoohtffeefccreeoss,m, Wanedelkow1 toorWnoefeo5kod.cOonnesummaplteiogni;vtehnis3amngim/kagl/ldoasyt (12A.n5i%ma(l0.N5o.kg1)0o57f2it1s)bwoadsy swaceriigfhitcefdroimn . `W mmooerreiikbbuu1nntddoccWoonneddeiikttiio5on.n ooOnnneDDaamyyal11e337g7..ivCeClnliin3niicmcaalgl/ookbbgss/ederravvyaat(tiiAoonnnissmnnaooltteNeddo.ffoo1rr0AA5n7ni2imm1)aalwl NNasoo.s. a11c00r55if77i22c11edooinnn DDaayy 113377 ((WWeecekk 2200)) iinncclluuddeedd lliimmiitteedd uussee aanndd hypoactive behavior, few feces, and no food paralysis of the hind limbs, ataxic and cpoanrsaulymspitsioonf;thtehihsinandilmiamlblso,stat9ax.i5c%an(0d.4 kg) ohfypitosabcotidvye wbeeihgahvtiorr,ofmewWefeeckes,19an1d0 Week 20. no food consumption; this animal lost 9.5% (0.4 kg) of its body weight from Week 19 to Week 20. During Week 1, all males given 30 mg/kg/day had low food consumption and lost from D33..u11r1tion1g077.W.55%e%eookfft1th,heealirlr mbbooaddleyyswwgeeiiviggehhntt:;30ffoomuurrgoo/kffgtt/hhdeeayssiixxhaaadnniilmmoawallssfoaaollsdsoochhoaanddsuoombbsspeetrrivovanattiiaoonnndsslooofsftffeferwwom ffeecceess.. BBaasseedd oonn ddeeccrreeaasseedd ffoooodd ccoonnssuummppttiioonn and and bod body weight weight oss, loss, the the dos dose level level was. was , ltloowwwoeearrneeiddmttaools2200(Ammnyig/m/kkaegl//ddNaaoyys.bbee1gg0ii5nn7nn0ii4nngganoodnn 1DD0aa5yy71223.2). toAAlfefttreearrtettdhheethddeoosdseeoslleeevvleeellvewwlaafssorllootwwheeerrreeeddm,,aooinnnlilyyng t2w3oweaneikmsaolsfd(oAsneimadamliNniostsr. a1t0i5on7.04Aafntder10W5e7e1k3)2t,otleesrtatmeadtetrhieakdroesleatleevdeolbfsoerrtvhaetiroenmsaninotinegd 23 weeks of dose administration. After Week 2, test material-related observations noted 227 11881122..00002288 I3MM_MMNN0022334433335699 CCoovvaannSecsMe 36T32.2969.8-282339113 3M T-6889.3 ffoorr AAnniimmaall NNoo.. I10055771133 iinncclluuddeedd ffeewwffeecceessaanndd llooww ffoooodd ccoonnssuummptpitioonn.. AAfftteerr WWeecekk 22,, tthheerree wweerree nnoo cclliinniiccaall oobbsseerrvvaattiioonnss ccoonnssiiddeerreedd t1o0 bbee tteesstt mmaateterriiaakl--rreellaatteedd nnootteedd ffoorr AAnniimmaall NNoo.. 110055770044,. DDuurriinngg tthhee ssttuuddyy,, ddoossee aaddmmininisisttrraattiioonn wwaass ddiissccoonnttiinnuueeddffoorr tthhrreeee mmaalleess ggiivveenn 33001/2200 mmgg//kkgg//ddaayy bbaasseedd oonn tteesstt mmaatteerriiaakl--reellaatteedd oobbsseerrvvaattiioonnss.. DDoossee aaddmmininisisttrraattiioonn ffoorr AAnniimmaall NNooss.. 110055771111,, 110055772222,, aanndd 110055770033 wwaass ddiissccoonnttiinnuueedd oonn DDaayyss 4433 ((WWeecekk 77)),, 6666 ((WWeeeekk1100)),,aanndd 8811 ((WWeeeekk 1122)),, rreessppeeccttiivveellyy.. TTeesstt mmaatteerriiaall-rreellaatteedd oobbsseerrvvaattiioonnss nnootteedd ffoorr AAnniimmaall NNoo.. 110055771111 pprriioorr ttoo tthhee ssuussppeennssiioonnooffddoossiinngg iinncclluuddeedd ffeeww oorr nnoo ffeecceess aanndd lTooww oorr nnoo ffoooodd ccoonnssuummppttiioonn;; tthhiiss aanniimmaall lloosstt 1177..55%% ((00..77 kkgg))oofiftitss bbooddyy wweeiigghhtt ffrroomm WWeeeekk I1 ttoo W Weeeekk 77.. TTeesstt mmataeterriiaall--rreellaatteedd oobbsseerrvvaattiioonnss nnootteedd ffoorr AAnniimmaall NNoo.. 110055772222 pprriioorr ttootthhee ssuussppeennssiioonnooffddoossiinngg iinncclluuddeedd tthhiinn aappppeeaarraannccee,, ffeeww oorr nnoo ffeecceess,, aanndd llooww oorr nnoo ffoooodd `ccoonnssuummppttiioonn;; tthhiiss aanniimmaall lloosstt 2233..11%% ((00..99 kkgg))ooffiittssbbooddyy wweeiigghhtt ffrroomm W Weeeekk 111t0o, W`Weeeekk 1100.. TTeesstt mmaateterriiaall--rreellaatteedd oobbsseerrvvaattiioonnss nnootteedd ffoorr AAnniimmaall NNoo.. 110055770033ppririoorrttoo tthhee ssuussppeennssiioonnooffddoossiinngg iinncclluuddeedd tthhiinn aappppeeaarraannccee,, ofeww oofr nnoo ffeecceess,, aanndd lloowwoorrnnoo ffoooodd ccoonnssuummppttiioonn;; tthhiiss aanniimmaall lloosstt 1188..77%% ((00..66 kkgg)) ooff iittss bbooddyy wweeiigghhtt ffrroomm W Weeeekk 11 ttoo W `Weeeekk 1122.. TThheessee aanniimmaallss aappppeeaarreedd ttoo rreeccoovveerr ffrroomm tthhee tteesstt mmaateterriiaall--rreellaatteedd eeffffeeccttss within within 33 wweeeekkss aafftteerr ddoossee aaddmmininisisttrraattiioonn wwaass ddiissccoonnttiinnuueedd.. DDuurriinngg tthhee ssttuuddyy,, sseevveerraall aanniimmaallss ddeevveellooppeedd pphhyyssiiccaall ccoonnddiittiioonnss tthhaatt rreeqquuiirreedd `eexxaammiinnaattiioonn bbyy aa llaabboorraattoorryy aanniimmaall vveetteerriinnaarriiaann aanndd aaddmmininisisttrraattiioonnooffttrreeaattmmeennttss.. OOnn DDaayy 1111 ((WWeeeekk 22)),, AAnniimmaall NNoo.. 110055772244 ((GGrroouupp 44)) hhaadd oobbsseerrvvaattiioonnss ooff nnoo ffeecceess aanndd nnoo ffoooodd ccoonnssuummppttiioonn;; tthhiiss aanniimmaall wwaass ttrreeaatteedd wwiitthh LLaaccttaatteedd RRiinnggeerrss ssoolluuttiioonn ((AAbbbbootttt LLaabboorraattoorriieess)) oonn DDaayyss 1111 tthhrroouugghh 1133.. DDuurriinngg W Weeeekkss55 aanndd 66,, AAnniimmaall NNoo.. 110055771133 ((GGrroouupp 44)) hhaadd oobbsseerrvvaattiioonnssoofflliiqquuiidd ffeecceess aanndd llooww ffoooodd ccoonnssuummppttiioonn;; tthhiiss aanniimmaall wwaass. ttrreeaatteedd wwiitthh eerryytthhrroommyycciinn ((DDiissttaall PPrroodduuccttss CCo.o).)oonn DDaayyss 3366 tthhrroouugghh 4466.. OOnn DDaayy 113344 ((WWeesekk 2200)),, AAnniimmaall NNoo.. 110055772211 ((GGrroouupp 22)) hhaadd oobbsseerrvvaattiioonnss ooff ffeeww ffeecceess aanndd llooww ffoooodd ccoonnssuummppttiioonn.. AAnniimmaall NNoo.. 1[0055772211 wwaass ttrreeaatteedd wwiitthh EEnnssuurrec ((AAbbbbootttt LLaabboorraattoorriieess)) aanndd LLaaccttaatteedd RRiinnggeerrss ssoolluuttiioonn ((AAbbbbootttt LLaabboorraattoorriieess)) oonn DDaayy 113377;; hhoowweevveerr,, bbeeccaauussee tthhee aanniimmaall hhaadd oobbsseerrvvaattiioonnss ooff ppaarraallyyssiiss aanndd lliimmiitteedd uusseeooff tthhee hhiinndd lliimmbbss,, iitt wwaas.s ssuubbsseeqquueennttllyy ssaaccrriiffiicceedd.. DDuurriinngg WWeeeekkss 2211 aanndd 2266,, AAnniimmaall NNoo.. I10055771199 ((GGrroouupp 33)) hhaadd lliiqquuiidd ffeecceess;; tthhiiss aanniimmaall wwaass ttrreeaatteedd wwiitthh eerryytthhrroommyycciinn ((DDiissttaall PPrroodduuccttss CCoo.. oorr BBaarrrree)) oonn DDaayyss 114433 tthhrroouugghh 115511aanndd oonn DDaayyss 117799 tthhrroouugghh 118833.. TThhee ccoonnddiittiioonnoofftthheessee aanniimmalasls. iimmpprroovveedd wwiitthh ttrreeaattmmeenntt eexxcceepptt ffoorr AAnniimmaall NNoo.. 110055772211. OOpphhtthhaallmmoolologgyy.. OOpphhtthhaallmmiicc oobbsseerrvvaattiioonnss aarree ssuummmmarariizzeedd iinn TTaabblleess 33 aanndd 44;; iinnddiivviidduuaall ddaattaa aarree iinn AAppppeennddiixx 22.. TThhee OOpphhtthhaallmmoollooggyy RReeppoorrtt ccoonnttaaiinnss aaddiissccuussssiioonnooff tthhee ddaattaa.. 228 11881122..00002299 I3MM_MMNN0022334433337700 CCoevvaannScceMe 66T33822598.-22933311 3M T-6889.3 TThheerree wweerree nnoo oopphhtthhaallmmiicc ffiinnddiinnggss ffoorr aannyy aanniimmaall dduurriinngg tthhee bbaasseelliinnee oorr tthhee WWeeeekkss 27 27 oorr4400eexxaammininaattiioonnss. Body Weights. Body weight dataare summarized in Tables and 6; individualdataare Body Weights. Body weight data are summarized in Tables 5 and 6; individual data are iinn AAppppeennddiixx 33.. Covariate-adjusted mean body weights were notably lower throughout the study C(sotavtaisrtiaictael-laydsjuigsnteifdicmanetandubroidngy Wweeeigkhsts2wtehrreoungohta5blaynldowWeeer kthr1o0u)gfhoorumtatlheessgtiuvdeyn 3(s0t1a2ti0stmicga/lklgy/dsiagyn.ifiTchaentldouwreinrgboWdyeewkesi2ghtthsrofoughth5e amnadleWs egeikve1n03)0f7o2r0mmagl/eksgg/idvaeynwere c3o0n/2si0dmerge/dkgte/sdtayma. teTrhieallorwelearebd.ody weights for the males given 30/20 mg/kg!day were considered test material-related. AAllll bod yaannwiiemmiaagllhsstfmmaoairincntataaciinhneeiddndbbioovddiyyduwwaeleiiaggnhhittmssaddluubrreiinntggwerreeecncootvvheeerryyt;r; etthahteemrreeenwwteaerrneed no nroe marked changes cmovaerkryedphcahsaensges in in bDiofdfyerwenecigehstifnomreeaanchbionddyivwideuiaglhasnbimetawl ebeentwteheenmtehaentrbeoadtmyewnetigahntdsorefcotvheeraynipmhaalssesg.iven D10iffmegr/ekngc/edsaiyn amndetanhobsoedoyftwheeigchotsntbreotlwdeuernitnhgermeceoavnerbyocdaynwbeeigahttrsiboufttehde0anbimioallosgigciavlen v1a0rimatgi/okng./day and those of the controls during recovery can be attributed to biological variation. Body Weight Changes. Body weight change data re summarized in Tables 7 and 8; Body Weight Changes. Body weight change data are summarized in Tables 7 and 8; iinnddiivviidduuaallddaattaaaarree iinn AAppppeennddiixx 33., DDuurriinngg tthhee ffiirrsstt 22 wweeeekkssooftf thhee ssttuuddyy,, mmeeaann bbooddyy wweeiigghhtt cchhaannggeess wweerree nnoottaabbllyy lloowweerr d((ssoiisggenniilffeiivcceaalnnttwllyayslloolwwoewererrddeuudrriitnnogg2WW0emecgek/kk22g))/dffaooyrr,mmamaleleeassniinbniiottidiaayllllywyeggiiigvvheetnnc33h00anmmggge//skkggw//eddraaeyy..sigAAnfifttfeeirrcatthnhteely dllooowwseeerrletthvheaalnnwtthhaoosssleeoowoffeccroeondntttrroool2ls0ddumurrgiinn/kgggWW/deaeeyek,kssm77e,,a9n9,,baaonndddy22w44..eigOOvhvetercrahallallnmmgeeeasannwbbeooreddyysigwweneiiifggihchtatntly cchhaannggeess ((WWeeeekkss 1| tthhrroouugghh 2277)) wweerree nnoottaabbllyy lloowweerr ffoorr tthhee mmaalleess ggiivveenn 3300//2200 mmgg//kkgg//ddaayy ((1144..33%%ofoftthhoossee ooff tthhee ccoonnttrrooll mmaaleles)s.). FFoooodd CCoonnssuummptpitoionn.. FFoooodd ccoonnssuummppttiioonn ddaattaaaarrce ssuummmmarariizzeedd iinn Tables Tables 1 1 and and 2 2 clinical observarions in Appendix 2. ((SSuummmmaarryyooffCClilinniiccaall OObbsseerrvvaattiioonnss));; iinnddiivviidduuaall ddaattaa aarree iinncclluuddeedd iinn tthhee iinnddiivviidduuaall clinical observations in Appendix 2. "Therewasan increased incidence of low or no food consumption for animals given T3300h1/e22r00e mwmgag/s/kkgag/n/ddaianyyc..reTaTshheeed dienccriedaesnecde decreased foofoldowcoonsr unmoptfoioodn food consumption cwoanssucomnpsitidoenrefdor0anbiemtaelsst was considered to be test given mmaatteerraiallr-erellaatteedd.. 229 ) S3MM. MMNN0022334433537711 11881122..00003300 CoCvoavnacnIceMe 66T33622988-22933311 3M T-6889.3 BBlloooodd HHoorrmmoonnee DDeetteerrmmiinnaattiioonn `SSuummmmaarryy aanndd iinnddiivviidduuaall hhoorrmmoonnee aannaallyysseess ddaattaa pprroovviiddeedd bbyy AAnnii LLyyttiiccss IInncc.. oorr DDuuPPoonntt,, arein Appendi6caensd7 (cholecystokinin), respectively. are in Appendices 6 and 7 (cholecystokinin), respectively. TThheerree wweerree nnoo eeffffeeccttss oonn eessttrroonnee,, eessttrraaddiiooll,, estriol, estriol, thyroid thyroid stimulating stimulating hormone, hormone, or or tteessttoosstteerroonnee tthhaatt wweerree cclleeaarrllyy ddoossee--rreellaatteedd or or consistent consistent in in their their effects effects over time. over time. Total Total ttrriil'iooddootthhyyrroonniinnee wwaass ddeeccrreeaasseedd bbeeggiinnnniinngg oonn DDaayy 3355 iinn aanniimmaallss aaddmmininiisstteerreedd l100 oorr 33001/2200 mmgg AAPPFFOO/k/kgg//ddaayy.. W Whhiillee tthhee llooww nnuummbbeerr ooff aanniimmaallss tthhaatt rreemmaaiinneedd on on treatment treatment in in tthhee ggrroouupp aaddmmininiisstteerreedd 3300//2200 mmgg//kkgg//ddaayy mmaakkeess iinntteerrpprreettaattiioonn difficult, difficult, it it appears appears tha that the. the levelof riodothyronine remained depressed through Day 183 in this group. Total ltehvyerloxoifntrwiiaosdodtehcyrreoanseindebreegminanininegd odnepDraesyse3d5 tihnroanuigmhalDsaaydm1i8n3iisntethreisdg1r0ouopr. Total t3h0y1r2o0xming/wkga/sddaeyc.reWahseidlebetgheinlnoinwgnounmbDearyof3a5niinmaanlismtahlastardemmainiinsetedreodn 1tr0eoartment in the `3g0r/o2u0p madgm/ikngi/sdtaeyr.edW3h0/il2e0thmeg/lkogw/dnauymmbaekreosf tahneiminatlesrtphraettarteimonadinifefdicoulnt,trietaatpmpeenart sinththatethe. gefrfoeucpt oandmthinyrisotxeirnedwa3s0/m2o0smt gp/rkogn/oduanycmedakaetsDtahyesin35terapnrdet6atioinn adnififmiaculslt,aditmianpipsetaerrsetdha1t0thoer e3f0f1e2c0t omng/tkhgy/rdoaxyi,n awftaesrmwhoisct hprtohneoeufnfeccetdbaetgDanaytso 3d5imainndis6h6ainndtahneimreaalpspaedamreindistteorbeed. 10 or r3e0c/2ov0emryg/bkygt/dheaye,nadfotefrthwehiscthudtyh.e eFfrfeeecttrbieigoadnotthoyrdoinminineisahndafnrdetehtehryeroapxipneawreerdetodebcereased rbeecgoivnneiryngbyonthDeaeynd35ofinthaenismtuadlys.adFmrieneistrthe'oreddot1h0yorron3in0e/2a0ndmgf/rkege/tdhayyr.oxWinhiwleerethdeelcorewased bneugmibnenriongfoanniDmaalys3t5haitnraenmimaianlesdadonmtinreisattemreendt 1i0 othre3g0r/2o0upmagd/mkign/idsatye.reWd hile the low n30u/m2b0emrgo/fkagn/idmayalmsathkaetsrethmeaiinnteedrpornettarteiaotnmdeifnfticinultth,eitgarpopueparasdmthaintitshteereledvel of t3r0i/i2o0domthgy/rkogn/idnaeyrmemaakiensetdhedeipnrteerspsreedtatthiornoudgihffDicauylt,1i8t3apinpeaanrismathlastatdhmeilneivsetleroefd 10 or t3r0ii/o2d0omthgy/rkogn/idnaeyraemndaitnhaetd rdeecporveesrsyedoctchurroruegdhiDn aanyi1m8a3lsinadamniinmiasltseraeddm1in0imstge/rekdg 1d0uroirng the 3re0c/2o0vemrygp/khgas/de.ay and that recovery occurred in animals administered 10 mg/kg during the recovery phase. NNoo aalltteerraattiioonnss iinn cchhoolleeccyyssttookkiinniinn ccoonncceennttrraattiioonnss wweerree oobbsseerrvveedd aatt aannyy ooftf thhee ttiimmee ppooiinntsts.. CClliinniiccaall PPaatthhoollooggyy HHeemmatatoollooggyy,, ccooaagguullaattiioonn,, cclliinniiccaall cchheemmisisttrryy,, aanndd uurriinnaallyyssiissddaattaaaarree ssuummmmarariizzeedd in in `TTaabblleess 99 tthhrroouugghh 3322:; iinnddiivviidduuaall ddaattaa aarree iinn AAppppeennddiixx 44.. TThhee PPaatthhoollooggyy RReeppoorrtt containas contains a ddiissccuussssiioonnoofftthhee ddaattaa.. AdministrationofAPFO at dose levels of 3 or 10 mg/kg/day had no apparent effects on Ahheedmmmaatitnoolilsootggrayyt,,ioccnooaaoggufulAlaatPtiiFooOnn,, actlidnoisceallcehveemlsisotfry3,oorr1u0rimnagl/yksgi/sdraeysuhlatsd. clinical chemistry, or urinalysis results. nOofaupnpcaerretnatienffects Of uncertain on rreellaattiioonnsshhiipp ttoo aaddmmininisisttrraattiioonn ooff AAPPFFOO aatt 3300//2200 mmgg//kkgg//ddaayy wweerree mmiillddllyy increased increased ttrriiggllyycceerriiddee ccoonncceennttrraattiioonn aanndd mmiillddllyy ttoo mmooddeerraatteellyy ddeeccrreeaasseedd aabbssoolluuttee nneeuuttrroopphhiill ccoouunntt,, ttoottaall pprrootteeiinn ccoonncceennttrraattiioonn,, aanndd aalblubmuin ccoonncceenntrtraattiioonn.. IInn aaddddiittiioonn,, ttwwoo aanniimmaallss ggiivveenn AAPPFFOO aatt 33007/2200 mmgg//kkgg//ddaayy eexxhhiibbiitteedd mmooddeerraatteellyy ttoo mmaarrkkeeddllyy iinnccrreeaasseedd sseerruumm eennzzyymmee 33O0 11881122..00003311 I3MM_MMNN0022334433337722 CCoovvaannIccMee 66T33262698--22933311 3M T-6889.3 aaccttiivviittieess ((ii.e,., aassppaarrttaattee aammiinnootrtraannssffeerraassee,, aallaanniinnee aminotransferase, aminotransferase, sorbitol sorbitol ddeehhyyddrrooggeennaassee,, aanndd ccrreeaattiinnee kkiinnaassee)) aanndd mildly mildly increased increased serum serum bile bile acid acid concentration concentration prior to the unscheduled sacrificeofone of the animals and the cessation of treatment for tphreioortthoerthaenuimnaslchbeedcualuesdesoafcrpiofiocrehoeaflothn.e oTfhtehseeafniinmdianlgss,anadltthhoeucgehsnsaottioonbsoefrvtreedatfmorenmtosfotr otfhethoethaenriamnailms aglibveecna3u0s1e2o0fmpgo/okgr/hdeaaylt,h.maTyhealsseofihnadviengbse,eanltchaouusgehd nboyttohbesteersvtemdatfeorrimalost of the animals given 30/20 mg/kg/day, may also have been caused by the test material. DDuurriinngg rreeccoovveerryy,, tthheerree wwaass nnoo eevviiddeennccee ooff ppeerrssiisstteenntt oorr ddeellaayyeedd toxic toxic effects effects on on clinical clinical ppaatthhoollooggyy tteesstt rreessuullttss.. Cell Proliferation Evaluation CReeslullPtsrooflifceerlaltpiroonliEfevraaltuioantieovnaluation provided by Pathology Associates, A Charles RiRveesurltCsoomfpcaenllypraorleifienraAtpiopnenedviaxlua.tion provided by Pathology Associates, A Charles River Company are in Appendix 8. AAfftteerr uuppttoo 2266 wweeeekkss oonn ssttuuddyy,, eennhhaanncceedd cceellll pprroolliiffeerraattiioonn wwaass nnoott evidentinthe evident in the ppaannccrreeaass oorr tteesstteess ooff mmaallee mmoonnkkeeyyss,, wwhheerreeaass iinn tthhee lliivveerr the the findings findings were were equivocal. equivocal. AAnnaattoommiicc PPaatthhoollooggyy TTeerrmmiinnaall bbooddyy wweeiigghhtt aanndd oorrggaann wweeiigghhtt ddaattaa aarree ssuummmmarariizzeedd in in Tables Tables 33 33 and and 34; 34; iinncciiddeenncceess ooff mmaaccrroossccooppiicc aanndd mmiiccrroossccooppiicc observations observations are are summarized summarized in in Tables Tables 35 35 tthhrroouugghh 3388.. IInnddiivviidduuaall ddaattaa aarree iinn AAppppeennddiixx 55.. TThhee PPaatthhoollooggyy RReeppoorrtt contains contains a a ddiissccuussssiioonnoofftthhee ddaattaa.. TTeesstt mmaatcterriiaall--rreellaatteedd aanndd ssttaattiissttiiccaallllyy significant significant increases increases were were seen seen in in mean mean absolute absolute liver weights and mean liver-to-body weight percentages in animals in all dose groups at thlievertewrmeiignahltssaacnrdifmicee.anIlnivaedrd-ittoi-obno,dmyewaneilgihvterp-etroc-ebnrataingewseiinghatnismiganlisfiicnaantlllydoisnecrgeraosuepdsinat athneimtearlms iinnatlhseac1r0ifmicge/.kgI/ndaadydgitrioounp,;mtheiasnwlaivsera-ltsoo-bcroanisnidweeriegdhttessitgmnaitfeicriaanltlyeliantcerde.ased in aHnoiwmevalesri,nnthoete1s0t mmagte/krgia/dla-eylgatroedupm;atchriosswcoapsiaclsoorcmoincsriodsecroepdictescthamnagteesriawle-rreelasteeedn. in any Horowgaevnaesr,tnhoe tteesrtmimnaaltesraiacrl-irfeilcaet,edinmclaucdrionsgcloipveirc,oardrmenicarlo,sscpolpeiecn,chpaanncgreesasw,earnedsteeesntsi.n any organs at the terminal sacrifice, including liver, adrenal, spleen, pancreas, and testis. AAtt tthhee rreeccoovveerryy ssaaccrriiffiiccee,, tthheerree wweerree nnoo tteesstt mmaatteerriiaall--reellaatteedd effects effects on on terminal terminal body body wweeiigghhttss oorr oonn aabbssoolluuttee oorr rreellaattiivvee oorrggaann wweeiigghhttss,, iinnddiiccaattiinngg tthhaatt the the liver liver weight weight increases increases sseeeenn aatt tthhee tteerrmmiinnaattiioonnooffddoossiinngg wweerree rreevveerrssiibbllee.. TThheerree were were no no macroscopic macroscopic or or mmiiccrroossccooppiicc ffiinnddiinnggss tatrtiribbuutteedd (to0 tteesstt mmaatteerriiaall aaddmmininisisttrraattiioonn aat tthhee rreeccoovveerryy sacrifice. sacrifice. 331 11881122..00003322 I3MM_MMNN0022334433337733 CCoovvaannIccMee 66T33622899-9-2233311 3M T-6889.3 `TTwwoo aanniimmaallss wweerree ssaaccrriiffiicceedd iinn aa mmoorriibbuunndd ccoonnddiittiioonn dduurriinngg tthhee ccoouurrsseeofoftthhee ssttuuddyy,, aa `mmaallee ggiivveenn 3300//2200 mmgg//kkgg//ddaayy ((DDaayy 2299)) aanndd aa mmaallee ggiivveenn 33 mmgg//kkgg//ddaayy ((DDaayy 113377)).. TThhee mmaallee ggiivveenn 3300//2200 mmgg//kkgg//ddaayy hhaadd eessoopphhaaggeeaall and and gastric gastric lesions lesions indicative indicative oaf of a dosing. dosing iinnjjuurryy aanndd lliivveerr lleessiioonnss pprreessuummeedd ttoo bbee dduuee ttoo tthhee tteesstt mmataetreiraial.l. TThhee causeof cause of the the mmoorriibbuunndd ccoonnddiittiioonnoofftthhee mmaallee ggiivveenn 33 mmgg//kkgg//ddaayy wwaass uunncclleeaarr.. DISCUSSION AND CONCLUSIONS DISCUSSION AND CONCLUSIONS BBaasseedd oonn tthhee rreessuullttssoofftthhiiss ssttuuddyy in in which which ammonium ammonium perfluorooctanoate perfluorooctanoate (APFO) (APFO) was was aaddmmiinniisstteerreedd oorraallllyy bbyy ccaappssuullee ttoo ccyynnoommoollgguuss mmoonnkkeeyyss at at dosesof0, doses of 0, 3, 3, 10, 10, or or 33001/2200 mmgg//kkgg//ddaayy ffoorr 2266 wweeeekkss,, tthhee nnoo--oobbsseerrvvaabbllee--aaddvveresrsee--eeffffeecctt level level (NOAEL) (NOAEL) was. was 1100 mmyg//kkggl/ddaayy.. EEffffeeccttss sseeeenn iinn aanniimmaallss aaddmmininiisstteerreedd 10 mg/kg/day were not evident 10 mg/kg/day were not evident after after 1133 wweeeekkssooffrreeccoovveeryry.. 322 11881122..00003333 I3MM_MMNND022334433337744 SIGNATURES SIGNATURES covmee Covance 6329-231 3M T-6889.3 Pe ee R28 PPaattrriicciiaa KK.. MMccKKeeee PPeessiikk,, BBSS,, LLAATT SyCoc Study Coordinator sn. Covance Laboratories Inc. BAoEnA Study Dir-t~or~ ors Covance Laboratories IS Dee 2000 DDaattee M#4aregro Date n33 11881122..00003344 unzses 3M MN02343375 Conace 6329-31 Covance 6329-231 NT3 3M T-6889.3 RREEFFEERREENNCCEESS BMDP, Biomedical Data Processing, BMDP Inc, Los Angeles, California, 1992. BMDP, Biomedical Data Processing, BMDP Inc., Los Angeles, California, 1992. DDuunnnnetettt,, CC.. Biometrics 2W W.0,/.,4""8N2N-ee4ww91TTaa(b1bl9le6e4ss).ffoorr MMuultltiippllee CCoommpaprairissoonnss wwiitthh a a CCoonnttrrooll,"" Bio~netrics, 20:482-491 (1964). Levene, H., "Robust Tests for Equalityof Variances." ContritobPruobtabiiliotynansd Levene, H., "Robust Tests for Equality of Variances," Contributions to Probability and `SSttaattiissttiiccss., ((eeddss..)) II.. OOllkkiinn eett aall..,, CChh.. 2255,, pppp.. 227788--229922,, SSttaannffoorrdd UUnniivveerrssiittyy PPrreessss:: SSttaannffoorrdd,, CCaalliiffoorrnniiaa ((11996600)).. 199%. SSAASS ((SSttaattiissttiiccaall AAnnaallyyssiiss SSyysstteemm)),, SSAASS IInnssttiittuuttee,, RReelleeaassee 66..1122,, CCaarryy,, NNoorrtthh CCaarroolliinnaa,, 1996. iWWniEnixneperre,,rBBi.m. eJJ,n.,"t"DaDelDseesiisgginngnaa,nnddSeAAcnnaoalnlydyssiEissd.oo,ffSCShi.inngg3l,lee-p-pFF.aacc1tt4oo9rr-EE2x6x0pp,eerMriicmmGeernnatwtss-,""HiSSlttlaat:tiissttNiicceaawll PPYrroiirnnkcc,iipplleess in Experimental Design, Second Ed., Ch. 3, pp. 149-260, McGraw-Hill: New York, NNeewwYYoorrkk((11997711a)a.). WW Sienicneoernr,,dBBE.d..J,J,.,C""AhAn.anl1a0yl,yssipipss. oo7ff5C2Co-ov8va1ar2ri,iaaMnnecceGe,r,""aSwtS-atHtaiitsilstlti:iccaalNPPertriiwnngcYiipoplrlekes,siNinneEEwxxYppoeerrikrm(ie1nm9t7ae1lD0Dne)s.etisaiggnln,, Second Ed., Ch. 10, pp. 752-812, McGraw-Hill: New York, New York (1971b). Mu 34 11881122..00003355 _3MMNM0N203243343337766 OOPPHHTTHHAALLMMOOLLOOGGYY RREEPPOORRTT CCoovvaann3ccMee 66T33822998--22933311 3M T-6889.3 `OOpphhtthhaallmmiicc eexxaammiinnaattiioonnss wweerree ddoonnee oonn eeaacchh aanniimmaall bbeeffoorree iinniittiiaattiioonn ooff ttrreeaattmmeennttaanndd dduurriinngg WWeeeekkss 2277 aanndd 4400 ((rreeccoovveerryy)).. TThhee ppuuppiillss wweerree ddiillaatteedd wwiitthh 11%% MMyyddririaaccyyll,, aanndd the anterior portionofthe eye, optic media, and ocular fandus were examined with an tiihnneddiiarreenccttet rooipophrhtpthhoaarlltmimooonssccooofpptehe.e. eye, optic media, and ocular fundus were examined with an "TThheerreewweerreennoo oopphhtthhaallmmiicc ffiinnddiinnggss ffoorr aannyy aanniimmaall dduurriinngg tthhee bbaasseelliinnee oorr tthhee WWeeeekkss 2277 oorr 4400 eexxaammininaattiioonnss.. DoDnaoJ. Cglemdys, DVM, MS IDoinplnoamaJt. eC,lAemCeLnAs,MDVM, MS 'D.~plomate, AC~AM 1 0c o DDaa'~te.e~ 33s5 11881122..00003366 I3MM_MMNN0022334433337777 PPAATTHHOOLLOOGGYY RREEPPOORRTT CCoovnaenAcsNe 66T33622998-22933311 3M T-6889.3 SUMMARY SUMMARY "The purposeofthe study was o asses the effectof the test material, ammonium Tppbeiehroreffcllhpuueuoomrrripoocoooascclettaaponnafcortaaahttmeeeets((eAtAurPPdsFFyOwOw)h),ea,snootnnaodccamrrisiittsniieiccsasasltleteehrnneezzdyeyfdmmfaeeiecltylleeobvvfeyelltsshc,,eahhtpooesrsrmmtuomlonen0aeetsecs,r,yiaananlno,ddmaooomlttghhmeuerosrnssmieeuollmeneccktteeeydds for baa3tti0ollecemahagsse/ttmk2g2i/66cdawwaleyepe.ekaksrAsa.d.mmTTienhtheieerssttteerwssatthteimmonaantateoedrfrimiaatlilhnewwisahatsiesgrieihnneditstitdiaaaldlillolyyysaeabddywmmiacnisanipisssstttueoelrpreeeptddeoadatcotdyndnooosDsmeaeyollelv1gve2uellsbssemoocffoaun33s,k, ee11y00o,s,f aafonnrdd 3si0gnmsogf/kgto/dxiacyi.tyAadnmd itnhiesntrarteisounmoefdthoen hDiagyhe2s2t datosaelwowaesrstdoopspeedevoeln,D2a0ym1g2/kbge/cdaauys.e of signs of toxicity and then resumed on Day 22 at a lower dose level, 20 mg/kg/day. Administration of APFOa dose levels of 3 or 10 mg/kg/day had no apparent effects on Ahedmmationlisotgrya,tiocnoaoguflAatPiFoOn, actlidnoiscaellecvheemlsisotfry3,oorr1u0rimnagl/yksgi/sdraeysuhltasd. hreelmataitoonlsohgiyp, tcooaadgmuilnaitsiotnra, tciloinniocfalAcPhFemO iasttr3y0, 1o2r0umryin/aklgyisidsaryewsuelrtse. nOofapunpcaerretnatienffects miOlfdluyncienrctraeiansed on rweilgaltyiocenrsihdiep ctoonacdenmtirnaitsitorantiaonndomfiAldPlFyOtoamto3d0e/r2a0temlyg/dkegc/rdeaayswedearebsmoliludtleynienuctrreoapsheidl count, totArotiPtgaalFllyOppcrreoaorttitdee3iie0nn7ccc2ooo0nnnmcccgeee/nnntkttrrgraaa/tttidiiooaonnny,,aenaaxdnnhddimbaaiilltlbdbeulduymmmitioonndemccroooanndctceeeenrlnatyrttreataltoytiimoodanne.r.ckreI[enndalsaaeydddddiiinattcbiiorosnneo,a,lsuttewtwdeoosnaaeennuriitumrmmoaaplelhssnizlggyiicvvmoeeeunnnt, AaadccePtthiiFyvvOdiittriioeaegsste3((nii0a..e/s.2.,e,0,aasmsappngaadr/rkttcaagrtt/eeedaaatayimmnieeinxnokhotiitrnbraaainstnseesfd)feearmranasodsede,m,eiraaallldtaaelnnlyyiinniteenocaarmmmeiaainnrsokoetedrtrdaasnlnyessrffieunermrcaarsbseeiea,,lsessadoocrrisbbdeiitrtcoouollmnceennztyrmtieon pdptrhreieihooyorrdttthrooeorttghheaeennaiuusmnneass,lccahhbneeedddcuuacllureeesddaetssioaanfcpcerroiikffoiiincrcaeeoshoeefa)flootahnnn.eedoolTfmfhttelhhdseeleyaafinniniincmmdraiealnalgsssseaa,dnnaddsletttrhhhuoeemuccgeehbssisnsleaaotttaiiocoonibndsooecffrottvnrreecedaeatntfmotmrreeannmttitoosffnootrr otfhethoethaenriamnailmsaglibveecna3u0s/e2o0fmpgo/okgr/hdeaaylt,h.maTyhealsesofmhadviengbse,eanltchaouusgehd nboyttohbesteersvtemdatfeorriaml.ost of the animals given 30/20 mg/kg/day, may also have been caused by the test material. During recovery, there was no evidence of persistent or delayed toxic effects on clinical Dpautrhinolgorgeyctoevsetreys,utlhse.re was no evidence of persistent or delayed toxic effects on clinical pathology test results. TTeesstt liver mmwaeatitegeihriatalsl--arrnelldaattmeeeddaaannnddivssettraat-tii1ssotti-iccbaaolldllyyy significant increases were seen swiegingihfticapnetrcinenctreaagseessinwaenreimsaelesn in mean absolute iinnamlledaonseabgsrooluuptes at tltahihnveeiemttreaewrlrmsmeiiiignnnahatltlhssseaaacnc1rrdi0iffimmiccgeee/.a.kngII/nlnidvaaaeddyrdgd-iritttooii-ooubnnpo,,;dmmtyehewaiasnnewilglisihvvteerrap--lettsor0oc--becbnrroaatnaiisngniedwwseeeriiineggdhhatttneisssmiitggamnnliaisfftiiiecncaraanniltatlllbyydeoiilnsnaeccerrdgee.araosseueddpsiinant oaHHnoroiwgmweaevavlneasersri,n,tnnhthooeettteee1ssr0ttmmmmianatgaet/erksirgaaiac/ldrl-iarfeyeillcgaaertt,oeeidudnpmcm;latauchcdririsoonssgwccoaloipspvieiaccrl,soooafrdcrmMoeininccasrrliood,ssesccrpooelpdpeiiecctne,sccthhpamaannnacggtreeeessraisaww,le-errareeenldassteeeteeedsnn.tsii.nn any any organs at the terminal sacrifice, including liver, adrenal, spleen, pancreas, and testis. . AAwettittghhheetsrreeoccroovvoeenrryaybsssaaocclrruiitffeiiccoeer,, ttrhehelearrteeiwvweeeorrreegnnaoon test material related tweesitgmhtast,eriinadl-ircealtaitnegd effects tehfafetctes on terminal olinveterrwmeiingahlt body biondcyreases weights or on absolute or relative organ weights, indicating that the liver weight increases 336 11881122..00003377 33MM_MMNN0022334433337788 CCoovvaann3ccMee 66T33822969-2933311 3M T-6889.3 sseeeenn aatt tthhee tteerrmmiinnaattiioonnooff ddoossiinngg wweerree rreevveerrssiibbllee.. TThheerree wweerree n1o0 mMaaccrroossccooppiicc oorr mmiiccrroossccooppiicc ffiinnddiinnggss aattttrriibbuutteedd ttoo tteesstt mmaatteerriiaall aaddmmiinniissttrartaitoinaoant tthhee rreeccoovveerryy ssaaccrriiffiiccee.. T"Twwoo aanniimmaallss wweerree ssaaccrriiffiicceedd iinn a a mmoorriibbuunndd ccoonnddiittiioonn dduurriinngg tthhee ccoouurrssee of of the the study, study, a a `mmaallee ggiivveenn3300//2200mmg/gk/kgg//ddaayy ((DDaayy 2299))aanndd a a mmaallee ggiivveenn 33mmg/gk/kgg//ddaayy (Day (Day 137). 137). The The `mmaallee ggiivveenn injury, and 3300//2200 mmgg//kkgg//ddaayy hhaadd eessoopphhaaggeeaall aanndd ggaassttrriicc lesions lesions liver lesions presumed to be due to the test material. indicativeof a dosing Tinhdeirceataisvoenoffoardtohseing imnojruiryb,uannddcolinvdeirtileosnioonfsthperemsuameegdivtoenbe3 dmuge/ktog/tdhaeytewsatsmuantcelreiaalr.. The reason for the moribund condition of the male given 3 mg/kg/day was unclear. M MEETTHItOODDSS FFoouurr capsu ggrroouuppss le at a ooff mmaallee dose lev ccyynnoommoollgguuss el of0 (contr mmoonnkkeeyyss ol groups wweerree recei administered vaeddmeimnpisttyerceadp th stuhlee test ste),st material 3m, a1t0e,rioarl daily by 3d0aimlyg/bkyg. ocfapbsoudlye awteaigdhotsdealyev(emlgo/kfg0/d(caoy)n.troTlrgeraotumpe;ntreocfetivheedaenmimpatlyscgaipvseunletsh)e, 3hi, g1h0e,stord3o0semlgev/kelg owwfaasbsossdttoyoppwppeeeddigoohnnt/dDDaaayyy(m1122g/bbkeegcc/aaduuassyee).oofsfTisrigegnantssmooeffntotoxoxicfiicttihtyey..anTTihmheealhhsiiggghhievesesttnddtohoseseehlliegevvheeellswtwadasos sttehheelennvel rreedduucceedd ttoo 2200 mmgg//kkgg//ddaayy,, aanndd ttrreeaattmmeennttooff tthheessee animals animals `One animal given 30120 mg/kg/day was sacrificed on Da was yw2a9s resumed rbeescuamuseed on Day oofnpDooary 22. h2e2a.lth, and dOonseinagniwmaaslpgeirvmeann3en0t/2l0y mstgo/pkpge/ddfaoyrtwharseesaacdridfiitcieodnaolnaDniamyal2s9gbievceanus3e0/o2f0pmogo/rkhg/edaaltyh,, and odnoesinogn cwaacshpoefrmDaaynsen4t3ly, 6s6to,papnedd81f.or tAhtresetuaddydiitniiotniaatliaonn,imthaelrsegwievrene 3si0x/2a0nimmagl/skgi/ndathye:, occoonnnettroroonll eggarrcoohuuppofaaDnnddaytthshee4gg3rr,oo6uu6pp,ssaggniidvvee8nn1. 10Aot rst3u0dymgi/nkitgia/tdiaoyn;, 10 or 30 mg/kg/day; tthweoreanwiemraelssixinacnaicmhaolsftihnetshee two animals in each of these ggrroouuppss wweerree ddeessiiggnnaatteedd aass rreeccoovveerryyaanniimmaallss too bbee oobbsseerrvveedd ffoorr aapppprrooxxiimmaatteellyy 1133 weeks weeks ppoosstttrreesattmmeenntt.. BBeeccaauussee oonnllyy ttwwoo aanniimmaallss wweerree ggiivveenn 3300//2200 mg/kg/day mg/kg/day for for the the duration duration of of tthhee ttrreeaattmmeenntt ppeerriioodd ((aapppprrooxxiimmaatteellyy 2266 wweeeekkss)),, tthheerree were were no no high-dose high-dose recovery recovery aanniimmaallss.. TThheerree wweerree ffoouurr aanniimmaallss iinn tthhee ggrroouupp given given 3 3 mg/kg/day; mg/kg/day; oneofthese one of these animals animals wwaass ssaaccrriiffiicceedd oonn DDaayy 113377 bbeeccaauussee ooff ppoooorr hheeaalltthh.. BBlloooodd aanndd uurriinnee wweerree ccoolllleecctteedd ffoorr hheemmaattoollooggyy,, ccooaagguullaattiioonn,, clinical clinical chemistry, chemistry, and and uurriinnaallyyssiiss tteessttss oonnccee bbeeffoorree iinniittiiaattiioonnooff ttrreeaattmmeenntt ((DDaayy --1111)),, oonn DDaayyss3311,, 63,91, 63, 91, and and 152, 182, aanndd oonn DDaayyss 221177,, 224455,, aanndd 227755 ((rreeccoovveerryy aanniimmalasl)s.). BBlloooodd ffoorr hheemmaattoollooggyy,, ccooaagguullaattiioonn,, aanndd cclliinniiccaall cchheemmiissttrryy tteesstss wwaass aallssoo ccoolllleecctteedd ffrroomm aanniimmaallss pprriioorr t0o uunnsscchheedduulleedd ssaaccrriiffiicceess.. TThhee tteerrmmiinnaall aanndd rreeccoovveerryy ssaaccrriiffiicceess ooccccuurrrreedd oonn DDaayyss 118844.aanndd 277, 277, rreessppeeccttiivveellyy.. AAllll aanniimmaallss wweerree nneeccrrooppssiieedd;; mmaaccrroossccooppiicc oobbsseerrvvaattiioonnss wweerree recorded, recorded, oorrggaann wweeiigghhttss protocol. The wweerree right oobbttaaiinneedd,, aanndd ttiissssuueess were were placed placed lateral lobeofthe ver was collec in fixative as specified by tiendfaixnadtivfreoazsenspfeorciafnieadlybsiys the tohfe pparolmtoictooyl.] CToheAroigxhitdalasteeraacltilvoibtye.ofSathmeplfievserofwpaasnccorellaesc,teldeftanadndfriogzhetn tfeosrteasn,aalyndsisthoefleft plIaaattheernraailtlollyoolbbeeCooofAftthhoeexilldiivaveserer wwaecertrieevicctoyol.llleeSccattemeddpaalennsddoppfrreepssaeenrrcvvreeeddasff,oolrreefctlellalnppdrroorlilgiiffheetrraatettisiotoennsee,vvaaanllduuaatthtiieoonnleft =37 11881122..00003388 33MM_MMNN0022334433337799 CCoovvaannMcceTe -66336228098--22933311 3M T-6889.3 using proliferation cell nuclear antigen. Samplesofbile were collected and frozen for ubbiisllieengaaccpiirddoddlieeftteeerrrammtiioinnnaattciieoolnnl..nuSScaalmmepaplrleeassntooigffellniiv.veerrSaaannmddpppleaasnncocrrfeebaaisslewwewerreeereccooclolllleelccettceetddedaannaddndffrrforozozezennenffoofrror rreecceeppttoorr lleevveell ddeetteerrmmiinnaatitioonnss.. AA ssaammppllee ooff liivveerr wwaass ccoolllleecctteedd and and frozenfor frozen for APFO APFO ddeetteerrmmiinnaattiioonn.. AAddddiittiioonnaall ssaammpplleessoofftthhee lliivveerr aanndd aallll rreemmaaiinniinngg ppaannccrreeaass aanndd lleefftt aanndd rriigghhtt tteesstteess ttiissssuuee wweerree ccoolllleecctteedd aanndd ffrroozzeenn ffoorr ppoossssiibbllee ffuuttuurree aannaallyysissis.. MMiiccrroossccooppiicc `eexxaammiinnaattiioonnss wweerree ddoonnee oonn ccoolllleecctteedd ttiissssuueess ffrroomm aallll aanniimmaallss,, iinncclluuddiinngg tthhee rreeppllaacceedd aanniimmaall.. SSttaattiissttiiccaallllyy ssiiggnniiffiiccaanntt ddiiffffeerreenncceess cciitteedd iinn tthhee RReessuullttss aanndd DDiissccuussssiioonn SSeeccttiioonn aarree bbaasseedd oonn ccoommppaarriissoonnss bbeettwweeeenn tthhee ccoonnttrrooll aanndd ttrreeaatteedd ggrroouuppss.. RREESSUULLTTSS AANNDD DDIISSCCUUSSSSIIOONN MMorotratalliittyy `OOnnee aanniimmaall ggiivveenn 3300//2200 mmgg//kkgg//ddaayy ((AAnniimmaall NNoo.. 110055772244)) wwaass sacrificed sacrificed on on Day Day 29 29 bbeeccaauussee ooff ppoooorr hheeaalltthh,, aanndd oonnee aanniimmaall ggiivveenn 33 mmgg//kkgg//ddaayy ((AAnniimmaall NNoo.. 110055772211)) wwaass ssaaccrriiffiicceedd oonn DDaayy 113377 bbeeccaauusseeooff ppoooorr hheeaalltthh.. AAllll ootthheerr aanniimmaallss ssuurrvviivveedd ttoo tthhee: rreessppeeccttiivvee sscchheedduulleedd ssaaccrriiffiiccee.. AAnniimmaall NNoo.. 110055772244,, tthhee mmaallee ggiivveenn 3300//2200 mmgg//kkgg//ddaayy tthhaatt wwaass ssaaccrriiffiicceedd iinn aa mmoorriibbuunndd ccoonnddiittiioonn oonn DDaayy 2299,, hhaadd mmuultltiippllee ssiiggnniiffiiccaanntt mmiiccrroossccooppiicc ffiinnddiinnggss.. EEddeemmaa aanndd iinnffllaammmmaattiioonnooff tthhee eessoopphhaagguuss aanndd eerroossiioonnss aanndd uullcceerraattiioonnss iinn bbootthh tthhee eessoopphhaagguuss aanndd ssttoommaacchh ssuuggggeesstteedd tthhaatt aa ddoossiinngg iinnjjuurryy wwaass tthhee iimmmmeeddiiaattee ccaauussee ooff tthhee aanniimmaal'l'ss ddeeaatthh.. HHoowweevveerr,, lleessiioonnssiinn tthheelilivveerr,, iinncclluuddiinngg cceennttrriilloobbuullaarr aanndd mmiiddzzoonnaall hheeppaattoocceelllluullaarr ddeeggeenneerraattiioonn aanndd nneeccrroossiiss,, ddiiffffuussee hheeppaattoocceelllluullaarr vvaaccuuoollaattiioonn,, aanndd hepatocyte hepatocyte basophilia basophilia iinn cceennttrriilloobbuullaarr aarreeaass ((liivveerr rreeggeenneerraattiioonn)) pprroobbaabbllyy ccoonnttrriibbuutteedd ttoo tthhee aanniimmaall''ss mmoorriibbuunndd ccoonnddiittiioonn aanndd wweerree lliikkeellyy tto0 bbee tteesstt mmaateterriiaall--rreellaatteedd.. OOtthheerr iimmppoorrttaanntt ffiinnddiinnggss iinncclluuddeedd iinnvvoolluuttiioonnoofftthhee tthhyymmuuss,,aa rreellaattiivveellyy ccoommmmoonn ffiinnddiinngg iinn ssttrreesssseedd aanniimmaallss,, aanndd ddeeggeenneerraattiioonn aanndd nneeccrroossiissiinn tthhee hheeaarrtt,, wwhhiicchh were were probably probably agonal agonal changes. changes. `TThhee ccaauusseeooffddeeaatthh ffoorr AAnniimmaall NNoo.. 110055772211,, tthhee mmaallee ggiivveenn 33 mmgg//kkgg//ddaayy tthhaatt wwaass ssaaccrriiffiicceedd iinnaa mmoorriibbuunndd ccoonnddiittiioonn oonn DDaayy 113377,, wwaass nnoott aappppaarreennt.t. TThhee cclliinniiccaall hhiissttoorryy ssuuggggeesstteedd tthhaatt tthhee bblloooodd ssuuppppllyy ttoo tthhee aanniimmaall'ss hhiinndd lliimmbbss wwaass sseevveerreellyy ccoommpprroommisiseedd,, aass tthhee rreeaarr lliimmbbss wweerree nnoottiicceeaabbllyy ccoolldd aatt tthhee ttiimmeeoofftthhee ffiinnaall mmeeddiiccaall eexxaammiinnaattiioonn,, aanndd ' kKeettaammiinnee iinnjjeecctteedd iinnttoo tthhee tthhiigghh mmuusscclleess aappppaarreennttllyy ffaaiilleedd ttoo rreeaacchh tthhee ssyysstteemmiicc cciirrccuullaattiioonn ((sseeddaattiioonn ddiidd nnoott ooccccuur)r).. HHoowweevveerr,, tthhee mmaaccrroossccooppiicc aanndd mmiiccrroossccooppiicc ffiinnddiinnggss 3388 11881122..00003399 I3MM_MMNND022334433338800 CCoovannMceTe 666332299-3.23311 3M T-6889.3 for this animal were minimal and incidental (i... evidence for spinal cord injury or fiimomrppatahiiirrseeddanbbillmoooaolddwcciierrrcceuumllaaittniioiomnn awwlaaassnnndootitnuucnnidcceoonvvteearrlee(ddi.eiinn., tehveidpeonstc-eiffoeresvpalinuaatlicoonrsd).inTjuheryreofrore, the post-life evaluations). Therefore, the the rroolleeoofftteessttmmaatteerriiaall-rreellaatteedd ttooxxiiciittyy iinn tthhee aanniimmaall''ss declining declining condition condition was was unclear. unclear. CClliinniiccaall PPaatthhoollooggyy Day -11. Resultofclinical pathology tests indicated no obvious group or individual Dheaaylth-1a1b.noRrmeasluilttiseos.f clAinniicmaallpaNtoh.ol1o0g5y72te1st(sGirnoduipca2t)edhando aobnovtioaublsyghroiguhphoermaintdoicvriidtual h(4ea9l.t7h%a)bannodrmaallbiutimeisn. cAonnciemnatlraNtoio. nI0(557.621g/(dGLr)otuhpat2m) ahyadhaavneotbaebelny ahnigihndhiecmataitooncoriftmild d(4eh9y.7dr%at)iaonn.d aIltbualmsoinhcaodntcheenltroawteisotn a(b5s.6olgu/tdeLn)euthtarotpmhialychoauvnetobfeeanl atnheinadniicmaatilosn of mild (d1e,h6y0d0r/aLti)o.n. WIhteatlshoerhatdhetsheeflionwdiensgtsawbesroeludteirneectultyrooprhiinldcioruecnttlyofrealllatthedetaontimheaalsnimal's (i1ll,6ne0s0s/[rteLq)u.irW ingheetahrelry tshaecsreiffiicnedoinngDsawyer1e37dicroeucltldy noortinbedidreecttelrymirenleadt.ed to the animal's illness requiring early sacrifice on Day 137 could not be determined. DDnoaatyyasbsl33e11,d,i66f3f3e,,r99e11n,,ceaasnnddfor1188c2l2.i.niTTchahleerpreeatwwheoerlreeogrryeelltaaettsiitvveerlleyysfufleetwwssbtseatttaitwsiestteiinccaaltllhlyye significant or otherwise: csoigntnriofilcaanntdotrreoattheedrwise nanoitmaablles,deifsfpeerceinaclelys tfohorscelianniciamlalpsatghiovleongy3 toerst1r0esmugl/tksgb/edtawy.eenNothneecoofnttrhoeldainfdfetrreenacteesdwere ccaconooninmsmspiirasstlotseem,nnitetssooepvvdeeecrribayttliilmtymheeet..huoCCnsoseomcmahpneapdiramuirilsaseloosdnnsgssiavwwcrieiitntfhhi3ctthehooeerfaa1nno0iinmmmeaaglal/ssnkigggm/iiadvvlaeeynni.n33tN00h//io22sn00gemrmooggfu//ptkkhgoge//ndddaaiDfyyafewwyreee2rnr9eeceasndwtehree cceosmsaptrioomn iosfedtrbeyattmheentufnosrchtehdreueleodthsearcsribfiyceDaoyf o8n0.e aFnoirmtalhincltihniiscaglropautphoolnoDgyayte2s9tinagnd the icinnettseesrravvtaaiollssn ooonn f DDtraeayaystsm99e11natannfoddr 1t8h2r,eethoetrheerwsebrye 182, there were Donalyy only 8t0w. o two Fanoirmtahlescilintihciasl animals in this gpraothuoplotiglyl group still treescteiinvging. receiving ttrreeaattmmeenntt. Of uncertain relationship to administrationofthe test material were mildly increased tOrifgulnycceerritadeincorenlcaetniotrnasthiipontoanaddmmiilndilsytratotiomnodoefrtahteelteysdtemcraetearsieadl wabesroelumtieldnleyutirnocprheialsecdoun, ttroitgallypcreorticdienccoonncceennttrraattiioonn,anadndmailldbluymiton mcoondceernattrealtyiodnecfroeranseidnabasogliuvteenneutrophil count, t3s3oi00tg/7a2n21li03fpirmmcogagtn/e/tkkignog/n/cddDaoayany.cy.esnTT3thhr1aeetiaddoniinffd,ffe9ear1rne.ednnccaTeelhbffeuoomrrotttirhrnieigrgclloydyncicefcefrreieindrdteeernaccctooieonsncncewefnenotrtrreraaatntniioiootmnnsatwwlasatasigssitssvittecaaanttliilssyttiicsciaaglllnlyyificant but wswiegernreeifrriecellaaantttiivvoeenllyyDccaooynnsssi3iss1tteeannnttdoov9ve1err. tTimhee. time. otPhreirordtifofetroepnpciensgwtehreeirntorteasttamteinstti,caalblsyolsuigtneificant Prior to stopping their treatment, absolute but naneneuiutmtrraoolppshhigililvcceoonuunn3tt07aa2nn0dd maagllb/bukamgm/iidnnaccyoontnchcaeetnnthtrraaadttiitoohnnirwweterrreeeammtimilelddnlltyysddteeoccprrpeeeaadssepedrdeffmooarrtuecraaecclhhoyofbftethchaeuttshherreoeeef apppnoooiooomrrrahhhleeesaaallglttthihhv..efAnoAlr3lll0oo/v2ffa0trthhimeetssgyee/fokiffginn/rdddeiaiannysggotsnshasaar.treehSagpgedeencnteiherfreaiailclrllmytyreenncaoohtnnmassnpepeinecstcimisffstiioccrpeaaplnneaddtdcecpdaarntneobmbdeeaiartusaecssrtesoolcayciciatbaitetoeecnddasuowwsfieitththohfe: pteosot rmhateearlithalfowreraevanoritetayppoarferneta.sons. Specific mechanisms related to direct actions of the test material were not apparent. Animal No. 105722, the animal in the high-dose group whose treatment was stopped on ADanyim6a6l, Naod. 1m0o5d7e2r2a,tethley ahniigmh asleirnutmheachtiigviht-idesosfeorgarospuaprtwatheoasmeitnroetartamnesnfetrwasaes,satolapnpiende on aDmaiyno6t6r,anhsafdermasoed,eraantdelcyrheiagthinsekriunmaseacatnivditmieosdefroartaeslpyarhtiagteh asemriunrontrbalnesfaecriadsec,onacleanntinraetion aminotransferase, and creatine kinase and moderately high serum bile acid concentration E39 11881122..00004400 I3MM_MMNN0022334433338811 CCoovvaannIccMee 66T32629982-2933311 3M T-6889.3 oonn DDaayy 6633.. TThhee rreellaattiioonnsshhiippoofftthheessee ffiinnddiinnggss ttoo aaddmmininisisttrraattiioonnoofftthhee tteesstt mmaateterriiaall iiss nnoott kknnoowwnn.. SSttaattiissttiiccaallllyy ssiiggnniiffiiccaanntt ddiiffffeerreenncceessffoorrootthheerr tteesstt rreessuulltts wweerree ccoonnssiiddeerreedd iinncciiddeennttaall aanndd uunnrreellaatteedd ttoo aaddmmininisisttrraattiioonn ooff tthhee tteesstt mmaateterriiaall.. TThheessee ddiiffffeerreenncceess wweerree iinnccoonnssiisstteenntt oovveerr ttiimmee,, aanndd iinn ssoommee ccaasseess,, wweerree ssiimmiillaarr ttoo ddiiffffeerreenncceess tthhaatt eexxiisstteedd bbeeffoorree the the initiation initiation of of ttrreeaattmmeennt.t. DDaayyss 221177,, 224455,, aanndd 227755 ((RReeccoovveerryy aanniimmaallss)).. TThheerree wwaass nnoo eevviiddeennccee ooff ppeerrssiisstteenntt oorr ddeellaayyeedd ttooxxiicc eeffffeeccttss oonn cclliinniiccaall ppaatthhoollooggyy tteesstt rreessuultltss.. UUnnsscchheedduulleedd SSaaccrriiffiiccee AAnniimmaallss.. AAnniimmaall NNoo.. 110055772244,, aann aanniimmaall iinn tthhee hhiigghh--ddoossee ggrroouupp,, wwaass ssaaccrriiffiicceedd oonn DDaayy 2299.. tItss mmoosstt nnoottaabbllee cclliinniiccaall ppaatthhoollooggyy ffiinnddiinnggss wweerree aa mmiilldd nneeuuttrroopphhiilliiaa ((1133,,770000 nneeuuttrroopphhiillss//~uLL));; mmiilldd hhyyppooggllyycceemmiiaa ((gglluuccoossee == 5533 mmgg//ddLL));; mmiilldd aazzootteemmiiaa ((uurreeaa nniittrrooggeenn == 2299 mmgg//ddLL);; mmooddeerraattee ttoo mmaarrkkeedd hhyyppoopprrootteeiinneemmiiaa ((toottaall pprrootteeiinn == 55..66 gg//ddLL;; aallbbuummiinn == 22..99 gg//ddLL;; gglloobbuulliinn == 22..77 gg//ddLL));; mmooddeerraattee hhyyppooccaallcceemmiiaa ((ccaallcciiuumm == 88..00 mmgg//ddLL;; lliikkeellyy dduuee ttoo llooww aallbbuummiinn ccoonncceenntrtraattiioonn));; mmaarrkkeedd hhyyppoocchhoolleesstteerroolleemmiiaa ((cchhoolleesstteerrooll == 1144 mmgg//ddLL));; mmaarrkkeedd sseerruumm eennzzyymmee aaccttiivviittiieess ((ee..8g..,, aassppaarrttaattee aammiinnoottrraannssffeerraassee == 11,,997744 IIUU//LL;; aallaanniinnee aammiinnoottrraannssffeerraassee == 11,,446633 I1UU//LL;; ssoorrbbiittooll ddeehhyyddrrooggeennaassee == 5599 IIUU//LL;; aanndd ccrreeaattiinnee kkiinnaases=e-- 6688,,885500 IIUU//LL));;mmilildd hhyyppeerrbbiilliirruubbiinneemmiiaa ((ttoottaall bbiilliirruubbiinn == 11..88 mmgg//ddLL));; mmiillddllyy iinnccrreeaasseedd sseerruumm bbiillee aacciidd ccoonncceennttrraattiioonn ((4499 u~tmmool]/LL;); aanndd mmooddeerraattee ttoo mmaarrkkeedd hhyyppoonnaattrreemmiiaa ((ssooddiiuumm == 113333 mmmmolo/l/LL))aanndd hhyyppoocchhlloorriiddeemmiiaa ((8899 mmmmolo/l/LL)).. AAlltthhoouugghh mmaannyy ooff tthheessee: ffiinnddiinnggss aarree nnoonnssppeecciiffiicc aanndd aarree ccoommmmoonnllyyoobbsseerrvveedd iinn aanniimmaallss tthhaatt aarree vveerryy iilll,, tthhee sseerruumm eennzzyymmee aaccttiivviittiieess wweerree iinnddiiccaattiivveeooffsusbusbtsatanntitiaall lliivveerr aanndd mmuussccllee iinnjjuurryy,, aanndd tthhee hhyyppoocchhoolleesstteerroolleemmiiaa wwaass uunnuussuuaallllyy sseevveerree.. AAnniimmaall NNoo.. 110055772211,, aann aanniimmaall iinn tthhee llooww--ddoossee ggrroouupp,, wwaass ssaaccrriiffiicceedd oonn DDaayy 113377.. Ittss mmoosstt nnoottaabbllee cclliinniiccaall ppaatthhoollooggyy ffiinnddiinnggss wweerree mmaarrkkeedd hhyyppeerrffiibbrriinnooggeenneemmiiaa ((fBibbrriinnooggeenn == 770022 mmgg//ddLL));; mmooddeerraattee llyymmpphhooppeenniiaa ((11,,770000 llyymmpphhooccyytteess//~utLL));; mmoodedreartaete: hhyyppooaallbbuummiinneemmiiaa ((aallbbuummiinn == 33..33 gg//ddLL));; aanndd mmiilldd hhyyppoocchhoolleesstteerroolleemmiiaa ((9944 mmgg//ddLL)).. "TThheessee ffiinnddiinnggss wweerree aallssoo nnoonnssppeecicfifiicc,, aanndd wwiitthh tthhee eexxcceeppttiioonnooffllooww aallbbuummiinn ccoonncceennttrraattiioonn,, wweerree nnoott ttyypipcailoocffatthhlee ffiinnddiinnggss oobbsseerrvveedd iinn tthhee aanniimmaallss iinn tthhee hhiigghh--ddoossee `ggrroouupp tthhaatt hhaaddttoobbee wwiitthhddrraawwnn ffrroomm ttrreeaattmmeennt.t. AAlltthhoouugghh tthhee ffiinnddiinnggss ffoorr tthhiiss animal animal in in tthhee llooww--ddoossee ggrroouupp ddiidd nnoott iinnddiiccaattee aa ssppeecciiffiicc ccaauussee ffoorr iittss ppoooorr hheeaalltthh,, tthheeyy wweerree nnoott ccoonnssiiddeerreedd ttoo bbee ddiirreeccttllyy rreellaatteedd 1to0 aaddmmininisisttrraattiioonnofoftthhee tteesstt mmaateterriiaall.. a4On 11881122..00004411 I3MM_MMNN0022334433338822 CCoovvaannMccee 66T33622095--29233311 3M T-6889.3 AAnnaattoommiiccPPaatthhoollooggyy//TTeerrmmiinnaall SSaaccrriiffiiccee ((WWeeeekk 2277)) `TTeerrmmiinnaall BBooddyy W Weeiigghhttss aanndd OOrrggaann W Weiegighhtsts.. MMeeaann aabbssoolluuttee lliivveerr wweeiigghhttss aanndd mmeeaann lliivveerr--ttoo--bbooddyy wweeiigghhtt ppeerrcceennttaaggeess wweerree ssttaattiissttiiccaallllyy ssiiggnniiffiiccaannttllyy iinnccrreeaasseedd iinn aanniimmaallss tthhaatt wweerree ddoosseedd uunnttiill WWeeeekk 2277iinn tthhee 33,, 1100,, aanndd 3300//2200 mmgg//kkgg//ddaayy ddoossee ggrroouuppss.. IInn aaddddiittiioonn,, mmeeaann lliivveerr--ttoo--bbrraaiinn wweeiigghhtt rraattiioo wwaass ssttaattiissttiiccaallllyy ssiiggnniiffiiccaannttllyy iinnccrreeaasseedd iinn aanniimmaallss iinntthhee 1100 mmgg//kkgg//ddaayy ggrroouupp oonnllyy.. AAlltthhoouugghhnnooccoomrerlealattiivvee mmaaccrroossccooppiicc oorr mmiiccrroossccooppiicc cchhaannggeess wweerree sseeeenn iinn lliivveerrss iinn aannyyoofftthheeaanniimmaallss ffrroomm tthhe tteerrmmiinnaall ssaaccrriiffiiccee,, tthhe iinnccrreeaasseedd lliivveerr wweeiigghhttss iinnaallll ddoossee ggrroouuppss mmaayy iinnddiiccaattee aa tteesstt mmaateterriiaall eeffffeecctt,, ggiivveenn tthhee nnaattuurreeooftf thhee tteesstt mmaatteerriiaall aanndd tthhe lliivveer lleessiioonnss sseeeenniinn tthhee mmaallee iinn tthhee hhiigghh--ddoossee ggrroouupp ssaaccrriiffiicceedd oonn DDaayy2299.. `AAbbssoolluuttee lleeftt kKiiddnneeyy wweeiigghhtt wwaass ssttaattiissttiiccaallllyy ssiiggnniiffiiccaannttllyy iinnccrreeaasseeddiinnaanniimmaallss iinn tthhee 33007/2200 mmgg//kkgg//ddaayy ggrroouupp,, bbuutt tthhiiss wwaass ccoonnssiiddeerreeddaan iinncciiddeennttaall ffiinnddiinnggbbeeccaauussee tthheerree wweerree 1n0o tteessttmmataetreiraiall-erellaatteedd mmaaccrroossccooppiicc oorr mmiiccrroossccooppiicc ff'imnddiinnggss iinn tthhee kkiiddnneeyy.. TThheerree wweerree. 0no ootthheerr ssttaattiissttiiccaallllyy ssiiggnniiffiiccaanntt oorr ttooxxiiccoollooggiiccaallllyy ssiiggnniiffiiccaanntt oorrggaann wweeiigghhtt vvaarriiaattiioonnss iinn ttrreeaatteedd aanniimmaallss.. M Maaccrroossccooppiicc FFiinnddiinnggss.. TThheerree wweerreennoo tteessttmmataetreiriaall-rreellaatteedd mmaaccrroossccooppiicc ffiinnddiinnggss.. AAllll m`maaccrroossccooppiicc ffiinnddiinnggss wweerreeooffllooww iinncciiddeennccee,, wweerree rraannddoommllyy ddiissttrriibbuutteedd aammoonngg ttrreeaatteedd aanndd ccoonnttrrooll aanniimmaallss,, aanndd wweerree ccoonnssiiddeerreedd oto bbee ssppoonntatnaenoeuosouorsr iinncciiddeennttaall cchhaannggeess tthhaatt wweerree ooff nnoo ttooxxiiccoollooggiiccaall ssiiggnniiffiiccaannccee.. MMiiccrroossccooppiicc FFiinnddiinnggss.. TThheerree wweerree nnoo tteesstt mmaateterriiaall--rreellaatteedd mmiiccrroossccooppiicc ffiinnddiinnggss iinn aannyy Oofftthheettiissssuueess tthhaatt wweerree eexxaammiinneedd,, iinncclluuddiinngg lliivveerr,, aaddrreennaall,, sspplleeeenn,, ppaannccrreeaass,, aanndd tteessttiss. AAllll mmiiccrroossccooppiicc ffiinnddiinnggss wweerree ccoonnssiiddeerreedd ttoo bbee ssppoonnttaanneeoouuss oorr iinncciiddeennttaall cchhaannggeess aanndd ttyyppiiccaall ooff ffminddiinnggss sseeeenn iinn mmoonnkkeeyyss oonn ttooxxiicciittyy ssttuuddiieess. AAnnaattoommiicc PPaatthhoollooggyy//RReeccoovveerryy SSaaccrriiffiiccee ((WWeeeekk 4400)) `TTeerrmmiinnaall BBooddyy W Weeiigghhttss aanndd OOrrggaann W Weiegighthsts.. `TThheerree wweerree nnoo teessttmmataeterriiaalk-rreellaatteedd eeffffeeccttss oonn tteerrmmiinnaall bbooddyy wweeiigghhttss oorr oonn aabbssoolluuttee oorr rreellaattiivvee oorrggaann wweeiigghhtsts.. AAbbssoolluuttee oorrggaann wweeiigghhttss aanndd oorrggaann--ttoo--bbrraaiinn wweeiigghhtt rraattiiooss wweerree ccoonnssiisstteennttllyy hhiigghheerr iinn tthhee ccoonnttrrooll mmaalleess,, bbuutt tthheessee eelleevvaattiioonnss wweerree aattttrriibbuutteedd ttoo hhiigghheerr tteerrmmiinnaall bbooddyy wweeiigghhttss iinn tthhee ccoonnttrrooll aannimiaals ((oonnee wwaass eevveenn nnootteedd aas bbeeiinngg oobbeessee aalt nneeccrrooppssyy).). MMeeaann oorrggaann--ttoo--bbooddyy wweeiigghhtt ppeerrcceennttaaggeess,, iinnccllnuddiinngg mmeeaann llivveerr--ttoo--bbooddyy wweeiigghhtt,, sshhoowweedd oonnllyy slliigghhtt vvaarriiaattiioonnss tthhaatt wweerree ccoonnssiiddeerreedd uunnrreemmaarrkkaabbllee.. TThheessee ffiinnddiinnggss iinnddiiccaatteedd tthhaat tthhee lliivveerr wweeiigghhtt iinnccrreeaasseess wweerree rreevveerrssiibbllee.. 4a1 11881122..00004422 33MM_MMNN0022334433338833 . comgeonnaan Covance 6329-231 3M T-6889.3 . `MMaaccrroossccooppiicc FFiinnddiinnggss.. TThheerree wweerree nnoo tteesstt mmaateterriiaall--relaatteedd m`maacrrooscoppiic fiinndinggss.. IInn ffaacctt,, nnoo mmaaccrroossccooppiicc lleessiioonnssooffaannyy kkiinndd wweerre seen in one coonnttrrooll aniimmaall or iinneeiitthheerr ooff eg er the 10 mg/kg/day animals. The remaining control male was considered to be obese and Aa had liver adhesions, an incidental change. . `Microscopie Findings. There were no test materiab-related microscopic findings at the Microscopic Findings. There were no test material-related microscopic findings at the `rereccoovveerryy ssaaccrriiffiiccee.. AAllll mmiiccrroossccooppiicc ffiinnddiinngs wweerre inncideennttaall, ooccccuurrred rraannddoommlly iinn ont oh ad ite oes To et mt control animals and in animals given 10 mg/kg/day, and were typical of findings seen in . sgn: cynomolgus monkeys on toxicity studies. . [E a hroAntch eBH 1w8oLeconte200/ Date Diplomate, ACVP (Clinical Pathology) fEooRR fel /(~Hiipplloommaattee,, AA~G(Y/JP~ ~/ Ts Diplomate, ABT . ab 1l%w fe e e220001 Date . . 42 . -- 3M MN02343384 11881122..00004433  Cones 29-51 Covance 6329-231 MT 3M T-6889.3 . COMMENTS ON THE DATA COMMENTS ON THI~ DATA Various modelofcalculators, computes, and compute programs were used analyze Various models ofcalculators, computers, and computer programs were used to analyze ata inthis study, Because diferent models oundoffor truncate umber diffrent, data in this study. Because different models round off or truncate numbers differently, `vvaalluueessiinnssoommeettaabblleess ((ee..gg..,, mmeeaannss,,ssttaannddaarrdddedveivaitaitioonnss,,oorriinnddiivviidduuaall vvaalluueess))mmaayydidfiffferr ssliigghhtllyyffroommththoossee iinn oothher taabblleess,, ffrroomm iinnddivvidduaallllyy ccalccuulaatteedd ddaattaa,, oor ffrroomm staattisstiiccaall analysis daa. Neither the integrity nor the interpretation ofthe data was affected by these analysis data. Neither the integrity nor the interpretation ofthe data was affected by these differences. differences. `SSoommeettaabbuullaarrddaattaa wweerree ccoommppiilleedd uussiinngg EExxcceell VVeerrssiioonn 77.0.0 ssooffttwwaarree. . Tm"Tghhekeguuinniiatssy.ffoorr tthhee ddoossee lleevveellss oonn tthhee ddiattaa ccoolllleeccttiioonn ssyysstteemm ((PPTTSS))ssuummmmaarryyttaabblleess aarree mg/kg/day. . "TT(Thhaeebulnemumb1reberer oofffanalnitimmheaealclussmlltibmiesseredoiifnnattnhhieemhhaleeasaddaiinsngigoonffetthhdee1ssucmaucmhmgarrymooouffpaccallitrinntiihccyeaasllaoobbtsseeorfrvvtaahtetiioosnntssattyaa:bbllee (Table 1) reflects the number of animals assigned to each group at the start of the study. "TcTohhneedsisutuimmomnmawararyysttoaabbblsleeesrsvffeoodrrwccilliitnnhiioccuaatlloorbebsgseaerrrvdvaatotiitoohnness iisnnpddeicicciafatiteec ttthheuernnu,musbeevmeroroiftbfaya,nnierimmvaeralrlsssbffioorlwrkwyh,hiicchha umber ofincidences/anima, or the length of the condition persisted. condition was observed without regard to the specific nature, severity, reversibility, number of incidences/animal, or the length of lime the condition persisted. ables. . OOnnllyy oobbsseerrvvaattiioonnssootthheerrtthhaann nnoorrmmaall aarree iinnddiiccaatteedd oonn tthhee ssuummmmaarryy cclliinniiccaall oobbsseerrvvaattiioonns tables. . T"aTthhteehelleetvvieelmleooofffssteehvveeerrioitbtyyseffroovrraootbibossneerrnvvaadttiioiosnnssionodfficaaatttaaexxdiiccasaann"ddUhhNyySppPooEaacCctItiiFvveeIEbbeDehh"aavoviniootrrhwewaasssunnmoomtassrppyeeccaiinffdiieedd inadtitvhiedtuiamleoobfsethrevaotbisoenrsvtaatbiloens and is indicated as "UNSPECIFIED" on the summary and individual observations tables. "TThhee ssppeecciiffiicc ddeettaaiills foorr ccoommmmeennttss inntthhe iinnddiivviidduuaall cclliinniiccaall oobbsseerrvvaattiioonnss ttaabblleess tthhaatt aarree iinnddiiccaatteedd ww ithai a ""CCt ""ccaanh nbbee ffoouunnddaatttthheeeenndd ooffeeaacchh ggrroouuppffoorrceaacchh sseexx.. "TThheeddaayyofofininititiiaattiioonn ooffttrreeaattmmeennttiiss""DDaayy1,1, W Weeeekk 11.."" BBooddyywweeiigghhttddaattaaaarreeeenntteerreeddaatt 1bhodsytawretoifgha,satubdoydwyeweekig(he.tg.reacboroddeydwoeniDgahy r8ecisocrodnesdiodneDready4 |Weisocko2nbosdiy wdaeeiWgerhtee.kd| the start ofa study week (e.g., a body weight recorded on Day 1 is considered a Week 1 BdbBoaoodydodyyyfwwweteiheeigigghhfhttot,lccalhhobaawonnidggnygeedswdatateutiadagyhaarwtrecereecccaakollcrc(duuelelgaad.tteeodWdneffDreroaokmymt|8thhveieaslffcuioressntidsadiadaeyeysorceoafdlftcttahuhleW eaststeetuueddkdfyy2rwowebmeoeedDkkyaytowo e|ttihgehhft)irer.sst day of the following study week (e.g., Week 1 values are calculated from Day 1 tthhrroouugghh 77)).. . eDDixifpfflfeearrieennneccdeeossniitnnhttehheeinppdooippvuiuldlauatatiiloondnasstiiazzetea(b(lNNe)s).oonntthhe ssuummmmaarryy atabblleessffoor lclsiincicaall ppaatthhoollooggyy aarree explained on the individual data tables. . " . 43 a3MM_MboNz03243433338855 11881122..00004444 CCoorvaannIccMee 66T3262993.-22933311 3M T-6889.3 CCOOM MMMEENNTTSS OONN TTHHEE DDAATTAA ((CCoonnttiinnuueedd)) RRineetsseuurlvlttasslooaffpcpcleliiannriiccoaanll ptphaaetthhioonlldooiggvyiydssuaaalmmpcplllieenssicccaoolllllpeeacctttheeoddlffooogrryaatnnaibimmleaasllssfossraacctrrhiieffiincceeexddtaasttcaahnneduuunnlsseccdhheienddtueurllveeaddl. `iTTnhhteeesrsevearrleesasupulplttessaaarrroeennnotohtteooinnndtthhiveeisdsuuumamlmmcaalrirnyyicttaaablbllpeeassthaaonnlddoagarryeentanobotlteiisnncfcolluruddtehedde niinnetxthhetesstcsahttaeitdissuttilieccdaallinterval. aannaallyysseess.. DDoossiinngg wwaass ddiissccoonnttiinnuueedd ffoorr AAnniimmaall NNooss.. 110055771111,, I10055772222,, aanndd 110055770033 ((GGrroouupp 44)) oonn DDdaaatyyassf44r33om((WWtheeeeeskke 7a7)n),,im66a66ls((WWaefeteeekkr d11o00s))i,,naagnndwda88s11d((iWWsceeoeenkkti11n22u))e..d SSauunmdmmmthaiarsryydattatababllaeersseddnoootnnooitnt ciinlnuccdllueudddeein ttdhhaeetassttfaarttoiimssttiictchaalelsaaennaaalnlyyismseesas..ls after dosing was discontinued and this data are not included in t`ShSoeommdeeataaanniwimmearalelssrwweeceroreredooebbdssoeenrrvvteehddeaadnnaddy tttrrheeeaatteeexddabmbyiytnhtahteeiollanabbwooarraasttoodrroyyneaa.nniiTmmhaaellsvveeetdteearrtiiannaaarrryey rsstteaafffeffr,,eaannncdded i`tinhanpettphhdeeeaartRRaoeenwqquueterheseesttrseffuocomrormrVVdaeeetrtdeeyrroiionnnraatirrhnyyediSSdveeairrydvvuitiacchleeesscelaaxinnnaiddmcaaailnrreeoabtaaisroreccnrhhviiwavvateesiddodnwwosiintttehha.bttlhehTsee.hrreaaswew dddaaatttaaaabbruuettrddeoofennroeotntced appear on the summary or individual clinical observations tables. dDDaaatttaaawccioolllllleenccottteedbdeffooirrncAAlnunidimmeadallinNNotoh..is1100re55p77o22rt33.((GGArnrooiuumppal22))Nwwoi.illll10bb5ee7mm2a3aiinwntataasiinnseeaddcriiinnfittchheeed rriaanwwmoddaratitaab;;uttnhhdiiss c1dc0ooantnbaddeiawittiiioblolnancnootoenntribDDaealayyisnec11pl44tu;;idttcehhedeemiiccnaaauutwhsshieeisocorfhefpttwhohaeerst.mmuoonArrriniebbilmuuatnnaeddldNcctoooonn.dtd1ihit0etii5too7enns2ot3ofmfwattthhaeiisrssisaaaalnnc.iirmimfAaianclliewwdmaaaislns ddmNeeoott.eerrir1bmm0uii5nnn7dee2dd3 twwoaabsserreaeppbllaaaccceteeddribbayyl sAAennpiitmmicaaellmNNioao..w11h00i55c77h22w11 aoosnnuDDnaraeyyla11t5e5.d. to the test material. Animal No. 105723 a4"4 11881122..00004455 I3MM_MMNND022334433338866 CODES, ABBREVIATIONS, AND UNITS CODES, ABBREVIATIONS, AND UNITS `GGeenneerraall CCooddeess aanndd AAbbbbrreevviiaattiioonnss CCooddeess ffoorr CClliinniiccaall PPaatthhoollooggyy AAbbbbrreevviiaattiioonnss aanndd UUnniittss ffoorr CClliinniiccaall HHeemmaattoollooggyy AAbbbbrreevviiaattiioonnss aanndd UUnniittss ffoorrCClilinniiccaall CChheemmisisttrryy AAbbbbrreevviiaattiioonnss aanndd UUnniittss ffoorr CClliinniiccaall UUrriinnaallyyssiiss `CCooddeess ffoorr AAnnaattoommiicc PPaatthhoollooggyy CCoovvaannMcceeT6633e2209s--2233311 3M T-6889.3 NNoottee:: TThhee ffoolllloowwiinngg lliissttssooff ccooddeess,, aabbbbrreevviiaattiioonnss,, aanndd uunniittss aarree uusseedd bbyy Covance. Some, but not necessarily all, ofthis information may be: Cneoevdaendcef.orStohims er,ebpourttnot necessarily all, of this information may be needed for this report. 4455 11881122..00004466 I3MM_MMNN0022334433338877 W WN KK NMMCeaeaaMnn;; MEAN MEAN SCDA;MS.D.; STAND DEV; S.DSS;TTSAA.DNN.DD; AASTRRADDNDDDEEVDV;E; Vssdd; SNA N-Nc; VVNLLA C UU# NNSSCCHHEEDD # Cove 6329-51 Covance 6329-231 She 3M T-6889.3 GGeenneerraall CCooddeess aanndd AAbbbbrreevviiaattiioonnss W WNueemeebkker of measurements ina group NACArourivimttahhrbmmaeetertetioi-ccfammmdejeesaaatnnseudremmeeannts in a group SCSttoaavnnaddraairraddtedd-aeevdvijiuaatstiitoeonnd mean GtGhrreoomuueppammneeoaafnntsihsessciioggnnntiirffiiocclaagnntrtlloyyuddpiif(ffGferrreeonnuttprf1r)oommat tpNpho<e<v0ma00l.e0u5a5en:nooftthaeppcloinctarbolleg;nrooutpp(rGesreonutp 1) at `NNNCoooomvvvimaissleiiubnbellt;eenflloeoesutsiniaoodpnnapsslictahebleen; dnooft eparecshengtroup CffUoonorrsmcecaahmcceehhdnusstleefexxodund at the end of each group Number Unscheduled Number AAnnTiimmaall DDeeaatthh CCooddeess:: T M MUu TTMeoerrrmmiibinnuaanlldssaaccrriiffiiccee FFMiirrossrttibppuoosnstdtrreeccoovveerryy ssaccrrfifiiccee [463 11881122..00004477 33MM_MMNN0022334433338888 ) CCoonvannMcceeT6633e2209s.-2233311 3M T-6889.3 `CCooddeess ffoorr CClliinniiccaall PPaatthhoollooggyy GGEENNEERRAALL CCOODDEESS \ NQNSSSIQNS NQNuooanssaaimmtpypllneeot sufficient QS/QNS FNSRNR FNNQiooubrarrineentppisteeytaarttann((odsstsaa.smmuppflflieecivveoonlltuummee nnoott ssuuffffiicciieenntt ffoorr rreeppeeaatt aannaallyyssiiss)) FSsSSCHc FS`SlSiaibamgmrhippntllleesytccrhlaleoonmttdttoeselddyzed : SHHSLH HHSSleleiimgmgohhotltlllyyyyzzhleeieddpmemoilcy:zed sLLStL LLSSliiliippggeehhmmttliliyycc liicpteermicic NI1SEI ITAScenlttiieegrmrhiiactclly niocttefriacsted UNuDFTDOT AUUAnnnnsisicmmchahaeleldddnuuiloleetedddf/a/omsmntoeotrdreiisbtbuunndd bieed bleed DBDT/DOT ADineidmdaulrdiinegd bolneetedistng DTTilJEB DTTTeeeiccechhdhnnnidiiccucairilaiannnegrjjuruboddlreggem(mdieiennnmstgtrttuoomerrenetppeeoaartt ttteeessctthnician error tha results in TE uTsunnpeaiacccehccdnee,ippcteataanlbbtelrlreeyrododrfaata(iai,nn,vseeatg.lr.giu,.dm, duueannntaatacc)occreeptpettcaahbblnleeiciiinansnsttrerurumrmoeernmtthooaumttrppeuustut,,ltsssaamminpplele. RE sRpeiclolerdd,ienngteryrroorf i(nrveacloirddeddatian)correct data, .&., wrong number, EE spelling error, incorrect date) Recording error (recorded incorrect spelling error, incorrect date) data, e.g., wrong number, Entry error incorrect keyboard entry) SESPEEEC ESanmtrpylienrrgoerr(rionrcorrect keyboard entry) PSlaamtcplelitnsgclerurmopred PPPPlDCD PPPPllllaaaatttteeeelllleeeettttssss dcdienleucccmrrreeepaaaesssedeeddd PPPPAILL PPPPllllaaaatttteeeelllleeeettttssss aillanaprrcpggreeee:aarseaddequate HcPCBAOo CHPCeoloailltnooezrrleiibtmnsotdeaeirrpfefpeeserreoeassbrswaweidirttevhhqeuttdeeassttte HPPNLBLOAAASSMGMGOO HPNPlloeaaisnsamzgmgoobrddoeiidguuaimemtsioonbserved FNFuRRODAGG FNroacatgigoursegation FUnraacbtlioeutso determine. UNNOTODCCOOAAGG No coagulation Unable to determine No coagulation a 47 11881122..00004488 33MM_MMNN0022334433338899 , Covnce e331 Covance 6329-231 Te3M T-6889.3 CCooddeess ffoorr CClliinni|ceaall PPaatthhoollooggyy ((CCoonnttiinnuueedd)) RREESSUULLTTSS NNOOTT IINNCCLLUUDDEEDD IINN SSTTAATTIISSTTIICCAALL AANNAALLYYSSEESS \ HHSaeemmmpololelyyszzeefddroccmlliiannniicciaamllaclchsheeammtiuissnttsrrycyhooerrducclooaeagdguulilnaattteiiroovnnalsssaammpplleess PAPScrratoomitthvpharrloetosmemdbfbripionanmrtttiiimaamnleeitsmsh(r(aPoPlsTmTb)a)otggpurrleenaaassttcteehirrenhtdhtauailnnmeed55s00i(nssPteeeTcrcTvoo)annlddgssrseater than 10 seconds Bleed times (BLETIME) greater Activated partial thromboplastin Bleed times (BLETIME) greater than30 minutes times (PTT) greater than 30 minutes than 110 seconds CCOODDEESS FFOORR BBLLOOOODD CCEELLLL MMOORRPPHHOOLLOOGGYY Tp"Tohhieekifflooollcllyootwwoisininsgg (ssPccaOallIeeK)ww.aasspouulssyeecddhttrooommmaeesaaissauur(reePOtthLheYe,)dd,eegghrryeepeeooocfhfaranonsmiosaocsycityaotos(siHissYP((AOA)NN,IISSaOOn)d),,toxic: neutrophils (TOXNEUT): poikilocytosis (POLK), polychromasia neutrophils (TOXNEUT): (POLY), hypochromasia (HYPO), and toxic SSac~allee Demee Nomi fDoret~hreeespecies 1 1 sigh Normal Slight for the species 232 MMMoaodrdekreeradattee 443 NMotaarkpepdlicable Not applicable NoPPrpeerseensnecnste _ Rare Not present Rare FFMoeewdwerate MMaondyerate Man), BA SPPtaalrleeaw Straw CDDYaYerellkllooywwellow Dark yellow oe EEF CAABormmloobbwreenrr F Brown GHG GRRreeedden H Green UURRIINNEE AAPPPPEEAARRAANNCCEE IP1 BBBlllaaoccckklgeen P Blue/green QQR_OBBrllauuneege R Orange Cay Clarity 7 Clear J Clear K Hazy K Hazy LL CClloouuddyy MMMiisscDeeellbllraaineseoonuss 0MO Feces Debris Feces a48 11881122..00004499 W3M_MNM0N203243433330900 CCoovvaannSccMee 66T33o2299s--22033311 3M T-6889.3 CCooddeess ffoorr CClliinniiccaall PPaatthhoollooggyy ((CCoonnttiinnuueedd)) UURRIINNEE CCHHEEMMIISSTTRRYY M MUULLTTIISSTTIIXX SSTTRRIIPP UUririnnee GGlluuccoossee +- 1NN0ee0ggaamttgiivv/eedL ++++++++ 252150500000mmmmygggid//dddLLLL wre+++ ++++ 5110,.000000m0mmgg/gd//LddLL ++ ++++ 2_2>,20,00000 mmgg//ddLL UUrriinnee KKeettoonnee +- 5NNemegggaa/ttidivvLee +++++++ 1451505mmmmgggg//d/dLddLL ++e++ 8400 mmggl/ddLl ++++ 80 mg/dL A++b++b+ 116600mmgg//ddLL UUrriinnee BBlloooodd +-~ SNNmeeagglaalttiivvee +++r+++ LMSMaomordadgeleerlraattee +++ Large Utine Urobilinogen Urine Urobilinogen ~ 02mg/dL. 0.2 mg/dL + ng/L. + 1 mg/dL ++ 2mydl ++ 2 mg/dL +++ 4meld +++ 4 mg/dL +++++++ 88 mmgg//ddLL ((11 mmgg == aapppprrooxxiimmaatteellyy 1| EEhhrrlliicchh uunniitt)) UUrriinn~ ee BBNieillgiirarutubbiiivnne ++++- NSSMmomeadgaleallrltiavtee ++++++++ Large Moderate Large UURRIINNEE SSEEDDIIMMEENNTT CeCAlelllsAs,m, oCCrrrypyshtsaotlausls,s, uCCraaaststetsss,, aanndd CCooQmmmmeSenpntetsrsm AB AAmmoorrpphhoouuss puhraotsepshates QR SFepcearlmcontamination CB UArimcoarcpihdous phosphatcs RS FPecial nconwotvaomafinroautmniodn DEDC TrCUTiarrlpiipccllieeaucppmihdhooosxsapplhhaaattteeess TT S U PiPninwwoorrmm olavravafeofuonudnd PPinawroramovslaairvfaoteunefdound EF CCaallcciiuumm coaxrabloanteate U Parasite ova found GF G Granular casts Calcium carbonate Granular casts HHI HCyeHalyllauillinnaeercccaaasstststss 0015 NNoottppperreresfseienenlttd IJJK WUW Canxekalynxluyolcawcarnascstctassrsytsstal 21 6-11-50ppeerrffieiledld 32 161-2100ppeerrfifeiledld K Unknown crystal 3 11-20 per field PP_ MMucuocuosusththrreeaaddss 44 >>2200ppeerr ffiieelldd Bacteria -- 0B01 aNcNFoteeotrwtiapprreesseenntt 21 FMoedwerate 32 Many Moderate 3 Many 4499 11881122..00005500 33MM_MMNN0022334433339911 . Cones6329231 Covance 6329-231 . Tes) 3M T-6889.3 AAbbbbrreevviiaattiioonnss aanndd UUnniittss ffoorr CClfiinnilccaall HHeemmaattoollooggyy TTReeesdstt bloodcellcount ARAbBbbbCrre(evviiaaEttiiooSonn r((U/UXnn1iitU0tss%)) LL) - HeRHHemeemdomagbtololgocoloorbdbiiticnnell count HHRHCBGGCTBB ((((EG%G6)//D/DULLL)) or Xl0~/ttL) MMMHeeeaaemannnacctcoooorrcprpdpuutsuscscucululalaarrrvhveoomllouugmmleeobin MHMCCCTVV(((%FFL)L)) MCH (PG) MMMeaeeaannncccooorprrppusuucssuccluuallaarrr hhheeemmmoooggglllooobbbiiinnn ccoonncceennttrraattiioonn MMMCCCHHHCC(P((G%%))) . PPMlleaatateenlleepttlacctooeuulnnettt volume PMPLLPTTV((E(Ei33L//U)ULL oorr XX11003%tpL.L)) MRRAebetestiaoiccnluuulpltooleacctyyretetleeteitcccovouulounolnucttymtee count REMRREETPTTVII~CCC E((%%3))/ULor XI0%jL) HEAHreebyiistnnohzzlruobbtcooeyddtryyeetcciscooeuuudlninotmtceyntteactioounntate EHHRSEEERITINNI(CZZM((M(E%%/3))H/UR)L or X103/pL) . PEPArcrrootyittthhvhrarrootomecmdybbtipieannrsttteiiidmamliemethernotamtbioopnlraasttein time: PEPPTTST(RT(SS((EEMSCCEM)C) )/HR) TAATchhctrrtioiovvmmaabttbeieiddnn cpttioaimarmgteeiuallatthiroonmibno:plastin time TPTTTTT((SS(ESEEQC)C) ) ACT (SEC) FiFAFbiicrbbtririiivnnnao/otgfegeidebnnrcionaogguenladtieognratdimateion products FFFABDBCPRRT ((((MSUMEGGGC///MDD)LLL))) . PFPlliCaabottreelilnllee/tatfigaabgegrgingnrroeegggaeatntiioodnnegradation products FDP (UG/ML) PAGGICOL (%) AlACpAhdodaelelnn2ao-gosaesininnnteiepddliiappshhmoiosnspphhataete: APPPAANATGGGIGGGPI//ALCAAODDSFLP((((%%%%)))) . MeABBltlleepheeheddamiino2nggg-alttnioimtbimpeeilnasmin MABBLLENEETTTIHTPIIGLMMBAEES(((%(SS%)EE)CC)) MPPMyllaeeastlshmomeiaamdhheoeergmmyltooohgbgrlilnoooibbdiinnrio M PPMLLEEAATRHHHAGGGTBBBIO(((%MM)GG//DDLL)) EME`Wsshyttiiiemtmleoaaibttdeel/ddoeormmydytyehcleerollooliiiddcdio/reeuarrntyyitotthhrrooiidd raattioo M ES/ETMRAETRIAOTIO EWSBTCM(/E REAToVIrOXIU0'4LLL) - WDDiifhNfffiueetrcereekbnnatltiotiaaoellddbbcrlleoeodlooldbdcloccoeueollnlldtcccooeluulnntctount WBC (E3/UL or X103/I~L) NRBC (/100 WBC) CSNCoeourgrcrmrleeeeccantttteeededddwwrenhhdeiiuttbteelrobboolplohodoiolcddeclccloeeluclllnotccuoonuutnntt NCCN-OORSRRBECW WG(BB(/1CEC0V0((UEEWL33B//oUUCrLL)Xoor1r XX01100)37/4~aLLn)d) % `LBSByeaamgnnpmddhneneoneuctuteytrdtrooenppehchuioiltulrnccotoopuuhnnitlt count NNNL-Y--BSBMEAAPGNNHDD(E(((3EE/B3U33//L/UUULoLLrooorXrrX1XX01I~10I00t%3t"L/4g))LLa))naadannndd%d%%% . L`MMyoomnnopochcyyottceeyctceoouucnontut nt LMYOMNPOH((EE33//UULoLrorXX11030/gLLa)n)adnd%% MONO (E3/UL or XI03/[tL) and % E`BEaoosssoiinpnhooipplhhiiclloccuoonuutnntt EEBOOASSSIIONN(((EE33E//UULoLVrooXrr XX/111000%3U//tu)tLL)a)Lnaannddd%%% PBAAonlanisyissocoophcchyrytioltomocsasoiisssuinat BAAPNAONILSISSOYOO((E((1-31,21/U2,323L),3))or Xl03/t~L) and % . Polychromasia POLY (-,1,2,3) 5500 . a3M uMNNo0z2334433339922 11881122..00005511 . CCoorvannTceee 66e332299-s223311 -- Abbreviations and Units for Clin--ical Hematology 3M (Continued) T-6889.3 Abbreviations and Units for Clinical Hematology (Continued) TTePesosittkilocytosis AAPbObbIbrKreev(vi1ia1at.t2ii.oo3nn) ((UUnniittss)) - HPHHooyywpipkoeoicllcohlhcrJryoootmmolasyasissibiaaodies HPHHOIYYlBPPKOOOD(-((,Y-11,1,,(2,321,3,3.3)))234) BTBHoaaoxsswioocpepilhnll-eilJiuioctclrlssoytipihppbippolildsniingeg.s HBBAAJBSSTOTIDIPPY((-(1,-123,.2,2,33,)3) ,4) TOXNEUT (1.234) AquAATetotoyyxpupiicisccawnalheliullyttyremombppplhhhooioolcscdyycttaeeslslcoun (ight eye) TAAROTTEYXYYPNPELLE(YUYWMMTBC(((-I-,1,U11.,L,222),,333,4,44))) . `AAAqqquuueeeooouuusss wwwhihhtiitteeebbbllloooooodddccceeelllllcccooouuunnntt (ef eye) (right eye) (lett eye) LLREEEYYYEEE(((WWWBBBCCCU//UULLL))) . . . . . . s5t1 . a3M 1MNN00Z2334433339933 11881122..00005522  CoCnovaacnTceie 63T322o992w-233111 3M T-6889.3 e Abbreviations and Unit for Clinical Chemistry Abbreviations and Units for Clinical Chemi.~try TeTsetst AAbbbbrreevviiaattiioonn ((UUnniittss)) Glucose GLU (MG/DL) Glucose GLU (MG/DL) - Urea nitrogen UN MG/DL) Urea nitrogen UN (MG/DL) Urea UREA (MG/DL) Urea UREA (MG/DL) Creatinine CREAT (MG/DL) Creatinine `TToottaall pprrootteeiinn AlAblbuummiinn `GGlloobbuulliinn - AAllbbuumminin//gglloobbuulliinn rraattiioo `TToottaall bbiilliimrubbiinn DDiirreecctt bbi'flliirruubbiinn IInnddiirreecctt bbiilliirruubbiinn CREAT (MG/DL) TTPPRROO ((GG//DDLL)) AALLBB ((GG//DDLL)) `GGLLOOBB ((GG//DDLL)) AA//GG RRAATTIIOO TTBBIILLII ((MMGG//DDLL)) DD BBIILLII ((MMGG//DDLL)) I1BBIILLII ((MMGG//DDLL)) Cholesterol CHOL (GIDL) Cholesterol CHOL (MG/DL) . TrTidggllyycceerriiddee T`TRRIIGG ((MMGG//DDLL)) U`Urreeaa nniittrrooggeerng/ccrreeaattiinniinnee rraattiioo U'UNN//CCRREEAATT ((RRAATTIIOO)) `TToottaall lliippiiddss TT LLIIPPIIDDSS ((MMGG//DDLL)) PhPHoihsgophs-hpdohelonilspiipitiddysslipoprotein cholesterol High-density lipoprotein cholesterol PHHP DDLLILILPPI((IDMMDSSGG/((/DDMMLLGG))//DDLL)) Low-density lipoprotein cholesterol LDL (MG/DL) . Uric acid UA (MG/DL) Low-density lipoprotein cholesterol Uric acid AAssppaarrttaattee aammiinnoottrraannssffeerraassee AAllaanniinnee aammiinnoottrraannssffeerraassee LDL (MG/DL) UA (MG/DL) AASSTT//SSGGOOTT ((IIUU//LL)) AALLTT//SSGGPPTT ((IIUU/LL)) `Abaline phosphatase ALK PHOS IU) Alkaline phosphatase ALK PHOS (IU/L) Gamma ghtamylransferase GGT UL) Gamma glutamyltransferase . SSLoaorcrbtbiaitttooelldddeeehhhyyydddrrrooogggeeennnaaassseee Lactate dehydrogenase CCrreeaattiinnee kkiinnaassee AmAymlyalassee GGT (IU/L) SSDDHH ((IIUU//LL)) LLDDHH ((IIUU/L)) CCKK ((IIUU/LL)) AAMMYYLLAASSEE ((IIUU//LL)) Lipase LIPASE (UL) Lipase LIPASE (IU/L) . PancreaticspecificAmlse P AMYL (ULL) Pancreatic-specific Amylase PPaallmmiittooyyll CCooAA ooxxiiddaassee CCaallcciiuumm P AMYL (U/L) PPCPCOOAAOQ ((IIUU//GG)) `CCAA ((MMGG//DDLL)) Tonized calcium ION CA (MG/DL) Ionized calcium IInnoorrggaanniicc pphhoosspphhoorurus.s ION CA (MG/DL) 1I PPHHOOSS ((MMGG//DDLL)) Sodium NA (MOLL) . PPSooottdaaissussmiiuumm CChlholoririddee NKKA((MM(MMMOOMLLO!/LLL))/L) CCLL ((MMMMOOLL//LL)) Magnesium MG (MEQUL or MG/DL) Magnesium MG (MEQ/L or MG/DL) Zine ZN (MGIL or PPM) Zinc ZN (MG/L or PPM) Sontiam SR (MG/L or PPM) Strontium SR (MG/L or PPM) . Tron FE (UGIDL) Iron FE (UG~DL) 2 . 52 M3M_NM0N203243343330944 11881122..00005533 CCoovvaannMcceeT663e3229s2-233311 3M T-6889.3 AAbbbbrreevviiaattiioonnss aanndd UUnniittss ffoorr CClliinniiccaall CChheemmisisttrryy ((CCoonnttiinnuueedd)) TETexescstetss iron ETTUoxnotcbtaaeollsusiinrroidornnoinbbriionnnddbiininnggdcicanapgpaacccaiipttyaycity PPUPelenrarbccseoemnunatnt cdiihrrooiorlnnoinsnsaaebtstuuitnrreaadrttaiinisoogenn capacity RBPRreleaaddsimnbbllacoohocoohdldoiccnleieelnsllletcscehtrheoaorlsalieisnneeesstteerraassee. BHriCCapiaanupudcodahcatotaeelminpppeuuusttatsaemmraeesnne CeFHFrrrieoopnbnptetoaalclllaccumoomrrpttueesxx BSBiceiaCcrrauebrrmboenobhaneetalmeltuoegmlobin SFSSeeeecrrrauuulmmmbbbhiiielllmeeacoaaiccgdiildsdossbin FFAAevevceceaarrllaagbgbieielleeffeeaaccccaaiillddsswwe(eicigaglhhcttulation) OsFEOmleseocmclatalorllboaipillthietyoyraecsidiss (calculation) El`eAAAcllltpbbrhouuapmm-hi1ionn-rgelsoibsulin `AABAellltppphahhaaag---l221o--b-gggulllloooibbbnuuullliiinnn BGHGiaeagtmmha-mmgdaelaonbggsluilootlibbynuullliiinpnoprotein LHLooiwgw-h-d-dedenensnsisiitttyyy llliiipppoooppprrroootttceeiiinnn InsVVueleriryny--llooww--ddeennssiittyy lliippoopprrootteeiinn CAIAondrdsrtrueienlsnionooclocrotrtiiccoottrrooppiicc hhoorrmmoonnee. GCCGrloleuuraccttiaasiggonooelnnkinase isocnzymes CMrBBeBaBBtine kinase isoenzymes MMMBMM EAAbXbbbrFreEevvi(iaaUttGiio/onDnL(()UUnniittss)) TETIIXBBCFCE((U(UUGGG//DD/DLL)L) ) UUFEIIBB%CCS((AUUTGG//(DD%L)L)) `FCCEHHE%EPPSA((MMTUU(/%MML)L)) CCCHHHEEERBR (((MMMUUU/MMMLLL))) CCCHHAIAPEUUPBDDO(PPCMUUAUTTM/M(((UUULMMM)OOOLLL/I/GGG))) FCFHEICCPROOPERORBTTCEEEALXXML(((U(UUUMMMMOOOLOLLILI/GG/GG)))) SBCBEIIECRCRAAEHRRBGBBEBL((ML(MMMM(GUOO/LMDL/LO/LL)L))/G) SFSSBEBBRAAA H(((UUUGMMGBOMO(LLMLI)/GLL/ooDrrLMM)GG//DDLL)) FFBCAC W(UGGT/M(LG)) SFFFCBBMCAAOW ((MMG(GGM/T/DOD(aSGayMy)))/KG) OSMO (MOSM/KG) EEEAAA-LL1BB(((GGGD//LDD)LL)) EA2 E A-1 E A-2 (((GGGI//DDDLLL))) EEEBGBEEATTMAAM((AGG//(ID)GLLI))DL) EEEE---GHLHADDDLMLL (M((%%%A))) (G/DL) EEEI---NLVSVDLULLDLDILL(N%((%()%)U) UML) CAIANOCCSRTTUTHHLII((SNPPOGG(LI/UMM(ULUL/)GM) /LM)L) GCGOLLUURTCCIAASGGOOOLNN(U((GPPGG/M//MMLLL))) CCCKKK---BBMBBB(((UUU/LLL))) CCCKKK---MMMBMM (((UUU//LLL))) 5533 11881122..00005544 33MM_MMNN0022334433339955 Cones 520231 Covance 6329-231 MT e93 3M T-6889.3 AAbbbbrreevviiaattiioonnss aanndd UUnniittss ffoorr CClliinniiccaall UUrriinnaallyyssiiss TTUeresistnte volume. 8Urhionuervuorliunme evolume. SUS8prpheieconciueiffriioccusrmggionrrlaaeavvliviittoyytlyume UQQuruafiannltnueiitditotaasptmtriiovvoteeleaiuulnrritiiynnaarryy//cceerreebbrroossppiinnaall UUUrrriifilnnnueeeidppcrhrpooertmtoeeitiisenntinreexyxccMrrueelttitiooinnstix strip UrUUUinrrreiiinnnceeehepppmrHHoitsetirny Multistix strip UUUUrrrriiiinnnneeee gpgklelruuotccoteoonisesnees UUUUrrrriiiinnnneeee kbbbileillotiiororundubebsiinn UUUUrrrriiiinnnneeee buurrelrooodobubicdilliiinnngoogsgueebnnstances MMiicURcrerrooidnsscecboolrpopeiodiccduceecixxenlaaglmmsisipnuneabarttsiihtooainnngochofe-fsupuroirwinneeer ssfeieeddliidmmeenntt E`W RpWeihhdtiihltbeeellobbialolloodooccddeellccsleesllpllpsseerpprehehririgghhhhii-g-gpphhoo--wpwpeooerwwrefefririeelfflidideelldd ECBBaapascictttthesererpilieiaaarplpleecrorewlhhl-siigpgphohew--rpepohrowiwgfeieherr-lpdffiioeewlldder field CCrayssttsalpserpelorwl-opwo-wpeorwefirelfdield Crystals per low-power field CUUormriimnneeenaapptppseeaarraannccee Comments AAUbbbVbrOreeLvvii(aatMtiiLoo)nn ((UUnniittss)) U8S8 PHHVGRRORVLVOO(MLLL(()MMLL)) UUQSPUOOGASSRNMMOOPR((OMMO(OMSSGMM///DKKLGG))) QUAN PRO (MG/DL) PPRROOEEXXCC ((MMGG)) UUUPPPRHHO (MG/DL) UUUUGPGKLRELOYUT (MG/DL) UUUUBBBKILIELLOTLIOD UUUURRRBOOELBBOISILOLUIIDB U RE SUB RWRBBBCCC(((PPPEEERRRHHHPPPFFF))) EEWBPPABIICTCTTHH(P(((EPPPEERERRRHHHHPPPFPFF)F))) CCBCARAASYSCTSTTSST(AP((PLEPESRERRH(LLPPPPEFFFR)))LPFI or CURRPPIEYENRRSETLLAAPPFLFP2S2I))(PoEr RURLIPNF1E or APP2 CUCOORMIMNMMEEEANNPTTPSS1 or URINE APP2 MMFiecsisaccleelolllcaacnunleetoouubslsoCCoododdeess aanndd AAbbbbrreevviiaattiioonnss ffoorr CClliinniiccaallNPPoaatttahhpooplllooiggcyayble FFFHeeeeccmcaaaollllyopptaacrircaacusslipitttoeebtleddoneeotttideeacclttiioonn NNNNooootttt aaaapppppppplllliiiiccccaaaabbbblllleeee Hemolytic potential Not applicable 5544 11881122..00005855 33MM_MMNN0022334433339966 CCooddee TuT MU M CCooddeess ffoorr AAnnaattoommiicc PPaatthhoollooggyy DDeeffiinniittiioonn AANNIIMMAALL DDEEAATTHH CCOODDEESS. TTFieerrrsmmtipinnoaasltl rsseaacccroriviffeiicrceye: sacrifice FMMokorsritibbpuuonnsddtrecovery sacrifice CCoovvaannIccMee 66T33622098--22933311 3M T-6889.3 MMIICCRROOSSCCOOPPIICC CCOODDEESS DFDioiscstatrrliibbuuttiioonnooffFFiinnddiinnggss FDMDiuoiflfcffiauufslseoe:cal Multitbcal GG1rraaddeess ffoorr SSeevveerriittyy oo`rrMiAAnmmiomoauulnn-ttthe least amount ofchange thatcanbe observed with the 1 Mliiggihhnttimmmiaicclrr-oostshccoeoplpeee:ast amount of change that can be observed with the 22 SaSlsliigagbhhtnto--rllmeeassssl tthhaann aavveerraaggee aammoouunnttooff cchhaannggee,, bbuutt rreeaaddiillyy ddiisscceerrnniibbllee. 3 3 MaMsoodadebernraoatrtmee a-- ltthhee aavveerraaggee aammoouunnttooff cchhaannggee tthhaattiisseexxppeecctteedd ffoorr aa lesion 44 lMpMeoossodisdoeirenbarlateteellloyysssseeovvfeefrrueenc((mtmiaaorrnkokefeddt))h--eaaamfmfaaerrckkteeeddd caaemmlolesuunontrt ooorffgaccnhhsaa.nnggee wwiitthh 55 pSSeoevsveseirrbeele-- laaoggsrsreeoaatft faaummnoocutuinnottnoofoffccthhhaaennaggfeefewwcititethhd ppcrreoollbbsaaboblrleeorllogossassnosoffffuunnccttiioonn ooff ttthhheee aaoffrffgeeaccntteedd cceelll oorr oorrggaannss aanndd ffrreeqquueennttllyy iinnvvoollvveessllaarrggeeaarreeaass ooff the organ ALbAbFbrberveivaitatiioonn LLINFN LLRNNT,, TTRRAACCHHEEOOBBRROONN RSSSTATTLOOIMMVAAGCCLHH,,,MGGALL.NDIB TTSAHHYLYIRRVOOIGIDDL/,/PPMAAARRNAADIB `TTIISSSSUUEE AABBBBRREEVVIIAATTIIOONNSS DLDeeeffftiinniittiioonn LLLyeyfmmtpphh nnooddee TTRriragachcthheeoobbrroonncchhiiaall llyymmpphh nnooddee GRGMlailagnanhdnditdubululaalrrarssttosoammliaavccahhry gland TMThhayynrrdooiiibddu/pplaaarrraasttahhlyyivrroaoiriydd gland 5555 11881122..00005566 I3MM_MMNND022334433339977 i| | Ph Eo } ii ii iEi | 0 i th dHj Eihi a| EEE 25 LB wy JRE pio i Po Po LL ce eee ors if HAi i 2i8: ii i ae iFE een Eg = iih # I | fE fgro t ,Be otp mgtog iiNE DDo oEpobElispReniaEs mOTEiEE HEE0 HRihRceE "5 GE 11881122..00005577 aunozzions 3M MN02343398 P#e5 ; iis :; : i8: : i |: i| 25k: i & El | HR Fi aHblH, |!| ii =l i gi i i ily Ppt i i$8 iBiBde. 0 eee amon ne iBOF & Hd i: ii |i E0H | | pa !] Cog Bi0ldEH Pi L, p[yIlEePglBE PfRad) EK i mt fut iH 11881122..00005588 33MM_MMNN0022334433339999 0 Fogi i AR iHE E i | gis : Boop on lPo oa i i ig gi EEE i 2 31 o8BE BIE 11881122..00005599 33MM_MMNN0022334433440000 P[I e i i i: iE 1 Boal i dh ER. jEE- - EE ij PoE a PDo or LaRbEiinagEEhs [I i iy 11881122..00006600 ' awozs 3M MN02343401 CE Pgooged i| Bisi bk iCi Eaks ti : sf ii i i he pili i1 i HEH i i: Hgite, on8 sEf R B1iIFa"TEi 46|% Bie EEE sifa yi | i o Pn R | i fi | igh: EHR 11881122..00006611 2 33MM_MMNN0022334433440022 if i 3x - i i il i o r] | 1| PEE PE i osila i EE s3i2 a2n2 |i FR i oe HPo E i i PE o og Hge]ls [I B igh 11881122..00006622 2 anwnozson 3M MN02343403 igooo8. l ii Po . Co i iCo ; ai8: gI l i5% o io ih 5iEBRE. o i i#git a & HE .. B iBelse Batdlmad ioO flesh 11PdTE eae I=hf iy PUB ou en op | ined oid ond oid oid W333 W332 iDUgRgEgaEi LER: LWEW LBE a: l; P} oE}, a LL a alh; aIalie 838a8 11881122..00006633 33MM_MMNN0022334433440044 el E FoEo JR PCoo gl Peo Po iTEBO figg iBig5 bi % 1Hih 4: i ba ISg jE Ld] Ed anda nd & EOL HH BILE ot ot ot on on oa IE LEEJ | RR ; [3 nds whine wevo eres wevs vase i Py maaan i i I iH WisE: FDRyE RE aR al ll Boait 11881122..00006644 33MM_MMNN0022334433440055 Co i i pl i i " ll | i 0 Po |i 3| di BL i sh :iE4 ] i. i4 ii EI Big fio~ siz p5L = il 3i H ge g Pilg #19o Bf aon od oad a ner an fg Fi y1 UiTERR] TTS TTS ee wTUe at vvve as wvwe a evme ee nOBFeY [-. i Li fii | iaeBl 393 WTEC WTEC OTE WTS WS fg iDgIegEed LAR: ERR . i I ; Jaii!f 588 11881122..00006655 33MM_MMNN0022334433440066 Fogio Iie. CPo od Ii Pod ig pid Ti i Fe Lo i I 5 2 5 | i PE ii Lib i L3E3Bi i ifid 8 i2 EE8il f| er8dinacned WcTo0f WmReIl WwIel WnEaRd WaIdE oGAu gBilt RfiSe lg dada aaa ih pH Ft FE ee ane i | UYGC GYES WIS INES WINS muws 4] Den onto I] IIE |Po ant tag fest ee gsi 11881122..00006666 awozs4saor 3M MN02343407 fo Po Po |PPo od ig i gi io o sh ER | IE | i A aiBn= He i: i] ifo H23soos OE aml RO GAIS EAH S EE LIN i bol mwas A fifa i Ed Peed] 223d zed nln md I Cen tanta jiu eld gh 32 [IE J i He Pi Bsi a ozs 2 os Self 11881122..00006677 Su_wNoz343408 3M MN02343408 Fy |i o i I ph i 0E 1 0 o Fil Bl uf of 8 oF oF wi of Pie ERI: J JO J: 3J RE ERE ERE 11881122..00006688 sunozsesi9 3M MN02343409 Fi J38il8 ; HE i BO El i giio i bToot laaaaas PE raEREE Pole os 5 nos oe 11881122..000069 < amnzsaeto 3M MN02343410 . re Po FaLo . Pod . IIbo.d i . HA . Ai ki iTthEL| L ;s kie i[:i;=z] i ii fple BE . iyo = fll sagas san ih . Hiagaaasss ii; LE ig EE i PoE. . sanvasiy 3M MN02343411 11881122..00007700 P$oic | Pio i Pod od 5 ; Pod tH Fa i JPEH 23m iTL ELL R i ie y g) d! ' ,~c~c~ '~oo moo moo ~oo ~oo ~oo pif Ef en am roa oe i ined] TOS SSS WSS wes wos wy vss is FIT E 2s ss aan a5i. 3 32 i iH BE WoF il iix 28 =a= EoeH Bh Biy Th Dep SE atafatalatl i [I 1% HEEEE BE ERLE ie DH BE 11881122..00007711 awozsaserz 3M MN02343412 , FEoi. Po ioa Lo B so pi i i 3BailEi i iii:f FR be Aii phdh &a1i = oo o ~o oo ~ oo thd ERaagads gh FoEsH ity ! Eon Po i f gi l8a=g2s" a= g= as a2 hes HIYE EEFEEEREY i a i DUH yn omowos ni Hiss oo~ oo agsas ~o~ o~ oo~ o~o oo i LT 1s [i dsHgalEL5 IBs LIBd JBs Bs i382 i BT iii Of 11881122..00007722 anversa 3M MN02343413 Fill i Po A PPooodd 5is PPo od a5k i gi i BE 2 o I ih iEL ; i i i a S$i8 BL #13 3PEE ri L d:aa 5odh peor f Fi oer an OE LH agi wie 34 33 033 033 o34 3 Py 5 [I (JE JE J Do g H POTRRHE GB BBB BL. Hmq oayE iPEgToa T 3 8l$si5y5 EF88% 11881122..00007733 33MM_MMNN0022334433441144 Fi Ho ih side o cHfreEl [EE LE CPil EASE | 4 BELZILZALR LER 11881122..00074 [-- 3M MN02343415 iahlfo : iSifeE PoFil 8 a8 o8 of of of oF of Tfylb asaasas id 2 EE Ema EEEE 11881122..00007755 3M MN02343416 , i i i wl{aFfOEnde oEe Eof | TE \ i gl sde sv cde aie ahs gh : i ERI Boga 3 som ii 5 shel wl EF Er i : k SE Paid ddd Ea a a a i Ld 3 gt gm 1 & 2 o3i Bk EB % Bi. . = 2 11881122..00007766 " awnozs17 3M MN02343417 iI p |pe WN Wh Wh i g {| FE fF HE id Looeo~ edoo~ ed~e ole shih 2) i. pa Wl ae ode ode FIER PoE ogp ogi oi ooh sh i i EB grow ! gE i oR BOR Bi. o. o2 11881122..00007777 awo22as41s 3M MN02343418 , ' a8 . oFoa ge 5 ER } gi{omiReORaf oEfe FoRw EEE ! " o. - =, . Pg og fe woe doedge IBo Ee am ame om . 3. | iPee. IFOE E ai ow oom ome pp pfdeTv aeeae S3 E i wl a Fe EEea . FiPom E a EoeEEam ) E oe aEaE n amE e ae 5 ET ETE gopiEfHweohsa oFHIE A2 Api -s2 11881122..00007788 Su_wNoz3s3419 3M MN02343419 , Fo i eh : [she wie oad of } i go 2d pie ge Ii. TE [ate ade ede ofe dijo . i gi Be af Re o3e Fogg oh fe oe oe {gl ga Be oi eBe ale TPo og aa oam aen a Poa og oF BORER OE 11881122..00007799 33MM_MMNN0022334433442200 . ; yi FFE wi FE : al = de ate al Fa E $.88 2d ih Coa od| E87 "3 Be 3 dbf alas 83 ET EET gBe ge ui 8& PRE ge BR 3% go THEE EA grEEHE 3 BBO BR gBii. oo a go o 11881122..00008800 2 swmozsisizn 3M MN02343421 , I pp , LTE ig : :: bibP , Bog i ose sie sie ae . : poo ese ak Hg ig ,kBOA| afc a%+ afc e3e it i gig be wh Ee we iE LE TE Lg) We de fe ue Pyog 3 Li wf fe of of ; gio 3 BOR OH OR eBfl. . = 8& 11881122..00008811 2 aNo2s4n22 3M MN02343422 , Hi : wl FE FF gd aod NEE EE ' 2 3| : Bl ; fF o o 0 PL 2 | 58 3m og $f EE hg 22 oad a 5 = iis Er ; i ge! oat 4 Ed o . 8fog) BFeOFBe HofleEElia eq EEE yd dB i. . a 11881122..00008822 33MM_MMNN0022334433442233 i i . Pl fg Bd . 2 Poe 0 - gobs 5, 2k 1 ofc ofe af ala d3p1i8B0Y ae we FPiigg Eg R C i Egg he fe Re oi 3. Ee ete 33 ie bppw sss gid EE WB5li. i BOB .= O:E 3 11881122..00008833 # awo2aasezs 3M MN02343424 , : OE "i ETE Ee ao . PE ogg od dod : i : q 8 | EEE RE a ae E i LEE #37 3o i F&F 8 3pop lLoeie Eain E 43a Afe 2 OE EE #0os om 3 ROE OEE Bi. . = 3 11881122..00008844 2 Sw nezsesizs 3M MN02343425 BLi ea a a | i : ge gin gae Fa Sigg i: y gi] ve de ale wie SEER FH | e3e nBa eRe ofa fog od a EEE fii. . = 3 11881122..00008855 2 awozsssezs 3M MN02343426 & BO ` wl EF Pp Had AES Pe a i_3 Toa. FE ol oo grt : : ii jog ge TE aa fin pis os i iyomy 2 fOEe Pl a oes A gi iE aww 5 OE 5B2l! . 11881122..00008866 : awozsssezr 3M MN02343427 :i [: EE g i f o pogo ie RE |: PEE C LJiYEE on H1.i0gai = eo EipEgo 3 pi i 8 ; Bi 3, BOE fri. Ot:n = 11881122..00008877 2 33MM_MMNN0022334433442288 &PotuT FrTE ty ; ET : Bl zg JR 3 4 or LE 0 me eRe i Loo. g PEL s gl EE Fi:iPlTiiEgp Fi Sob oi fit i Epi EE oaf 8 EEF pu E 5, iE gBii. 11881122..00008888 5 awozsssezs 3M MN02343429 ii gii "TCT ig fT EE fi fd Ti0d SpE PR h i 8 amo I 3 1 3a ada Io ae ae ogi aH ot5 ff fOb~ri. 2 11881122..00008899 33MM_MMNN0022334433443300 iFoaI Fr i pA : i Foli sLligha 1d | fe de Eo EF 34 fe ode jPien hl of os 3pom seB oowde Eo gl EE 3 BOE Bi. 11881122..00009900 33MM_MMNN0022334433443311 I] FE o i LI g i io eb ib ld sek fi ii # Lose se 1 3358 8B 7 a a. fi ig gli : PoEE FE rosie oi " Dae a HfEgg oB3ii. BR Ob~ 11881122..00009911 8 smo 3M MN02343432 2 4] Wer a w= i g 0~. over g gi " gi Wow EgA oobm, o&a FESR BH Ce ne a H sg E capo TTT HE oo mo pg i Eo LI ;FogBgY| 0ofle g fe oS e fe # gle giv ame oie 3 dk BE Bl1 . . = 32 11881122..00009922 = 33MM_MMNN0022334433443333  [a1REge giv og-he gi ; BH :Pog ttowe pe ooei soFie 5 | gl FE EE PBuil elaa aan 58 Fg i HBEL] OBg sogwe goe oodemaie i[TIEgNE og ge ge oe oo Eri, $k 2 Eai sEe gv pe 23 Boa a ah a OE. BOH OH Bi. . = & , 11881122..00009933 & 33MM_MMNN0022334433443344 7 Bog oEe aoa oan o Pe did og ii i De aie ge ge 8 hu rE [fag eoy & pope gi ge oh o 1 3, 86, BB gos. - 2 8 11881122..00009944 33MM_MMNN0022334433443355  Ll s5e a3e ed3e ge EB i #ogE ge | EE ' i pfazhogl TA ji ig dLEe gi ge ge EER T: g SS Top LI 3 sa| gE ot gi 2 og fe oh a id 2! ae ad pee pe St3 BLOB. BH 5 Ari. - 2 2 11881122..00009955 x awNo223436 3M MN02343436 + ge| EOE 58 30 gy EE PRETREE SE lg FE Ed : Lob as i FER H oo 2 oo e 5 ig Py Boo a ds PF } i sie ate mae smn Ea ae a sOE OE BH aBi. . = :3 11881122..00009966 Sw nezsesasT 3M MN02343437 7 8 53 or Egeoa ; Loge S:115 ECTe ge gh gh sig PFogE dp0=eS o= h v+ie ode [T ET T 8 Be FSI 11881122..00009977 awozsssess 3M MN02343438 I og T5S R3E me wi o ~J 8 HLL 4! wie ode ode pie . i 3fHE og FoRIoIEFe we Ee ge at] gi EE Rap SHE Le oe a iB Boggy ot a oh ge EEE 353.H0.EH 0. E . 11881122..00009988 o unzsess 3M MN02343439 F gg sd Fog og 8 EE EC g 1g FE Ew ECE, diiolll a #l i Teen oom me AA I 8 1 Sov gR* zRe sor Po ab a abeog gi uFiE : Bi. 22 , 11881122..00009999 Sw_mo2sis40 3M MN02343440 { PE Pde oa og i: i g2i ge geogde gt HR gif PPP 1tah Wo a BSiiBp by oho oo [Pioare7Fg s p iooge BOE.OE2 E yp Bi. oL e 11881122..00110000 33MM_MMNN0022334433444411 i= f# 8 B| FGeoog3edr imie am Fd : % RET ER fo ee af fe ale i ii TaE~ e ae AEE a eo (33EI8Ig 7 LS[EEIEE ge| de oaafew Bfe Eof f oogR of ooo FTE g pomde mee pee gas hB5yi.B.ER os 33 n~ 11881122..00110011 . s 33MM_MMNN0022334433444422 o } gi . F~ E- E- BEE gg week cE a [ 2 APoe - . - , i TE EE c~ o o~ o ii ih Ce sie abe sie z GET i i i 5 og EC ou ly = H oEYE L she ain . i3B: BEB. gBfi. . 2 i 11881122..00110022 sw_mozsisss 3M MN02343443 i Co. Ipodgo og oE og 2 i GEE : i og og Pe Ee 134 o aPilg RH | SR = FR a @ 3 fg ume Bi. . 2 2o o 11881122..00110033 awozsssess 3M MN02343444 o B gi Eee s Pog) aEPha Eee Hl foSfH gE 51 a ae we ow Lg we i 3 | sie gi he ole Pola a a ig3 li. H ed:E 11881122..00110044 z pr 3M MN02343445 pEE at FELL, FiEFTE Lil Ce ge ea 2 Fie gi oFoa o PProog g om ow os Dp a iE P Po sg ao as 3 BS. BEB of 3 EE - 2s s 11881122..00110055 33MM_MMNN0022334433444466 # FEEAE jFoeall 4s0yagd gBi oghgge siak fH 5 iFiigg y PomR oe = ten i og od oo i iBo oE BOE. O5E Pi. oe 3 11881122..00110066 33MM_MMNN0022334433444477 IH i C| S ail Eo 5 gq on of 2 gi iPe.l i Pig o81aUe a fAiaED a a iii q FN BEI 5 EERE gf BE 3 BOE Bi. = o ~ 11881122..00110077 2= sw_mozsiss 3M MN02343448 io | EE dEfilpgge"di oh iid aoa VEge ow ome 3 Lae aia [IE HEE i 3, BR fri. = 11881122..00110088 g 33MM_MMNN0022334433444499 = i tek i aA asf fH ifPR5Ei og oavf ode g i Pog fo BER PfPo ohpi.mooe n 11881122..00110099 Sw_mozsiss0 3M MN02343450 7 Lo i a se aE Bi iFRa a ATL HPEEL RgSl vo pide PEEHoy te plgi ain 3 0 f2i| . = 11881122..00111100 : 33MM_MMNN0022334433445511 % Cn i | gE" I vis 1 1 ga" 3" L1if EENE ETE HL = ah a i gos gE 3 EB 2 o ~o 11881122..00111111 . -- 3M MN02343452 ) F Pd oF . P: o| od$ioH o fg i gitII beE . : PPihgy 0oowe g Poon PBL. o ~ 11881122..00111122 awoz23a34s3 3M MN02343453 o i E~ TR glo iFE.E ga Csooeo s ifii;a lr FtA8e5L8n] FEE i MFE rfeomy aUfinEofa ET 3 Lae ge id 3 i. gBil. = o ~ 11881122..00111133 oo a MNoz3s3454 3M MN02343454 F O . Bl al He LFElaHp ud oh oh Rid w FE Pvjiii0 dgloo2 oEofn [piso Bi 25 BE i. o~ o =~ 11881122..00111144 a MNoz34345S 3M MN02343455 ) . oe go oE an gd HE PIE fap ti 2 iieSkE sf!TH = 3E3AEg gl1 P Be Wafin = I 3 Boe Jip oar Pg o Bi5 p Bi. ox 11881122..00111155 Su MNoz343455 3M MN02343456 , F 8> 0 i | PE, HE = stih wow wow . E: Ra5.BOLEsOE 23OW i 11881122..00111166 sw_mozsists? 3M MN02343457 I 80 f ii ifgL{. ate efA ade ae fad IR wo ww . FE Ee 0 = vP3hR0oBLlf anS omgde E ofc aola gs Cae a E 8 g ii fi BOR &OH fF Ri... 2 2 i 11881122..00111177 Su wNoz3s3458 3M MN02343458 HS | i i ode Fog $S3il40E 08E8 FR 5B a Cheda EEE FPeloEoop mE EE REaI Pn. Le i 11881122..00111188 su. nozsassd 3M MN02343459 p:d 8 2I . H: i 0 0 A EWo R Ril al al id fed cd Ih, oF 2 Bi Hci - T5 Edaxk feii; oogfe oogfe ooo~mfc~ Aaf P0 op fo OEOE 1 LE 2 PoE. .o2 2 f 11881122..00111199 aN0z343450 3M MN02343460 , ' i 3 8 o o o s53f32 es | 8a5g7e g37in s83ds 23 2 SP HEE EEam moFe nom oso Ty momen o o . i 11881122..00112200 wns 3M MN02343461 ) g Pe ] of JFiHfeEfT 7 pris [EE 2 degi*E| I EH Bosi oa fF3 ii EOE E hi. = i 11881122..00112211 awoz2sasss2 3M MN02343462 i f | Hg Sah. doa _ trig 8 = j3 ia:b& BBu oEoogfa goossfa ~~ Bog bE. Pri. i 11881122..00112222 awoz23as4s3 3M MN02343463 ) ' 2 iB3g i FiE gs| s, =. BoE f TEip0s a C7 = LiEf REE i Poy ROR { Bi. = . i 11881122..00112233 Su unezsesiss 3M MN02343464 ' o ~ io . [ER 8 iPYDiE boi wie inie inie n) POpEl b limiimn iiglig BLE EEE es (DO PoR w ECEwDwE PPpLHEEgfTlEed dLEnLdE 11881122..00112244 33MM_MMNN0022334433446655 Fa id di108] 3 HEB REET He IE eIl N PoE Frodo pi icmiiEiiglg O~ PoE ss 0 HTF HEEEgolo edIEeO a lN f 11881122..00112255 3M MN02343466 Fe o L dit HE a eg Flot iesiisn i stant - oo oo oo amd EEE Peo oo ipoo T ELE LE m E ho omisizizis CC LR Ea OF Ei E ew HEigCE ae PLE EERE 11881122..00112266 33MM_MMNN0022334433446677 b iH hg sp BE BLE Hriyltfi niimtoam 8 ~g Pr aha P 3 EiE ew emEsEeEs ga bh bri ii BE IEE DIRE BEE Ti to EEE LE Plog bi hE Pi ogaq. fogs |HNtemp |i.eis i.ep mp |i PEE mE PPREE LRLAERTE REERLFEd LLeErn Y! 11881122..00112277 33MM_MMNN0022334433446688 Foo Poy S23g ihb4ghE HE 5 s|hgi iB E ESECE i pimiaz ik ppl gaoo PEST ECEEEglieCdEEeBd EeAdR e PE oo E EEL pE e 11881122..00112288 33MM_MMNN0022334433446699 Pgo oE |B mS ES | aFIi BE igs a Tir hk imlimiimlimiois i i MELRELEE LE B EaO ad 11881122..00112299 33MM_MMNN0022334433447700 Fro o o o fli 3 . EEE I , = wi a] EE [33 E DERo: l2E RE) PES EEE PYbow ow 2winE s a sl RV i } " ! i ag | ig al `i {gER is gE o r~ o hhg PEOR0 LE EE 11881122..00113300 33MM_MMNN0022334433447711 |gf ihi 2 gh! 21 3% s i . 2 PR les esd 2 EE oo o eRe PER Leg edd age | lege | 12 0.4 i .ii Lib EE ew E EinladW ed el PELL oo ~r~ LET LE 11881122..00113311 33MM_MMNN0022334433447722 iFi | | | dH Vadioiigigi ig! : jE ome me Pili i i (35% EEL "ER C381 BR ~o gE EEE HEE EA A Bai ian SSE 11881122..00113322 3M MN02343473 Fog o jEPoE bime ise iosm 31 ES o ~m RIE o Bi ee | a|g lez bea iteg i ge E ueaE del eE odr~ ad oo FREE ie ed iE 11881122..00113333 33MM_MMNN0022334433447744  gi ~ o o ~ pao E HE Cuiiwtiniigin op d EEE Polelimiialliias Bi ITHEERMIEE Pong br hn dn i H a ig a a PEgE o PgR i. i 11881122..00113344 33MM_MMNN0022334433447755 | L5Pd HGl pid i 2 FETE Buslimiiwmiomomd jp EES : 5 :i li iaa llel e! fi i | m2 "2o%o ] nad } Blom iiaiin alia D LoE mTiE EgliEal TEEgREe]OFe3d8a3d ) 1 8: oof oveor | ozs | vege i PLL oo LE LE 11881122..00113355 33MM_MMNN0022334433447766 PoE L giiigli s ~o IE jE PE .i Pmiimiimiimn CE em ee owliglinligligl Ea sd ind i 2 : nad : Pig lia iii PEE l|e eee ese| D PEE E geE d lR ad E aged DPa EBLiLOg0E~gT ieLRiA TEiEgi 11881122..00113366 33MM_MMNN0022334433447777 HEo ~ . 385 Ei fig lee iPoomElimiw o LPE ldE le PIEEL b Di i Pp E iglea f lad 11881122..00113377 2 -- 3M MN02343478 Fog i il yi BEi Bl i Loi a LE fig Wo olim ig BBoLlElyes iiegled ole EE Clima Ph TEE a ginal PE LEE ie 11881122..00113388 5 3M MN02343479 Fi ihyi EsRd Tfigh TWimeio oio osmisin Eom mim EE ee O PoiBlEigiEte mills PRE~o ~m EE 1 Hint oadm PE opi ia 11881122..00113399 z 33MM_MMNN0022334433448800 i aiihd i tHPiia cid Eheim iia ~g Poors P DL EEt E He PH EEE dita 11881122..00114400 : 3M MN02343481 HI I HHi HE 5 Big ae lig ESS poe INE Pao, iid EE PERL EEL CELE 0 11881122..00114411 : 33MM_MMNN0022334433448822 , Pe u ' 5 1 ) 1h Poors i 2H3r 4EeBai LE fig =Po og Sms fs es d gEelEtEaEs r~q 0 Vomoisiie ~Hb~ LE CRE Pa lg Pg i PaEfE plgeEd eg PEE iE igi 11881122..00114422 -2 33MM_MMNN0022334433448833 r~ 0 'D o ,:2;, 1g EEE id Lh gb Egr~i PRUR smiomlig L O ome miems O~ FEI YBBR BD o didi Py 0~ PPogLBEegE lariE EggL le] E ed 11881122..00114433 :s -- 3M MN02343484 HE ii1 sLBffihg# oTg WwSiFn 1So opmEil iegli eieg FEE PY gill] gall iE PELE oo n~ LT 11881122..00114444 2 33MM_MMNN0022334433448855 : of ' yi i CiHiotElE gif Hg Big Piedim lig] ig == ' i flim Pow A O~ 0 gi loa lee i Plog PORE i EE d Pre 11881122..00114455 z Su Noz343465 3M MN02343486 , Fi | i8n3h EE FijpliigBEL DiEnil Es HteH s eb r: o esi g igis Bl ii BEE iii BED 1338 Fin PER: ii hig EPRREEERRET 11881122..00114466 ` annossa 3M MN02343487 Fa iro 0 2Pg%HIEE| lbana ig Ee Poa Po oiiao~ iw o ~m o Voss im Pym EHoTa H~ PELE 11881122..00114477 1 33MM_MMNN0022334433448888 FPoogE o ~ Aik bors il Ei Ig | Ee,~o CEE ER owmiigiig UogeiEE Le 0~ DL EE H EE iE d PELE 11881122..00114488 33MM_MMNN0022334433448899 Py giis l| jie dl fig fd 1PopipEiiEg O~q~ bL gt, EiE d oe wom Melba i g38 : i E|EEEE E! oo [IE SE TEEa S 11881122..00114499 i 3M_MNG2343490 3M MN02343490 poli o i, i Fee vere 2p3H1iEdHogHiE EB RHEnEgi iPoaE ppooF Be o8 i: i i Eo Ee Cehh Cs Coleen Pg Doge Ee ly EPE gReEERYEEE 11881122..00115500 : annaz 3M MN02343491 Fi ji Poh Ee SHE ET . IERIE EN 2 if Bl PPOEH ELBE AA EB iF gi ii : 1p TEL Ea H [i i Pipa, 4 PELE 11881122..00115511 33MM_MMNN0022334433449922 BPoog ioit Hi pg Eo es 2n3iidrgkei iRgE: iOB Ek IE Ph : Po fd 5| Ee Ed PCEH ee Ch i | Po DH ain oh DE piu 11881122..00115522 2 33MM_MMNN0022334433449933 gd PoE Popp hn iid she id iE HE Rhy fii HE Bd hs Bh ~o BE PTET sn Pog Pod ont Elam OLR Pari Pog Eo hg ri PE EE o [CIBR EN alPdR hy ePdg H PE I CN e|T 11881122..00115533 Bp 3M MN02343494 Poh ig Ha gaagy Jl a Seiad SEDGE EB EOE 2 ie BERBER A EE Po Pil E~ 0 wl PoE Pog E EE g [I TIE PO EPEELECEE Cog iEH SS bg Sd 11881122..00154 33MM_MMNN0022334433449955 jf o inn $ BET wp vv 96 wn Sewn ve Guonv vv 38 S iyLhiy bos if ifx IEd i go Eo ii, irongkog C haEdEesEolme Faby 11881122..00115555 3M MN02343496 g Hp oomos S en Ee RE wBeY dg BEL bE PE po io | RII - # fl i hag tiiEne , Ep EE iF Bd OE % 2 6- 11881122..0011556 3M MN02343497 Poi r~ ,-1 ji Bp0 uTIIIII IN HEE ed HE dhe HA [4 Fl JE pREEEeEEas a. bo : i PL Co ay PC PHE iD ph p are a, ddoe .abd DHE r teEE ED op Esd 11881122..00115577 -- 3M MN02343498 (1 THEREIN I sePiEE4 EEE HH Gee8 # ha bh LEE BB PEO [IE i nioo io i Po P CR R,E Clik BE PETE Lo po fe thr td 11881122..00115588 3M MN02343499 Poi [ooo Co HdHpEEpRItTRhTBnE EEeERtEB y.. PI E IE BPEu H E EE ER 11881122..00115599 3M MNO23435DO |: SPFIeEETiRYHnIane ToE e EouEn 2? Peg Bai EEE ie By IH O BOE "i EEE o PPRREaE Tog He Bgly EBE PPEEELLE TH BEE 11881122..00116600 3M MN02343501 P1 oiia n o HEE ite hE LTHI Pi Hy PPBapel i Hy lye 11881122..00116611 : 33MM_MMNN0O22334433550D22 HIo ~ ii HE nem cm mw sg a IBLE BOE OB BE = Hid HEA 3 (PE Se dai BBE Be he Bi PEOEo BEE i bE Ls ii : Po 51Ce. bk | 3 Po Habe He PDoE EEgnR,if 3Epe GgE el og Bll ER 11881122..00116622 3M MN02343503 Ik HEE haa ` iFEd TT pgaoe i i a in ye Bal iBEBe.E5 BBcE8 OB FE REo E 25 o bg E H PEaEiti rnog PER bbs 1 11881122..00116633 3M MNO23435D4 o ~ o ig Hy HH : HE mee PE ogi ) 2 i BEiE : o 8 8 ii iphdBi 0b BEBE i Pi i HE 1 i gi ii i: oooie P cERnEomo P EiEdE adsy ed ENE LIL PEEL 81 11881122..00116644 33MM_MMNN0O22334433550D55 Fao PL BTL, wnmmmm momome Hig ME ERa ly os FF R H Bif OB. B0 B0B 0B. E i ii 1707 3 i Po Co i Po od bay b PEE 8, Hd PL llHhtyH p dis: cI iBt gEil 11881122..00116655 33MM_MMNN0O22334433550D66 EE pg sii1 3 i FicinExi RRR gud GRE`EHEE BB4E 4 a ioBhe Bh BoeBb0 go Ob Pp pi [1 TE TE i Pioigl CE , EOE CCOEBLH eidEe I Ck Pop : HoEEiE3 Phi i A EBECE dit ah Ea F I2E38 MNEE8M%N 11881122..00116666 awnozziosr 3M MN02343507 py hain sepFELIUBERGE BwO OoHOmB M:G tig BB EELGE FFB TE vy 1] LEIA CELB IF2 BBii"st aroEgg El ha 11881122..00116677 3M MN02343508 Fi o ji {i RppLsdt EIHTEnRRayER0Ag H 3 Eilin BEBE OE bk ~0 1 HE Bi 1111 1 ! Boo nh ba, PRE bb ELo E E E RRL ni E PR a 11881122..00116688 A 3M MNO23435D9 AAPPPPEENNDDIIXX 11 PPrroottooccooll DDeevviiaattiioonnss PPrroottooccooll PPrroottooccooll AAmmeennddmmeenntt NNoo.. |1 PPrroottooccooll AAmmeennddmmeenntt NNoo.. 22 MMataeterriiaall SSaaffeettyy DDaattaa SShheeeett CCeerrttiiffiiccaatteeooff AAnnaallyyssiiss CCoonvann3cceMe 66T3262098.-22933311 3M T-6889.3 116688 11881122..00116699 I3MM_MMNND022334433551100 Protocol Deviations Protocol Deviations CCoovvaannScceMe 36T3262989.-8229331)1 3M T-6889.3 PPrroottooccooll.. HHuussbbaannddrryy.. DDieiet.t. ""CCeerrttiiffiieedd pprriimmaattee ddiieett ((#88772266CC,, HHaarrllaann TTeekkllaadd)) oonnccee oorr ttwiiccee ddaaiillyy.."" Actual Procedure. All animals were fasted beginning in the afternoon on NAocvtueamlbPerroc15e,du1r9e9.8 A(Dlal yan4i8m);alasnwimearlesfawsetreed pbreogviindneindgwiinththfeooadfteinrntohoenmoornning on NNoovveemmbbeerr 1165,, 11999988 ((DDaayy 4498).); animals were provided with food in the morning on November 16, 1998 (Day 49). PPrroottooccool.l. DDoossiinngg PPrroocceedduurreess.. MMeetthhoodd ooff AAddmminiinsitsrtraattiioonn.. ""OOrraallllyy bbyy ggeellaattiinn ccaappssuulleess,, ddaaiillyy((77 ddaayyss//wweeeekk))ffoorraatt lfeeaasstt 2266 wwoecekkss.."" aAAdccmttiuunaailsltPPerrrooeccdeetddouurarene.i.maTTlhhseerdreeuewweteroreethsseeevvceeornraadllitooiccoccnaaossfiioontnhssewwahhneeinnmattlhheeoftteeasstttmmhaeatetrerericiaaollmwwmaeasnsdnnaootttion ofa aldabmorinaitsotreyreadnitomaalnvimetaerlsindaruieant.o thDeosceonadditmioinniosftthreatawniaiomsnaldiosrcaotntthineureedcofomrmAneinmdaatlion of a lNaob.or1a0t5o7ry24an(iGmroaul pve4t)eroinnaDriaayn.28D; otshiesaadnmiminailstwraatsiosnubwsaesqudeinstcloyntsiancureidficfoedr Ainnmimorailbund Ncoon.di1t0i5o7n2o4n(GDaroyup29.4) DoonsDeaaydm2i8n;itshtirsatainoinmwaal swdaissscuobnsteiqnuueedntflyorsAancirimfaicledNoisn.m1o0r5i7b1u1n,d c1o05n7d2i2ti,onanodn1D0a5y70239(. GDroouspe 4a)dmoninDisatyrasti4o3n (wWaesedkis7c)o,n6tin(uWedeefkor1A0)n,imanadl 8N1os(.W1e0e5k71112,), 1re0s5p7ec2t2i,vealnyd. 10D5o7s0e3a(dGmironiusptr4a)toionnDwaayss d4i3sc(oWnteienkue7d),f6or6 A(nWiemeakl N1o0.), a1n0d578211 ((WGreoekup122)),for rDeasypsec1ti3v5elayn.dD13o6s;etahdismainniismtaraltiwoanswsausbsdeiqsuceonnttlinyuseadcrfiofricAedniimn amloNriob.u1n0d57c2o1nd(iGtiroonupon2) for DDaayys13173.5 and 136; this animal was subsequently sacrificed in moribund condition on Day 137. OOnn DDaayy 4444,, AAnniimmaall NNoo.. 110055770033 ((GGrroouupp 44) ddiidd nnoott rreecceeiivvee iittss aammoouunnttooff ddoossee pprreeppaarraattiioonn bbeeccaauussee tthhee ccaappssuullee bbrrookkee dduurriinngg ddoossee aaddmmininisisttrraattiioonn pprroocceedduurreess.. PPrroottooccool.l. OObbsseerrvvaattiioonn ooff AAnniimmalasl.s. CClliinniiccaall OObbsseervrvataitioonnss.. ""OOnnccee wweeeekkllyy,, eeaacchh aanniimmaall wwiillllbbeeoobbseserrvveedd;;aabbnnoorrmmaall ff'imnddiinnggss,, oorr aan iinnddiiccaattiioonn tthhaatt tthhee aanniimmaall iiss nnoorrmmaall wwiillll bbee rreeccoorrddeedd.."" 116699 11881122..00117700 33MM_MMNNo022334433551111 CoCvoavannccee 26T3-62928-3293131 3M T-6889.3 PPrroottooccooll DDeevviiaattiioonnss ((CCoonnttiinnuueedd)) AAccttuuaall PPrroocceedduurree.. TThhee ffoolllloowwiinngg animals animals did did not not have have a a weekly weekly observation observation recorded recorded on the following days: Animal No. 105714 (Group 1) on Days 1 and 22; Animal oNon.th1e05fo7l2l5ow(Ginrgoudpay1s): oAn nDiamyal1;NAon. iIm0a5l71N4o.(G1r0o5u7p17l)(oGnroDuapy2s) 1onanDda2y25; 7A;nAinmiamlal NNoo., 1I0055771295 ((GGrroouupp 31)) oonn DDaayys11; Aanndim29a;l NAnoi.mIa0l57N1o7. (1G0r5o7u0p3 2()GornouDpa4y)5o7n; DAaniyms8al andNo. and 15; Animal No. 105704 (Group 4) on Day 15: Animal No. 105711 (Group 4) I05719 (Group 3) on Days 1 and 29; Animal No, I05703 (Group 4) on Days 15; Animal No. I05704 (Group 4) on Day 15; Animal No. I05711 (Group 4) 8oonn DDaayyss 88 aanndd 1155;; AAnniimmaall NNoo.. I10055771133 ((GGrroouupp 44)) oonn DDaayyss 1155,, 4433,, aanndd 6644;; aanndd AAnniimmaall NNoo.. I10055772244 ((GGrroouupp 44)) oonn DDaayy 88.. PPrroottooccool.l. BBlloooodd HHoorrmmoonnee DDeetteerrmmininataitioonn.. MMeetthhooddooff CCoolllleeccttiioonn.. ""BBlloooodd ssaammpplleess wwiillll bbee mmaaiinnttaaiinneedd cchhiilllleedd uunnttiill ppllaassmmaa iiss hhaarrvveesstteedd.."" AAccttuuaall PPrroocceedduurree.. BBlloooodd ssaammpplleess ccoolllleecctteedd ffoorr bblloooodd hhoorrmmoonnee ddeetteerrmmiinnaattiioonn oonn DDaayyss 3355,, 6666,, aanndd 9944 wweerree ssttoorreedd aatt rroooomm tteemmppeerraattuurree dduurriinngg hhaarrvveessttiinngg.. Protocol. Urineand Feces APFO Level Determination. Sample Handling. "Samples of urPirnoetoc(aotl.leaUstrin2emaLn)d aFnedcefsecAesPF(aOt lLeaesvtel Dgreatemrsm)iwnialtliboen. stSoarmedplien Ha afnrdleinegs.zee"tSroammapilenstaoifn u-1ri0n1e0(-a3t0leCa.st"2 mL) and feces (at least 5 grams) will be stored in a freezer set to maintain - 10 to -30C.'' Actual Procedure. Approximately 3 grams of feces were collected from Animal ANocs.tua1l05P7r1o1ceadnudr1e0. 57A2p4pr(oGxriomuapte4l)yd3urgirnagmWseoefkfe2cefsorwfeerceescoAlPleFctOedlefvreolmDeAtnerimmianlation. Nos. I05711 and I05724 (Group 4) during Week 2 for feces APFO level Determination. . PPrroottooccool.l. TTeerrmmininataitioonn.. SScchheedduulleedd SSaaccrriiffiicceess.. ""AAfftteerraatt leeaasstt 2266 wweeeekkssofotfrtreeaattmmeenntt,, ffoouurr aanniimmaallss/sseexx//ggrroouupp wwiillll bbee ffaasstteedd oovveerrnniigghhtt,, tthheenn aanneesstthheettiizzeedd wwiitthh kkeettaammiinnee aanndd xxyyllaazziinnee,, wweeiigghheedd,, eexxssaanngguuiinnaatteedd,, aanndd nneeccrrooppssiieedd.."" Actual Procedure. Animal No. 105709 (Group 1) was weighed incorrectly at the AtecrmtuinaallPsraoccreifdiucere(.WeAenkim2a7,l NDao.y1108547)0.9T(hGerobuopdy1)wweiasghwecioglhleecdteindcfoorrrethcitslyaantimthael on tDearmyi1n8a3l swaacsrifeincteer(eWdeienkto2t7h,eDcaoymp1u8t4e)r. sTyhsetebmodfoyrwoeriggahnt-tcoo-llbeocdtyedwefiogrhtthiwseaingihmtal on Dpearyce1n8t3agweacsalecnutlearteidonisn.to the computer system for organ-to-body weight weight percentage calculations. 117700 11881122..00117711 33MM_MMNN0022334433551122 PPrroottooccooll DDeevviiaattiioonnss ((CCoonnttiinnuueedd)) Covance Cevance 66T3322a99-s2233s11 3M T-6889.3 PPrroottooccool.l. TTeerrmmininataitioonn.. PPoossttmmoorrtteemm PPrroocceedduurreess.. CCeellll PPrroolliiffeerraattiioonn EEvvaalluuaatitioonn.. ""RReepprreesseennttaattiivvee ssaammpplleess oofftthhee lleefft llaatteerraall lloobbeeooff tthee lliivveerr,, lleefftt aanndd rriigghht tteesstteess,, aanndd ppaannccrreeaass wwiillll bbee ccoolllleecctteedd ffrroomm eeaacchh aanniimmaall aatt tthhee sscchheedduulleedd aanndd uunnsscchheedduulleedd ssaaccrriiffiicceess aanndd pprreesseerrvveedd iinn ffoorrmmaalliinn.."" AAccttuuaall PPrroocceedduurree.. TThhee ffiixaattiivvee uusseedd ffoorr tthhee ttiissssuuee ssaammpplleess ccoolllleecctteedd ffrroomm tthhee lleefftt llaatteerraall lloobbee ooff tthhee lfiivveerr,, lleefftt aanndd rriigghhtt tteesstteess,, aanndd ppaannccrreeaassofoftthhee rreeccoovveerryy aanniimmaallssfoforrcceellll pprroolliiffeerraattiioonn eevvaalluuaattiioonn wwaass ddooccuummeenntteedd iinnccoorrrreecctltlyy.. PPrroottooccool.l. EExxppeerriimmeennttaall DDeessiiggnn.. PPoossttmmoorrtteemm PPrroocceedduurreess.. HHiissttooppaatthhoollooggyy.. ""TTiissssuueess ffrioomm eeaacchh aanniimmaall ((iinncclluuddiinngg AAnniimmaall NNoo.. 110055772233)) wwiillll bbee eemmbbeeddddeedd iinn ppaarraaffffiinn., sseeccttiioonneedd., ssttaaiinneedd wwiitthh hheemmaattooxxyylliinn aanndd eeoossiinn,, aanndd eexxaammiinneedd mmiiccrroossccooppicicaallllyy.."" Actual Procedure. Some tissues, required by the protocol, were not avaible for AhicsttuopaaltPhorolocgeidcuerxea.miSnoamtieonti.ssuMeiss,srienqgutiirsesduebsyotrheinpsurofftoiccioeln,twtiesrseuenostamapvlaeilsaabrlee lfoisrted hwiistthopapapthrooplorigaicteexcaommmineanttiosni.n Mtheisspiantghotilsosguyesdaotrainshseueftfsicfieonrtitnidsisvuiedusaalmapnliemsalasr.e listed `wSiuthmmaaprpyrotparbilaetse dcoomnomt einntcsluindethtehepmathasolhoagvyindgatbaeeshneeextsamfionreindd.ividual animals. Summary tables do not include them as having been examined. T"Thheessee ddeevviiaattiioonnss aarree nnoott eexxppeecctteedd ttoo hhaavvee aaffffeecctteedd tthhee rreessuulltssooff tthhee ssttuuddyy.. m171 11881122..00117722 I3MM_MMNN0022334433551133